evaluacion de la tÉcnica de elisa indirecta como test diagnÓstico para la deteccion de...
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EVALUACION DE LA TÉCNICA DE EVALUACION DE LA TÉCNICA DE ELISA INDIRECTA COMO TEST ELISA INDIRECTA COMO TEST
DIAGNÓSTICO PARA LA DETECCION DIAGNÓSTICO PARA LA DETECCION DE LEPTOSPIROSIS HUMANA, DE LEPTOSPIROSIS HUMANA,
ICA-LNDV,2006ICA-LNDV,2006
DOCENTE DIRECTOR: DOCENTE DIRECTOR:
MARIA CRISTINA VASQUEZMARIA CRISTINA VASQUEZ
ESTUDIANTES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTOESTUDIANTES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTO: :
EDWARD JOHNNY ZAMBRANO MORAEDWARD JOHNNY ZAMBRANO MORA ELIDA MAYERLITH PINTO SAAVEDRAELIDA MAYERLITH PINTO SAAVEDRA ENITH CASTILLA GOMEZENITH CASTILLA GOMEZ
INSTITUCIONES PARTICIPANTESINSTITUCIONES PARTICIPANTES
UDESUDES ICAICA BIOGENIXBIOGENIX
INTRODUCCION
TAXONOMIA
FAMILIA
Spirochaetacea Leptospiraceae
Trepomonema BorreliaLeptospira
Interrogans(180 serotipos)
Biflexa (60 serovares)
18 subgrupos
SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS REPRESENTATIVOS DE L. Interrogans
SEROGRUPOS SEROVAR (ES)
Australis australis , bratislava , lora
Autumnalis autumnalis , forbragg , bim , weerasinghe
Ballum ballum , aroborea
Bataviae bataviae
Canicola canicola
Celledoni celledoni
Cynopteri cynopteri
Djasiman djasiman
Grippotyphosa grippotyphosa , canalzonae, ratnapura
Hebdomadis hebdomadis , jules , kremastos
Hurstbridge hurstbridge
Icterohaemorrhagiae icterohaemorrhagiae , copenhageni , lai
Zimbabwe
SEROGRUPOS Y SEROVARES MAS REPRESENTATIVOS DE L. Interrogans
SEROGRUPOS SEROVAR (ES)
Javanica javanica , poi
Louisiana louisiana , lanka
Manhao manhao
Mini mini , georgia , swajizak
Panama panama , mangus
Pomona pomona
Pyrogenes pyrogenes
Ranarum ranarum
Sarmin sarmin
Sejroe sejroe,saxkoebing,hardjo
Semaranga patoc
Shermani shermani
Tarassovi tarassovi
Pumarola, 1994; Levett, 2001. (Modificado)
RESERVORIOS Y SUS SEROVARES
Pumarola, 1994; Levett, 2001. (Modificado)
ESPECIE SEROVAR
Ganados y búfalos
hardjo, pomona, icterohaemorragiae, bratislava, canícola, tarassovi
Cerdos pomona, tarassovi, bratislava
Perros
Canicola,bratislava, pomona, grippotyphosa, icterohaemorragiae
Caballos
grippotyphosa, icterohaemorragiae
LEPTOSPIROSIS
ANTROPOZOONOSIS DE DISTRIBUCION MUNDIAL
ANIMALES SILVESTRES
ANIMALES DOMESTICOS
HOMBRE
HOSPEDADOR DE
MANTENIMIENTO DENGUE HEMORRRAGICOHEPATITIS VIRAL
INFECCIONES POR HANTAVIRUS
HOSPEDADOR ACCIDENTAL
EPIDEMIOLOGIA
Los países tropicales y subtropicales son los más afectados por sus condiciones climáticas.
• La OMS ha estimado una tasa de incidencia en humanos entre 4-100 casos por 100 000 habitantes en estos países (22).
Precipitación
Temperatura
Humedad relativa
El pH, estructura
La composición de suelo
Son favorables para la presentación de Leptospira.
La seropósitividad de estudios hechos indican (2):
Colombia 18.5%,
México 14.1%,
El salvador 17.5%,
Brasil 9.8%
Argentina 3.8%
EPIDEMIOLOGIA
SEROVARES MAS FRECUENTES ENCONTRADOS EN COLOMBIA
EPIDEMIOLOGIA
TOMADO DE :Acosta Helbert, Moreno Carlos Hugo, Viafara B Daniel. Leptospirosis. Revision de tema, Colombia médica, Universidad del Valle, Cali, 1994 ; 25: 36-42.
TRANSMISION
PATOGENIA Y SINTOMAS
FORMA ICTERICA
FORMA ANICTERICA
DIAGNOSTICO
TECNICAS O METODOS
DIRECTOS INDIRECTOS
Observacion de campo oscuro
Tinciòn argenica
Tinciòn inmunohistoquimica
Deteccion de acidos nucleicos
Aislamiento
MAT
MsatFijación del complemento
ELISA
Aglutinación microscópicaAglutinación en microcapsulaHemoaglutinación indirecta
DIAGNOSTICO
TECNICA DE MICROAGLUTINACION (MAT)
Detectar anticuerpos aglutinantes en sueros Enfrentar a Ag (cultivos vivos de Leptospiras).
