fusarium oxysporum
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analisis de cepaTRANSCRIPT
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UNIVERSIDAD POLITECNICA DE PUEBLA
Programa académico de Ingeniería en Biotecnología
Ingeniería Genética
“Marcador molecular de Fusarium oxysporum producido en Escherichia coli.
Presenta:
Noé Juárez César
Asesor de proyecto:
Mtra. Verónica Miroslava Martínez Ortiz
Fecha
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Características Macroscópicas• 1. Aspecto de la colonia (En agar glucosa de peptona a 30º):
• - Diámetro: 50 mm en una semana. - Topografía: Lisa.- Textura: Al principio algodonosa para terminar como el fieltro.- Color: Desde blanco hasta salmón pálido; generalmente tiene un tinte púrpura.- Reverso: Púrpura.
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Características Microscópicas
• - Características predominantes:
• - Conidióforo: Fiálides cortas que se afilan hacia la punta con collaretes poco definidos.
• - Macroconidia: De 1 a 5 tabiques con forma de media luna.
• - Microconidia: Abundantes, pequeñas, ovales o en forma de riñón.
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Pruebas confirmatorias
• Sembrar en Agra PDA
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Fuente natural.
• Bananeros
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Importancia Biotecnológica
• Es un hongo patógeno se estudia por los daños que causa tanto a las plantas llevándolas a la muerte como a los seres humanos infectando partes del cuerpo vitales.
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Antecedentes.
• Fusarium oxysporum EL HONGO QUE NOS FALTA CONOCER
EMIRA GARCÉS DE GRANADA
MARTHA OROZCO DE AMÉZQUITA
CARACTERIZACIÓN DE GENES DE POLIGALACTURONASAS DE “FUSARIUM OXYSPORUM” f.sp. “RADICIS LYCOPERSICI” Y SU ANÁLISIS EN SISTEMAS HETERÓLOGOS.
AITOR DE LAS HERAS GUTIÉRREZ
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Justificación
• Esta presente en el genoma del genero fusarium hasta en un 99 %.
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ObjetivoCaracterización de genes en común del genero fusarium oxysporum
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Objetivos específicos
• Diseñar oligos para la amplificación de las secuencias codificantes de enzimas útiles.
• - Selección de vectores correctos
• - Selección de clonas
• -Corroboración del experimento
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Metodología generalAmplificación de
fragmentos codificantes por
PCR
Diseño de primers y condiciones de
PCR
Generar la inserción de los
genes en el vector(Considerar mapa
de restricción)
Corroboración de la efectividad del
experimento
Selección de las cepas
transfectadas
Seleccionar un hospedero adecuado
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Resultados
• Pg1prom 1F 5´- GCAT GGATCC GCT GCA GAA ATG TAT TCG ATT A –3´ Pg1prom 2R 5´- ACTA TCTAGA TCG AAC CAT TGT GAT ATT CGA –3´
• 1538 pb Yeppg1a
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Selección de vector
• Se seleccionó debido a sus puc 19 características de sensibilidad y capacidad de replicación
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•C. Selección de clonas
• Se seleccionaron las clonas debido al cassete de resistencia que presenta el vector antes mencionado
• Las cepas son resistentes a la presencia de ampicilina
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Corroboración
•La corroboración se hace mediante la comparación del rendimiento en la producción de gen pg1 de interés en cepas de Escherichia coli.
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Conclusión.
• Se logro realizar el diseño para la síntesis del gen que permitiera su inserción en un vector de clonación para su expresión.
• Se logro encontrar el gen de dicho M.O.
• Se logro la obtención del gen en la célula hospedera
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Perspectiva
• Se puede utilizar este proyecto como base para identificación entre genero de fusarium oxysporum en la biotecnología con ayuda de ingeniería genética.
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