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HAEMOPHILUS INFLUENZAE Jorge Arturo Casas Alvarez Microbiología y Parasitología Medico Cirujano y Partero 2013B

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HAEMOPHILUS INFLUENZAE Jorge Arturo Casas Alvarez

Microbiología y Parasitología Medico Cirujano y Partero

2013B

TAXONOMÍA

Familia: Pasteurellaceae Genero: Haemophilus Especie: influenzae

BACTERIAS DEL GÉNERO HAEMOPHILUS

Este es un pequeño grupo de bacterias polimorfas gramnegativas que necesitan medios enriquecidos, por lo general contienen sangre o sus derivados para su aislamiento.

HAEMOPHILUS INFLUENZAE Se detecta en las

mucosas de las vías respiratorias altas en el ser humano.

Es una causa importante de meningitis en los niños y puede causar infecciones respiratorias en niños y adultos.

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN

En las muestras de infecciones agudas, los microorganismos son bacilos cocoides cortos (1.5µm), que a veces se encuentran en pares o cadenas cortas.

En los cultivos, la morfología depende de la edad y del medio.

Microorganismos Típicos

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN A las 6 a 8 horas en

un medio enriquecido, predominan las formas cocobacilares pequeñas.

Más tarde hay bacilos mas largos, bacterias que experimentan lisis y muchas variantes polimorfas.

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN

Los microorganismos en cultivos jóvenes (6-18 hrs) en un medio enriquecido tienen una capsula definida.

La cápsula es el antígeno que se utiliza para la “tipificación” de H. influenzae.

CULTIVO

En Agar Chocolate se presentan colonias planas de color pardo grisáceo con diámetros de 1 a 2 nm después de 24 horas de incubación.

IsoVitaleX en los medios de cultivo favorece la multiplicación.

 IsoVitaleX o Vitox es un concentrado estéril de factores esenciales para el crecimiento.

CULTIVO

H. influenzae no se multiplica en Agar Sangre de Cordero, excepto alrededor de colonias de estafilococos (“Fenómeno Satélite”)

CARACTERÍSTICAS DEL CRECIMIENTO

La identificación de los microorganismos del género Haemophilus depende en parte de demostrar la necesidad de determinados factores de crecimiento denominados Factores de Crecimiento X y V.

FACTOR X El factor X actúa

fisiológicamente como hemina; el factor V puede ser sustituido por Dinucleótido de Nicotinamida y Adenina.

Las colonias de estafilococos en agar sangre de carnero producen la liberación de NAD y generan el fenómeno de crecimiento satélite.

CARACTERÍSTICAS Y NECESIDADES DE CULTIVO DE BACTERIAS DEL GENERO HAEMOPHILUS IMPORTANTES PARA EL SER HUMANO

Especie Necesita X V

Hemólisis

Haemophilus Influenzae (H. Aegyptius) + + -Haemophilus Parainfluenzae - + -Haemophilus Ducreyi + - -Haemophilus Haemolyticus + + +Aggregatibacter Aphrophilus - - -Haemophilus Paraphrophaemolyticus - + +Haemophilus Segnis - + -

VARIACIÓN

Además de la variación morfológica, H. influenzae muestra una noble tendencia a perder su cápsula y la especificidad de tipo asociada.

Las colonias de variantes no encapsuladas carecen de iridiscencia.

TRANSFORMACIÓN

En circunstancias experimentales adecuadas, el DNA extraído de un determinado tipo de H. Influenzae puede transferir la especificidad de tipo a otras células (Transformación).

La resistencia a la Ampicilina y al Cloranfenicol es controlada por los genes en plásmidos transmisibles.

ESTRUCTURA ANTIGÉNICA

H. influenzae encapsulado contiene Polisacáridos Capsulares (PM > 150 000) de uno de seis tipos (a - f). El antígeno capsular de tipo b es un fosfato de polirribosa-ribitol (PRP).

H. influenzae se puede tipificar mediante: Aglutinación en portaobjetos Coagulación con estafilococos, o Aglutinación de partículas de látex

recubiertas con anticuerpos de tipo especifico.

También se puede llevar a cabo la tipificación mediante inmunofluorescencia.

