UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE ZOOTECNIA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA
"TIEMPO DERECUPERACIÓN DE LESIONES CUTÁNEAS PROVOCADAS POR
EL VIRUS DE LA VIRUELA AVIAR EN PAVOS UTILIZANDO ACEITE
OZONIZADO DE OLIVA (Pur03® OZONATED ()LIVE OIL)"
TESIS
PARA OPTAR EL TITULO DE:
MÉDICO VETERINARIO
PRESENTADA POR:
Bach. ALFONSO CHIROQUE TOCTO
PIURA-PERU
2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE ZOOTECNIA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA
"TIEMPO DERECUPERACIÓN DE LESIONES CUTÁNEAS PROVOCADAS POR
EL VIRUS DE LA VIRUELA AVIAR EN PAVOS UTILIZANDO ACEITE
OZONIZADO DE OLIVA (Pur03 OZONATED OLIVE OIL)"
TESIS
PARA OPTAR EL TITULO DE:
MÉDICO VETERINARIO
PRESENTADA POR:
Bac!). ALFONSO CHIROQUE TOCTO
PIURA-PERU
2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PTURA
FACULTAD DE ZOOTECNIA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA
"TIEMPO DERECUPERACIÓN DE LESIONES CUTÁNEAS PROVOCADAS POR
EL VIRUS DE LA VIRUELA AVIAR EN PAVOS UTILIZANDO ACEITE
OZONIZADO DE OLIVA (Pur03® OZONA'TED OLIVE OIL)"
RESPONSABLES:
Back ALFONSO CHIROQUE TOCTO
EJECUTOR
Med.Vet. ROSARIO NELLY ELERA OJEDA Dra.
PATROCINADORA
PIURA-PERU
2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PILTRA
FACULTAD DE ZOOTECNIA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA
"TIEMPO DE RECUPERACIÓN DE LESIONES CUTÁNEAS PROVOCADAS POR
EL VIRUS DE LA VIRUELA AVIAR EN PAVOS UTILIZANDO ACEITE
OZONIZADO DE OJIVA (Pur03® OZONATED OLIVE OIL)"
JURADO:
Med.Vet. JOAQUÍN M. TANTALEÁN ODAR, Dr. PRESIDEN E
Med.Vet JUAN S. SÁNCHEZ ACOSTA, Ms. VOCAL
Med.Vet. JENNY J. BAYONA MATIEIEUS, Mg SECRETARIA
PIURA-PERU
2018
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA FACULTAD DE ZOOTECNIA
SECRETARIA ACADÉMICA
ACTA DE SUSTENTACIÓN DE TESIS.
Los Miembros del Jurado que suscriben, se reunieron en acto académico para la ;tentación de la tesis denominada: "TIEMPO DE RECUPERACIÓN DE LESIONES TÁNEAS PROVOCADAS POR EL VIRUS DE LA VIRUELA AVIAR EN PAVOS, UTILIZANDO
EITE OZONIZADO DE OLIVA (Pur03® Ozonated OLIVE OIL)", presentado por el Bachiller: FONSO CHIROQUE TOCTO; y, cumplir con el requisito académico para la obtención del título fesional de Médico Veterinario.
Teniendo en consideración los méritos del referido trabajo de investigación, así como los iocimientos demostrados por el sustentante, los miembros de jurado declaran:
R_o7-13A-D
En consecuencia, queda en condición de ser considerado apto por el Consejo Universitario !cibir el tituló profesional de Médico Veterinario, de conformidad con lo estipulado en el Art. ° del Estatuto General de la Universidad Nacional de Piura.
Castilla (Piura), 17 de mayo del 2018
!d.Vet.Joa yin Tantaleán O. Dr. Méd.Vet. Juan Sánchez Acosta, Ms. Presidente Vocal
/- Méd. Vet. Jenny Bayona Matheils, Mg.
Secretaria
DEDICATORIA
Dedico este trabajo a Dios porque dentro de todos sus planes destinados para mí, el ser
médico veterinario fue uno de ellos. Por enseflanne a perseverar y a nunca reemplazar
mi &, y permitirme evidenciar sus bendiciones en toda mi vida universitaria. Por
guiarme a través de su Palabra a esforzamr y ser valiente, prometiéndome estar a mi
lado en todo tiempo (Josué 19). Teniendo plena convicción que seguirá siendo así
siempre.
A mis hermanas Rosa, Gladys, Elizabeth y Deysi; mis sobrinos Michael y Elena; mi
cuñado Percy; quienes me brindaron su apoyo de manera incondicional.
A mis pastores José, Flo4 William y Sara, quienes fueron clave para ni perseverancia
en la fe y ni consistencia espiritual.
A mis amigos Yul Castillo, Gustavo García, 1510a Valiente, Irvin Jaramillo, Nathaly
Zegarra, Nadia Guerrero, Jackeline Hidalgo, Nicolás Ortiz, Cinthia Trona, entre otros;
con quienes compartí momentos maravillosos en toda mi vida universitaria, y que
fueron mofivo para cumplir mis sueños.
A mis nuestros quienes nunca desistieron al enseñarme, impartiendo sus experiencias y
consejos dentro y fuera de las aulas.
AGRADECIMIENTO
A mis padres Alfonso Chiroque Raymundo y Valentina Tocto Tocto, por su apoyo
económico, consejos y motivación durante la ejecución de mi tesis.
A mi patrocinadora Dra. Rosario Nelly Ekra Ojeda, por sus consejos y gran apoyo en la
ejecución de ni proyecto de tesis.
A mi jurado de tesis, los médicos veterinarios Dr. Joaquín Tantaleán Odar, Ms. Juan
Sánchez Acostay Mg. Jemy 13ayona Matheus, por su tiempo, dedicación y
proksionalismo; razón por la cual pude culminar este trabajo.
ÍNDICE DE CONTENIDOS
Capítulo Página
L INTRODUCCIÓN 01
II. REVISIÓN DE LITERATURA 03
2.1. Antecedentes bibliográficos 03
2.2. Viruela aviar 03
2.2.1. Agente etiológico 04
2.2.2. Transmisión 04
2.2.3. Forma cutánea de la viruela aviar 05
2.2.4. Patogenia 06
2.2.5. Signos y síntomas 08
2.2.6. Diagnóstico 08
2.2.6.1. Citología e histopatología 08
2.2.6.2. Microscopia electrónica 08
2.2.6.3. Serología 09
2.2.7. Diagnóstico diferencial 09
2.2.8. Tratamiento 10
2.2.9. Prevención y control 10
2.3. Pavo doméstico: Origen, características y clasificación 10
2.4. Aceite ozonizado de oliva 11
2.4.1. Mecanismo de acción 11
2.4.2. Pur03® - producto comercial 12
2.4.3. Beneficios 12
[II. MATERIALES Y MÉTODOS 14
3.1. Lugar de experimentación 14
3.2. Duración del estudio 14
3.3. Materiales 14
3.3.1. Material biológico 14
3.3.2. Material de laboratorio 15
3.3.3. Equipo de laboratorio 15
3.3.4. Material y equipo para el experimento 16
3.3.5, Matetial y equipo de oficina 16
3.4. Metodología 17
3.4.1. Procedimientos iniciales 17
3.4.2. Frotis para viruela aviar 17
3.4.3. Macerado de lesiones de viruela 17
3.4.4. Inoculación en embriones de pavo 18
3.4.5. Cosecha del virus 18
3.4.6. Inoculación del virus en los pavos 19
3.4.7. Observaciones 19
3.4.8. Administración del aceite ozoni72do 19
3.4.9. Análisis de variación porcentual de datos 20
3.4.10. Manejo de residuos infecciosos 21
3.5. Diseño y análisis estadístico 20
3.5.1. Tipo de investigación 20
3.5.2. Diseño de investigación 20
3.5.3. Análisis estadístico 21
V. RESULTADOS Y DISCUSION 22
4.1. Observación de las lesiones 22
4.2. Evaluación de las lesiones nodulares 23
4.2.1. Evaluación del número de lesiones nodulares 23
4.2.2. Evaluación del tamaño de lesiones nodulares 24
4.3. Tiempo de regresión de las lesiones 26
CONCLUSIONES 29
RECOMENDACIONES 30
ril. BIBLIOGRAFIA 31
[II. RESUMEN 34
IX ABSTRACT 36
ANEXOS 38
ÍNDICE DE TABLAS
TABLA PÁGINA
Promedio del número de lesiones del Grupo A 22
Promedio del número de lesiones del Grupo B „ „ 23
Promedio del número de lesiones 23
Promedio del tamaño de lesiones de acuerdo a la localización 25
Efectividad del tratamiento 27
INDICE DE GRÁFICOS
GRÁFICO PÁGINA
1. Efectividad del tratamiento 28
ÍNDICE DE ANEXOS
ANEXO PÁGINA
1. Análisis estadístico 39
2. Ficha de evaluación de lesiones nodulares durante el tratamiento.. 41
3. Proceso de inducción de viruela aviar 42
4. Tratamiento y evaluación de los pavos en experimentación 45
5. Preparación de los colorantes 47
6. Recopilación de datos durante el tratamiento 48
7. Recopilación de datos de grupo control 53
CAPÍTULO 1
INTRODUCCIÓN
El aceite ozonizado de oliva ha generado interés en la medicina tras realizarse
trabajos de investigación comprobando su eficiencia en tratamientos y estética cutánea
en los últimos años. Su capacidad regenerativa se debe al oxigeno trivalente (ozono)
contenido en el aceite de oliva, favorece la formación de tejido de granulación y la
oxigenación del tejido dañado en mayor proporción que el oxígeno normal. Sin
embargo, la mayor parte de investigaciones; están enfocados en la salud humana, y en
menor proporción en la salud animal
El aceite ozonizado de oliva es de uso topical, por ello sería una alternativa de
elección para la mayoría de patologías cutáneas. Una de ellas, y frecuente en nuestra
región, es viruela aviar en su forma cutánea, cuyas lesiones se manifiestan a nivel de
piel, específicamente en zonas desprovistas de plumas; manifestándose en pollos,
gallinas y pavos; siendo en esta última especie la más frecuente y más sensible al cuadro
clínico.
