informe desnaturalizacion de proteinas

8/18/2019 INFORME Desnaturalizacion de Proteinas

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Informe de Laboratorio N°7 Desnaturalización de Proteínas

INFORME DE LABORATORIO N°7

DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS ___________________________________________________________________________________

INTRODUCCIÓN

Las proteínas son elementos fundamentales. Éstas biomoléculas formadas por C!"N seencuentran en un sin n#mero de estructuras

or$%nicas de nuestro diario &i&ir como el propiocuerpo ' diferentes alimentos (ue proporcionan alos metabolismos uno de los pilares elementales para su correcto funcionamiento. )s este por e*emplo un moti&o para buscarlas ' detectarlas.




Los cambios ambientales o los tratamientos(uímicos pueden causar una desor$anización enla conformación natural de una proteína a esto sele llama desnaturalización. La ener$ía necesaria para causar este proceso es con frecuencia mu' pe(ue+a e(ui&alente a la desor$anización en treso cuatro puentes de ,idro$eno.

Pre&iamente en la e-periencia de laboratorio se

,an obser&ado los cambios &isibles de sustancias proteicas al ad,erirles sustancias (ue conlle&arona su desnaturalización.

)n el presente informe se ,a de analizar ladenominada /eacción de 0iuret1 en la (ue elcompuesto conocido como 2/eacti&o de 0iuret34sulfato de cobre en una base fuerte5 reacciona




con los enlaces del péptido ' cambia el color

cuando entra en contacto con otra sustancia enotras palabras la reacción nos permite detectar los enlaces peptídicos ' así obser&ar a simple&ista las proteínas.

6 tra&és del desarrollo del presente informe presentamos información elemental sobre laestructura de la proteína ' su implicancia a ser

desnaturalizada por di&ersos factores mostrando

lo aprendido durante la pr%ctica así como también profundizamos in&esti$ando en otros mediossobre otras in(uietudes.

JUSTIFICACÓN




La realización de esta pr%ctica es si$nificati&a 'a

(ue nos permite comprender teórica 'e-perimentalmente uno de los procedimientosm%s trascendentales como lo es ladesnaturalización de proteínas de compuestosconocidos cotidianamente. 6dem%s de recordar laimportancia de las proteínas para nuestroor$anismo.

OBJETIVO GENERAL:

"bser&ar el comportamiento de las proteínas desustancias conocidas como la $elatina la clara de,ue&o ' la alb#mina en diferentes medios4temperatura P! e-tremos ' sol&entes or$%nicos5' determinar los cambios en su estructura.




OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

Comprender el concepto de Desnaturalización delas proteínas ' sus consecuencias.Conocer los a$entes (ue inter&ienen en ladesnaturalización de una proteína.Identificar al$unas de las pruebas paradesnaturalizar proteínas.6nalizar las reacciones de 0iuret suscomponentes ' efectos.

/ecordar la importancia de las proteínas paranuestro or$anismo.

MARCO TEORICO

Las proteínas son macromoléculas compuestas por carbono ,idró$eno o-í$eno ' nitró$eno. Lama'oría también contienen azufre ' fósforo. Lasmismas est%n formadas por la unión de &arios




amino%cidos unidos mediante enlaces peptídicos

las cuales tienen una $ran importancia a ni&el bioló$ico pues permite muc,os procesos 'facilita muc,as reacciones &itales. )l monómero(ue forma a las proteínas se conoce comoamino%cido. Los amino%cidos son moléculas (ueen uno de sus e-tremos tienen un $rupo funcional6mino 48N!95 ' en el otro tienen un %cidoCarbo-ílico 4C""!85. 6dem%s los amino%cidos

tienen una cadena carbonatada 4/5 de lar$o '

componentes &ariables. )l proceso de polimerización de las proteínas es decondensación en el cual se libera a$ua. (Devlin,

20004)




:omadade; Bioquímica (Devlin, 20004)

Estructur !" Pr#t"$%s

6 pesar de saber (ue las proteínas son la unión demuc,os amino%cidos el orden de estos ,ace (uelas propiedades de las proteínas también &aríen.

Estructur Pr&'r& !" Pr#t"$%s

Corresponde a su secuencia de amino%cidos. )staestructura se mantiene unida por los enlaces




peptídicos entre las moléculas de amino%cidos.

)n otras palabras esta estructura indica la clase 'orden de los amino %cidos en la molécula

:omada de; Bioquímica (Devlin, 20004)




Estructur S"cu%!r& !" Pr#t"$%s

<e refiere a la disposición de las cadenas. )stadisposición podría ser de l%mina ple$ada o de,élice. )sta estructura es la forma (ue ad(uiere lacadena debido a los puentes de ,idro$eno entre$rupos amídicos.


Estructur T"rc&r& !" Pr#t"$%s

<e refiere a las relaciones espaciales de lasunidades de amino%cido (ue est%n relati&amenteseparadas unas de otras en la cadena proteica.)sta es la forma (ue ad(uiere una proteína debido




a las relaciones (ue se establecen entre

los $rupos /8libres de los diferentesamino%cidos.

