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Guía laboratorio N5
HEMOGRAMA
VALORES DE VARIABILIDAD BIOLÓGICA
La interpretación correcta de los datos obtenidos en el hemograma dependen de la tecnología
utilizada y de los valores de variabilidad biológica establecida por cada laboratorio de acuerdo a la
edad, sexo y raza.
Parámetros eritrocitarios
Recuento de Hematíes: Varones adultos 4.7- 6.1x10 12/L
Mujeres adultas 4.2- 5.4x10 12/L
Recién nacidos 4.8- 7.1x10 12/L
Hematocrito: Varones adultos 42 – 52 %
Mujeres adultas 37 – 47 %
Lactantes - niños 30 – 43 %
Recién nacidos 44 – 64 %
Posible valor critico: < 15 %
Hemoglobina: Varones adultos 13.5 – 18 g/dL
Mujeres adultas 12.5 – 16 g/dL
Lactantes - niños 11 – 16 g/dL
Recién nacidos 14 – 24 g/dL
Posible valor critico: < 5 g/dL
Volumen corpuscular medio: Adultos/niños/as 86 - 96 fL
Recién nacidos 96 - 108 fL
Hemoglobina corpuscular media: Adultos/niños/as 25 - 31 pg
Concentración de hemoglobina
corpuscular media:
Adultos/niños/as 32 - 38 g/dl
ADE – RDW 11.5 -- 15.1
VSG Niños 0 – 10 mm/h
Hombres < 50 años 0 – 15 mm/h
Mujeres <50 años 0 – 20 mm/h
Hombre >50 años 0 – 20 mm/h
Mujer > 50 años 0 – 30 mm/h
Parámetros Leucocitarios
Leucocitos totales: Adultos/niños > 2 años 4.5 – 11x10 /L
Niños > 2 años 6.2 – 17 x10 /L
Recién nacidos 6.2 – 17 x10 /L
Leucocitos totales Valores críticos < 2.5 x 109/L
>30.0 x 109/L
Fórmula Leucocitaria valor relativo Banda 0 - 5 %
Neutrófilos 45 – 65 %
Linfocitos 30 – 40 %
Monocitos 3 – 8 %
Eosinófilos 1 – 5 %
basófilos 0 – 1 %
Fórmula Leucocitaria valor absoluto Banda 0 - 0.5 x 109/L
Neutrófilos 2.3 -6.5 x 109/L
Linfocitos 1.5 – 4.0 x 109/L
Monocitos 0.1 – 0.8 x 109/L
Eosinófilos 0.05 – 0.5 x 109/L
basófilos 0 –0.1 x 109/L
Parámetros Plaquetarios
Recuento de Plaquetas: Adultos/niños 150 - 400 x10 /L
Niños > 2 años 200 - 475 x10 /L
Recién nacidos 150 - 300 x10 /L
Posible valor critico: plaquetas< 50 o
> 1 millón x 10 / L
Ancho de ditribucionde plaquetas
4
Adultos 15.4% - 16.8%
Volumen medio plaquetario4 Adultos 6.5 fl - 13.5 fl
Factores que intervienen en el estudio
Serie Roja
Alteración en el tamaño de los hematíes
Un número muy alto de leucocitos
Hemodilución: aumento de la cantidad proporcional de agua en la sangre.
Deshidratación: pérdida de agua del organismo, que se refleja en la sangre.
Embarazo: porque se produce hemodilución
Resistencia a la gran altitud: por ejemplo, la gente que vive en el altiplano andino.
Hemorragia inmediatamente previa a la prueba
Medicamentos.
Serie Blanca
La ingestión de algunos alimentos, la actividad física y el estrés pueden aumentar el
número de leucocitos.
Durante el último mes de embarazo y en esparto, puede aumentar la cifra de leucocitos.
Las personas a las que se les ha extirpado el bazo pueden tener una elevación leve y
persistente de la cifra de leucocitos.
Medicamentos, que pueden aumentar o disminuir niveles.
Serie Plaquetaria
La resistencia a gran altitud puede aumentar los niveles de plaquetas
El ejercicio muy intenso puede aumentar el número de plaquetas.
Medicamentos, que pueden aumentar o disminuir cifras.
OBTENCION DE LA MUESTRA DE SANGRE
El control de calidad del hemograma al igual que el de otras pruebas de laboratorio comienza
desde la fase preanalitica, condiciones del paciente, toma adecuada de la muestra de sangre,
verificación de datos del paciente, marcación correcta de los tubos y la verificación de los
exámenes solicitados por el médico.
La muestra para hemograma no requiere ser tomada en ayunas, aunque es preferible desde el
punto de vista administrativo y para lograr una mejor estandarización del procedimiento ya que la
hiperlipidemia post- prandial puede causar falso aumento de la hemoglobina y lo parámetros
relacionados con ella.
