Download - Fusarium oxysporum
UNIVERSIDAD POLITECNICA DE PUEBLA
Programa académico de Ingeniería en Biotecnología
Ingeniería Genética
“Marcador molecular de Fusarium oxysporum producido en Escherichia coli.
Presenta:
Noé Juárez César
Asesor de proyecto:
Mtra. Verónica Miroslava Martínez Ortiz
Fecha
Características Macroscópicas• 1. Aspecto de la colonia (En agar glucosa de peptona a 30º):
• - Diámetro: 50 mm en una semana. - Topografía: Lisa.- Textura: Al principio algodonosa para terminar como el fieltro.- Color: Desde blanco hasta salmón pálido; generalmente tiene un tinte púrpura.- Reverso: Púrpura.
Características Microscópicas
• - Características predominantes:
• - Conidióforo: Fiálides cortas que se afilan hacia la punta con collaretes poco definidos.
• - Macroconidia: De 1 a 5 tabiques con forma de media luna.
• - Microconidia: Abundantes, pequeñas, ovales o en forma de riñón.
Pruebas confirmatorias
• Sembrar en Agra PDA
Fuente natural.
• Bananeros
Importancia Biotecnológica
• Es un hongo patógeno se estudia por los daños que causa tanto a las plantas llevándolas a la muerte como a los seres humanos infectando partes del cuerpo vitales.
Antecedentes.
• Fusarium oxysporum EL HONGO QUE NOS FALTA CONOCER
EMIRA GARCÉS DE GRANADA
MARTHA OROZCO DE AMÉZQUITA
CARACTERIZACIÓN DE GENES DE POLIGALACTURONASAS DE “FUSARIUM OXYSPORUM” f.sp. “RADICIS LYCOPERSICI” Y SU ANÁLISIS EN SISTEMAS HETERÓLOGOS.
AITOR DE LAS HERAS GUTIÉRREZ
Justificación
• Esta presente en el genoma del genero fusarium hasta en un 99 %.
ObjetivoCaracterización de genes en común del genero fusarium oxysporum
Objetivos específicos
• Diseñar oligos para la amplificación de las secuencias codificantes de enzimas útiles.
• - Selección de vectores correctos
• - Selección de clonas
• -Corroboración del experimento
Metodología generalAmplificación de
fragmentos codificantes por
PCR
Diseño de primers y condiciones de
PCR
Generar la inserción de los
genes en el vector(Considerar mapa
de restricción)
Corroboración de la efectividad del
experimento
Selección de las cepas
transfectadas
Seleccionar un hospedero adecuado
Resultados
• Pg1prom 1F 5´- GCAT GGATCC GCT GCA GAA ATG TAT TCG ATT A –3´ Pg1prom 2R 5´- ACTA TCTAGA TCG AAC CAT TGT GAT ATT CGA –3´
• 1538 pb Yeppg1a
Selección de vector
• Se seleccionó debido a sus puc 19 características de sensibilidad y capacidad de replicación
•C. Selección de clonas
• Se seleccionaron las clonas debido al cassete de resistencia que presenta el vector antes mencionado
• Las cepas son resistentes a la presencia de ampicilina
Corroboración
•La corroboración se hace mediante la comparación del rendimiento en la producción de gen pg1 de interés en cepas de Escherichia coli.
Conclusión.
• Se logro realizar el diseño para la síntesis del gen que permitiera su inserción en un vector de clonación para su expresión.
• Se logro encontrar el gen de dicho M.O.
• Se logro la obtención del gen en la célula hospedera
Perspectiva
• Se puede utilizar este proyecto como base para identificación entre genero de fusarium oxysporum en la biotecnología con ayuda de ingeniería genética.
Bibliografia.• Simons, G., Groenendijk, J., Wijbrandi, J., Reijans, M., Groenen, J., Diergaarde, P., Van der Lee, T.,
Bleeker, M., Onstenk, J., de Both, M., Haring, M., Mes, J., Cornelissen, B., Zabeau, M. y Vos, P. (1998). Dissection of the Fusarium I2 gene cluster in tomato reveals six homologs and one active gene copy. Plant Cell 10, 1055-1068.
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• Yun, S. H., Arie, T., Kaneko, I., Yoder, O. C. y Turgeon, B. G. (2000). Molecular organization of mating type loci in heterothallic, homothallic, and asexual Gibberella/Fusarium species. Fungal Genet Biol 31, 7-20.
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