haemophilus influenzae
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HAEMOPHILUS INFLUENZAE Jorge Arturo Casas Alvarez
Microbiología y Parasitología Medico Cirujano y Partero
2013B
BACTERIAS DEL GÉNERO HAEMOPHILUS
Este es un pequeño grupo de bacterias polimorfas gramnegativas que necesitan medios enriquecidos, por lo general contienen sangre o sus derivados para su aislamiento.
HAEMOPHILUS INFLUENZAE Se detecta en las
mucosas de las vías respiratorias altas en el ser humano.
Es una causa importante de meningitis en los niños y puede causar infecciones respiratorias en niños y adultos.
MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
En las muestras de infecciones agudas, los microorganismos son bacilos cocoides cortos (1.5µm), que a veces se encuentran en pares o cadenas cortas.
En los cultivos, la morfología depende de la edad y del medio.
Microorganismos Típicos
MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN A las 6 a 8 horas en
un medio enriquecido, predominan las formas cocobacilares pequeñas.
Más tarde hay bacilos mas largos, bacterias que experimentan lisis y muchas variantes polimorfas.
MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Los microorganismos en cultivos jóvenes (6-18 hrs) en un medio enriquecido tienen una capsula definida.
La cápsula es el antígeno que se utiliza para la “tipificación” de H. influenzae.
CULTIVO
En Agar Chocolate se presentan colonias planas de color pardo grisáceo con diámetros de 1 a 2 nm después de 24 horas de incubación.
IsoVitaleX en los medios de cultivo favorece la multiplicación.
IsoVitaleX o Vitox es un concentrado estéril de factores esenciales para el crecimiento.
CULTIVO
H. influenzae no se multiplica en Agar Sangre de Cordero, excepto alrededor de colonias de estafilococos (“Fenómeno Satélite”)
CARACTERÍSTICAS DEL CRECIMIENTO
La identificación de los microorganismos del género Haemophilus depende en parte de demostrar la necesidad de determinados factores de crecimiento denominados Factores de Crecimiento X y V.
FACTOR X El factor X actúa
fisiológicamente como hemina; el factor V puede ser sustituido por Dinucleótido de Nicotinamida y Adenina.
Las colonias de estafilococos en agar sangre de carnero producen la liberación de NAD y generan el fenómeno de crecimiento satélite.
CARACTERÍSTICAS Y NECESIDADES DE CULTIVO DE BACTERIAS DEL GENERO HAEMOPHILUS IMPORTANTES PARA EL SER HUMANO
Especie Necesita X V
Hemólisis
Haemophilus Influenzae (H. Aegyptius) + + -Haemophilus Parainfluenzae - + -Haemophilus Ducreyi + - -Haemophilus Haemolyticus + + +Aggregatibacter Aphrophilus - - -Haemophilus Paraphrophaemolyticus - + +Haemophilus Segnis - + -
VARIACIÓN
Además de la variación morfológica, H. influenzae muestra una noble tendencia a perder su cápsula y la especificidad de tipo asociada.
Las colonias de variantes no encapsuladas carecen de iridiscencia.
TRANSFORMACIÓN
En circunstancias experimentales adecuadas, el DNA extraído de un determinado tipo de H. Influenzae puede transferir la especificidad de tipo a otras células (Transformación).
La resistencia a la Ampicilina y al Cloranfenicol es controlada por los genes en plásmidos transmisibles.
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
H. influenzae encapsulado contiene Polisacáridos Capsulares (PM > 150 000) de uno de seis tipos (a - f). El antígeno capsular de tipo b es un fosfato de polirribosa-ribitol (PRP).
H. influenzae se puede tipificar mediante: Aglutinación en portaobjetos Coagulación con estafilococos, o Aglutinación de partículas de látex
recubiertas con anticuerpos de tipo especifico.
También se puede llevar a cabo la tipificación mediante inmunofluorescencia.
La mayor parte de los microorganismos de H. influenzae
en la flora normal del aparato respiratorio superior no son
encapsulados
PATOGÉNESIS
H. influenzae no produce endotoxina.
El microorganismo no encapsulado es parte de la flora normal respiratoria general en los humanos.