Al ser, el aceite ozonizado de oliva un producto de uso topical y viruela aviar en su
forma cutánea una enfermedad de carácter dérmico, se pretende evaluar científicamente
el uso del aceite ozonizado de oliva frente a la recuperación de las lesiones cutáneas
provocadas por el virus de la viruela aviar en su forma cutánea, sin provocar efectos
colaterales en los animales tratados, logrando contribuir a futuras investigaciones
dirigidas al campo de la medicina veterinaria.
Frente a ello surgió la pregunta: ¿Puede el aceite ozonizado de oliva ser utilizado
como tratamiento alternativo frente a la recuperación total de las lesiones cutáneas
producidas por el virus de viruela aviar?
De acuerdo a estudios previos sobre esta enfermedad, se planteó la siguiente
hipótesis: "Las lesiones cutáneas provocadas por el virus de la viruela aviar se recuperan
totalmente en 10 días utilizando aceite de oliva ozonizado debido a su estabilidad en el
tejido y su capacidad regenerativa".
Para demostrar la hipótesis se estableció como objetivo general: "Determinar el
tiempo de recuperación de las lesiones cutáneas provocadas por el virus de la viruela
1
aviar en pavos utilizando aceite ozonizado de oliva"; teniendo como objetivos
específicos el aislar el virus de la viruela aviar a partir de un pavo con los signos
clínicos de la enfermedad utilizando embriones de pavo de 12 — 15 días; y, el evaluar el
proceso de regresión de las lesiones nodulares provocadas por el virus de la viruela
aviar desde su inducción hasta la culminación del tratamiento.
2
CAPÍTULO II
REVISIÓN DE LITERATURA
2.1. ANTECEDENTESBIBLIOGRÁFICOS
Camps, Valero y Téllez (2011), demostraron la efectividad del uso topical del
aceite ozonizado como tratamiento optativo frente a las alteraciones cutáneas
compatibles con la viruela aviar en gallinas utilizando cinco tratamientos, aplicando
aceite ozonizado y aceite vegetal, una a dos veces al día. La efectividad de los
tratamientos se evaluó durante siete días. Los resultados mostraron que en la aplicación
topical del aceite ozonizado una vez al día logró la recuperación de los animales en 8,12
días, mientras que en la aplicación topical del mismo dos veces al día se logró en 5,3
días; alcanzando la recuperación del 100% de las aves sin extirpación de las lesiones. Los
resultados indican que este producto tiene un efecto cicatrizante y antinfiamatorio
potencial para curar aves con lesiones compatibles de tal enfermedad.
Camps, Navily Benítez(2005),demostraron la efectividad cicatrizante con el uso
tópico del aceite ozonizado (Oleozón0) como alternativa de tratamiento en la
cicatrización de las heridas en aves semirústicas. Para la aplicación del tratamiento
fueron utilizadas 18 aves, distribuidas en tres grupos de seis animales cada uno. Los
resultados mostraron que el tratamiento con aceite ozonizado reveló un efecto positivo en
la cicatrización de lesiones comunes con un 25,6% y 13,6% mayor en el tratamiento
empleado con aceite ozonizado dos veces y una vez al día, correspondiéndose con los
parámetros hematológicos evaluados en la aplicación del OleozónC con la misma
frecuencia y período del tratamiento aplicado. Estos resultados ponen de manifiesta la
efectividad del producto para esta especie considerando el estudio de algunos parámetros
hematológicos.
2.2. VIRUELA AVIAR
Viruela aviar es una enfermedad común en las crianzas traspatio, que por lo
general se encuentra clínicamente manifestada en pollos, gallinas y pavos. La viruela
aviar es una enfermedad vírica conocida desde hace mucho tiempo en los pavos, siendo
el signo más resaltante, las protuberancias o epiteliomas en las zonas desprovistas de
plumas, no existiendo un tratamiento adecuado una vez presentados los primeros signos 3
clínicos (Woernle, 2006). Existen dos formas clínicas de la enfermedad: forma cutánea o
seca y forma diftérica o húmeda. No hay tratamiento específico para las aves infectadas
por poxvirus aviar (Calnek, 2000).
Existen pérdidas económicas generadas tras el brote de la enfermedad; el alto
nivel de morbilidad, la disminución en la ganancia de peso y conversión de etapa de
crecimiento, disminución de hasta 15 % de postura en la edad productiva,
inmunodepresión de las aves, mortalidad de hasta el 2-30% en jóvenes y hasta 50% en
otros animales. Todas las aves pueden infectarse, pero es frecuente en gallinas y pavos
(Barrero, 2014).
2.2.1. Agente etiológico
El agente causal de la enfermedad pertenece al género Avipoxvirus de la familia
Poxviridae, tiene forma de ladrillo y mide cerca de 250 x 345 mn. Estudios
realizados mediante microscopía electrónica han demostrado que el genoma del
poxvirus aviar es una molécula de DNA (Calnek, 2000).
Las cuatro cepas de virus más importantes están estrechamente relacionadas, y
en condiciones naturales son especies especificas. Estas son: virus gallina, virus
pavo, virus paloma y virus canario (Malvestiti, 2015).
El virus de la viruela aviar se multiplica en el citoplasma de las células
epiteliales formando grandes cuerpos de inclusión intracitoplasmática (cuerpos
de Bollinger) que contienen cuerpos elementales más pequeños (cuerpos de
Borrel) (01E, 2004).
2.2.2. Transmisión
Existen tres formas de transmisión de la enfermedad; a través del contacto
directo, por aerosoles y por vectores mecánicos (Calnek, 2000).
El virus está presente en gran número en las lesiones y se transmite por
contacto a través de las abrasiones presentes en la piel. Las lesiones cutáneas
(costras) que se desprenden de las aves convalecientes en los gallineros se
pueden convertir en una fuente de infección por aerosol. Pueden ser vectores
mecánicos varias especies de mosquitos y otros insectos chupadores. La
transmisión dentro del grupo es rápida cuando los mosquitos son abundantes. 4
Algunas de las aves afectadas pueden volverse portadoras y la enfermedad
puede ser reactivada por el estrés (por ejemplo, muda) o por una
inmunodepresión ocasionada por otras infecciones (Merck, 2007).
La literatura reporta que existe otra forma de transmisión; a través de fomites.
Las personas que vacunan a las aves pueden acarrear el virus en sus manos y
vestimenta, y depositarlo inadvertidamente en ojos de aves susceptibles
(Calnek, 2000).
2.2.3. Forma cutánea de la viruela aviar
La forma cutánea se caracteriza por lesiones nodulares, que en el pavo afectan a
varias partes de la piel que carecen de plumas, la cabeza y la parte superior del
cuello. También pueden ocurrir lesiones generalizadas en la piel emplumada. En
algunos casos, las lesiones suelen estar limitadas a los pies y patas. La lesión
consiste inicialmente en una zona nodular elevada y pálida, que se hace más
grande, se toma amarillenta y progresa hasta la formación de una costra gruesa
y oscura. Se desarrollan lesiones múltiples que a menudo se agrupan. En una
misma ave pueden observarse lesiones en distintas fases de la evolución. La
localización cercana a las fosas nasales puede producir secreción nasal. Las
lesiones cutáneas de los párpados pueden provocar el cierre completo de uno o
ambos ojos (Merck, 2007).
Dependiendo del lugar donde se desarrollen los epiteliomas, generarán diversos
signos clínicos. Lesiones iniciales a nivel ocular se ven comúnmente a los 10-14
días post- infección incluyendo epífora y blefaritis. Las úlceras cornéales son
comunes y pueden progresar hasta la perforación. (Trevefio, 2006).
Si las lesiones de la forma cutánea de viruela aviar no se llegan a tratar, éstas se
secan y se desprenden de la superficie epitelial de la piel por sí solas. La
regresión de las lesiones puede iniciar alrededor de las 4-6 semanas después que
los primeros signos de enfermedad; y, en raras ocasiones éstas persistirían por
unos meses. (Grifián, 2004).