Se deben utilizar tubos al vacío tapa morada que contienen anticoagulante EDTA, en forma de
sal dipotásica (K2-EDTA) con una concentración de 1.5-2.2 mg por ml de sangre. Este
anticoagulante no influye sobre la determinación de los parámetros hematológicos, los eritorcitos
y leucocitos permanecen inalterados durante las primeras 24 horas en número. El EDTA produce
menor distorsión de la morfología celular.
Los tubos deben estar correctamente marcados con la identificación, nombre, apellidos del
paciente y la fecha.
La muestra debe ser analizada dentro de las seis primeras horas cuando permanece a temperatura
ambiente y antes de 24 horas cuando es refrigerada a 4ºC.
Existen dos tipos de punción sanguínea uno para sangre venosa y otro para sangre capilar de
acuerdo a las necesidades.
Fundamento
La sangre venosa es la que generalmente se extrae de la región antecubital, la cual posee fina piel
y venas superficiales de calibre grueso. Las venas indicadas son la cefálica mediana y la basilica
mediana.
La mejor postura para el paciente es el decúbito dorsal. Si está sentado, el brazo deber tener un
buen apoyo. Las venas deben inspeccionarse y evaluarse aplicando un torniquete en la parte
superior del brazo, unos cuatro centímetros por encima del lugar de la puntura. Este debe
apretarse solo lo necesario para impedir la circulación venosa de retorno.
Materiales
tubos al vacío tapa morada
agujas hipodérmica numero 20-21
algodón
alcohol al 70% alcohol yodado
torniquete
lápiz marcador o cinta de enmascarar
Procedimiento
1. preparar el equipo necesario
2. asegurarse de la correcta identificación del paciente
3. seleccionar la vena
4. limpiar con algodón y alcohol el sitio elegido, realizando la limpieza del centro hacia la
periferia
5. colocar el torniquete
6. sostener el brazo del paciente justamente por debajo del lugar donde se va a puncionar,
evitar que el codo sea doblado
7. con el bisel de la aguja hacia arriba y siguiendo el curso de la vena, insertar rápida y
firmemente la piel y luego la vena
8. esperar que el tubo llene hasta agotar el vacío
9. liberar el torniquete, abrir el puño del paciente. Retirar la aguja
10. colocar el algodón seco en el punto de la punción una vez retirada la aguja para evitar
dolor y presionar suavemente
11. Colocar gota de sangre en el potaobjetos para realizar el extendido de sangre periférica de
la gota de la aguja sin anticuagilante
12. descartar las agujas inmediatamente en un aparato destructor, con el fin de evitar su
reutilización fuera de la institución
13. no intentar colocar nuevamente el capuchón a la aguja.
14. Realizar el extendido
15. Se recomienda presionar suavemente la zona y elevar el brazo por unos dos o tres
minutos
16. mezclar por inversión varias veces (mínimo 30), para obtener una muestra homogénea.
Hacerlo con suavidad para evitar la formación de espuma y el daño de las células.
17. No se debe puncionar zonas frías, edematosas.
Punción sangre capilar
Fundamento
Para cantidades pequeñas de sangre o cuando no pueda efectuarse la venopunción como en el
caso de recién nacidos, quemaduras extensas, oreja o, en niños, la superficie plantar del talón, con
una aguja desechable estéril, penetrando a una profundidad suficiente para asegurar el flujo
espontáneo de sangre. Debe evitarse una presión indebida que provoque la dilución de la sangre
por los líquidos titulares, mientras se recoge la muestra.
Materiales
algodón
alcohol al 70% o alcohol yodado
lanceta estéril
Procedimiento
1. ejercer una ligera presión longitudinal o unos ligeros golpes en la zona elegida para
conseguir un mayor flujo de sangre.
2. realizar una buena asepsia con una torunda de algodón impregnada de alcohol, se seca el
sitio y se procede con una lanceta estéril a efectuar la punción, que deber ser más o
menos de tres mm de profundidad.
3. descartar la primera gota mediante el uso de un algodón seco y realizar el llenado de las
pipetas requeridas.
4. presionar luego por unos minutos el lugar de la puntura con algodón seco
Causas de error en la toma de muestra
empleo de tubos húmedos
empleo de anticoagulantes inadecuados y en una proporción errónea
tiempo prolongado del uso del torniquete antes de practicar la punción venosa
extracción sanguínea excesivamente lenta con coagulación parcial de la sangra en
la jeringa o en el tubo recolector
agitación excesiva de la mezcla sangre-anticoagulante con formación de espuma o
agitación insuficiente con la aparición de microcoágulos
Observaciones
El parámetro que mayor labidad demuestra frente al tiempo en que se realiza la prueba es
el volumen medio plaquetario que puede modificarse a partir de las dos primeras horas
después de tomada la muestra.