La mayor parte de los microorganismos de H. influenzae

en la flora normal del aparato respiratorio superior no son

encapsulados

PATOGÉNESIS

H. influenzae no produce endotoxina.

El microorganismo no encapsulado es parte de la flora normal respiratoria general en los humanos.

La tasa de portador en el aparato respiratorio superior para el H. influenzae tipo b es del 2 a 4%.

La tasa de portador para el H. influenzae no tipificable es del 50 al 80% o mayor.

La capsula es antifagocitica en ausencia de anticuerpos anticapsulares específicos.

La capsula de Polirribosa- Fosfato del H. influenzae de tipo b es el principal factor de virulencia.

El H. influenzae causa:

Meningitis Neumonía y

Empiema Epiglotitis Celulitis Artritis Séptica y en

ocasiones otras variantes de infección invasiva.

El H. influenzae no tipificable tiende a causar:

Bronquitis Crónica Otitis Media Sinusitis y Conjuntivitis

La sangre de niños mayores de 3 a 5 años es bactericida para el H. influenzae.

*Los anticuerpos frente al Fosfato de Polirribosa- Ribitol activan la acción bactericida y opsonizante mediada por

complemento in vitro. No obstante no se conoce de forma adecuada cuales son los mecanismos que

determinan la adquisición natural del anticuerpo Anti PRP relacionada con la edad, que ocurre hacia los 3 a 4

años

*P. Bachiler Luque. 1998. Respuesta inmunitaria y estrategia de inmunización frente a Haemophilus influenzae Serotipo B. Biol Pediatr.

38. pp 112- 120.

DATOS CLÍNICOS

Entra por Ap. Respiratorio

Diseminación localAfección de Senos Paranasales y oído

medio

Torrente Sanguíneo

Meningitis

Lactantes

Laringotraqueitis Obstructiva

Inflamación Epiglotis

BronquitisNeumonía

PRUEBAS DE LABORATORIO

Las muestras consisten en:

Exudado Nasofaríngeo

Pus Sangre y LCR para

frotis y cultos

Muestras

IDENTIFICACIÓN DIRECTA

Se dispone de estuches (Kits) comerciales para la detección inmunitaria de antígeno de H. influenzae en LCR.

Una prueba positiva indica la presencia de concentraciones altas de polisacárido especifico de H. influenzae tipo b.

CULTIVO

Las muestras se incuban en Agar Chocolate con IsoVitaleX hasta que aparecen las colonias típicas.

Se diferencia de otras bacilos G- semejantes por su requerimiento de Factores X y V y ausencia de hemolisis sobre Agar Sangre.

INMUNIDAD

Los lactantes menores a 3 meses pueden presentar anticuerpos séricos transmitidos por su madre. Durante este tiempo la infección es poco común, pero después se pierden los anticuerpos.

H. influenzae ha sido la causa mas frecuente de meningitis bacteriana en niños de 5 meses a 5 años.

Alrededor de los 5 años de edad los niños han adquirido de manera natural anticuerpos antiPRP que promueven la acción bactericida dependiente del complemento y la fagocitosis.

TRATAMIENTO

La tasa de mortalidad por meningitis sin tratamiento producida por el H. influenzae puede ser de hasta el 90%.

Muchas cepas son susceptibles a Ampicilina.

Hasta 25% producen β-Lactamasa bajo control de plásmido transmisible, y por tanto son resistentes.

Practicamente todas las cepas son susceptibles a las nuevas Cefalosporinas.

Cefotaxima por via I.V da muy buenos resultados

El diagnóstico oportuno y la terapeutica antimicrobiana son indispensables para reducir al minimo secuelas neurológicas y daño intelectual.

SECUELAS

Entre las complicaciones tardías de la meningitis por H. influenzae la más importante es el desarrollo de una acumulación localizada de liquido subdural que requiere drenaje quirúrgico.

EPIDEMIOLOGÍA, PREVENCIÓN Y CONTROL

H. influenzae tipo b encapsulado se transmite de persona a persona por vía respiratoria.

La enfermedad por el serotipo b se puede prevenir con la administración a niños de Vacuna Conjugada Hemófilus b.

Existen 4 vacunas disponibles para su uso: PRP-HbOC (el conjugado es CRM197) PRP-OMP (Complejo membrana de N.

meningitidis) PRP-T (Toxoide Tetánico) PRP-D (Toxoide Diftérico)