Se divide en dos etapas Cualitativa
Cuantitativa
Determinar el titulo exacto de un suero si este contiene anticuerpos contra Leptospiras,
NEGATIVO
POSITIVO
DIAGNOSTICO
MAT
FASE CUALITATIVA
FASE CUANTITATIVA
Determina la presencia deAc sin precisar el titulo exacto del suero.
Si se observa el 50% de las Leptospiras aglutinan se reporta el resultado con un titulo de 1:100
Determina el titulo exacto del suero.
Es la mayor dilución en la que se observa una aglutinación del 50%.
DIAGNOSTICODESVENTAJAS MAT
Necesidad de una infraestructura adecuada y de personal especializado y entrenado para su montaje, lectura e interpretación.
Mantenimiento continuo de las cepas Ag. 7 a 15 días . + aglutinante
La selección de los antígenos es un punto de vital importancia, cuando se comienza a trabajar en una zona donde no se conoce la prevalencia serológica.
Con respecto a los serovares utilizados en cada batería no existe estandarización en la selección de los mismos. Dif result
DIAGNOSTICO
VENTAJAS DEL ELISA
Los laboratorios tienen capacitación, conocimiento y equipos necesarios para el procesamiento de una prueba de ELISA .disminuye los riesgos en Bioseguridad, además en el mercado se encuentra un kit comercial con un costo razonable. Elisa IgM se muestra mas sensible que el MAT en el comienzo de la fase aguda (11) permitiendo brindar un diagnostico diferencial oportuno con otras patologías de origen viral que presentan sintomatología similar.Por su rapidez la prueba de ELISA permite una confirmación diagnostica rápida y segura, útil también en situaciones epidémicas o brotes, posibilitando dirigir medidas de vigilancia y control epidemiológico. (Manuel Céspedes)
OTROS METODOS SEROLOGICOS
LeptoTek Dri Dot Ensayo:
Aglutinacion en latex con suero.
LEPTO Dipstick Ensayo:
Detecta rápidamente anticuerpos IgM específicos de Leptospira en sangre total.
LeptoTek Flujo Lateral Ensayo:
Detecta anticuerpos IgM específicos-Leptospira en suero humano o las muestras de sangre total.
FC y PCR DE LCR
FIEBRE AMARILLA:
Duración de la viremia mas corta
DENGUE:
Intensidad de dolores musculares es mayor en dengue
HEPATITIS:
Inicio de fiebre menos brusco y de menor intensidad, desaparece cuando comienza
la Ictericia
MENINGOENCEFALITIS:
LCR: leucocitosis – Meningitis bacteriana
MALARIA:
Hepatoesplenomegalia y anemia
Protección de trabajadores mediante el
uso de calzado y vestimentas
apropiadas (botas, delantal, guantes,
antiparras, tapaboca).
Higiene personal y del ambiente
doméstico.
Impedir el ingreso de animales al interior
de los domicilios.
Higiene y desinfección en los locales de
ordeñe así como de las máquinas o
instrumentos.
Control de roedores.
Inmunización.
Antibioticoterapia.
Educación a la poblaciones de riesgo.
Limpieza y desinfección de los domicilios
que se inundan con solución de hipoclorito.
Vacunación de la población canina.
Vigilancia epidemiológica de las
poblaciones consideradas de mayor riesgo.
Educación y difusión de las posibles formas
de adquirir la enfermedad y como evitarla.
Medidas de prevención, protección y control para los animales.
Realizar el aislamiento de cepas de
Leptospira spp. en distintas especies
para conocer los serovalentes
involucrados.
Realizar estudios de reservorios
silvestres.
Realizar estudios epidemiológicos para
estudiar la evolución de la enfermedad.
Implementar programas de control de
roedores e higiene ambiental.
PLAN DE VACUNACIÓN Primo vacunación: Se vacunan todos
los animales del establecimiento,machos, hembras y terneros.2da. Dosis a los 21 días de la 1ra
dosisRevacunaciones en forma anual o
semestral de acuerdo al laboratorio productor.Machos: vacunar antes de entrar
al servicio para proteger al rodeo.Hembras: vacunar antes del
servicio y previo a la parición.
Terneros: vacunar a los 2 meses
de edad y luego revacunar.
Notificación obligatoria ( Brasil, Cuba y Uruguay).
CASO SOSPECHOSO:
a) Caso notificado hasta demostración de lo contrario en la epidemiología.
b) signos y síntomas sugestivos de la Enf mas
Epidemiología compatible.
CASO CONFIRMADO:
a) Aislamiento de leptospiras.
b) Serología positiva mediante la
prueba de aglutinación microscópica (MAT)
2 mx
PREGUNTAS? ? ? ? ? ? ?
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GRACIAS