En caso de que la vena no haya podido ser puncionada al primer intento, no debe
intentarse puncionar la vena desde el lugar donde se halle la aguja hasta que su extremo
se halle muy próximo a la superficie de la piel y volver a dirigirla convencionalmente.
Algunas veces se hace necesaria una segunda punción.
No retirar la aguja del sitio de punción sin antes haber aflojado el torniquete del brazo del
paciente
Al retirar la aguja del sitio no utilizar algodón impregnado de alcohol para presionar sobre
el lugar de puntura ya que esto produciría vaso dilatación y por tanto aumento de
sangrado
Evitar la formación de espuma(hemólisis) al mezclar con agitación excesiva la mezcla
sangre-anticoagulante
Utilizar siempre elementos de protección personal.
EL ERITROGRAMA
Es el estudio cualitativo y cuantitativo de los eritrocitos en sangre periférica. Hacen parte de este
grupo el recuento de hematíes, hematocrito, hemoglobina e índices eritrocitarios: Promedio del
Volumen corpuscular (PVC - MVC), Promedio de la hemoglobina corpuscular (PHC- MCH) y
Promedio de la concentración de hemoglobina corpuscular (PCHC- CMHC). También pertenecen a
este grupo los nuevos valores dados por lo equipos automatizados, como es el ancho de
distribución eritroide (ADE), ancho de distribución de la hemoglobina, recuento de reticulocitos. 4
Algunos son determinados directamente por el equipo como la hemoglobina, el recuento
eritrocitario y volumen corpuscular medio; otros como el hematocrito, la hemoglobina corpuscular
media, la concentración de hemoglobina corpuscular media y el ancho de distribución de
eritrocitos son derivados de cálculos realizados por el equipo.
RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS
Consiste en determinar la cantidad de eritrocitos en sangre periférica por unidad de volumen por
microlitro (µL), milímetro cubico mm3 o litro(L) de acuerdo con el sistema de unidades adoptado
en el laboratorio clínico. El recuento manual de eritrocitos ha salido de la práctica por su alto
coeficiente de variación, el tiempo requerido para su realización y materiales insumos utilizados.
Actualmente este recuento lo realizan los equipos automatizados con coeficientes de variación
muy bajos, mejorando tiempo rapidez y confiabilidad del resultado obtenido. .
Variaciones fisiológicas que alteran resultados del hemograma:
La postura
La excitación o el ejercicio físico intenso
Deshidratación grave
Edad
Sexo (género)
HEMOGLOBINA
La hemoglobina puede ser medida por métodos manuales o automatizados, los métodos
automatizados utilizan la misma fundamentación del método manual utilizando un
hemoglobinometro incorporado al instrumento.
El método de la Cianometahemoglobina fue recomendado por el comité Internacional para la
estandarización de la Hematología (ICSH), en 1.966, modificado en 1977y sigue siendo hasta hoy el
más recomendado.
Este procedimiento tiene muchas ventajas, tales como la disponibilidad de estándares
satisfactorios y la capacidad de cuantificar todas las formas de hemoglobina de importancia
clínica. Es el método de elección para efectuar estudios científicos sobre anemia y para determinar
su prevalencia en encuestas de salud pública.
La hemoglobina es la proteína transportadora de Oxígeno. Representa en promedio el 32 % de la
masa total del eritrocito.La hemoglobina es el mejor índice para medir la capacidad
transportadora de gases, tanto para oxígeno como para dióxido de Carbono por parte del
eritrocito. Tanto la concentración de hemoglobina, como el hematocrito representan en forma
directa el número de eritrocitos.Desde el punto de vista de la evaluación de la integridad
hematológica, la determinación de hemoglobina es superior al hematocrito y al recuento de
eritrocitos. Las enfermedades relacionadas con los eritrocitos (especialmente los síndromes
anémicos) están definidas por la concentración de la hemoglobina.
Fundamento
La sangre es diluida con reactivo de cianometahemoglobina, ocurriendo hemolisis y liberación de
hemoglobina en solución. Los iones ferrosos (fe++)de las moléculas de hemoglobina se oxidan con
ferrocianuro de potasio a iones férricos(fe+++). Esta oxidación resulta en la formación de
matahemoglobina, la cual se combina con los iones de cianuro para formar
cianometahemoglobina, compuesto estable para poder cuantificarse con por espectrofotometría.
Todos los derivados de la hemoglobina se convierten a cianometahemoglobina con excepción de
la sulfahemoglobina. 1
La intensidad de color se mide mediante un fotómetro a una longitud de onda de 540 λ, La
densidad óptica de la solución es proporcional a la concentración de hemoglobina.
Materiales.
Sangre venenosa anticoagulada con EDTA o sangre obtenida mediante punción capilar.
Reactivo de Drabkin
Tubos de ensayo
Pipeta Salí (20 ul = 0.02 ml) o pipeta automática.
