“gen delta 32 e infección vih: ¿nuevos conceptos?” expositor: claudio alejandro torres...

““Gen Gen delta 32 e infección VIH:delta 32 e infección VIH:¿Nuevos Conceptos?”¿Nuevos Conceptos?”

Expositor: Claudio Alejandro Torres Bodevin.Expositor: Claudio Alejandro Torres Bodevin.

Universidad de Concepción.Universidad de Concepción.Facultad de Medicina.Facultad de Medicina.

Carrera de Tecnología Médica.Carrera de Tecnología Médica.Mención de Bioanálisis Clínico, Hematología y Banco de Sangre.Mención de Bioanálisis Clínico, Hematología y Banco de Sangre.

2204 de Septiembre de 200604 de Septiembre de 2006 Gen delta 32 en infección por VIH: ¿NuGen delta 32 en infección por VIH: ¿Nuevos Concepctos?evos Concepctos?

Microorganismos patógenos.Microorganismos patógenos.


Microorganismos patógenos.Microorganismos patógenos.

Comunicabilidad

InvasiónDaño


VIH y SIDA.VIH y SIDA.

• VIH: Virus de la Inmunodeficiencia humana.

• VIH +: Paciente que ha sufrido la infección de este virus.

SIDA: Síndrome de InmunoDeficiencia Adquirida.

Conjunto de síntomas y signos derivados de un debilitamiento importante del sistema inmunitario.


Infección de células CD4+Infección de células CD4+


VIHVIH

De la familia De la familia lentiviridae.lentiviridae.

Dos grandes tipos:Dos grandes tipos: VIH-1VIH-1 VIH-2VIH-2

VIH-1VIH-1 causante del SIDA causante del SIDA en el mundo en general.en el mundo en general.

VIH-2VIH-2 causante del SIDA causante del SIDA en la mayor parte de África.en la mayor parte de África.

No existen No existen ReaccionesReacciones

cruzadascruzadas


Conformación del VIH.Conformación del VIH.

Capa de Capa de glucoproteínas: glucoproteínas:

gp120gp120 gp41gp41 LípidosLípidos

Núcleo:Núcleo: p17p17 p24p24 2 moléculas de ARN2 moléculas de ARN Transcriptasa inversaTranscriptasa inversa p9 (proteasa)p9 (proteasa) Otras moléculas.Otras moléculas.

gp160


Conformación del VIH.Conformación del VIH.

gp-160

gp-120

gp-41

Se divide en dos subunidades asociadas no covalentemente

Involucrada en la inhibición de la quimotaxis de células B para:

- CXCL12

- CCL20

- CCL21


gp-41gp-41 ¤ ¤ CumpleCumple un un papelpapel central en la central en la fusiónfusión de de membranasmembranas..

¤ ¤ En su región N-terminal En su región N-terminal posee un dominio llamado posee un dominio llamado “péptido de fusión” (FP). “péptido de fusión” (FP).

¤ ¤ Este péptido de fusión Este péptido de fusión interactúa directamente interactúa directamente

con moléculas en la membrana de la célula T, como lo con moléculas en la membrana de la célula T, como lo son: CD4 y TCR.son: CD4 y TCR.

¤ Esta interacción provoca inhibición de células T, ¤ Esta interacción provoca inhibición de células T, conllevando a unaconllevando a una down-regulation.down-regulation.


Acoplamiento de VIH a célula Acoplamiento de VIH a célula CD4+CD4+

CD4

CCR5

Además de la señalética que le

proporciona la célula T al VIH,

a través del CD4 y el TCR para

su acoplamiento y posterior fusión,

existen otras moléculas que funcionan

como co-receptores para la infección de VIH-1 sobre los

linfocitos T CD4+, como el receptor de quimoquina 5

(CCR5), entre otros.

VIHVIH


VIH AIR LINES

Ejemplo extraído de material pedagógico de TM Marcelo Castillo.


CD 4 AIRPORT

LT CD4 CITY


VIH AIR LINES


VIH

AIR LINES

RNA


CCR5CCR5


VIH AIR LINES

CCR5


CCR5CCR5

Receptor tipo 5 de las Receptor tipo 5 de las quimoquinas de la quimoquinas de la familia CC.familia CC.

Pertenece a la Pertenece a la superfamilia de los superfamilia de los receptores unidos a receptores unidos a proteína G.proteína G.

Proteína Proteína transmembránica que transmembránica que cruza 7 veces la cruza 7 veces la membrana.membrana.


ccr5ccr5δδ3232

Mutación natural Mutación natural recesiva.recesiva.

Deleción interna del Deleción interna del nucleótido 32.nucleótido 32.

Es funcionalmente Es funcionalmente inactiva para el rol de inactiva para el rol de co-receptor para el co-receptor para el VIH.VIH.


CCR5 y ccr5CCR5 y ccr5δδ3232


CCR5/ccr5CCR5/ccr5δδ3232 y y ccr5ccr5δδ32/ccr532/ccr5δδ3232

CCR5/ccr5CCR5/ccr5δδ3232

HeterocigotosHeterocigotos

Ha sido descubierto en Ha sido descubierto en aproximadamente el 20% de la aproximadamente el 20% de la población.población.

Proporciona una protección Proporciona una protección relativa para desarrollar SIDA.relativa para desarrollar SIDA.

ccr5ccr5δδ32/ccr532/ccr5δδ3232 (Homocigotos)(Homocigotos)

Se presenta en Se presenta en aproximadamente el 1% de los aproximadamente el 1% de los caucásicos.caucásicos.

