EUTM,JULIO,2006

TEMA 1:VARIACIONES EN LAS TEMA 1:VARIACIONES EN LAS MEDIDAS DEL LABORATORIOMEDIDAS DEL LABORATORIO

PROF.ADJ.DRA. CRISTINA MIER

LICENCIATURA DE LABORATORIO CLÍNICO

EUTM

mcmier@yahoo.es

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IMPORTANCIA DEL TEMA

• El nivel de calidad de la fase preanalítica condiciona el nivel de calidad de las fases siguientes. la obtención correcta de la muestra es la primera condición de un resultado correcto

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Def preanalitica :ISO 15.189 3.10

Todos los pasos a seguir en orden cronológico, partiendo desde la solicitud del clínico, incluyendo solicitud, preparación del paciente obtención de la muestra primaria, transporte hacia y dentro del laboratorio y finaliza cuando el procedimiento analítico comienza .

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ETAPA PREANALÍTICA

atención al usuario

solicitud del examen,

preparación del paciente,

toma de muestra,

transporte

almacenamiento

separación y centrifugación

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Secuencia recomendada en el uso de tubos

• Tubo de separación de suero• Tubo de coagulación • Tubos con anticoagulantes:• citrato de sodio• EDTA• Heparina• Facilitar el reconocimiento de los tubos/tapones

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% DE ERROR

Preanalítico Analítico Postanalítico

46% 7% 47% (Rose,Boone)

68,2% 13,3% 18,5% (Plebani)

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RECHAZO DE MUESTRA• Datos incompletos o ilegibles• Discordancia entre datos solicitud y muestra• Proporción inadecuada de sangre-anticoagulante• Muestra incorrecta. Uso de anticoagulante incorrecto• Transporte inapropiado• Presencia de interferentes como hemólisis, turbidez• Cantidad insuficiente de muestra• Tiempo de recolección incorrecto

MUESTRA NO VÁLIDA

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% de error preanalíticoError en nombre paciente 2,6%Error identificación unidad hosp 19,0%Extravío orden 18,1%Orden malinterpretada 3,2%Envase inapropiado 2,6%Toma incorrecta de muestra 2,1%Toma de via de infusión 20,6%

68,2%

129/40490 Clin Chem 1997,43:1348

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Errores relacionados con la solicitud

Examen ordenado pero no realizado 1,4%Examen realizado pero no ordenado 1,1%Discrepancias con nombre médico 1,9%Errores en urgencia 0,8%

4,8% con error en ingreso de solicitud

Arch Path Lab Med 1999; 123:1145

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Preparación del paciente Objetivo:

Establecer una correcta preparación del paciente, tratando de evitar cualquier factor externo que pueda influír en las determinaciones y lograr un estado “basal”para que el resultado obtenido pueda ser comparable con su estado real de salud en ese instante y con otros resultados obtenidos bajo las mismas condiciones en otros momentos de la vida del paciente

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5.4.6 Control de traslado de muestras

• tiempo apropiado

• temperatura especificada

• seguridad del transportador, público en general y laboratorio que la recibe

• cumpliendo con los requisitos regulatorios nacionales, regionales, o locales.

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5.4.14

• Almacenaje por tiempo especificado

• Condiciones que aseguren estabilidad de las propiedades para repeticiones o análisis adicionales

SISTEMAS BIOLÓGICOS SON INESTABLES

ADSORCIÓN,DESNATURALIZACIÓN,EVAPORACIÓN,

CONGELACIÓN LENTA,ALÍCUOTAS,

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3.3análisisconjunto de operaciones que tienen el objeto de determinar el valor o características de una propiedad. NOTA En algunas disciplinas (ejemplo: microbiología) un análisis es la actividad total de un conjunto de ensayos/pruebas, observaciones o mediciones.

ISO 15189 :2003

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MÉTODOS ANALÍTICOS (DE MEDICIÓN)

MÉTODO ANALÍTICO: CONJUNTO DE PROCEDIMIENTOS (CONJUNTO DE INSTRUCCIONES ESCRITAS) Y TÉCNICAS PARA REALIZAR UNA ACTIVIDAD ORDENADO EN FORMA SISTEMÁTICA.

FORMAN PARTE DEL PROCESO ANALÍTICO

INEVITABLEMENTE EL INSTRUMENTO EMPLEADO ESTÁ INVOLUCRADO EN EL MÉTODO

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VARIACIÓN ANALÍTICA

INCERTIDUMBRE ( DE LA MEDICIÓN):

ES EL PARÁMETRO ASOCIADO A UN RESULTADO QUE CARACTERIZA LA DISPERSIÓN DE VALORES QUE PODRÍA TENER ESA MEDICIÓN

ENGLOBA TODAS LAS POSIBLES FUENTES DE VARIACIÓN

ESTIMADORES:

C.V. s INTERVALO DE CONFIANZA I.C.