Pipetas graduadas de 5 ml
Tapones de caucho para los tubos o vinipiel
Foto colorímetro previamente calibrado
Cubetas de lectura para el fotocolorímetro
Procedimiento
1. Prender el fotocolorímetro o el espectómetro y espera a que alcance la temperatura adecuada
para su funcionamiento.
2. Dispensar exactamente 5 ml de reactivo de Drabkin en dos tubos de ensayo (el procedimiento
debe realizarse por duplicado)
3. Homogenizar la muestra.
4. medir exactamente 20 uL (0.02 mL) de la sangre en la micropipeta de Salhi. Eliminar el exceso
de sangre que queda en las paredes externas de la pipeta antes de introducirla en la solución
de Drabkin.
5. Llevar la pipeta hasta el fondo del tubo y depositarla sangre, procurando lavar las paredes
internas de la pipeta; esto se logra mediante aspiraciones y expulsiones consecutivas de
reactivo dentro del tubo. Evitar la formación de burbujas.
6. Tapar el tubo y mezclar varias veces por inversión.
7. dejar reposar por 10 minutos para que se produzca la hemólisis total de las células rojas y se
complete la reacción.
8. Transferir la solución a las cubetas del Fotocolorímetro.
9. Leer la solución obtenida, usar como blanco el reactivo de Drabkin.
10. Calcular la concentración de hemoglobina, utilizando la curva de calibración o multiplicando
por una constante que resulta de la calibración del método.
Causas de error
Errores en la obtención de la sangre. Estasis prolongada causada por usar más de un minuto el
torniquete en el brazo del paciente, origina resultados falsamente elevados de hemoglobinas
en las muestras de sangre venosa. En sangre capilar ocurre lo contrario. Cuando se ejerce una
presión excesiva en el sitio de punción y aumenta el flujo de los líquidos tisulares, diluyendo la
muestra de sangre.
La muestra no se mezcla bien. Para evitarlo, invertir el tubo varias veces, o, de preferencia
usar un mezclador mecánico.
Errores de pipeteo o de dilución.
Muestra de sangre con coágulo.
Sangre lipémica.
Recuento de leucocitos muy elevado (50 x 10 9 / L).-
Instrumento incorrectamente calibrado
Observaciones:
Antes de efectuar la lectura de la muestra obtenida, se debe cerciorar que la solución no presente
ninguna turbidez, de lo contrario el resultado hallado puede ser erróneo. Algunas causas de
opacidad pueden ser:
1. un número de leucocitos excepcionalmente elevado (en tal caso se debe centrifugar la mezcla
y utilizar solo el sobrenadante).
2. presencia de hemoglobina S y C (diluir la muestra 1 :1 con agua destilada y se multiplica por
dos el resultado de la lectura del colorímetro).
3. globulinas anormales (añadir 0.1 g de Carbonato de potasio al reactivo de Drabkin).
4. sangre lipémica (mezclar al tubo con reactivo de Drabkin 0.02 mL de plasma lipémico y usarlo
como blanco).
La determinación de la hemoglobina no se ve afectada por la concentración del anticoagulante
usado.
Valores de variabilidad biológica:
Los valores normales varían con la edad, el sexo, y la altura sobre el nivel del mar.
Varones adultos: 13.5 – 18 g / dL
Mujeres adultas: 12.5 – 16 g / dL
Lactantes y niños: 11 – 16 g / dL
Recién nacidos: 14 – 24 g / dL
Posible valor crítico: menor a 5.0 g / dL
HEMATOCRITO
Es el volumen de células empacadas de una muestra de sangre que denota el porcentaje de
eritrocitos en un volumen conocido de sangre entera. De acuerdo con el tipo de hemograma se
puede realizar de un manera manual (hemogramas tipo I y II) o calculado en los demás tipos de
hemogramas antes descritos. Se expresa en porcentaje o en unidades recomendadas por el ICSH
(International Council for standarization in Haematology) como una fracción decimal L/L
El examen visual del plasma sobrenadante en el tubo de hematocrito, puede aportar información
valiosa relativa a la causa de anemia. Los niveles elevados de bilirrubina sérica, característicos de
pacientes con anemia hemolítica o megaloblástica, se detectan por el color amarillo (Ictérico) del
plasma. En las deficiencias de hierro y en los procesos inflamatorios, el plasma se observa más
pálido de lo normal. Los aumentos en el número de leucocitos y plaquetas pueden apreciarse
como una delgada capa de células grises, situada por encima de los eritrocitos empacados.