:omada de; Bioquímica (Devlin,

20004)

Estructur Cut"r%r& !" Pr#t"$%s

<e presenta solo en las proteínas (ue presentam%s de una cadena polipeptídica. <e consideracomo la unión mediante enlaces débiles




intermoleculares de &arias cadenas polipeptídicas

de estructura terciaria formando un comple*oestable. =n e*emplo es la estructura de la,emo$lobina. (Devlin, 20004)


D"s%tur(&)c&#% !" Pr#t"&%s:

)s una desnaturalización bio(uímica es decir un

cambio estructural de proteínas (ue lle&a a la perdida de la estructura nati&a de la molécula deestas sustancias. )n la desnaturalización la proteína comienza a ple$arse perdiendo su formaori$inal. La pérdida de esta conformaciónespacial ,ace (ue la proteína no pueda cumplir con su función bioló$ica en el or$anismo ' es lo(ue se conoce como desnaturalización de




proteínas. Por e*emplo un enzima pierde su

función catalítica. :ambién pero no siempre &aacompa+ado de cambios en las propiedadesfísico8(uímicas siendo lo m%s com#n la pérdidade solubilidad. (Melo y Cuamatzi, 200)




:omada de Bioquímica de los !rocesos

meta"ólicos (Melo y Cuamatzi, 200)

A*"%t"s !"s%tur(&)%t"s+ ,A*"%t"s -$s&c#s.

. C(#r: La sensibilidad de las proteínas a ladesnaturalización térmica depende de numerososfactores tales como la naturaleza ' concentraciónde proteínas la acti&idad de a$ua el p! la fuerzaiónica ' la naturaleza de los iones presentes.




/. Fr$#: Las ba*as temperaturas pueden inducir ladesnaturalización de muc,as proteínas. 6sí

enzimas (ue son estables a una temperatura

ambiente pueden inacti&arse a > ?°C ' al$unas proteínas se a$re$an ' precipitan cuandoalcanzan temperaturas de con$elación.

c. Trt'&"%t#s '"c0%&c#s: Numerosostratamientos mec%nicos tales como amasado olaminado (ue se aplican al pan ' otras masas




pueden desnaturalizar las proteínas por las

fuerzas de cizallamiento (ue ori$inan.A*"%t"s 1u$'&c#s

. 2c&!#s 3 /s"s: )l p! del medio en el cualest% la proteína tiene influencia considerable en el proceso de desnaturalización. La ma'oría de las proteínas son estables para una determinada zona

de p! ' frecuentemente se desnaturalizan cuando

se someten a&alores de p! mu' altos o mu' ba*os en al$unos casos la proteína recupera suacti&idad natural cuando el p! &uel&e al &alor enel cual la proteína es estable. 4Durst @ AoBel9>>75

/. M"t("s: Los iones met%licos alcalinos 4sodio potasio5 sólo reaccionan de una forma limitada




con las proteínas mientras (ue los alcalino8

térreos como el calcio ' el ma$nesio son m%sreacti&os.

c. S#(uc&#%"s cu#ss !" c#'4u"st#s#r*0%&c#s: arios compuestos or$%nicos talescomo la urea ' las sales de $uanina contribu'enen soluciones concentradas 4 a E F5 a la rupturade enlaces ,idró$enos ' pro&ocan con intensidad

&ariable una desnaturalización de las proteínas.

(#$#$B, 20%%)

La desnaturalización de proteínas puede ser re&ersible o irre&ersible. )sto depende del $radode cambios estructurales (ue ,a'a sufrido la proteína durante el proceso de desnaturalización.<i una desnaturalización es re&ersible la proteína puede &ol&er a su conformación espacial




funcional si el a$ente desnaturalizante desaparece

el medio o de*a de e*ercer su efecto. )n el caso de(ue la desnaturalización de una proteína seare&ersible la reestructuración de la proteína de&uelta a su conformación espacial funcional puede ser lenta puede durar desde ,oras ,astadías. (Melo y Cuamatzi, 200)

)l proceso opuesto a la desnaturalización recibe

el nombre de re8naturalización.

MATERIALES 5 REACTICVOS

MATERIALES

:ubos de ensa'oAradilla para tubos de ensa'o




0eacBerPlaca calefactora6$itador de &idrioPipetaPipeteador )spectrofotómetroPapel indicador

REACTIVOS

Patrones de alb#mina 4>9m$Gml ' Hm$Gml5<olución salina de $elatinaClara de ,ue&o!N")tanol6cetona/eacti&o de 0iuret




CONCLUSIONES:

Fediante este laboratorio se identificó elcomportamiento de las diferentes proteínassometidas a pruebas de desnaturalización por sol&entes or$%nicos calor ' p! e-tremosutilizando reacti&os como; acetona ' %cidonítrico entre otros ' muestras problema como;alb#mina $elatina ' clara de ,ue&o.

Por medio de este laboratorio de aprendió a

determinar la presencia de proteínas a tra&és de la&aloración cualitati&a con el reacti&o 0iuret prueba (ue se basa en la formación de uncompuesto de color &ioleta debido a laformación de un comple*o de coordinación entrelos iones Cu9J ' los pares de electrones nocompartidos del nitró$eno (ue forma parte de losenlaces peptídicos de las proteínas.




La absorbancia es directamente proporcional a la

concentración por tanto siempre (ue laconcentración de colorante o muestra se aumentela absorbancia aumenta también por lo tanto presentan una relación lineal.

6 ma'or cantidad de proteína ma'or cantidad de producto de reacción ' por lo tanto ma'or intensidad de color.

Fediante la ecuación de re$resión lineal es

posible calcular la concentración de una soluciónde una sustancia conocida.

BIBLIOGRAFÍA




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or'nica e!erimental. 0arcelona;/e&erté <.6.

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