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ERROR ANALÍTICO O ERROR DE LA MEDICIÓN:

TIPOS DE ERROR:

ERROR SISTEMÁTICO

ERROR ALEATORIO

ERROR TOTAL

ES CONSTANTE O VARÍA EN FORMA PREDECIBLE

SE CONOCE SU EXISTENCIA

SE PRODUCE AL AZAR

ERROR SISTEMÁTICO + ERROR ALEATORIO

EQUIPO,REACTIVOS,METÓDICA,

CALIBRACIÓN

REACTIVOS ,EQUIPO, PIPETEO,TRANSCRIPCIÓN

ES VARIABLE

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Tiempo entre toma de muestra y procesamiento

Sangre con EDTA Hasta 48 horas aTºA Hasta 7 días a 4ºC

Sangre con heparina Hasta 24 horaTºASangre sin anticoagulante Hasta 24 horas a TºASuero Hasta 48 horas a 4ºC.

Meses a -20ºC o -70ºC

Tº Ambiente 18-22 ºC

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CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO ANALÍTICO

PRECISIÓN :GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE RESULTADOS INDEPENDIENTESDE LA MISMA MUESTRA

ESPECIFICIDAD ANALÍTICA:CAPACIDAD DE PRODUCIR UNA SEÑAL EXCLUSIVAMENTE CON UN ANALITO ENPRESENCIA DE OTROS COMPONENTES (MATRIZ)

SENSIBILIDAD ANALÍTICA:CAPACIDAD DE PRODUCIR UNA SEÑAL DISTINTA FRENTE A CANTIDADES DISTINTAS DEL ANALITO

LINEALIDAD:CAPACIDAD DE PRODUCIR SEÑALES CUYA INTENSIDAD VARÍE PROPORCIONALMENTE CON LA CANTIDAD DEL ANALITO

REPETIBILIDAD:CUANDO SE MANTIENEN LAS CONDICIONES ANALÍTICAS

REPRODUCTIBILIDAD : CUANDO ALGUNAS DE ELLAS VARÍAN(PRECISIÓN INTERMEDIA)

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LÍMITES DE DETECCIÓN Y CUANTIFICACIÓN

EXACTITUD:GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE UN RESULTADO Y EL VALOR VERDADERO:

VERACIDAD: GRADO DE CONCORDANCIA ENTRE EL PROMEDIO DE UNA SERIE DE RESULTADOS DE LA MISMA MUESTRA Y EL VALOR VERDADERO

VALIDACIÓNVALIDACIÓN

característica estimador

veracidad Sesgo( bias, error sistemático)

precisión s(desvío estándar),C.V.

exactitud s acumulado

VALOR CONSISTENTE CON LA DEFINICIÓN DE UNA CANTIDAD PARTICULAR DADA.

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NECESIDAD DE CALIBRACIÓN:

CONJUNTO DE OPERACIONES QUE ESTABLECEN LA RELACIÓN ENTRE LA RESPUESTA DEL SISTEMA Y LA CANTIDAD DEL ANALITO

UTILIZA UN MATERIAL DE REFERENCIA (CALIBRADOR)

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BALANZABALANZA:DETERMINACIÓN DE MASA –PESADA

EQUILIBRAR UNA MASA DESCONOCIDA CON OTRA CONOCIDA

CAPACIDAD -SENSIBILIDAD –PRECISIÓN

USO,EN LA PREPARACIÓN DEUSO,EN LA PREPARACIÓN DE:

MATERIALES DE REFERENCIA(ESTÁNDARES)

REACTIVOS

SOLUCIONES (1º PASO)

CALIBRACIÓN DE EQUIPAMIENTO VOLUMÉTRICO

PESO = MASA . GRAVEDAD

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INSTRUMENTOS MAS PRECISOS DEL LABORATORIO

UBICACIÓN EN LUGARES LIBRES DE VIBRACIONES Y PROTEGIDOS DE LA LUZ SOLAR

PESAS CALIBRADAS:ESPECIFICACIONES DEL N B S

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1-COMPROBAR EL NIVEL2-VERIFICARLA SITUACIÓN DE MOVIMIENTO3-FIJAR EL PUNTO 0 (TARAR),VENTANAS LATERALES CERRADAS.4-ABRIR, COLOCAR LA MUESTRA (NO DIRECTAMENTE),CERRAR5-EQUILIBRAR HASTA EL REPOSO6-REGISTRAR7-RETIRAR LA MUESTRA8-EQUILIBRAR (RETIRAR LAS PESAS)9-VERIFICAR EL CERO (VENTANAS LATERALES CERRADAS)

ELECTRÓNICA: COMPENSACIÓN ELECTROMAGNÉTICA

RELACIÓN ENTRE LA MASA(FUERZA) Y LA CORRIENTE DE COMPENSACIÓN (CORRELACIÓN)

