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Factor de respuesta relativo(4)

En ocasiones no es posible contar con las sustancias de referencia de las impurezas, por falta de suministros, dificultades para aislamiento o problemas para la síntesis.

La determinación del FRR se debe incluir en la información de Validación del método analítico.

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Factor Respuesta

• Es la respuesta de una sustancia (Impureza) por unidad de peso o concentración.

)/()(Re

mLmgiónConcentracrespuestadeunidadesEnspuestarespuestadeFactor =

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Factor de Respuesta Relativo

Es usado para corregir las diferencias entre la respuesta de la sustancia relacionada o impurezaa y el principio activo.

𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟𝑑𝑒𝑟𝑒𝑠𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑎𝑟𝑒𝑙𝑎𝑡𝑖𝑣𝑜 = 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟𝑑𝑒𝑟𝑒𝑠𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑎𝑑𝑒𝑙𝑎𝑖𝑚𝑝𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎

𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟𝑑𝑒𝑟𝑒𝑠𝑝𝑢𝑒𝑡𝑎𝑑𝑒𝑙𝑝𝑟𝑖𝑛𝑐𝑖𝑝𝑖𝑜𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜

𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟𝑑𝑒𝑟𝑒𝑠𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑎𝑟𝑒𝑙𝑎𝑡𝑖𝑣𝑜 = Pendiente𝑑𝑒𝑙𝑎𝑖𝑚𝑝𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎

Pendiente𝑑𝑒𝑙𝑝𝑟𝑖𝑛𝑐𝑖𝑝𝑖𝑜𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜

Pendiente𝑑𝑒𝑙𝑎𝑖𝑚𝑝𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎

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Factor de Respuesta Relativo

Pendiente𝑑𝑒𝑙𝑎𝑖𝑚𝑝𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎

Pendiente𝑑𝑒𝑙𝑝𝑟𝑖𝑛𝑐𝑖𝑝𝑖𝑜𝑎𝑐𝑡𝑖𝑣𝑜

𝐼𝑚𝑝𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎

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Factor de Respuesta Relativo (RRF)

𝐼𝑚𝑝𝑢𝑟𝑒𝑧𝑎

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Ejemplo de factores de respuesta relativos

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Generalidades FRR(4)

• El FRR es específico para las condiciones experimentales en las cuales se determinó.• Se introduce en la fórmula de cálculo de las impurezas

para realizar una corrección en la diferencia en la respuesta del detector entre el ingrediente activo y la impureza.• La USP lo utiliza para la identificación y control de las

impurezas.• Actualmente ni la FDA ni la USP tienen una guía para su

uso.• El FRR se coloca en el numerador o en el denominador

dependiendo de la forma en la que fue calculado.

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Generalidades FRR(4)

• No esta definido el intervalo de valores de FFR válidos, esto dependerá de la linealidad, exactitud y robustez.• La farmacopea europea recomiendo el uso del FRR

cuanto este esta fuera del rango de 0.8 – 1.2.• Se recomienda usar el FRR en el denominador.• Debió determinarse dentro del rango lineal del

método• Reportar el FRR con un decimal si es igual o mayor

a 1 y con dos decimales si es menor a 1.

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¿ Cómo se determina el FRR?

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¿ Cómo se determina el FRR?

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Tipos de cuantificación para sustancias relacionadas

Por ciento de Area.• Se calcula con la siguiente ecuación:

• No se requiere una sustancia de referencia (Estándar).• Este método es usado en la fase de desarrollo del

principio activo, cuando un estándar de referencia de alta pureza aún no esta disponible.

% Impureza= Á<=>?=@>ABCD<=E>Á<=>FGF>@(AIJ@DK=I?G@>ABCD<=E>)

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Formas de cuantificar impurezas1. Por % de área (una sola muestra) 2. Preparando una sola muestra en donde se

cuantifican en el mismo método las impurezas y el ingrediente activo. (una sola muestra)

3. Preparando dos muestras una “Concentrada” y una de concentración más baja para cuantificar respectivamente las impurezas y el ingrediente activo.

4. Empleando un método para cuantificar al ingrediente activo y un método para cuantificar las impurezas.

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Cuantificación por por ciento de área

Requisitos:

• Linealidad en un amplio rango de concentraciones: se sumarán áreas grandes y pequeñas.

• La concentración del análisis debe permitir detectar niveles bajos de sustancias relacionadas.

• Los factores de respuesta de las sustancias relacionadas deben ser similares al de la sustancia activa.

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Preparación de una sola muestra en donde se cuantifican en la misma corrida las impurezas y el ingrediente activo.

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Preparar dos muestras una “concentrada” y una deconcentración más baja para cuantificar respectivamentelas impurezas y el ingrediente activo

Cromatograma de la muestra concentrada, no se puedecuantificar el ingrediente activo porque a estaconcentración no se tiene linealida para elactivo.

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Preparar dos muestras una “Concentrada” y una deconcentración más baja para cuantificar respectivamentelas impurezas y el ingrediente activo

Cromatograma de la muestra a una concentración másbaja, no se pueden cuantificar las impurezas por que nose detectan con precisión y exactitud.

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Ejercicio

Escriba la fórmula para calcular el Factor Respuesta.

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Ejercicio

Escriba la fórmula para calcular elfactor de respuesta relativo.

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Ejercicio

Dibuje una gráfica en donde el Factor derespuesta de la sustancia relacionada esmayor que el Factor de respuesta del activo

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EjercicioDibuje una gráfica en donde el Factor de respuesta de la sustancia relacionada es menor que el Factor de respuesta del activo

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Fórmulas para la cuantificación de impurezas

Caso 1: Cuando se cuenta con el estándar de la impureza y el método indica usarlo para la cuantificación.

Nota: La fórmula incluye solo como ejemplo diluciones para el estándar y para la muestra.

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Fórmulas para cuantificación de impurezas

%Impureza

conocida o desconocida =Area impureza conoc o desc

Área std del activoX Peso mg std del activo

100mLX 5mL50mL

X 5mL25mL

X Pureza mg100mg

X 100mLPeso muestra mg

X Peso promedioCant marbete mg

X 100

Caso 2: Cuando se cuantifica una impureza conocidausando el activo como estándar, por que no se cuentacon el estándar o el método indica cuantificarlo así.

Caso 3: Cuando se cuantifica una impureza desconocidausando el activo como estándar, por que no se cuentacon el estándar o el método indica cuantificarlo así.

Nota: La fórmula incluye solo como ejemplo diluciones para el estándar y para la muestra.

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Comparación de las fórmulas

%Impureza

conocida o desconocida =Area impureza conoc o desc

Área std del activoX Peso mg std del activo

100mLX 5mL50mL

X 5mL25mL

X Pureza mg100mg

X 100mLPeso muestra mg

X Peso promedioCant marbete mg

X 100

%Impureza conocida =Area impureza conocidaÁrea std imp conocida

XPeso mg Imp conocida

100mLX5mL50mL

X5mL25mL

XPureza mg100mg

X100mL

Peso muestra mgXPeso promedioCant marbete mg

X 100

Nota: La fórmula incluye solo como ejemplo diluciones para el estándar y para la muestra.

¿ Cómo se modificarían las fórmulas si se cuenta con los factores de respuesta?