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CONFERENCISTA
LUIS MOLINA Biotecnólogo
Ingeniero Agrónomo
Coordinador
Área de Biotecnología
IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS EN
JUGOS PRIMARIOS Y DILUIDOS DE
CUATRO INGENIOS GUATEMALTECOS
MEDIANTE ANÁLISIS DE SECUENCIAS DE
ADN
Luis Molina, Carlos Maddaleno, Victoriano Sut, Byron López
Antigua Guatemala, Agosto 2015
Dextrano
INTRODUCCIÓN
Ribosoma bacteriano
OBJETIVO
Adaptar en el Área de Biotecnología de
CENGICAÑA, una metodología basada en el
análisis de secuencias genómicas, para la
identificación de bacterias presentes en jugos
obtenidos de caña de azúcar durante el proceso de
extracción
MATERIALES Y MÉTODOS
Toma de muestra
Diluciones: 1:1, 1:2…1:512
Inoculación
Aislamiento
Extracción de ADN
PCR
Secuenciación de ADN
Comparación
RESULTADOS
Crecimiento de cepas bacterianas en función de
la dilución
Cepa aislada tándem B Pantaleón
Cepa aislada jugo diluido Concepción
Cepa aislada tándem C Magdalena
Ingenio Jugo Tándem Pureza Concentracion
1 Magdalena Primario A 1.78 840
2 Magdalena Primario A 1.50 300
3 Magdalena Primario B 1.06 6180
4 Magdalena Primario B 1.73 1020
5 Magdalena Primario C 1.56 1320
6 Magdalena Primario C 1.70 1020
7 Magdalena Primario C 1.65 870
8 Magdalena Primario C 2.06 960
9 Magdalena Primario C 1.86 360
10 Madre Tierra Primario - 1.90 510
11 Madre Tierra Primario - 1.67 270
12 Madre Tierra Diluido - 1.78 870
13 Madre Tierra Diluido - 1.92 750
14 Madre Tierra Diluido - 1.90 540
15 Concepción Primario - 1.90 570
16 Concepción Primario - 1.86 360
17 Concepción Diluido - 2.00 450
18 Concepción Diluido - 1.91 600
19 Pantaleón Diluido A 1.86 390
20 Pantaleón Diluido A 2.00 480
21 Pantaleón Diluido B 1.94 1020
22 Pantaleón Diluido B 1.82 810
23 Pantaleón Diluido B 2.00 360
Muestra No.
Pureza y concentración del ADN extraído
Resultado de la electroforesis de ADN en 11
cepas aisladas que muestra la amplificación
del gen 16S
Secuenciación de ADN
Alineamiento de secuencias complementarias
Comparación GeneBank
Identificación
La metodología utilizada resultó útil para la identificación de bacterias presentes en jugos
primarios y diluidos de caña de azúcar.
Mediante la secuenciación de fragmentos de ADN del gen 16S y su comparación mediante
la herramienta BLAST del NCBI se logró la identificación de Leuconostoc mesenteroides,
Leuconostoc lactis, Lactococcus lactis y Kosakonia sp.
Los resultados obtenidos difieren de los reportados con anterioridad usando una
metodología basada en el análisis de secuencias genómicas.
Conclusiones