Ante ello, la invasión de microorganismos presentes en el ambiente puede
provocar una infección secundaria. Las infecciones bacterianas o fángicas
secundarias pueden complicar los signos clínicos, y las lesiones orales
5
concurrentes pueden dificultar la alimentación, resultando en una pérdida de
peso. (Trevefio, 2006).
Afortunadamente, la forma seca de la enfermedad provoca un bajo índice de
mortalidad en las aves a comparación de la forma diftérica e incluso cuando se
presenta la combinación de ambas (Arhelger et al, 2008).
En el caso de la forma cutánea, la tasa de mortalidad es generalmente baja y las
aves afectadas suelen recuperarse con mayor probabilidad que las afectadas por
la forma diftérica. En la forma diftérica, las lesiones proliferativas en los
conductos nasales, y en la laringe y tráquea, pueden causar dificultades
respiratorias y muerte por asfixia (01E, 2004).
2.2.4. Patogenia
La endocitosis es el proceso por el cual el virus ingresa a las células epiteliales,
células huésped; a éste nivel se replican y posteriormente algunos por gemación
la abandonan; mientras que la mayoría permanece en el citoplasma (Altaman y
Clubb, 2006).
El virus entra a la célula por un proceso de endocitosis. Una vez dentro del
huésped, las enzimas degradan las proteínas estructurales que liberan el DNA y
las enzimas vírales. Estas últimas utilizan el DNA como una plantilla para
iniciar el ciclo de replicación que produce todas las proteínas, enzimas y DNA
virales necesarios para nuevos viriones infecciosos. Algunos virus dejan la
célula infectada por gemación, en cuyo caso adquieren una membrana externa;
sin embargo, la mayoría permanece en la inclusión (Altaman y Clubb, 2006).
El lugar específico de la replicación de los poxvirus es el citoplasma celular. Es
por ello que algunos virus suelen permanecer a éste nivel. La replicación del
ADN viral en el epitelio dérmico se inicia entre las 12 y24 horas pos infección
y continúa a la primera aparición del virus infeccioso alas22 a 24 horas. A nivel
citoplásmico, el virus forma cuerpos de inclusión (Calnek, 2000). Los cuerpos
de inclusión existen a las 72 horas pos infección en el epitelio dérmico
(Arthelger et. al.,2008).
Luego de ingresar a las células del epitelio dérmico; se iniciarán dos fases. Una
respuesta del huésped, caracterizada por hipetplasia celular de grado muy
6
manifiesto durante las primeras 72 horas; y la síntesis de virus infecciosos de 72
a 96 horas (Arthelger et. al., 2008).
Ésta hiperplasia celular es producto de la activación de una hormona análoga al
EGF (Factor de Crecimiento Epidérmico) (Calnek, 2000). Estos virus producen
una hormona análoga al factor de crecimiento epidérmico. Esta hormona induce
la división celular y el resultado son lesiones proliferativas (Maman et. al.,
2006).
La hiperplasia epitelial termina en un incremento de 23 veces en el número de
células a las 72 horas pos infección. Entre las 72 y96 horas, la síntesis de DNA
viral se vuelve cada vez más notable, y no se observa hiperplasia adicional
(Calnek, 2000).
Por medio de autorradiografia demostró que la epidermis de pollos infectados
por 48 horas por poxvirus aviar, muestran un porcentaje tres veces mayor de
núcleos marcados en comparación con controles, lo que indica que la infección
está relacionada con un aumento en la incidencia de síntesis de DNA
intranuclear. Se detectaron tanto RNA como DNA viral por hibridización en el
núcleo de células infectadas de 24 a 72 horas post infección (Swallen, 2000).
Las lesiones continúan; pues, desde la aparición de las máculas, se
desencadenan una serie de mecanismos hasta convertirse en costras.
Inicialmente las lesiones aparecen como una pequeña vesícula blanco, rosa o
amarillo en las partes sin plumas de la piel; la vesícula es un resultado de la
separación de la capa superficial de la piel con la formación de bolsas de líquido
acuoso en la multiplicación de virus ricos. Las vesículas se convierten en
nódulos, ya que aumentan de tamaño, se unen y se rompen. Linfa de las células
se congela y se forman costras. La superficie de los nódulos se convierte en
cambios ásperos y secos y el color marrón oscuro o negro (Department of
Natural Resources, 2015).
Las costras se caen al finalizar el ciclo del virus; es estas estructuras, el virus se
mantiene latente y pueden permanecer en el ambiente hasta por un año. El ciclo
de infección se mantiene de forma latente por el virus en el medio ambiente.
Cuando las células infectadas mueren y son desprendidas hacia el medio
ambiente en las costras, el virus permanece en la inclusión y es resistente a la
desecación (Altaman y Clubb, 2006).
7
2.2.5. Signos ysintomas
La lesión característica de la forma cutánea de viruela en pavos es una
hiperplasia epitelial local que afecta la epidermis y los folículos de plumas
subyacentes, con formación de nódulos que se presentan primero como focos
blancos pequeños y luego aumentan con rapidez de tamaño para volverse
amarillos. En los pavos infectados por vía intradérmica, se desarrollan pocas
lesiones primarias hacia el día cuatro. Se forman pápulas hacia los días 5 o 6.
Esto continúa por la etapa vesiculosa, con formación de lesiones gruesas
extensas. las lesiones cercanas pueden coalescer y volverse ásperas y de color
gris o pardo oscuro (Calnek et. al, 2005).
Después de dos semanas, incluso antes, las lesiones tienen áreas de inflamación
en la base se vuelven hemorrágicas. - La formación de una costra, que puede
durar de 1 a 2 semanas más, termina con descamación de la capa epitelial
degenerada. Si la costra se retira de manera temprana en su desarrollo, hay un
exudado seropurulento húmedo por debajo que cubre una superficie
hemorrágica de granulación. Cuando la costra se desprende de manera natural
puede haber una cicatriz lisa; en los casos leves puede no haber una costra
apreciable (Calnek et. al., 2005).
2.2.6. Diagnóstico
2.2.6.1. Citología e histopatologia
En el diagnóstico clínico a partir de exámenes citológícos e
histopatológicos; se observan inclusiones citoplásmicas o llamados también
corpúsculos de Bollinger. (Maman y Clubb, 2006).
2.2.6.2. Microscopía electrónica
En microscopla pueden detectarse cuerpos elementales (cuerpos de
Borre!) de poxvirus de aves de corral en frotis preparados de lesiones y teñidos
con tinción de Wright. Los cortes de tejido de lesiones cutáneas o difiéricas,
pueden procesarse por medio de métodos convencionales o usando una solución
que fija y deshidrata los tejidos al mismo tiempo para la detección de
inclusiones citoplásmicas (Calnek et. al., 2005).
8
Puede emplearse microscopía electrónica para la demostración de
partículas de virus en lesiones y exudado por tinción negativa o en cortes
ultradelgados de tejidos infectados. Pueden observarse inclusiones tipo A con
viriones alrededor de la periferia o inclusiones llenas de virus al examen con
microscopio electrónico (Altaman y Clubb,2006).
La característica más sobresaliente de la enfermedad es la hiperylasia
del epitelio, el crecimiento de células con alteraciones inflamatorias
relacionadas (Calnek et. al. 2005).
Con microscopia luminosa se observan cuerpos citoplásmicos de
inclusión tipo A, eosinófilos típicos (cuerpos de Bollinger). Los cuerpos de
inclusión pueden presentarse en varias etapas de desarrollo, dependiendo del
tiempo transcurrido después de la infección. El cuerpo de inclusión puede
ocupar casi la totalidad del citoplasma, originando necrosis celular (Mingo,
2013).
2.2.63. Serología
Aunque en las infecciones por poxvirus tanto la inmunidad mediada
por células (1MC) como la inmunidad humoral desarrollan un papel importante,
no resulta conveniente utilizar pruebas de la ¡MC para uso rutinario. Por tanto,
se usan pruebas serológicas para medir la respuesta de anticuerpos humorales
específicos, del tipo de la neutralización vírica (Ny), inmunodifusión en gel de
agar (1GDA), hemaglutinación pasiva y pruebas con anticuerpos fluorescentes,
así como enzimoinmunoensayos. La evidencia de una inmunización favorable
por la vacuna se puede demostrar examinando una bandada a los 7-10 días de la
vacunación para "tomas". Una toma consiste en un hinchamiento de la piel o
una costra en el sitio de inoculación de la vacuna, y su presencia denota una
inmunización acertada (01E, 2004).
2.2.7. Diagnóstico diferencial
No existen enfermedades con manifestaciones clínicas similares a viruela aviar
en su forma cutánea en pavos; por ello, esta enfermedad es fácilmente
diagnosticada, siendo así los exámenes de laboratorio de carácter corroborativo
9
(Calnek et. al., 2005).
2.2.8. Tratamiento
No hay tratamiento específico para las aves infectadas por poxvirus aviar, solo
se utilizan tinturas, nitrato de plata, ungüentos, entre otros; para abreviar el
curso de la enfermedad y cuyos resultados son impredecibles. Debe practicarse
un manejo apropiado para aliviar el estrés ambiental (Calnek et. al., 2005).
