esterilización de material de laboratorio

7/26/2019 Esterilizacin de material de laboratorio

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TPICOS DE CIENCIAS SOCIALES, ARTES Y HUMANIDADES

RESULTADOS:

GENERACION DE UN BANCO DE CLULAS BACTERIANASCOMPETENTES Y PRODUCTRAS DE PLSMIDOS.

1 |Equipo 4 6A

!o"o#$%&'% (. L% %)*o$)%+,i% o)"-+i% &u- /%%-,u%% p%$% i+i,i%$ -/ p$o"o,o/o - ,0/u/%*,o1p-"-+"-*2 /%* ,o+i,io+-* p%$% /%,o+*-$3%,i+ % u/"$% ,o+#-/%,i+ - /%*,0/u/%* )%,"-$i%+%* &u-$o+: -quipo ( C%C/5#/i,-$o/ *i-+o /%* ,o+i,io+-* p"i1%*2-quipo 5 C%C/5N%C/2 -quipo 7 N%C/G/i,-$o/8 -quipo 4 N%C/5N%C/

!o"o#$%&'% 5. S-p$-*-+"%+ 9,%%* - 1-ioLB2 *o/o -+ u+%*- $-#i*"$,$-,i1i-+"o;,%% ,o+ 1-ioLB ,o+


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TRANS!ORMACION DE CLULAS COMPETENTES Y SELECCI>NDE CLONES POSITI?OS

NOTA: P%$% $-%/i@%$ -*"% p$,"i,% *- "o1%$o+ ,0/u/%* ,o1p-"-+"-* -/ 6 B

2 |Equipo 4 6A

NOTA: *- o)"u3i-$o+ 5 ,%%* ,o+1-io LB ,o+


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CONSTRUCCI>N MOLECULAR2 PURI!ICACI>N Y E?ALUACI>N DEPLASMIDOS

Purificacin del plsmido

3 |Equipo 4 6A

!o"o#$%&'% 6. S- -*,%$" -/*o)$-+%%+"- 8 *- $-*u*p-+i -/)o"+ ,-/u/%$ &i+%/ - ,%%1i,$o"u)o ,o+ (L - *o/u,i+ /

!o"o#$%&'% . E+ o* 1i,$o"u)o* *-"o1%$o+ (1/ - ,u/"i3o - /% ,/o+%9 8 F2 ,-+"$i&u#+o*- (1i+ %(5$p1

!o"o#$%&'% . S- %#$-# (L -*o/u,i+ // $-,i0+ p$-p%$%% -

i+,u)o 1i+ /o* 1i,$o"u)o* ,o+ /%*,/o+%* 9 8 F ,o+ *o/u,i+ /%*o/u,i+ (

!o"o#$%&'% 9. S- %#$-# (L -*o/u,i+ /// % /o* 1i,$o"u)o*2 % /o*1i+ - i+,u)%,i+ *- puoo)*-$3%$ /% p$-,ipi"%,i+ - /%*

p$o"-'+%* 8 -/ DNA ,$o1o*1i,o2*i-+o 1* -3i-+"- -+ /% ,/o+% 9;"u)o i@qui-$o= qu- -+ /% F ;"u)o-$-,Jo=


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4 |Equipo 4 6A

!o"o#$%&'% (. S- %#$-# %/*o)$-+%%+"- $-,up-$%o (1L --"%+o/ %)*2 *- i+,u)o 6 1i+ 8,-+"$i&u#o % (($p1 po$ (1i+-/i1i+%+o -/ *o)$-+%%+"- po$%*pi$%,i+ ,o+ 1i,$opip-"%

!o"o#$%&'% F. S- ,-+"$i&u#%$o+ /o*1i,$o"u)o* 1i+ % (($p1 8 *-$-,up-$ -/ *o)$-+%%+"- *i+ //-3%$$-*iuo* */io* % 1i,$o"u)o*-*"0$i/-* 8 /i1pio*

!o"o#$%&'% ((. S- /%3 po$ $-p-"io -/ )o"+ ,o+ -"%+o/ %/K 8 *- ,-+"$i&u#o % (($p1 1i+2 *- -,%+" -/*o)$-+%%+"- 8 *- - *-,%$ -+ p%p-/ *-,%+"- po$ (1i+J%*"% -3%po$%$ -/ -"%+o/. S- $-*u*p-+i -+ DNA p/%*1'i,o-+ 7L - %#u% Mi/i -*"0$i/ 8 %/1%,-+o % 5C p%$% *u

po*"-$io$ u"i/i@%,i+


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Cuantificacin de DNA plasmdico

NOTA: *- u* u+ N%+oD$op p%$% o)"-+-$ /o* $-*u/"%o*2 8% qu- u+

-*p-,"$o&o"1-"$o +o -$% ,%p%@ - /--$ ,%+"i%-* "%+ p-qu-%*Tabla 1 cuantificacin del ADN plasmdico

Clona D.O. 2! nm D.O. 2"! nm D.O. 23! nm Pure#a

2!$2"!