Mediante los métodos electrónicos el hematocrito se obtiene de un cálculo matemático de
acuerdo con el volumen corpuscular medio (VCM) y el recuento de eritrocitos). Debido a que el
hematocrito electrónico no tiene plasma atrapado (el plasma de las células después de
centrifugadas) su valor es 2% a 3% más bajo que el hematocrito convencional. Se reconoce como
hematocrito verdadero
Esta diferencia por plasma atrapado del hematocrito manual versus hematocrito automatizado, es
mayor en los pacientes con anemia macrocitica, esferocitosis hereditaria, síndromes talasamicos,
anemia hipocromícas y anemia falciforme en donde puede llegar hasta el 20%. 4
El verdadero valor del hematocrito depende del volumen plasmático real así: un descenso del
volumen plasmático o hemoconcentración, como el que se observa en deshidratación, se traduce
en un aumento relativo del hematocrito y la hemoglobina. Un aumento del volumen plasmático o
hemodilución produciría una falsa disminución del hematocrito y la hemoglobina. Es importante
enfatizar que el hematocrito refleja la concentración de los eritrocitos pero no la masa total de
éstos.
El microhematocrito se puede afectar cuando los tubos capilares son diferentes a los establecidos
por estándares internacionales y por la punción, el hematocrito realizado por punción capilar
puede ser un poco mayor que el realizado en sangre venosa.
Los métodos para determinar el hematocrito por centrifugación son el micrométodo y el
macrométodo. En ambos se centrifuga una columna de sangre en un tubo cuyo interior es
uniforme y está cerrado en un extremo. El micrométodo es más conveniente para muchos
laboratorios y ha sido adoptado como método de rutina.
Fundamento.
Conocido como microhematocrito o hematocrito capilar. Se determina aplicando una fuerza
centrífuga de 8.000 a 12.000 r.p.m. por 5 minutos. Este método ha demostrado ser el mejor, por
lo tanto es utilizado en la mayoría de los laboratorios.
Materiales.
Sangre total anticoagulada con EDTA o sangre capilar.
Tubos capilares de virio desechables, de 1 mm de diámetro interior y 0.75 cm de longitud. En
el mercado estos tubos tienen dos presentaciones:
Con heparina para ser utilizados en muestras obtenidas por punción capilar.
Sin heparina, se identifican por una franja azul y deben llenarse con sangre anticoagulada.
Plastilina.
Microcentrífuga.
Tabla de lectura.
Procedimiento.
1. mezclar cuidadosamente la sangre, por un minuto.
2. llenar los 2/3 de capilar con la muestra, evitando la formación de burbujas.
3. sellar uno de los extremos del capilar con plastilina.
4. colocar los capilares del hematocrito en los surcos radiales del accesorio apropiado de la
centrífuga, en posición opuesta el uno del otro y con su extremo sellado en la parte exterior.
5. centrifugar durante 5 minutos.
6. extraer los tubos tan pronto la centrífuga se detenga. Efectuar la lectura de los capilares.
Lectura del hematocrito en la tabla.
Causas de error
Cuando se obtiene la sangre de una punción cutánea no se debe usa la primera gota, ya que
puede contener líquido tisular. Se usan las gotas que fluyen después. Las presiones excesivas
ejercidas sobre la zona de punción, para que la sangre fluya, provocan la salida de líquido
tisular que diluye la muestra y favorece la coagulación. La estasis prolongada causada por
colocar el torniquete durante un minuto o más, puede originar resultados falsamente
elevados.
Mezcla insuficiente de la sangre antes de hacer el estudio.
Muestra con coágulo.
Observaciones
Si el tubo del hematocrito es sellado de forma incompleta, el resultado será erróneo y
anormalmente bajo; ya que en la centrifugación se pierden eritrocitos.
Si los tubos son centrifugados de forma inadecuada o permanecen mucho tiempo dentro de la
centrífuga parada, los resultados serán erróneos, dando demasiado elevados. El tiempo y la
velocidad de la centrifugación son factores muy importantes que deben tenerse en cuenta para
obtener el máximo agrupamiento de los glóbulos rojos
Si la sangre posee demasiado anticoagulante, la lectura del hematocrito será anormalmente baja
debido al encogimiento (contracción) de los glóbulos rojos.
Valores de variabilidad biológica:
Los valores normales del hematocrito varían según la edad y el sexo del individuo. La localización
geográfica también influye siendo la tasa normal del hematocrito, mayor en las personas que
habitan en zonas altas.
Varones adultos: 42-52 %
Mujeres adultas: 37-47%
Lactantes-niños: 30-43%
Recién nacidos: 44-64%
Posible valor crítico: menor de 15%
ÍNDICES ERITROCITARIOS
Wintrobe introdujo en 1929 los índices eritrocitarios siendo el punto de partida para la
clasificación morfológica de las anemias determinando el tamaño y la concentración de
hemoglobina de los eritrocitos por medio del volumen corpuscular medio, hemoglobina
corpuscular media y concentración de la hemoglobina corpuscular media. Los índices
corpusculares se pueden derivar de los hemogramas manuales o automatizados. Bessman
reciente mente a introducido un nuevo parámetro para la clasificación de las anemias, el ancho
de distribución eritroide, ADE como lo veremos más adelante.