2.2.9. Prevención ycontrol
Mediante la utilización de medidas sanitarias es difícil tratar de controlar esta
enfermedad, ya que se dificulta demasiado el control de mosquitos. La más
efectiva forma de evitar los problemas de viruela aviar es la vacunación (Calnek
et. al., 2005).
23. PAVO DOMESTICO: ORIGEN, CARACTERISTICAS Y
CLASIFICACION
El pavo es originario de Norteamérica, desde el sur de Canadá hasta el norte de
México, siendo la única ave de este origen que ha sido domesticada. El proceso lo debieron
iniciar las poblaciones nativas del norte de América hace unos 2500 años. Esta especie se
introdujo en Europa en el siglo XVI y desde entonces ha sido objeto de una selección
intensiva con el fin de producir animales de rápido crecimiento muscular (Bernia, 2012).
Se reproduce en primavera, época en que realiza la única puesta del año. En primer
lugar, el macho deberá cortejar a una o varias hembras. Para ello, realiza cantos y
movimientos afines, y una vez que las hembras acceden, comienza un ritual en el cual infla el
plumaje adquiriendo una apariencia mayor a la que realmente tiene, sensación que es
reforzada abriendo en abanico su cola. Si la hembra lo acepta, será fecundada en ese mismo
instante. A los pocos días la hembra construye un nido y en él incubará durante veintiocho
días su puesta, la cual está compuesta por entre ocho y quince huevos. Desde que recién
nacen, se alimentan por si mismos de insectos, y luego de hojas y granos, a los que acompaña
con pequeñas piedrecitas indispensables para triturar y entonces poder digerir esos
alimentos (Bernia, 2012).
10
La clasificación taxonómica del pavo común es el siguiente (Mejía, 2012):
Reino: Animal
Tipo: Cordados
Subtipo: Vertebrados
Clase: Aves
Orden: Gallinae
Familia: Phasianidae
Género: Meleagris
Especie: Meleagris gallopavo
2.4. ACEITE OZONIZADO DE OLIVA
Con el correr de los tiempos, el hombre con su afán de conocimientos y ávido de
aplicar sus nuevas investigaciones, modificó la estructura molecular del oxígeno (02),
transformándola a oxígeno trivalente (03) y este oxígeno modificado, denominado
ozono. La combinación de una molécula de oxígeno con un átomo de oxígeno es lo que
dará lugar a la formación del ozono. (Camps, 2006).
La ozonoterapia, es una técnica alternativa válida y complementaria, que consiste
en la utilización del gas ozono como elemento catalizador. El cual trata de mejorar la
calidad de vida humana, animal y vegetal, como además normalizar las funciones
básicas de nuestro ecosistema. (Camps et. al., 2008).
2.4.1. Mecanismo de acción
El oxígeno trivalente hallado en el aceite ozonizado posee un poder oxigenante
mucho mayor que el del oxigeno normal y su reacción con los compuestos
orgánicos es mucho más selectivo y puede reaccionar con algunos de ellos, sin
afectar a los demás. Estimula diferentes sistemas enzimáticos protectores del
organismo, mejora la circulación sanguínea a través de los capilares,
aumentando la capacidad de absorción del oxígeno en los eritrocitos, así como
su transferencia hacia los tejidos, lo que permite que aumente el metabolismo
en el área dañada donde se aplique, permitiendo así su pronta regeneración
(Camps et. al., 2011).
11
2.4.2. Pur030 - producto comercial
Pur030 se realiza con oxígeno puro de calidad médica. Esto hace que el aceite
de oliva ozonizado más estable y más eficaz que otras marcas que utilizan
fuentes de oxígeno. Este producto puede ser utilizado vía tópica para tratar lo
siguiente: La piel seca, eczema, pie de atleta, picaduras de insectos, quemadura,
úlceras en la piel, dermatitis, entre otros (Pur03 Actived Oxygen Skin Care,
2015).
Aceite de oliva ozonizado Pur03® se crea utilizando un generador de ozono
para producción en frío con oxígeno médico. El beneficio del uso de
producción en frío (baja frecuencia) de ozono se debe a la ausencia de calor
que entra en el aceite, ya que el calor hace que el aceite pierda parte de sus
propiedades beneficiosas (Pur03 Actived Oxygen Skin Care, 2015).
La composición del producto es: Aceite de oliva extra virgen 100% orgánico y
certificado, oxigeno médico y ozono puro, sin ningún ingrediente adicional. El
ozono se contiene a través de aceite de oliva orgánico extra virgen durante un
período prolongado de tiempo, haciendo que el aceite gel como un bálsamo. En
forma de gel se satura con ozono (oxígeno activo) y oxígeno. El aceite líquido
tiene muy poca saturación de ozono y es menos eficaz o totalmente ineficaz
(Pur03 Actived Oxygen Skin Care, 2015).
El ozono, que es uno de sus componentes, es un gas inestable que se
descompone fácilmente a una velocidad que depende de la temperatura. Por
eso, no deja residuos tóxicos ya que dentro del organismo se transforrna en
oxígeno (Camps et. al., 2005).
Se recomienda almacenar el aceite de oliva ozonizado Pur030 en el
refrigerador para su conservación; pues, en estas condiciones puede durar hasta
diez arios, sin embargo, a temperatura ambiente su eficacia es
aproximadamente un año dependiendo del lugar donde se adquiera. El aceite
ozonizado de oliva Pur0311, se expende en frascos de 4oz/118m1 y 2oz/59 ml
(Pur03 Actived Oxygen Skin Care, 2015).
2.4.3. Beneficios
El aceite °zonificado tópicamente favorece la formación de tejido de
12
granulación, con gran efectividad en la terapia ulcerativa. Al aceite ozonizado se
le confieren propiedades germicidas además de favorecer el crecimiento del
tejido afectado, permitiendo que las heridas no se infecten siendo estas un
pasaje directo al interior del organismo para los agentes biológicos (Camps et.
al., 2008).
El tratamiento por gas ozono, es inocuo, no tiene contraindicaciones y actúa
sobre la zona a tratar sin pasar por los distintos órganos de rnetabolización, que
algunas veces complican a nuestro organismo (Camps et. al., 2011).
13
CAPÍTULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
3.1 LUGAR DE EXPERIMENTACIÓN
La experimentación se realizó en un local propio ubicado en la Calle lea #220A.H.
Nuevo Catacaos, cuyos datos geográficos se muestran a continuación:
Distrito: Catacaos.
Provincia: Piura.
Departamento: Piura.
Latitud sur: 5°15'42".
Longitud oeste: 80°40'27".
Altitud: 28 m.s.n.m.
Temperatura mínima registrada: 16°C.
Temperatura máxima registrada: 38°C. (INEI2014)
El proceso que involucra el aislamiento del virus de la viruela aviar se realizó en
el Laboratorio de Microbiología de la Escuela Profesional de Medicina Veterinaria de la
Facultad de Zootecnia de la Universidad Nacional de Piura.
3.2 DURACIÓN DEL ESTUDIO
La duración total del estudio fue de 6 meses y la parte experimental, de un mes
(04 de septiembre y al 01 de octubre de12017).
33 MATERIALES
3.1.1. Material biológico
- Pavo con signos clínicos compatibles a viruela aviar seca.
Lesiones de viruela aviar cepa decampo.
Huevos embrionados de 12 — 15 días de incubación.
Pavos de 2 meses de edad.
14
3.1.2. Material de laboratorio
Agua destilada.
- Lámina portaobjetos medida estándar (75 x25mm).
- Mechero de alcohol.
- Colorante (solución de fucsina básica mezclada con sustancia PBS).
- Papel filtro.
- Colorante verde de malaquita25g.
- Aceite de inmersión 100mL.
- Hoja de bisturí N° 24.
- Mango de bisturí N° 03.
Guantes Talla S.
Mascarilla.
Guardapolvo.
Piseta 250mL.
Matraz Erlenmeyer de 50mL.
- Mortero de porcelana con pilón.
- Solución salina buferada (PBS).
Antibiótico: Estrepto-Penicilina®.
- Jeringa de imL.
- Aguja N' 23.
Soporte de madera.
- Algodón paquete x 25g.
- Alcohol al 96%.
- Parafina a granel.
- Tijera mayo recta.
- Pinza de disección con diente.
Recipiente estéril.
- Placas Petri 90x15mm.
3.1.3. Equipo de laboratorio
- Balanza Analítica Digital ADAM® NBL 214e (210g x 0.0001g) AE9X53.
- Ovoscopio Labor Muszeripari Muvek Esztergom Typ 3981/03 1P138-9579/3.
- Incubadora Model JSGI-050T Elec: 220 VAC, 50/60 Hz, 1 phase. 48L. Serie
160620-09. 15
- Refrigeradora Model RT38FEAJDSL, Power 220V, Serie Na
JLOO4BAGB00454M.
- Microscopio Marca Carl Zeiss, Serie 3144015994, Cod. 5BN532278560305.
- Autoclave Model JSAX-60, Elec. 220 VAC, 50/60 Hz, 1 Phase, Serial Na
160704-57.