Pure#a

2!$23!

1 .9 7.74 79F5.9 5.F 5.7F

3 (59.(9 65.795 64.F 5.5 5.77

4 7.F9 (9.F95 (5F.F (.6( 5.47

% (.75 F.777 96.6 (.96 (.4

55(.( (4.79 ((9.6 5.(5 5.74

& (79.97 69.4 694.( 5.( 5.5

" F.95( 46.55F 49( 5. 5.7

' F.F7 46.7F 4F9.6 5.9 5.7(

R-/%,i+ ADNp$o"-'+%*: 56+159+12 /o* 3%/o$-* p"i1o* *o+ - (.9 5.

R-/%,i+ ADN*%/-*: 56+157+12 /o* 3%/o$-* p"i1o* *o+ - .7 .6

Tabla 2 interpretacin de la informacin del ndice de pureza en las clonas

Clon

a

Pure#a 2!$2"!proteinas Pure#a 2!$23!sales

1 E+,o+"$%1o* 3%/o$ - .F po$-+,i1% - /o* 3%/o$-* p"i1o*

Mu-*"$% 3%/o$ - 5.77 po$ -+,i1%-/ 3%/o$ 1Qi1o op"i1o2 *--+,u-+"$% #$%+-* ,%+"i%-* -

*%/-* -+ /% ,/o+%3 E+,o+"$%1o* 3%/o$ - .5 po$

-+,i1% - /o* 3%/o$-* p"i1o*Mu-*"$% 3%/o$ - 5.5 po$ -+,i1%-/ 3%/o$ 1Qi1o op"i1o2 *--+,u-+"$% #$%+-* ,%+"i%-* -*%/-* -+ /% ,/o+%

4 E+,o+"$%1o* 3%/o$ p"i1o -+"$o-/ $%+#o %p$oQi1%o2 "-+i-+o u+3%/o$ - pu$-@% %-,u%o -+ /%,/o+%

Mu-*"$% 3%/o$ - 5.4 po$ -+,i1%-/ 3%/o$ 1Qi1o op"i1o2 *--+,u-+"$% #$%+-* ,%+"i%-* -*%/-* -+ /% ,/o+%

% |Equipo 4 6A


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TPICOS DE CIENCIAS SOCIALES, ARTES Y HUMANIDADES%

E+,o+"$%1o* 3%/o$ p"i1o -+"$o-/ $%+#o %p$oQi1%o2 "-+i-+o u+3%/o$ - pu$-@% %-,u%o -+ /%,/o+%

Mu-*"$% 3%/o$ - (.74 po$ -+,i1%-/ 3%/o$ 1Qi1o op"i1o2 *--+,u-+"$% #$%+-* ,%+"i%-* -*%/-* -+ /% ,/o+%2 *i+ -1)%$#o &u--/ qu- "u)o 1-+o$ ,%+"i% -"o%* /%* ,/o+%*

E+,o+"$%1o* 3%/o$ - .(5 po$-+,i1% - /o* 3%/o$-* p"i1o*


& E+,o+"$%1o* 3%/o$ - .( po$-+,i1% - /o* 3%/o$-* p"i1o*2%u+ %*' *- -+,u-+"$% ,-$,% - /o*3%/o$-* p"i1o*

Mu-*"$% 3%/o$ - 5.(F po$ -+,i1%-/ 3%/o$ 1Qi1o op"i1o2 *--+,u-+"$% #$%+-* ,%+"i%-* -*%/-* -+ /% ,/o+%

" E+,o+"$%1o* 3%/o$ - . po$-+,i1% - /o* 3%/o$-* p"i1o*

Mu-*"$% 3%/o$ - 5.5F po$ -+,i1%-/ 3%/o$ 1Qi1o op"i1o2 *--+,u-+"$% #$%+-* ,%+"i%-* -*%/-* -+ /% ,/o+%