Volumen corpuscular medio. VCM (PVC)
El volumen corpuscular medio (VCM) también conocido como Promedio de volumen corpuscular
(PVC), representa uno de los parámetros tradicionales de mayor importancia en el hemograma
electrónico. En el hemograma convencional se obtiene a partir del hematocrito y el recuento de
eritrocitos, así:
PVC= Hto% x 10 fL
Recuento eritrocitosx1012 /L
En el hemograma electrónico de determina de acuerdo con la amplitud (tamaño) de los pulsos
generados durante el recuento de eritrocitos. La medición por estos métodos tiene un coeficiente
de variación menor del 1%
El PVC es el parámetro más estable en el paciente. Cualquier modificación (con el mismo
instrumento y en el mismo laboratorio) superior a 5 fL es significativa, incluso en ausencia de
anemia u otros hallazgos en la sangre, y justifica plenamente iniciar los estudios complementarios.
Este parámetro define los conceptos normocitosis, macrocitosis y microcitosis .
Valor de Variabilidad biológica:
Adultos/niños: 86 – 96 fL
Recién nacidos: 96 – 108 fL
Hemoglobina Corpuscular Media. HCM (PCH)
La hemoglobina corpuscular media, también conocida como promedio de hemoglobina
corpuscular (PCH) representa la concentración en peso (picogramos) de hemoglobina, en cada
eritrocito. Por métodos manuales tiene un coeficiente de variación de más del 10 %, y por
métodos electrónicos se disminuye a un 1.5 %.
PHC= Hemoglobina (g/dL) x 10 pgs
Recuento eritrocitosx1012 /L
Valor de variabilidad biológica:
Adultos/niños: 25-31 pg
Concentración de la hemoglobina corpuscular media: CHCM (PCHC)
La concentración de la hemoglobina corpuscular media, también conocida como promedio de
concentración de hemoglobina corpuscular, representa la concentración de hemoglobina
expresada en gramos por decilitro (g/dL). Este parámetro define el concepto de normocromía,
hipocromía, e hipercromía siendo este ultimo más hipotético que real.
PCHC= Hemoglobina (g/dL) x 100 g/dL
Hematocrito (L/L)
Este parámetro por métodos manuales, tiene un coeficiente de variación por encima de 10%,
debido al factor de error inducido en el recuento manual de eritrocitos, en tanto que con métodos
electrónicos es del 1%.
Las anemias ferropenicas presentan disminución significativa de la PCHC, mientras que en la
esferocitosis hereditaria esta elevada, y es así como la concentración de hemoglobina corpuscular
media , por encima de 35.4 g/dl, combinada con el ancho de distribución eritroide, mayor de 14%,
tienen una sensibilidad del 63% para detectar la esferocitosis hereditaria como prueba de
tamizaje. El PCHC es un parámetro muy estable, convirtiéndose en una excelente herramienta
para el control de calidad en hemogramas automatizados excepto en los casos de esferocitosis
hereditaria y algunas hemoglobinopatías. 4
También puede encontrarse falsamente elevada en caso de para proteínas, procesos de
deshidratación e hiperlipidemia.
Clasificación Morfológica según Wintrobe:
Tabla 4: Clasificación morfológica eritroide a partir de los índices eritrocitarios. Manual de
Hematología I. Universidad de Antioquia. 1990
TIPO ANEMIA PVC (fL) PCH (pg) PCHC (g/dL)
Normocítica-
Normocrómica
86-96 25-31 32-38
Macrocítica
Normocrómica
> 101 > 32 32-38
Microcítica
Hipocrómica
< 81 < 25 < 32
Ancho de distribución de los eritrocitos:
El ancho de distribución eritroide ADE o RDW, Red cell distribution width o índice de anisocitosis
es un parámetro exclusivo del hemograma electrónico, y representa el coeficiente de variación
expresado en porcentaje, del tamaño de los eritrocitos.
El valor de referencia para el coeficiente de variación del ancho de distribución eritroide es de
11.5% a 15.1%. Permite clasificar los síndromes anémicos en Homogéneos si el ADE <15% y
heterogéneos si el ADE > 15.1 %.
En combinación con el VCM se establece una nueva clasificación morfológica, conocida como
clasificación Bessman la cual tiene muy buena correlación etiológica de la anemia.
Tabla 5: Clasificación de Bessman apartir del PVC y el ADE. Manual de Hematología I. Universidad
de Antioquia. 1990
PVC DISMINUIDO PVC NORMAL PVC AUMENTADO
ADE normal
microcitica simple
beta talasemia
alfa talasemia
normocitica
pérdida de sangre
crónica
macrocitica simple
aplasia medular
ADE
aumentado
Microcitica y anisocitosis
ferropenica
delta/beta talasemia
normocitica y
anisocitosis
Hemoglobinopatias
Macrocitica con
anisocitosis
anemia hemolitica
autoinmune
Velocidad de sedimentación globular
Eritrosedimentación manual
La velocidad de sedimentación globular (VSG), conocida también como eritrosedimentación, no
constituye parte del hemograma. Es una medida de la velocidad a la cual se asienta los eritrocitos
en el plasma. La velocidad de asentamiento depende de:
La composición de proteínas del plasma.