Ha sido relacionado con un Ha sido relacionado con un fenotipo altamente protector fenotipo altamente protector para la infección por VIH-1.para la infección por VIH-1.


Modificaciones post-traduccionalesModificaciones post-traduccionales

Modificaciones:Modificaciones: Fosforilación.Fosforilación. Modificación co-traduccional por Modificación co-traduccional por

multimerizaciónmultimerización

Fenotipo: Fenotipo:

CCR5CCR5

Genotipo: Genotipo:

CCR5/CCR5CCR5/CCR5

Fenotipos:Fenotipos:

CCR5CCR5

ccr5ccr5δδ3232

Genotipo:Genotipo:

CCR5/ccr5CCR5/ccr5δδ3232

CCR5 normal

CCR5 normal

Ccr5δ32normal

Receptor inactivo

Formación de Heterocomplejo


Infección de células CD4+Infección de células CD4+


CXCR4CXCR4


Tropismo celular VIHTropismo celular VIH

Immunology Today 20: 89-94, 1999


Quimoquinas y ligandoQuimoquinas y ligando

CCL3L1.CCL3L1. Potente quimoquina Potente quimoquina

supresora para el VIH-1supresora para el VIH-1 Ligando para CCR5, Ligando para CCR5,

compite por dicho receptor. compite por dicho receptor.

CCL4L1.CCL4L1.

Rantes.Rantes. Funciona de manera muy Funciona de manera muy

similar a CCL3L1similar a CCL3L1

Factor 1 derivado del Factor 1 derivado del estroma (SDF-1)estroma (SDF-1)

Ligando para CXCR4Ligando para CXCR4


Células susceptiblesCélulas susceptibles

EspermatozoidesEspermatozoides Asociado a la presencia del Asociado a la presencia del

CCR5 a la región CCR5 a la región periacrosomal.periacrosomal.

Monocitos

Linfocitos Th


Interacción viral con ADN de célula Interacción viral con ADN de célula blancoblanco

En el proceso de infección celular, El ADN complementario viral (ADNc) atraviesa la envoltura nuclear para integrarse entre la cromatina, para este fenómeno el VIH-1 necesita de una proteína de envoltura nuclear interna integral llamada emerin, la cual es la encargada de unir la interfase entre la envoltura nuclear interna y la cromatina.

Emerin


Respuesta inmune frente a VIHRespuesta inmune frente a VIH

Fase aguda Fase crónica


Relación células CD4/CD8Relación células CD4/CD8

Progresiva pérdida de células CD4

Incremento de células CD8

Poco

eficaz

Muy poco eficaz


Monitorización analítica de la Monitorización analítica de la infección VIH.infección VIH.

Técnicas de biología Técnicas de biología molecular:molecular:

RT-PCRRT-PCR ELISAELISA IFIIFI

Citometría de flujo:Citometría de flujo: Recuento de Recuento de

subpoblaciones subpoblaciones linfocitarias (CD4 y CD8)linfocitarias (CD4 y CD8)

Relación CD4/CD8 Relación CD4/CD8 (1,2-2,1)(1,2-2,1) CD38 en LT CD8 CD38 en LT CD8 (>7.250)(>7.250)


File: 111.003Acquisition Date: 23-Apr-98Gate: G6Gated Events: 12430Total Events: 15000

Quad Events % Gated% TotalUL 20 0.16 0.13UR 1496 12.04 9.97LL 2028 16.32 13.52LR 8886 71.49 59.24

File: 111.004Acquisition Date: 23-Apr-98Gate: G6Gated Events: 12512Total Events: 15000

Quad Events % Gated % TotalUL 600 4.80 4.00UR 8866 70.86 59.11LL 1499 11.98 9.99LR 1547 12.36 10.31

RELACION CD4/CD8 = 12.04/70.86 = 0.17


Inmunidad frente a VIHInmunidad frente a VIH

Reacción cruzada

Reacción cruzada


Resistencia LT CD8.Resistencia LT CD8.

HLA - I

• HLA-A *6802

•HLA-B18


La plaga negraLa plaga negra *Causada por bacteria *Causada por bacteria Yersinia Yersinia

pestispestis

*También es conocida como *También es conocida como peste bubónica, a causa de la peste bubónica, a causa de la gran gran

hinchazón dolorosa de las glándulas hinchazón dolorosa de las glándulas

linfáticas, elemento conocido como linfáticas, elemento conocido como

bubones.bubones.

*Usualmente resulta de la mordida de *Usualmente resulta de la mordida de

la pulga de las ratas o de la la pulga de las ratas o de la

manipulación de animales infestadosmanipulación de animales infestados


La peste negra y selección naturalLa peste negra y selección naturalExiste asociación entre la Existe asociación entre la resistencia a la infección por resistencia a la infección por Yersinia pestisYersinia pestis y la presencia del y la presencia del

gen gen δδ32 32 en al población. en al población.

Durante la época de la peste Durante la época de la peste negra, la devastación provocada negra, la devastación provocada por dicha plaga estableció una por dicha plaga estableció una inmunidad en poblaciones inmunidad en poblaciones caucásicas ancestrales. caucásicas ancestrales.

Descendientes de caucásicos Descendientes de caucásicos quienes contrajeron la plaga a quienes contrajeron la plaga a mediados del siglo catorce y mediados del siglo catorce y sobrevivieron, pueden tener sobrevivieron, pueden tener inmunidad completa o parcial a inmunidad completa o parcial a HIV/SIDA. HIV/SIDA.


““Selección natural”Selección natural”

1%De la

población europea.

Yersinia pestisVIHVIH


““Selección natural”Selección natural”


Referencias.Referencias.

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