' E+,o+"$%1o* 3%/o$ - .9 po$-+,i1% - /o* 3%/o$-* p"i1o*


(os datos o)tenidos no son del todo confia)les al presentar

contaminacin por sales * protenas+ sus ni,eles de pure#a son mu* )a-os

se/n lo calculado

0nsa*o de restriccin

NOTA: *- //-3 % ,%)o ,o+ -/ p$o"o,o/o p%$% /% -+@i1% - $-*"$i,,i+


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& |Equipo 4 6A

!o"o#$%&'% (7. S- %#$-#%F/ (Q Bu&&-$


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ELECTRO!ORESIS EN GEL DE AGAROSA AL .9K DE LOS PLSMIDOS

DIGERIDOS

Di#-*"i+ - P3%Q( EG!P ,o+ Jo I L%)o$%"o$io (

" |Equipo 4 6A

!o"o#$%&'% (. S- //-3%$o+/o* 1i,$o"u)o* % )%o 1%$'%% 6C p%$% /% i+%,"i3%,i+

- /% -+@i1% 8 - -*"%1%+-$% -3i"%$ u+% i#-*"i+-+ -Q,-*o.

Po*"-$io$1-+"- *-1%+"u3i-$o+ -+ Ji-/o &$%pp0p%$% *u po*"-$io$ %/1%,-+%o % 5C J%*"%u*%$/%* - +u-3o


9/12


M%p-o - -/-,"$o&o$-*i*

(. M 6. C/o+% QJo(

5. p/%*1io o$i#i+%/ . C/o+% 9 QJo(

7. ,/o+% 4 QJo( 9. C/o+% F QJo(

4. ,/o+% QJo(. ,/o+% 6 QJo (

O)*-$3%,i+: */o -+,o+"$%1o* -/ p/*1io /i+-%/i@%o -+ -/ &o+o 8 *p-$-+$o//%1i-+"o* -+ /% p%$"- - %$$i)%

' |Equipo 4 6A

( 5 7 4 6 9

Sp-$-+$o//%1i-+"o

p/*1io


10/12


Nu1-$o - po@o

(.(


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TPICOS DE CIENCIAS SOCIALES, ARTES Y HUMANIDADESG-/

-

%#%$o*% %/ .9K - /o* p/*1io* /%)o$%"o$io (

M%p% - ,%$#%

(. M

5. P3%Q(EG!P E,oR(

7. C/o+% E,oR(

4. 3%,'o

. P3%Q( Equipo ( o)/- i# %,-"%"o*

6. P3%Q( Equipo 5 o)/- i# %,-"%"o*

. P3%Q( Equipo 7 o)/- i# )u"%+o/9. P3%Q( Equipo 4 o)/- i# )u"%+o/

O)*-$3%,io+-*: p$o"o,o/o ,o+ %,-"%"o* +o *- //-# % $-,o+o,-$ -/ )o"+21i-+"$%* qu- ,o+ u"i/i@%+o -/ p$o"o,o/o ,o+ )u"%+o/ *- -+,o+"$ -/ )o"+ o *-%-/ &$%#1-+"o $-,up-$%o2 /o ,u%/ /o J%,- -/ 1* $-+"%)/- -+ -*"- p$o,-i1i-+"o.

No *- /o#$ i*"i+#ui$ /o* &$%#1-+"o* p-$"-+-,i-+"-* %/ p/*1io EG!P1i-+"$%* qu- *- $-,o+o,- % 7 p) /o qu- -* +u-*"$o p/*1io P3%Q( 8 -+ /%

p%$"- - %$$i)% o* )%+%* *i+ i#-$i$ o *p-$ -+$o//%%*2 J%*"% -/ &o+o *--+,u-+"$% % 6(p) +u-*"$o #-+ pui0+o/o i-+"i&i,%$ -"-,"%+o *u p$-*-+,i%.

11 |Equipo 4 6A

76( p)

P/*1io *i+ i#-$i$2 *p-$

7 p) P/*1io P3%Q(

6( p) Nu-*"$o #-+ EG!P


12/12

1 2 3 4 5 6 7 8


LIGACI>N DE !RAGMENTOS DE ADN

(iacin

NOTA: */o -/ *-#u+o 8 "-$,-$ po@o p-$"-+-,-+ % +u-*"$o* p/*1io*2/o* -1* *o+ -Q"-$+o*

M%p% - ,%$#%

(. M

5. p/*1io *i+ i#-$i$ "-1p %1)i-+"-

7. p/*1io i#-$io 7C

12 |Equipo 4 6A

esterilización de material de laboratorio

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