El tamaño y forma de los eritrocitos.
La concentración de los eritrocitos.
El incremento de los valores de las proteínas del plasma (principalmente fibrinógeno, alfa
globulinas o gamma globulinas) resulta en una disminución del potencial zeta que rodea los
eritrocitos. Con un potencial zeta menor, los eritrocitos pueden unirse en formación de pilas de
monedas y asentarse en el plasma a una velocidad más rápida.
De igual forma, el tamaño y la forma de los eritrocitos afectan la velocidad de la sedimentación.
Los macrocitos se asientan más rápidamente que los eritrocitos normales, y los microcitos de una
manera más lenta. Debido a su forma irregular, los poiquilocitos no pueden formar pilas de
monedas, y se asientan a una velocidad más lenta.
La concentración de los eritrocitos afecta directamente a la velocidad de sedimentación y mientras
mayor es la concentración de eritrocitos, menor es la eritrosedimentación un paciente anémico
parece tener aumento de la eritrosedimentación, lo que podría alterar el diagnóstico. Sin
embargo es importante seguir las recomendaciones del Comité Internacional de Estandarización
en Hematología.
La eritrosedimentación se utiliza para demostrar la presencia de inflamación o destrucción tisular,
o ambas afecciones. Es una prueba inespecífica ya que no determina la causa.
Cuando una muestra de sangre anticoagulada se deja en reposo, las células sanguíneas de
sedimentan formándose un paquete de glóbulos rojos en el fondo.
Una vez finalizado este proceso, quedan dos fases bien delimitadas y que corresponden al plasma
(parte superior) y las células (parte inferior).
La sedimentación globular se realiza en tres etapas:
1. hemoaglutinación o tendencia de los glóbulos rojos a formar agregados en forma de pilas de
monedas. Su duración es de unos minutos.
2. sedimentación o desplazamiento de los glóbulos rojos hacia el fondo del recipiente a
velocidad constante.
3. Acumulo de los glóbulos rojos en el fondo del recipiente, es una fase de velocidad lenta.
Etapas en el desarrollo de la Eritrosedimentación
De estas etapas, la más importante es la primera o hemoaglutinación, ya que de ella depende la
velocidad de todo el proceso. Así, cuantos más pequeños sean los agregados, más lentamente se
producirá la sedimentación y viceversa.
Fundamento:
Se ha usado principalmente el metodeo de Westergren. La VSG es la velocidad con la que los
eritrocitos se sedimentan en el plasma. El valor numérico en milímetros se obtiene midiendo la
distancia entre el límite inferior del menisco de la superficie y el superior del sedimento de
eritrocitos, en una columna de sangre anticoagulada en reposo durante 60 minutos, dentro del
tubo elegido. Los glóbulos rojos descienden porque son más densos que el plasma y caen por
gravedad.
Materiales
2 mL de sangre total, obtenido con EDTA
Pipeta de westerngren.
Gradilla de westerngren.
Reloj.
Descripción de la pipeta de westerngren
Pipeta de vidrio, con una longitud de 200 mm y 2.5 mm de diámetro. Está graduada de 0 a 200
mm con capacidad de contener 2 ml de sangre.
Se coloca vertical usando la gradilla del mismo nombre.
Procedimiento:
1. Mezclar suavemente, por inversión, la sangre total anticoagulada por EDTA.
2. Llenar la pipeta de westerngren mediante un propipeteador, hasta que la sangre llegue a la
marca 0. evitar la formación de burbujas.
3. colocar la pipeta en la gradilla de westerngren, procurando que quede estrictamente vertical.
4. marcar una hora en el reloj. La lectura debe realizarse en el tiempo exacto.
5. una vez transcurridos los 60 minutos, leer determinando la profundidad de la caída de los
eritrocitos.
Causas de error
Si la concentracion de anticoagulacion es demasiado elevada, la VSG estara disminuida.
Si se deja la sangre en la pipeta durante más de 60 minutos, la VSG aumentará. Si se lee antes de
60 minutos la VSG dará resultados bajos.
Un aumento (o disminución) muy marcados de la temperatura ambiente dará valores de VSG
aumentados (o disminuidos), respectivamente.
La vibración de tubo donde se halla la sangre aumenta los valores de la VSG.
La presencia de burbujas en la sangre dará resultados erróneos.
La presencia de coágulos de fibrina en la sangre invalida los resultados de la prueba.
La determinación de la velocidad de sedimentación debe efectuarse en el transcurso de las 2 horas
que siguen a la extracción de la sangre. Si se utiliza EDTA como anticoagulante, este lapso puede
prolongarse hasta 12 horas, si la sangre se refrigera.
