preparación y esterilización de materiales del laboratorio

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TECNOLÓGICO DE MONTERREY CAMPUS MORELIA Laboratorio e Microbiología. Practica #1 Preparación y esterilización de materiales del laboratorio. Por Jessica Michelle Méndez Beltrán Anayantzin Torres Morales Carlos Pineda Bernal

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Materiales del laboratorio de microbiología, distinga los procedimientos para preparar, limpiar y esterilizar el material que requiera y su área de trabajo, así como el fundamento de la técnica de esterilización.

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Page 1: Preparación y esterilización de materiales del laboratorio

TECNOLÓGICO DE MONTERREY CAMPUS MORELIALaboratorio e Microbiología.

Practica #1

Preparación y esterilización de materiales del laboratorio.

Por

Jessica Michelle Méndez Beltrán

Anayantzin Torres Morales

Carlos Pineda Bernal

M.C. Luis José Flores Álvarez.

Morelia, Michoacán, 24 de agosto de 2015.

Page 2: Preparación y esterilización de materiales del laboratorio

Introducción.

El objetivo de esta práctica que el estudiante conozca los materiales del laboratorio de

microbiología, distinga los procedimientos para preparar, limpiar y esterilizar el material que

requiera y su área de trabajo, así como el fundamento de la técnica de esterilización.

En el trabajo del laboratorio de Microbiología tienen importantísima aplicación los procedimientos,

técnicas y productos que suprimen o disminuyen la vitalidad de los microorganismos patógenos.

La preparación del material del laboratorio se inicia desde el momento en que se colectan

recipientes o utensilios que contienen sustancias de un estudio ya realizado o los materiales que se

requieren para llevarlo a cabo, estos deberán esterilizarse y lavarse; posteriormente se secan, se

tapan y se envuelven adecuadamente para ser esterilizados en el horno o autoclave.

En Microbiología la esterilización se define como “el proceso mediante el cual se eliminan todos los

microorganismos (incluyendo formas de resistencia) de un objeto, medio o superficie” y su

aplicación garantiza la ausencia de microorganismos en el material y medios de cultivo a ser

empleados. Existen diversos métodos de esterilización, entre ellos: calor (seco o húmedo),

filtración (para sustancias termolábiles y aire), radiaciones y aplicación de gas de óxido de etileno

(para jeringas y cajas de plástico).

Existen diferentes métodos para la esterilización del material como son:

Métodos físicos

Los métodos físicos se realizan a través de la utilización de calor húmedo, seco o radiación,

destruyen todas las formas de vida microbiana, incluyendo las esporas, el método más utilizado es

el de vapor a presión.

1. Vapor a presión-calor húmedo.

2. Aire caliente-calor seco.

3. Radiación ionizante.

Métodos químicos

1. Gas óxido de etileno.

2. Gas y solución de formaldehído.

3. Plasma/vapor peróxido de hidrógeno.

4. Ozono.

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Page 3: Preparación y esterilización de materiales del laboratorio

Objetivo.

Conocer los materiales del laboratorio de microbiología, distinguir los procedimientos para preparar, limpiar y esterilizar el material que requiera y su área de trabajo, así como el fundamento de la técnica de esterilización.

Material.o 7 tubos de cultivo de 16 x 150 mm con

tapón de roscao 3 tubos de cultivo de 16 x 150 mm sin

tapón de roscao 3 pipetas de 1 o 2 mlo 3 pipetas de 10 ml

o 1 pipeta Pasteuro 3 matraces Erlenmeyer de 250 mlo 1 autoclaveo 1 horno de calor secoo Algodón y gasao Papel manila o estraza para envolver

Actividad.

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Realización de asepsia del área de trabajo.

Limpieza, preparación y envoltura de la cristalería para

utilizarla.

Presentación de los utensilios para el

manejo directo de los microorganismos.

Elaborar tapones para tubos y matraces.Envolver pipetas.Etiquetar el material.

Esterilizar el material en la forma en que lo indique el instructor.

Page 4: Preparación y esterilización de materiales del laboratorio

Desarrollo de la práctica.

Resultados.Cuestionario:

1. ¿Qué es la esterilización?

La esterilización es la muerte y/ o eliminación de todo microorganismo. No existen grados de esterilidad, un objeto es estéril o no lo es.

2. ¿Qué tipo de esterilización utilizó para el material de cristalería?

Se utilizó un método físico por medio de calor, en específico calor húmedo.

3. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por calor seco?

Deshidrata las bacterias, virus, etc. y facilita la coagulación o desnaturalización de las proteínas

4. ¿Cuál es el fundamento de la esterilización por calor húmedo?

Coagulación de proteínas (desnaturalización), lo que es causado por la rotura de los puentes de hidrógeno que son los que mantienen a las proteínas en su forma tridimensional,

5. ¿Cuál es la temperatura, presión y tiempo para la esterilización en autoclave?

A los 121°C con una presión de 15 lb durante un tiempo de 15 minutos.

6. ¿Cuál es más eficaz como agente esterilizante, el calor seco o el calor húmedo?, ¿por qué?

Dependiendo del material que se quiera esterilizar, en nuestro caso al solo esterilizar material de vidrio o cristalería lo mejor es el calor húmedo debido a que tiene un rápido calentamiento y

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Introduzca el material a esterilizar en el autoclave.

Revisar que el nivel de agua coincida con la marca en el tubo

indicador.

Conectar el autoclave y poner la perilla de control en calentamiento alto.

Cerrar la puerta, apretar las manijas de dos en dos en

posición encontrada, abra la válvula y esperar a que salga el

aíre con el vapor de agua que se produce.

Dejar que el equipo se caliente hasta alcanzar los 121 °C o 15 lb

de presión revisando continuamente la escala del

manómetro.

Mantener el equipo en estas condiciones durante 15 minutos.

Apagar el autoclave y dejar que baje la presión a “0”. Abrir la válvula de seguridad y con la

ayuda de guantes de asbesto o una franela húmeda abrir

cuidadosamente la puerta.

Page 5: Preparación y esterilización de materiales del laboratorio

penetración, destruye bacterias y esporas en corto tiempo, no deja residuos tóxicos y es más económico que el calor seco.

7. ¿Cuál es el diámetro del poro en los filtros de ésteres de celulosa utilizados para esterilizar por filtración? Y ¿Cuánto mide una bacteria de las más pequeñas que se conocen?

El poro de los filtros bacteriológicos comunes es de 0,22 micrómetros para esterilizar líquidos y de 0,45 micrómetros para retener bacterias.

8. Defina desinfección y asepsia

Desinfección: Técnica de saneamiento que tiene por objeto destruir los microorganismos patógenos, productores de enfermedades transmisibles, actuando sobre el ambiente y superficies de locales, objetos y excretas que son portadores de aquéllos, evitando así su propagación

Asepsia: Conjunto de procedimientos que tienen por objeto impedir la penetración de gérmenes en el sitio que no los contenga.

9. ¿Cuál es el método más apropiado para esterilizar el siguiente material?

MATERIAL MÉTODOSolución de vitaminasCajas de Petri de plástico de desecho Horno de aire caliente Aceite mineral Horno de aire caliente Sangre para transfusiónRopa contaminada Vapor a presiónCajas de Petri de plástico limpias Horno de aire caliente Talco Calor secoInstrumental de cirugía Vapor a presiónSangre de desecho Por vaporCadáveres de animales de experimentación de laboratorio

Fig. 1: Material forrado con papel manila. Fig. 2: Autoclave utilizada.

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Referencias.- Departamento de Química Biológica. (2014). Esterilización > Generalidades. Agosto 23,

2015, de Universidad de Buenos Aires Sitio web: http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/Seminarioesterilizacion.htm

- Garcés, A.. (2008). PREPARACIÓN DEL MATERIAL DE VIDRIO DE USO EN EL LABORATORIO. Agosto 23, 2015, de Universidad Central de Venezuela Sitio web: http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Prep_de_material_de_vidrio.pdf

- Grupo Cosmos. (2013). Información Técnica y Comercial del Filtro bacterial. Agosto 23, 2015, de Cosmos Sitio web: http://www.cosmos.com.mx/wiki/fv11/filtro-bacterial

- López, L. & Torres, C.. (2006). Preparación del material para el trabajo en Microbiología Limpieza y Esterilización. Agosto 22, 2015, de Universidad Nacional del Nordeste Sitio web: http://www.biologia.edu.ar/microgeneral/tp3.pdf

- Rivas, R.. (2013). ASEPSIA Y ANTISEPSIA EN ENDODONCIA. Agosto 23, 2015, de UNAM Sitio web: http://www.iztacala.unam.mx/rrivas/NOTAS/Notas13Microbiologia/aseconceptos.html

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