- Horno Model JSOF-150, Dese. Forced Convection Oven 151L, elec. 220
YAC, 50/60 Hz, Serial Na160620-08
3.1.4. Material y equipo para el experimento
- Pur038 - Aceite ozonizado de oliva.
- Gotero plástico.
- Lancetas.
- Comederos.
- Bebederos.
- Dieta comercial.
- Corrales individuales para pavos.
- Hilo de seda.
- Cinta métrica.
3.1.5. Material y equipo de oficina
- Notebook Hp®G42-460LA.
- USB Kingston® (8Gb).
- Impresora Multiftmcional-Canon® MP190 SerieMC-2402.
- Tinta para impresora.
- Papel DinA-4.
- Cámara digital Kodak® Easy Share M530 12 Mega Pixels.
- Lapiceros.
- Cuadernos de apuntes.
- Plumón indeleble.
16
3.4 METODOLOGÍA
3.4.1. Procedimientos iniciales
Se obtuvo un pavo con signos característicos de la enfermedad, de crianza
traspatio, hembra de 2 meses de edad cuyo peso era 210g, presentaba lesiones
diftéricas a nivel del pico, a partir del cual se realizaron los siguientes
procedimientos.
3.4.2. Frotis para viruela aviar
El frotis para viruela aviar se realizó siguiendo las indicaciones de Soto (2013) de
la siguiente manera:
Se extrajo un nódulo del ave, se procedió a colocarlo en una lámina porta, se
colocó una porta superior y rotando varias veces se extendió el tejido. Se secó
con un mechero.
Se colocó la fucsina básica por 10 minutos, se procedió a lavar con agua
destilada.
Posterior a ello, se utilizó el verde de malaquita por un minuto, se lavó con
agua destilada. Se procedió a secar la lámina con mechero.
Se colocó una gota de aceite de inmersión y se procedió a observar las lesiones
en el microscopio al00x.
Se observaron los corpúsculos de Bollinger en las células epiteliales del
nódulo de la piel, confirmando la enfermedad.
3.4.3. Macerado de lesiones de viruela
El proceso del macerado de las lesiones de viruela aviar se realizó siguiendo las
indicaciones del "Manual de las pruebas de diagnóstico y de las vacunas para los
animales terrestres" de la OIE (2004) de la siguiente manera:
Se extrajo una de las lesiones del pavo positivo a viruela aviar y se colocó en
una placa Petri.
Se realizaron varios cortes a la lesión extraída, se procedió a verter la sustancia
PBS. Ambos se mezclaron y se procedió a colocar vidrio molido a dicha
mezcla con la finalidad de facilitar la ruptura de las células epiteliales y la
liberación del virus. 17
Posterior a ello, toda la mezcla fue colocada en tubos de ensayo para su
centrifinación, a 2500 tpm por lOrninutos.
3.4.4. Inoculación en embriones de pavo
La inoculación en los embriones de pavo se realizó siguiendo las indicaciones del
"Manual de las pruebas de diagnóstico y de las vacunas para los animales
terrestres" de la OIE (2004), se realizó siguiendo los siguientes pasos:
Se seleccionaron huevos embrionados a partir de ovoscopla.
Se colocaron los huevos en sentido vertical, y a través del ovoscopio se detectó
la cámara de aire. Una vez detectada se perforó la cáscara con una aguja
calibre 21.
Se extrajo el sobrenadante de los tubos de ensayo que contiene el virus de la
viruela y se inoculó 0,2 mL en el interior de los huevos con una jeringa
tuberculina y una aguja calibre 23 Gauss. Se procedió a sellar el orificio con
parafina.
Se incubaron los huevos embrionados de pavo, por 5 días a 37°C y con 80%
de humedad.
A las 24 horas de la incubación se separaron los embriones muertos, los cuales
fueron identificados en el ovoscopio por las sombras oscuras y olor putrefacto.
Los embriones vivos y en buen estado continuaron el proceso de incubación por 3
días más.
3.4.5. Cosecha del virus
La cosecha del virus se realizó siguiendo las indicaciones del "Manual de las
pruebas de diagnóstico y de las vacunas para los animales terrestres" de la OIE
(2004), se llevó a cabo de la siguiente manera:
Se retiraron los huevos de la incubadora y se trasladaron a refrigeración por 30
minutos.
Pasado este tiempo, se procedió a realizar la cosecha del virus, se aperturaron
los huevos y solo en dos de ellos se hallaron las pústulas en la membrana
corioalantoidea inoculada con el virus, en los huevos restantes hubo muerte
18
embrionada.
Las membranas corioalantoideas fueron colocadas, lavadas y maceradas en
una placa Petri. El producto final fue trasladado hacia el lugar de ubicación de
los 10 pavos experimentales.
3.4.6. Inoculación del virus en los pavos
Con una lanceta se realizó las inoculaciones a los 10 pavos, por punción con el
macerado de las pústulas de las membranas corioalantoideas (MCA) en las
siguientes áreas anatómicas:
Barbilla.
A nivel proximal del cuello.
Lado interno de ambas alas.
Los pavos fueron trasladados a corrales individuales, formando 2 grupos de 5 aves
cada uno.
3.4.7. Observaciones de la evolución de la enfermedad
Los 10 pavos fueron observados desde su inoculación hasta el término del
tratamiento, se llevó el control de las lesiones dos veces (10:00am y 06:00pm) al
día todos los días. Se tomaron en cuenta el número de lesiones y tamaño en las
zonas de inoculación, cuyos datos se registraron en una ficha de observación.
3.4.8. Administración del aceite ozonizado
El tratamiento de los pavos, con el aceite y el agua destilada se inició una vez
desarrollada la enfermedad clínica con la formación de pústulas en las zonas
inoculadas.
La población estuvo conformada por 10 pavos dividida en 2 grupos de 5 pavos
cada uno.
El primer grupo se denominó "Grupo A"; y se aplicó 1 gota de aceite ozonizado
en cada una de las lesiones dos veces al día sin extirpación de las mismas.
El segundo grupo se denominó "Grupo B", y fue el grupo control; a éstos
animales se le aplicó 1 gota de agua destilada en cada una de las lesiones dos
19
veces al día sin extirpación de las mismas
El tratamiento tuvo una duración de 10 días. Estos animales fueron incorporados a
crianza traspatio tras la culminación del trabajo de investigación.
3.4.9. Análisis de variación porcentual de datos
Como parte del estudio se desarrolló el análisis de variación porcentual de datos,
la cual permite determinar el cambio de una variable a lo largo del tiempo; para
ello primero se obtuvo el área afectada por las heridas, posterior a ello se procedió
a promediar las heridas presentadas por los cinco casos evaluados; la misma que
permite describir la evolución (negativa) de los datos, debido a la disminución de
las heridas según el tratamiento seguido. La fórmula para hallar la variación
porcentual según XIFRA-Información Estadística (2008) es la siguiente:
(Valor final — Valor inicial)
Valor inicial
3.4.10. Manejo de residuos infecciosos
Los residuos que se generaron en este trabajo están clasificados como "Residuos
biológicos de Clase II" y al ser obtenidos de un laboratorio de microbiología y ser
de carácter infecto-contagioso, se procedió a su esterilización en autoclave a
121°C por 15 minutos y a 15 libras de presión, antes de eliminarlos al basurero.
3.5 DISEÑO Y ANÁLISIS ESTADISTICO
3.5.1 Tipo de investigación
La investigación es de tipo experimental.
3.5.2 Diseño de investigación
El diseño de investigación es experimental con dos tratamientos (A y B), con
cinco animales por tratamiento, con tres observaciones por animal (barbilla, alas y
cuello).
20
3.5.3 Análisis estadístico
Como medida de tendencia central se ha determinado la media, y como medida
de dispersión la desviación estándar.
Se utilizó la prueba estadística de Shapiro Wilk para comprobar la normalidad de
las observaciones.
Se utilizó la prueba de Levene para comparar las varianzas, y la prueba T de
student.
21
CAPÍTULO IV
RESULTADOS Y DISCUSION
4.1 OBSERVACIONES DE LESIONES
En las siguientes tablas se muestra el comportamiento de las lesiones del Grupo A
(Grupo experimental) y el Grupo B (Grupo control) en relación al transcurso de los días.
Tabla 01: Promedio del número de lesiones del Grupo A
Día Grupo A
Cuello Alas Barbilla
0 6,4 1,18 0,1
1 6,2 1,14 0,1
2 5,8 0,92 0,06
3 4,9 0,72 0,02
4 4,84 0,62 0
5 3,8 0,46 0
6 2,44 0,46 0
7 2,12 0,22 0
8 1,4 0,2 0
9 0,8 0 0
10 0 0 0
En la Tabla 01 se evidencia regresión de las lesiones según el transcurso de los
días. Las lesiones a nivel del cuello regfesionan por completo al día 10, en alas al día 9 y
en barbillas al día 4.