La tasa de portador en el aparato respiratorio superior para el H. influenzae tipo b es del 2 a 4%.
La tasa de portador para el H. influenzae no tipificable es del 50 al 80% o mayor.
La capsula es antifagocitica en ausencia de anticuerpos anticapsulares específicos.
La capsula de Polirribosa- Fosfato del H. influenzae de tipo b es el principal factor de virulencia.
El H. influenzae causa:
Meningitis Neumonía y
Empiema Epiglotitis Celulitis Artritis Séptica y en
ocasiones otras variantes de infección invasiva.
El H. influenzae no tipificable tiende a causar:
Bronquitis Crónica Otitis Media Sinusitis y Conjuntivitis
La sangre de niños mayores de 3 a 5 años es bactericida para el H. influenzae.
*Los anticuerpos frente al Fosfato de Polirribosa- Ribitol activan la acción bactericida y opsonizante mediada por
complemento in vitro. No obstante no se conoce de forma adecuada cuales son los mecanismos que
determinan la adquisición natural del anticuerpo Anti PRP relacionada con la edad, que ocurre hacia los 3 a 4
años
*P. Bachiler Luque. 1998. Respuesta inmunitaria y estrategia de inmunización frente a Haemophilus influenzae Serotipo B. Biol Pediatr.
38. pp 112- 120.
DATOS CLÍNICOS
Entra por Ap. Respiratorio
Diseminación localAfección de Senos Paranasales y oído
medio
Torrente Sanguíneo
Meningitis
Lactantes
Laringotraqueitis Obstructiva
Inflamación Epiglotis
BronquitisNeumonía
PRUEBAS DE LABORATORIO
Las muestras consisten en:
Exudado Nasofaríngeo
Pus Sangre y LCR para
frotis y cultos
Muestras
IDENTIFICACIÓN DIRECTA
Se dispone de estuches (Kits) comerciales para la detección inmunitaria de antígeno de H. influenzae en LCR.
Una prueba positiva indica la presencia de concentraciones altas de polisacárido especifico de H. influenzae tipo b.
CULTIVO
Las muestras se incuban en Agar Chocolate con IsoVitaleX hasta que aparecen las colonias típicas.
Se diferencia de otras bacilos G- semejantes por su requerimiento de Factores X y V y ausencia de hemolisis sobre Agar Sangre.
INMUNIDAD
Los lactantes menores a 3 meses pueden presentar anticuerpos séricos transmitidos por su madre. Durante este tiempo la infección es poco común, pero después se pierden los anticuerpos.
H. influenzae ha sido la causa mas frecuente de meningitis bacteriana en niños de 5 meses a 5 años.
Alrededor de los 5 años de edad los niños han adquirido de manera natural anticuerpos antiPRP que promueven la acción bactericida dependiente del complemento y la fagocitosis.
TRATAMIENTO
La tasa de mortalidad por meningitis sin tratamiento producida por el H. influenzae puede ser de hasta el 90%.
Muchas cepas son susceptibles a Ampicilina.
Hasta 25% producen β-Lactamasa bajo control de plásmido transmisible, y por tanto son resistentes.
Practicamente todas las cepas son susceptibles a las nuevas Cefalosporinas.
Cefotaxima por via I.V da muy buenos resultados
El diagnóstico oportuno y la terapeutica antimicrobiana son indispensables para reducir al minimo secuelas neurológicas y daño intelectual.
SECUELAS
Entre las complicaciones tardías de la meningitis por H. influenzae la más importante es el desarrollo de una acumulación localizada de liquido subdural que requiere drenaje quirúrgico.
EPIDEMIOLOGÍA, PREVENCIÓN Y CONTROL
H. influenzae tipo b encapsulado se transmite de persona a persona por vía respiratoria.
La enfermedad por el serotipo b se puede prevenir con la administración a niños de Vacuna Conjugada Hemófilus b.
Existen 4 vacunas disponibles para su uso: PRP-HbOC (el conjugado es CRM197) PRP-OMP (Complejo membrana de N.
meningitidis) PRP-T (Toxoide Tetánico) PRP-D (Toxoide Diftérico)