La eritrosedimentación fue utilizada en la práctica médica para la evaluación de enfermedades
inflamatorias, neoplásicas y en la tamización de personas sanas. Con la incorporación de nuevas
pruebas de laboratorio, en las dos últimas décadas ha perdido vigencia, quedando solo unas pocas
entidades en donde realmente estaría indicada.
La prueba es inespecífica, como alternativa, el médico dispone de pruebas con mayor sensibilidad
y especificidad, como la proteína C reactiva cuantitativa por nefelometría cinética. (La
proteína C reactiva es una proteína anormal que aparece en la sangre en las etapas agudas de
distintos trastornos inflamatorios, virtualmente ausente en personas sanas).
En la actualidad la utilidad clínica de la eritrosedimentación se resume así:
No tiene utilidad como prueba de tamización y no hace parte del hemograma electrónico.
En las enfermedades infecciosas es preferible utilizar la proteína C reactiva por métodos
cuantitativos, preferiblemente por nefelometría cinética.
En las enfermedades inflamatorias, en particular las enfermedades reumatológicas, solo está
indicada en la arteritis temporal y en la polimialgia reumática, enfermedades íntimamente
relacionadas, en donde la eritrosedimentación hace parte de los criterios del diagnostico. En el
resto de las enfermedades inflamatorias es preferible utilizar la proteína C reactiva.
En las enfermedades neoplásicas no tiene indicación. En estos casos se deben utilizar los
marcadores tumorales, de acuerdo con las respectivas neoplasias.
Valores de variabilidad biológica:
La eritrosedimentación varia con el sexo y la edad con la cual aumenta en forma paralela; en los
niños se espera que esté por debajo de 10mm/h, hasta los 50 años de edad en hombres entre 0 y
15 mm/h y en mujeres entre 0 y 20 mm/h y después de los 50 años en hombres entre 0 y 20
mm/h y en mujeres entre o y 30 mm/h.
Actualmente no se utiliza la formula de sedimentación corregida.
Eritrosedimentación Automatizada
Sistema cerrado para determinación de VSG
Este sistema utiliza sistema cerrado, tubos tapa negra al vacio.Se usa como anticoagulante citrato
de trisodio con el principio del método westergren. El tubo tapa negra debe ser el último tubo en
la recolección de la muestra y la lectura se realiza a la media hora.
Los tubos tapa negra se encuentran en dos presentaciones de 1.6 ml y 2.9 ml que se montan en
una gradilla especial con escala para la posterior medición.
Se manejan los mismos valores de referencia del método tradicional.
Velocidad de sedimentacion globular (VSG) automatizada
Se basa en un método cinético capilar que se correlaciona directamente con el método tradicional
de referencia de Westergren (Clinical laboratory standaritation), El cual realiza 1000 mediciones
fotométricas de la cinética celular en la muestra en 20 segundos y determina y homologa la
sedimentación celular a la de una hora por método manual. Este sistema, da un resultado
automatizado rápido, reproducible y confiable. Aemás permite el uso de tubo primario, menor
cantidad de muestra ( 30 uL, especialmente para recién nacidos y neonatos) y manejo de la
muestra libre de riesgo biológico.
La velocidad de sedimentación permanece siendo un examen de utilidad a pesar de Su
inespecificidad, ya que lo encontramos alterado en múltiples procesos que comprometen la vía de
la respuesta inflamatoria, la respuesta a las infecciones o sistema inmunológico, pero su
anormalidad alerta al clínico a que uno de estos procesos está activado y, acompañado de otros
exámenes de fase aguda como la PCR, se convierte en de gran orientación, especialmente en el
seguimiento de procesos donde ya estaba previamente alterado. Esta incluido además dentro de
los criterios diagnósticos de algunas enfermedades reumatológicas como la artritis temporal y la
polimialgia reumática, es así que para todos estos casos, se tiene ahora la VSG automatizada y en
20 segundos, lo cual corrige los problemas técnicos y mejora la oportunidad en el paciente
urgente” 5
Tabla 6: Principales factores que afectan la eritrosedimentación. Medicina & Laboratorio
i,Volumen 9, 7-8, 2000. Germán Campuzano Maya, MD
AUMENTAN DISMINUYEN LA ALTERAN SIN SIGNIFICADO
CLINICO
Anemia
Macrocitosis
Edad avanzada(>60
años
Aumento del
fibrinógeno (infección,
Esferocitosis,
acantocitosis,
microcitosis,
anisocitosis
Hipofibrinogenemia
Disproteinemia con
hiperviscosidad.
alimentación reciente
antiinflamatorios no
esteroideos
Aspirina
Obesidad
inflamación).
Embarazo
Malignidad
Sexo femenino
Factores técnicos
(problemas de dilución
mazcla inadecuada,
formación de coagulos,
disminución
temperatura medio).
policitemia
Temperatura corporal