22
Tabla 02: Promedio del número de lesiones del Grupo B
Día Grupo B
Cuello Alas Barbilla
0 3.98 0.7 0.16
1 4.38 0.76 0.2 2 4,8 0.82 0.24
3 6.16 0.92 0.28 4 7.8 1.78 0.34 5 9.7 2.4 0.38
6 12.86 2.92 0.4
7 15.62 3.16 0.4
8 16.94 3.6 0.52
9 19.42 4.14 0.58
10 21.9 4.68 0.62
En la Tabla 02 se evidencia el incremento de las lesiones según el transcurso de
los días. Las lesiones a nivel del cuello, alas y barbillas superan el triple de sus valores
iniciales, concluyendo que en este grupo la enfermedad tuvo mayor relevancia.
4.2 EVALUACION DELAS LESIONES NODULARES
4.2.1 Evaluación del número de lesiones nodulares
Para evaluar el número de las lesiones en los pavos de experimentación se
procedió a contabilizar cada una de ellas por animal y por día.
En la Tabla 03 se muestra el número de lesiones en promedio de ambos grupos al
finalizar el experimento.
Tabla 03: Promedio del número de lesiones
;ona a tratar y Grupos de Prueba de Levene Prueba t Media
Tratamiento Sig. t gl. Sig. (bilateral) Toma de decisión
esiones Grupo A 3,1700
Grupo B 5,0480 ,066 -4,679 8 ,002
Se rechaza la hipótesis nula
23
El promedio del número de lesiones entre el grupo A (tratado) y el grupo B (sin
tratamiento) fue de 3,170 a 5,048, existiendo una igualdad de variar!~ (prueba
de Levene); se logró determinar que existe una diferencia significativa (sig. 0,00)
en la reducción del número de lesiones en ambas poblaciones objeto de estudio.
En el grupo A las lesiones fueron disminuyendo a lo largo del tiempo, lo que no
sucedía en el grupo control (B). Existiendo efectividad al tratamiento empleado
según el número de lesiones.
La data obtenida según Camps et. al. (2011), arrojan que la recuperación de los
animales tratados dos veces al día con aceite ozonizado de girasol fue en el 100%
de sus casos en 5,3 días. Ello confiere que las lesiones disminuían a razón del
tiempo. Las lesiones del grupo tratado una vez al día desaparecieron en 8,12 días,
ello confiere que la recuperación de los animales compatibles a viruela aviar es
directamente proporcional al número de veces en la aplicación del aceite.
Asimismo, Camps et. al. (2005), recalca este principio, pues la efectividad
cicatrizante del aceite ozonizado (Oleozón0) en aves cuya recuperación de
lesiones comunes fue de un 25,6% de animales tratados dos veces al día; y un
13,6% en los animales tratados una vez al día. Ello nos indica que la recuperación
de los pavos hubiese sido más rápida si se aumentaba el número de aplicaciones
del producto en cada una de las lesiones.
4.2.2 Evaluación del tamaño de lesiones nodulares
Para evaluar el tamaño de las lesiones en los pavos de experimentación se
procedió a medir cada una de ellas por animal y por día.
En la Tabla 04 se muestra los promedios del tamaño de lesiones de acuerdo a la
localización y grupos de experimentación.
24
Tabla 04: Promedio del tamaño en cm de lesiones de acuerdo a la localización
Zona a tratar y Grupos Levene Media
de Tratamiento gl. Sig. Toma de Sig. t
(bilateral) decisión
Prueba de Prueba t
Grupo A ,050 Barbilla ,109 1,463 8 ,182
Grupo B ,008
Grupo A ,420 Alas ,861 -3,305 8 ,011
Grupo B 1,460
Grupo A 2,700
Cuello Grupo B 3,580 ,016 -2,673 8 ,028
Grupo B 5,0480
No se rechaza la hipótesis nula
Se rechaza la hipótesis nula
Se rechaza la hipótesis nula
Con el análisis estadístico se pudo comprobar que las medias de los tamaños
cuentan con una distribución normal.
Como resultado del análisis estadístico pudimos comprobar en primer lugar que
las medias de los tamaños cuentan con una distribución normal, dato fundamental
para cualquier análisis de este tipo (Prueba de Normalidad — Shapiro Wilk).
Para la aplicación de nuestros datos estadísticos de prueba (prueba t-student), el
promedio de lesiones de la barbilla entre el grupo A (tratado) y el grupo B (sin
tratamiento) fue de 0,050 a 0,008, existiendo una igualdad de varianzas (prueba
de Levene); se logró determinar que no existe una diferencia significativa (sig.
0,182) en la reducción del número de lesiones en ambas poblaciones objeto de
estudio, no existiendo efectividad en esta área debido a que a las lesiones son
escasamente frecuentes; y de existir, tienen un tamaño inferior a 0.3 cm, teniendo
un tamaño muy pequeño, por lo general imperceptible. Esto se evidencia en los
pavos de experimentación, donde solo 4 pavos presentaron lesiones a este nivel
de los 10 utilizados. De tal forma que la reducción de toda lesión en barbillas
tiene nula efectividad por su reducido tamaño y escasa frecuencia.
En el caso del promedio de lesiones de las alas entre el grupo A (tratado) y el
grupo B (sin tratamiento) fue de 0,420 a 1,460, existiendo una igualdad de
varianzas (prueba de Levene); se logró determinar que existe una diferencia
significativa (sig. 0,01) en la reducción del número de lesiones en ambas
poblaciones objeto de estudio. Existiendo efectividad en el tratamiento empleado
25
a este nivel.
En el caso del promedio de lesiones del cuello entre el grupo A (tratado) y el
grupo B (sin tratamiento) fue de 2,700 a 3,580, existiendo una igualdad de
varianzas (prueba de Levene), se logró determinar que existe una diferencia
significativa (sig. 0,03) en la reducción del número de lesiones en ambas
poblaciones objeto de estudio. Existiendo efectividad en el tratamiento empleado
a este nivel.
En la enfermedad la hipeiplasia epitelial genera un incremento de 2.5 veces en el
número de células a las 72 horas pos infección (Calnek, 2000). Esto ocurrió en
cada una de las zonas de inoculación del ave (barbilla, alas, cuello), por ende, el
tamaño de las lesiones se hizo evidente en el Grupo B (grupo control) pues no
recibió tratamiento alguno. Sin embargo, la regresión de las lesiones puede iniciar
alrededor de las 4-6 semanas sin un tratamiento previo, en raras ocasiones éstas
persistirían por unos meses (Griñán, 2004).Ello significa que el tiempo de
regresión de las lesiones en las aves es independiente al tratamiento que se
realice, pero que dicho tiempo puede reducirse significativamente a partir del uso
del aceite ozonizado de oliva y a partir del número de veces que se utilice durante
24 horas. Las lesiones a nivel de cuello, barbillas y alas desaparecen en un
determinado tiempo, el cual se ve influenciado por el producto utilizado y el
número de aplicaciones del mismo durante un día, claramente evidenciado en los
resultados obtenidos según C,amps et. al. (2011) y Camps et. al. (2005).
4.3 TIEMPO DE REGRESION DE LAS LESIONES
El comportamiento de la variable tamaño de lesiones respecto al tiempo se realizó
tomando como la base la fórmula descrita en el ítem 3.4.9 (Análisis de variación
porcentual de datos). Dicho comportamiento se describe en la Tabla 03, expresado
como efectividad del tratamiento.
26
Tabla 03: Efectividad del tratamiento
Día Tamaño de heridas Efectividad
Cuello Alas Barbilla Cuello Alas Barbilla
0 6,4 1,18 0,1
1 6,2 1,14 0,1 -0,03 -0,03 0,00
2 5,8 0,92 0,06 -0,06 -0,19 -0,40
3 4,9 0,72 0,02 -0,16 -0,22 -0,67
4 4,84 0,62 0 -0,01 -0,14 -1,00
5 3,8 0,46 0 -0,21 -0,26 -1,00
6 2,44 0,46 0 -0,36 0,00 -1,00
7 2,12 0,22 0 -0,13 -0,52 -1,00
8 1,4 0,2 0 -0,34 -0,09 -1,00
9 0,8 0 0 -0,43 -1,00 -1,00
10 0 0 0 -1,00 -1,00 -1,00
La Tabla 03 muestra que las heridas que se encontraban localizadas en el cuello y
que inicialmente tenían dimensiones de 6,4 cm en promedio, lograron recuperarse
en su totalidad al décimo día de tratamiento.
Las heridas que se encontraban situadas en las alas y que representaban 1,18 cm en
promedio mostraron una recuperación del 100% el día noveno.
Las heridas evaluadas en la barbilla que presentaban daño mínimo de 0,1 cm en
promedio lograron una recuperación completa el cuarto día.
El análisis de variación porcentual de datos permitió describir la evolución
(negativa) de los mismos, tal como se observa en el Gráfico 01, debido a la
disminución de las heridas según el tratamiento seguido.
