informe aminoacidos por tlc
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7/21/2019 Informe Aminoacidos Por TLC
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Anlisis de aminocidos por TLC
Amino acid anlisis by TLC
Autores:Osorio L.J, Arias T.
Corporacin tecnolgica de Bogot. Tecnologa en regencia de farmacia
Bogot, Colombia
Fecha 16/03/01!
Taria"#$%ctb.ed&.co
RESUMEN
Una clase de cromatografa de gran utilidad es en
capa fina y este sirve para separar pequeas
cantidades de una mezcla por la diferencia de
solubilidad entre dos sistemas disolventes. El
sistema cromatografico tiene dos elementos:
El primero es el soporte es decir el disolvente A.
El segundo es la fase mvil en este caso el
disolvente B. Es una tcnica simple primero por
el material que se necesita !una placa absorbente
de slice y una c"mara cromatografica# y el
segundo porque el procedimiento es f"cil de
llevarse a cabo. Esta tcnica utiliza un par"metro
e$perimental conocido como %f !factor de
retraso#& este relaciona la solubilidad relativa de
un compuesto entre la fase estacionaria y la fase
mvil. 'a nin(idrina es importante porque con
ella la sustancia se revela y se identifica entre la
separacin de una mezcla de amino"cidos.
)alabras *lave: *romatografa& capa fina&
sistemas disolventes& factor de retraso&
nin(idrina.
ABSTRACT
+ne class of c(romatograp(y of utility is in fine
layer and t(is serves for separate small quantities
of a mi$ture for t(e difference of solubility
bet,een t,o solvents systems.
-ey ords: Amp(oteric species& p/& isoelecetric
point& linear regression& points buffer. 0(e
c(romatograp(y system (ave t,o elements:
0(e first is t(e support t(is mean solvent A.
0(e second mobile p(ase is in t(is case t(e
solvent B. 0(is is a simple tec(nique for t(e
material ,(at ,e need !one absorbent plaque of
slice and one c(romatograp(ic camera# and for
t(e easy process. 0(is tec(nique use one
e$perimental parameter 1no, as %f !delay
factor#& t(is relates t(e relativity solubility of one
compound bet,een stationary fase and movil
fase. 0(e nin(idrina is very important because
,it( (er t(e substance is revealed bet,een t(e
separation of one amino acid mi$ture&
-ey ords: c(romatograp(y& fine layer& disolvent
sistems& delay factor& nin(idrina.
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INTRODUCCIN
En bioqumica se utiliza muc(os mtodos para
separar diversas sustancias& medir peso molculas
de los polmeros& distinguir diferentes aspectos
en la estructura de las sustancias y poder evaluar
la pureza de los compuestos aislados. Estos
mtodos de cromatografa se basan en el mismo
procedimiento general: las sustancias de la
muestra son disueltas en una fase mvil y luego
se (ace pasar por un medio estacionario que
interact2a con cada uno de los compuestos
individuales y el resultado de esto nos muestra
varios grados por la obstaculizacin del flu3o en
diferentes medidas. El resultado final es que cada
una de las sustancias (an migrado en diferentes
velocidades.
El tipo de interaccin entre la fase estacionaria y
los componentes de la muestra es lo que nos
ayuda a distinguir n tipo de cromatografa de
otro. 4ic(a interaccin se basa en uno de los
siguientes principios: intercambio inico
solubilidad& absorcin y cribado. Una estrategia
com2n en empacar el material de fase
estacionaria en una columna y luego permitir que
la fase mvil fluya a travs de esta& en ocasiones
con ayuda de algo depresin. )or razones obvias&
estos mtodos se les llaman com2nmente como
cromatografa en columna.
5e debe tener muy en cuenta los mtodos
colorimtricos de determinacin de amino"cidos&
que se basan en la reaccin especfica de estos
con determinados compuestos& dando derivados
coloreados.
'a formacin de color se toma como resultado
positivo e indica su presencia& mientas que el no
desarrollo de color es indicativo de que no est"
presente.
MATERIALES M!TODOS
6 )laca de silica
6 )lanc(a de calentamiento6 *apilar
6 vaso de precipitado 78ml
Cromatografa en capa fina de aminocidos
El mtodo general consiste en colocar 9ml de la
fase mvil !Butanol: "cido actico: agua# en un
vaso de precipitado de 788 ml se procede a tapar
con un vidrio de relo3 y se de3a saturar la c"mara
por 79 mn.
'uego sobre la placa de silica con un l"piz se
traz una lnea de 7 cm desde la base y sobre
esta con un capilar se procedi a sembrar las
muestras de amino"cidos y m"s la bebida
comercial.
'a placa de silica se coloc en un vaso de
precipitado previamente preparado con la fase
mvil y se esper que la fase mvil recorriera la
placa (asta que esta llegara a 7 cm del lmite
superior de la placa.
5e procedi a retirar la placa del vaso y esta se
de3 secar por 9mn en estufa para despus
colocarle el agente revelador en este caso fue
nin(idrina al 8& ; lo cual se llev a estufa de
calentamiento.
RESULTADOS ANALISIS DERESULTADOS"
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Al realizar el ensayo de cromatografia en capa
fina para aminoacidos& se obtuvo el siguiente
resultado: !
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estacionaria& es decir& a menor %f la sustancia
queda m"s retenida en la fase estacionaria y a
mayor %f la sustancia no est" unida con fuerza a
la fase estacionaria y es arrastrada por la fase
mvil.
*on base en la tabla & las estructuras de los
amino"cidos influyen en la cromatografa& debido
a su radical& ya que ellos cambian la polaridad de
la molcula& por el car"cter de los "tomos& por
e3emplo& el glutamato es m"s polar por tener un
grupo acido carbo$lico adicional a la estructura
b"sica de amino"cido& caso contrario a la
fenilalanina& la cual por tener un benceno en su
estructura es apolar.
Cocacola #ero
4e acuerdo a la imagen 7& los puntos = y 9 se
relacionan de manera similar en su rf& es decir& el
desplazamiento en la capa de silica es igual& ya
que la fenilalanina es compuesto principal del
aspartame& el cual es el edulcorante de la
*oca*ola >ero& por ellos se observan las mismas
caractersticas del amino"cido en la bebida y ello
permiti que ambos corrieran a travs de la placa
de la misma forma.
CONCLUSIONES"
0eniendo en cuenta que la fase mvil es polar&
posemos concluir que la velocidad de
desplazamiento de cada amino"cido depende de
la polaridad& entre m"s polar sea el amino"cido&
este se queda m"s retenido en la fase estacionaria
'a nin(idrina es un revelador especfico para
sustancias con grupo amino libre& por ello es muy
efectiva en la determinacin de amino"cidos.
'a cromatografa en capa fina es un mtodo degran utilidad ya que aprovec(a las diferencias de
polaridad de los compuestos para clasificarlos& es
una tcnica sencilla& eficiente y de ba3o costo& lo
cual (ace que sea muy viable.
El rf nos sirve como par"metro para evaluar el
desplazamiento de la muestra& respecto a la
distancia total de la placa de slica y distancia
recorrida por el solvente& por ello nos da un
indicio de la polaridad de la muestra.
BIBLIO$RA%&A
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