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Guía de Laboratorio N°1 de Biología Extracción de ADN Nombres: Francisca Diet, Delia Garrido, Florentina Jiménez, Daniela Ruiz Curso: IV°A Fecha: 19/05/2014 ¿ADN en mi comida? Como el ADN se encuentra en todas las células de los seres vivos, incluyendo por supuesto los vegetales, intentaremos extraer esta importante molécula a partir de un plátano, fruta que puedes comprar en cualquier lugar de Chile. El proceso de extracción de ADN desde una célula es el primer paso para muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnología. Los científicos deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas que se encuentran en las células, evitando que el ADN se desnature (que se rompa). ¿Qué necesitamos? Juguera o procesador de alimentos. 2 vasos precipitado 250 ml. Cucharita plástica. (5 ml) Cuchara sopera. (10 ml) Hisopos de algodón o palitos de cóctel. Ablandador de carne. varias capas de gasa para hacer un filtro. Bandas elásticas. Tubos de ensayo. Plátano u otra fruta o verdura (kiwi, coliflor, cebolla) Lavalozas. Sal de mesa Agua destilada Alcohol 95° frío (guardado en el freezer) Pipeta Pasteur plástica Varilla de vidrio pequeña ¿Qué vamos a hacer? EXTRACCIÓN DE ADN Vamos a preparar una solución de fruta tratada con sal, agua destilada y champú (o lavalozas). Trataremos con plátano. Si tú quieres puedes usar otras frutas o verduras y así comparar el resultado final. Referencia: Programa Explora - CONICYT Objetivo : Que los estudiantes a través de medios físicos y químicos de separación logren extraer el ADN de un fruta como el plátano y el Kiwi.

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GUIA BIOLOGIA

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ADN en mi comida

Gua de Laboratorio N1 de BiologaExtraccin de ADN Nombres: Francisca Diet, Delia Garrido, Florentina Jimnez, Daniela Ruiz Curso: IVA Fecha: 19/05/2014

ADN en mi comida?

Como el ADN se encuentra en todas las clulas de los seres vivos, incluyendo por supuesto los vegetales, intentaremos extraer esta importante molcula a partir de un pltano, fruta que puedes comprar en cualquier lugar de Chile. El proceso de extraccin de ADN desde una clula es el primer paso para muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnologa.

Los cientficos deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas que se encuentran en las clulas, evitando que el ADN se desnature (que se rompa).

Qu necesitamos?

Juguera o procesador de alimentos. 2 vasos precipitado 250 ml.

Cucharita plstica. (5 ml)

Cuchara sopera. (10 ml) Hisopos de algodn o palitos de cctel.

Ablandador de carne. varias capas de gasa para hacer un filtro. Bandas elsticas. Tubos de ensayo. Pltano u otra fruta o verdura (kiwi, coliflor, cebolla) Lavalozas.

Sal de mesa

Agua destilada

Alcohol 95 fro (guardado en el freezer)

Pipeta Pasteur plstica

Varilla de vidrio pequea

Qu vamos a hacer?

EXTRACCIN DE ADNVamos a preparar una solucin de fruta tratada con sal, agua destilada y champ (o lavalozas). Trataremos con pltano. Si t quieres puedes usar otras frutas o verduras y as comparar el resultado final.

1: En una juguera, mezcla un pltano pelado con una taza de agua destilada. Muele slo por 15-20 segundos, hasta que se produzca una mezcla homognea. No muelas ms ya que puedes romper el ADN. Si no tienes juguera muele bien el pltano con un tenedor junto con el agua.

2: En una taza prepara una solucin con una cucharadita de champ y dos pizcas de sal de mesa. Puedes usar champ o lavalozas de diferentes marcas para comparar la eficiencia de la extraccin al final del experimento. Agrega 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada o llena la taza hasta 1/3. Disuelve la sal y el champ mezclando lentamente con la cuchara sin producir espuma.

3. Agrega a la solucin preparada en el paso 2, tres cucharas soperas bien llenas de la mezcla de pltano (u otra fruta) del paso 1. Mezcla la solucin con la cuchara por 5 a 10 minutos sin producir espuma.

4. Mientras t mezclas la solucin de pltano, un compaero(a) colocar un trozo doble de gasa sobre un vaso de precipitado y lo sujetar con un par de elsticos.

5. Filtra la mezcla vertindola en el gasa y deja pasar la solucin durante varios minutos hasta tener aproximadamente 5 ml de filtrado para la prueba (que cubra el fondo del vaso).6. Agrega un pequea cantidad de ablandador de carne al filtrado y revuelvan lentamente por 2

minutos.

7. Llena un tubo de ensayo con el alcohol fro que tenas guardado en el freezer. Si no tienes freezer, mantn el alcohol en hielo. Para mejores resultados el alcohol debe estar lo ms fro posible.

8. Llena la pipeta plstica con la solucin filtrada de pltano.

9. Agrega el filtrado al alcohol. Djala reposar por 2-3 minutos sin perturbarla. Es importante no agitar el tubo de ensayo.

Anlisis del experimento1. Cul es la funcin del detergente en la experiencia?

La funcin del detergente es destruir las membranas celulares de las frutas; el detergente disuelve las grasas, que es el componente principal de la membrana plasmtica y nuclear de las clulas. Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior2.Cul es la funcin de la sal en la experiencia?La funcin de la sal en el experimento es de desnaturalizar las protenas, que se encuentran enrolladas con el ADN, llamadas protenas histonas, haciendo que se separen ms fcilmente el ADN.3.Cul es la funcin del alcohol en la experiencia?El alcohol se utiliza para que separar el ADN y precipite en este. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interfase. Adems de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solucin acuosa.4.Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sera el ADN. Es posible que la molcula de ADN se visualice a simple vista? Por qu?No es posible visualizar las molculas de ADN, porque es sumamente pequea y la nica manera de ver la molcula es a travs de un microscopio que posea un gran aumento, lo nico que se puede observar a simple son las fibras de ADN que es el mucus blanco que observamos.5.A partir de la respuesta anterior, qu creen que contiene el ADN obtenido en la experiencia?El ADN obtenido en ambas experiencias, tanto del kiwi, como del pltano contiene el material gentico de las frutas.6.Se podra utilizar otros alimentos para extraer ADN? En tal caso, cules podran ser esos alimentos?S, se podran utilizar otros alimentos para extraer el ADN, tales como, frutas, vegetales, plantas, animales, cualquier alimento de origen vegetal o animal debido a que al ser seres vivos, van a poseer ADN.7. Qu ocurre con el material gentico que se consume?El material gentico que consumimos es digerido y degradado por nuestro sistema digestivo, mediante una enzima, llamada nucleasa pancratica, que est en el intestino, la cual tiene como funcin romper el ADN de lo que consumimos y convertirlo en muchos nucletidos, que posteriormente son reducidos a unidades mucho ms pequeas.

Imgenes del experimento

Objetivo: Que los estudiantes a travs de medios fsicos y qumicos de separacin logren

extraer el ADN de un fruta como el pltano y el Kiwi.

Referencia: Programa Explora - CONICYT