27
Grafico 01: Efectividad del tratamiento
7 6.5
6 5.5
5 4.5
4 3.5
3 2.5
2 1.5
1 0.5
O DIA O DIA 1 DIA 2 DIA 3 DIA 4 DIA 5 DIA 6 DIA 7 DIA 8 DIA 9 DIA 10
~CUELLO ~ALAS rC BARBILLA
Camps et. al. (2011), demostraron que en la aplicación topical del aceite ozonizado
de girasol una vez al día en gallinas con lesiones compatibles a viruela aviar, se
logró la recuperación de los animales en 8 días, mientras que en la aplicación
topical del mismo dos veces al día se logró en 5 días; alcanzando la recuperación
del 100% de las aves sin extirpación de las lesiones. El tratamiento se evaluó
durante siete días. El efecto del aceite en recuperar a las gallinas fue más rápido a
comparación que los pavos analizados en este estudio, la razón se enfoca en el tipo
de aceite utilizado, pues el aceite de girasol tiene la capacidad de fijarse al tejido
epitelial con mayor firmeza a comparación del aceite de oliva, ello le confiere
ventaja en la acción del ozono frente a las lesiones postulares.
Camps et. al. (2005), demostraron la efectividad cicatrizante del aceite ozonizado
(Oleozón0) en la cicatrización de heridas en aves semirústicas. Los resultados
mostraron que el tratamiento con aceite ozonizado reveló un efecto positivo en la
cicatrización de lesiones comunes con un 25,6% de animales recuperados en el
tratamiento empleado dos veces al día; y un 13,6% en el tratamiento empleado una
vez al día. A diferencia de esta investigación, la recuperación fue en el 100% de los
animales tratados con aceite ozonizado de oliva (Grupo A).
28
CAPÍTULO VI
CONCLUSIONES
Utilizando embriones de pavo se logró aislar el virus de la viruela aviar a partir
de un pavo con signos clínicos, y reproducir la enfermedad en pavos sanos
produciendo lesiones en cuello, alas y barbilla.
El aceite ozonizado de oliva ejerce acción efectiva en el tratamiento de viruela
aviar en pavos al reducir significativamente las lesiones a nivel de cuello y alas.
No hay reducción significativa le las lesiones a nivel barbillas, esto debido a su
reducido tamaño y escasa frecuencia.
Las lesiones cutáneas provocadas por el virus de la viruela se recuperan
totalmente en 10 días utilizando aceite de oliva ozonizado.
29
CAPÍTULO VII
RECOMENDACIONES
Instaurar el uso del aceite de oliva ozonizado como tratamiento alternativo a
viruela aviar en pavos.
Teniendo en cuenta que la viruela aviar es una enfermedad de origen vital, se
recomienda la inmunización de los pavos para prevenirla.
Generar investigaciones enfocadas en la salud animal a partir del uso del aceite
ozonizado de oliva; con ello, se proporcionará mayor información sobre este
compuesto y sobre la ozonoterapia en el campo de la Medicina Veterinaria.
30
CAPÍTULO IX
BIBLIOGRAFÍA
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32
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33
RESUMEN
La investigación tuvo como objetivo determinar el tiempo de recuperación de las
lesiones cutáneas provocadas por el virus de la viruela aviar en pavos utilizando aceite
ozonizado de oliva. La fase experimental se realizó en un local propio ubicado en la
Calle Ira #220 A.H. Nuevo Catacaos. El proceso que involucra el aislamiento del virus
de la viruela aviar se realizó en el Laboratorio de Microbiología de la Escuela
Profesional de Medicina Veterinaria de la Facultad de Zootecnia de la Universidad
Nacional de Plum, siendo el 04 de septiembre del 2017 la fecha de inicio de este trabajo.
La investigación fue del tipo experimental donde se evaluó el proceso de regresión de
las lesiones nodulares provocadas por el virus de la viruela aviar utilizando aceite
ozonimlo de oliva (Pur03e) como tratamiento alternativo en un grupo experimental de
5 pavos en comparación con un grupo control de 5 pavos que fueron tratados con agua
destilada, todos ellos inducidos a la presentación clínica de la enfermedad. El virus de la
viruela procedente de pústulas machacadas de un pavo enfermo fue inoculado en la
membrana corioalantoidea de embriones de pavo de 11 días de incubación, de las cuales
se obtuvo un macerado con el virus que fue inoculado en tres áreas anatómicas:
barbillas, cara interna de ambas alas y a nivel proximal del cuello. Los tratamientos se
realizaron 2 veces al día por 10 días, donde se evaluó las variables número y tamaño de
lesiones. En el 100% de las aves hubo desarrollo de lesiones pustulares a nivel de
cuello, las cuales se propagaron por todo el rostro del animal. En el 80% de animales
hubo desarrollo de lesiones a nivel de alas; y en el 40% del total de animales hubo
desarrollo de lesiones a nivel de barbilla. Las aves del Grupo A evidenciaron una
regresión total en número de lesiones en el día 9 y día 10. Las lesiones que se
encontraban localizadas en el cuello (Grupo A) y que inicialmente tenían dimensiones
de 6,4 cm en promedio, lograron recuperarse en su totalidad al décimo día de
tratamiento. Las heridas que se encontraban situadas en las alas (Grupo A) y que
representaban 1,18 cm en promedio mostraron una recuperación del 100% el día
noveno. Las heridas evaluadas en la barbilla (Grupo A) que presentaban daño mínimo
de 0,1 cm en promedio lograron una recuperación completa el cuarto día. Las aves del
Grupo B evidenciaron un incremento del número de sus lesiones al doble o triple de sus
valores iniciales. Frente al tratamiento con aceite ozonizado de oliva (Pur03(8)), se
concluye que las lesiones cutáneas provocadas por el virus de la viruela aviar se
recuperan totalmente en 10 días, cuya evidencia radica en la disminución del tamaño y 34
número de lesiones, desapareciendo por completo.
Palabras claves: Aceite ozonizado de oliva, viruela aviar, lesiones nodulares, pavos.
35
ABSTRAC1'
The objective of the research was to determine the recovery time of cutaneous
lesions caused by the avian poxvirus in turkeys using ozonized olive oil. The
experimental phase was carried out in its own premises located in Calle ¡ca # 220 A.H.
New Catacaos. The process that involves the ísolation of the avian smallpox virus was
canied out in the Microbiology Laboratory of the Professional School of Veterinary
Medicine of the Faculty of Zootechnies of the National University of Piura, being
September 4, 2017 the start date of this work. The investigation was of the experimental
type where the regression process of the nodular lesions caused by the avian poxvirus
was evaluated using ozonized olive oil (Pur030) as an altemative treatment in an
experimental group of 5 turkeys compared to a control group of 5 turkeys that were
treated with distilled water, ah of thent induced to the clinical presentation of the disease.
The smallpox virus from crushed pustules of a diseased turkey was inoculated into the
chorioallantoic membrane of turkey embryos of 11 days of incubatíon, from which a
macerate was obtained with the virus that was inoculated in three anatomical arcas:
barbels, face intemal of both wings and proximal of the neck. The treatments were
performed twice a day for 10 days, where the variables number and size of lesions were
evaluated. In 100% of the birds there was development of pustular lesions in the neck,
which spread throughout the face of the animal. In 80% of animals there was
development of wing-level injuries; and in 40% of ah l animals there was development of
lesions at the chin level. The birds of Group A showed a total regression in number of
lesions on day 9 and day 10. The lesions that were located in the neck (Group A) and that
initially had dimensions of 6.4 cm on average, managed to recover in full on the tenth
day of treatment. The wounds that were located on the wings (Group A) and that
represented 1.18 cm on average showed a recovery of 100% on the ninth day. The
evaluated wotmds in the chin (Group A) that presented a mínimum damage of 0.1 cm on
average achieved a complete recovery on the fourth day. The birds in Group B showed
an mercase in the number of their lesions at double or triple their initial values. In
contrast tú the treatment with ozonized olive oil (Pur030), it is concluded that the
cutaneous lesions caused by the avian poxvirus recover completely in 10 days, the
evidence of which is the decrease in the size and number of lesions, disappearing
completely.
36
Key words: Ozonized olive oil, poultry pox, nodular lesions, turkeys.
37
ANEXOS
38
ANEXO 1
ANALISIS ESTADISTICO
Promedio del número de lesiones
Grupos de Tratamiento N Media Desviación Media de
estándar error
estándar
Grupo A 5 3,1700 ,45255 ,20239
Lesiones Grupo B 5 5,0480 ,77493 ,34656
Medidas de tendencia central para promedio del tamaño de lesiones
Grupos de
Tratamiento
N Media Desviaci
o'n
estándar
Media de
error
estándar
Grupo A 5 ,050 ,0616 ,0276
Barbilla Grupo B 5 ,008 ,0179 ,0080
Grupo A 5 ,420 ,5020 ,2245
Alas Grupo B 5 1,460 ,4930 ,2205
Grupo A 5 2,700 ,2345 ,1049
Cuello Grupo B 5 3,580 ,6979 ,3121
39
Prueba de Normalidad - Promedio de Lesiones
Grupos de
Tratamiento
Shapiro-Wilk
Estadístico G1 Sig.