PASOS

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MEDICIÓN DE VOLUMEN

MATERIAL DE VIDRIO VOLUMÉTRICO (CALIBRADO, NO CALENTAR) :PIPETAS ,MATRACES AFORADOS, VASOS

NO VOLUMÉTRICO- NO CALENTAR A LA LLAMA DIRECTA

JARRAS,BOTELLAS,VASOS, MATRACES

CLASE A – CAP

PIPETAS-AFORADAS:TD-TC(SE SOPLA)

GRADUADAS:TD-TC

ELEGIR LA ADECUADA

TODO EL MATERIAL:SANO, LIMPIO, SECO Y DESENGRASADO

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PASOS

1-COLOCAR PROPIPETA O PERA DE GOMA AL EXTREMO

2-INTRODUCIR LA PIPETA EN LA SOLUCIÓN

3- SUCCIONAR LENTAMENTE(NO DEBE ENTRAR AIRE),HASTA UN NIVEL POR ENCIMA DE LA MARCA DE CALIBRACIÓN

4-RETIRAR LA PIPETA

5- ENJUAGAR LA PUNTA(ERROR)

6-VACIARLA EN POSICIÓN VERTICAL HASTA QUE EL EXTREMO INFWERIOR DEL MENISCO LLEGUEA LA MARCA DE CALIBRACIÓN

7-DRENARLA EN EL RECIPIENTE DEFINITIVO EN POSICIÓN VERTICAL, SI ES TC, TOCAR LA PARED DEL RECIPIENTE

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PIPETAS AUTOMÁTICAS

ASEGURA UN VERTIDO EFICAZ DE VOLÚMENES IGUALES (DILUCIÓN) POR DESPLAZAMIENTO DE AIRE

CALIBRACIÓN

MANTENIMIENTO

LUBRICACIÓN

PRECISIÓN (COEFICIENTE DE VARIACIÓN 0.1%- 1%)

VERIFICACIÓNVERIFICACIÓN

SECAR LA PUNTA DE ARRIBA HACIA ABAJOSECAR LA PUNTA DE ARRIBA HACIA ABAJO

PUNTEROS CALIBRADOSPUNTEROS CALIBRADOS

INSTRUCCIONES

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SOLUCIONES- PREPARACIÓN

1-PESAR EL SOLUTO SÓLIDO EN UN VASO(GUANTES)

2-AGREGAR SOLVENTE AL VASO EN CANTIDAD SUFICIENTE PARA DILUÍR

3-COLOCAR UNAVARILLA DE VIDRIO( O UN EMBUDO DE VIDRIO) EN EL MATRÁZ. (EN EL QUE SE VA A MEDIR EL VOLUMEN FINAL DE SOLUCIÓN)

4-VERTER EL CONTENIDO DEL VASO EN EL MATRÁZ A TRAVÉS DE LA VARILLAO EL EMBUDO(PUEDE SER POR LA PARED CON PIPETA O GOTERO)

5-AGREGAR SOLVENTE AL VASO Y REPETIR LA OPERACIÓN HASTA QUE NO RESTE MAS SOLUTO Y EL NIVEL CASI ALCANCE LA MARCA DEL MATRÁZ(ENRASE)

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6-AÑADIR SOLVENTE GOTA A GOTA POR EL CUELLO DEL MATRÁZ PARA ARRASTRAR SOLUTO7-TAPAR EL MATRÁZ Y MEZCLAR INVIRTIÉNDOLO Y AGITANDO 4 VECES 8-DEJAR REPOSAR (QUE DESCIENDA TODO )Y AJUSTAR EL ENRASE

AGITADOR MAGNÉTICO , CORRECCIÓN DE PH SI ES NECESARIO

TRASVASE O TAPADO PARA ALMACENAR EVITANDO EVAPORACIÓN

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CENTRIFUGACIÓN

DISPOSITIVO QUE ACELERA LA SEPARACIÓN GRAVITACIONAL DE LAS SUSTANCIAS QUE DIFIEREN SIGNIFICATIVAMENTE EN SUS MASAS

LABORATORIO:SEPARAR PARTÍCULAS EN SUSPENSIÓN(CÉLULAS)

SEPARAR DOS LÍQUIDOS

UTILIZA LA FUERZA CENTRÍFUGA RELATIVA = FCR

FCR = 1.118*10 – 5 * radio * rpm

( RADIO EN CENTÍMETROS,REVOLUCIONES POR MINUTO,VELOCIDAD ROTATORIA)

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PRECAUCIONES :PRECAUCIONES :

TUBOS EN EQUILIBBRIO (DISPOSICIÓN GEOMÉTRICA, PESAR)

TUBOS TAPADOS

INSTRUCCIONES Y ESPECIFICACIONES

REFRIGERADAS, TIPO DE CABEZALES

PLASMA FCR: 850-1000g 10 MINUTOS