Grupo A ,858 5 ,220
Barbilla Grupo B ,552 5 ,000
Grupo A ,881 5 ,314
Alas Grupo B ,779 5 ,054
Grupo A ,836 5 ,154
Cuello Grupo B ,932 5 ,607
Grupo A ,782 5 ,058
Lesiones Grupo B ,827 5 ,133
40
CODIGO DEL AVE
FECHA
NÚMERO TOTAL DE
LAS LEE4COCES
DIÁMETRO PROMEDIO
DE LESPONES
DE ~BILLA
DIÁMETRO PROMEDIO
DE LESICCUS DE ALAS
•
DiÁzarrao PROMEDIO
DE LESIONES
DEL CUELLO
DIA
ANEXO 2:
FICHA DE EVALUACION DE LESIONES NODULARES DURANTE
EL TRATAMIENTO
43
ANEXO 3
PROCESO DE INDUCCION DE VIRUELA AVIAR
Foto 01: Pavo con lesiones compatibles a viruela aviar en su forma cutánea.
Foto 02: Cuerpos de Bollinger hallados a partir del frotis. Esto comprueba que el
animal es positivo a viruela aviar.
42
Foto 03: Huevo embrionado de pavo, confirmado a partir de ovoscopla.
Foto 04: Huevo no ernbrionado de pavo, confirmado a partir de ovoscopía.
Foto 05: Macerado de lesiones cutáneas en placa Petri, para su posterior centrifugación.
43
Foto 06: Huevos embrionados de pavo, preparados para su posterior inoculación.
Foto 07: Lesiones variólicas halladas a nivel de membranas corioalantoideas de los
embriones de pavo.
Foto 08: Inoculación del macerado de las membranas corioalantoideas en los pavos de
experimentación a nivel cuello.
44
ANEXO 4:
TRATAMIENTO Y EVALUACION DE LOS PAVOS EN
EXIIERIMENTACION
Foto 01: Lesiones cutáneas compatibles a viruela aviar desarrolladas a nivel de cuello
en los pavos del experimento.
Foto 02: Lesiones cutáneas compatibles a viruela aviar desarrolladas a nivel de alas en
los pavos de experimentación.
Foto 03: Aplicación del aceite ozonizado en las lesiones cutáneas de viruela aviar en los
pavos de experimentación.
45
Foto 04: Aplicación del agua destilada en las lesiones cutáneas de viruela aviar en los
pavos de experimentación.
ANEXO 5
PREPARACION DE LOS COLORANTES
Fucsina básica:
Se coloca I .25g de fucsina en 25mL de etanol (solución!).
Se coloca 2.5g de fenol cristalino en 225mL de agua destilada (solución2).
La solución se mezcla en la solución 2 en un recipiente de vidrio con tapa rosca.
Incubar a 37T por48h.
Pasadas las 48 horas, mantener a temperatura ambiente.
Verde de malaquita:
Se pesa 0.8g de verde de malaquita.
Disolver en 100mL de agua destilada.
ANEXO 6
RECOPILACION DE DATOS DURANTE EL TRATAMIENTO
Recopilación de resultados durante el tratamiento --GA01
GA01 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 4 1 0 4:00pm 4 1 0
DIA 1 10:00am 4 1 0 4:00pm 4 1 0
DIA 2 10:00am 4 1 0 4:00pm 4 1 0
DIA 3 10:00am 4 1 0 4:00pm 4 1 0
DIA 4 10:00am 3 1 0 4:00pm 3 1 0
DIA 5 1000am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA 6 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA 7 10:00am 2 0 0 4:00pm 2 0 0
DIA 8 10:00am 2 0 0 4:00pm 2 0 0
DIA 9 10:00am 1 0 0 4:00pm 1 0 0
DIA 10 10:00am O O O 4:00pm O O O
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES (cm)
DIA O 10:00am 1.3 03 4:00pm 1.3 0.3 0
DIA 1 10:00am 1.3 0.3 0 4:00pm 1.3 0.3 0
DIA 2 10:00am 1.2 0.3 0 4:00pm 1.2 0.3 0
DIA 3 10:00am 1.2 0.3 0 4:00pm 02 0.3 0
DIA 4 10:00am 1.2 0.2 0 4:00pm 1.2 0.2 0
DIA 5 10:00am 1.2 0.2 0 4:00pm 1.2 0.2 0
DIA 6 10:00am 12 02 0 4:00pm 12 0.2 0
DIA 7 10:00am 1.1 0 0 4:00pm 1.1 0 0
DIA 8 10:00am 1.1 0 0 4:00pm 1 0 0
DIA 9 10:00am 1 0 0 4:00pm 1 0 0
DIA 10 10:00am O O O 4:00pm O O O
Recopilación de resultados durante el tratamiento —GA02
GA02 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 5 2 I 4:00pm 5 2 1
DIA 1 10:00am 5 2 1 4:00pm S 2 1
DIA 2 10:00am 5 2 1 4:00pm 5 2 1
DIA 3 10:00am 5 2 0 4:00pm 5 2 0
DIA 4 10:00am 5 2 0 4:00pm 5 2 0
DIA 5 10:00am 5 2 0 4:00pm 4 2 0
DIA 6 10:00am 4 2 0 4:00pm 3 2 0
DIA 7 10:00am 3 2 0 4:00pm 3 1 0
DIA 8 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA 9 10:00am 2 0 0 4:00pm 1 0 0
DIA 10 10:CtOam O O O 4:00pm O O O
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES (cm)
DIA O 10:00am 1.6 1.5 0.3 4:00pm 1.6 1.5 0.3
DIA 1 10:00am 1.4 1.5 0.3 4:00pm 1.4 1.5 0.3
DIA 2 10:00am 1.4 1.5 02 4:00pm 1.4 1.3 0.2
DIA 3 10:00am 1.4 1.3 0 4:00pm 1.4 1.3 0
DIA 4 10:00am 1.4 1.2 0 4:00pm 1.3 1.2 0
DIA 5 10:00am 1.3 1 0 4:00pm 1.2 1 0
DIA 6 10:00am 1.2 1 O 4:00pm 1 1 O
DIA 7 10:00am 1 1 0 4:00pm 1 1 0
DIA 8 10:00am 1 I 0 4:00pm 1 1 0
DIA 9 10:00am 1 0 0 4:00pm 1 0 0
DIA 10 10:00am O O O 4:00pm O O O
Recopilación de resultados durante el tratamiento -GA03
GA03 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 4 1 1 4:00pm 4 1 1
DIA 1 10:00am 4 1 1 4:00pm 4 1 1
DIA 2 10:00am 4 1 1 4:00pm 4 1 1
DIA 3 10:00am 4 1 1 4:00pm 4 1 1
DIA 4 10:00am 3 1 1 4:00pm 3 1 0
DIA 5 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA 6 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA 7 1000am 1 1 0 4:00pm 1 I 0
DIA 8 10:00am 1 0 O 4:00pm 1 0 0
DIA 9 10:00am O O O 4:00pm O O O
DIA 10 1000am O O O 4:00pm 0 0 0
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES ( ) cm
DIA O 10:00am 1.7 0.8 0.2 4:00pm 1.7 0.8 0.2
DIA 1 10:00am 1.7 0.8 0.2 4:00pm 1.7 0.8 0.2
DIA 2 10:00am 1.7 0.7 02 4:00pm 1.5 0.7 0.1
DIA 3 10:00am 1.5 0.3 0.1 4:00pm 1.5 0.3 0.1
DIA 4 10:00am 1.5 0.3 0.1 4:00pm 1.5 0.3 0
DIA 5 10:00am 1.5 0.3 0 4:00pm 13 0.1 0
DIA 6 10:00am 1.5 0.1 0 4:00pm 1.3 0.1 0
DIA 7 10:00am 1.3 0.1 0 4:00pm 1.2 0.1 0
DIA 8 10:00am I 0 0 4:00pm 1 0 0
DIA 9 10:00am O O O 4:00pm O O 0
DIA 10 10:00am O O O 4:00pm O O O
Recopilación de resultados durante el tratamiento —GA04
_GA04 DIAS CUELLO . ALAS BARBILLA
DIA O _ 10:00am , 4 2 o 4:00pm 2 o 10:00aM 4 2 O
DIA 1 4100ffin 4 2 :o 10:00am 4 2 o
DIA 2 , 4:00pm 4 2 o 10:00am 4 2 0
. IA3 _,4tOOPin 2 0 10:00arn 1 o
NUMERO DE LESIONES
DIA 4 4.:00pth • _ 4 1 o
_ DIA 5 10:00am _4 0 .0
. 4100pin. 4 _ O O 10:00am 4 o O
DIA 6. 4:0001 2 o o 10:00am 2 O o
DIA 7 4:00pm ,2 O 1 0:00ant .,2 o o
DIA 8 4:00pm 2 o o 10:00am 2 o o
DIA 9 4:000M_ '; 2 o o 10:00am o o o
DIA 10_ 4:00pm 0 o O
10:00am _ 1.5 0.9 0 DIA O _ 4:00phi . 1 5 0.9 O
10:00am 1.5 0.8 o DIA I 4:00pm 1.5 0.8 o
10:00ám _ , 1.3_ _ 0.5 o DIA 2 .4:00pm_ 1.3 , _ 0.5 O
10:00am 1.3 o DIA 3 4:00pm 1.3 0.2 o
10:00am 13 0.2 o DIA 4 1.3 0.2 O
TAMAÑO PROMEDIO DÉ LESIONES (cm)
DIA 5 .10:00aln • 1.1 _ O o 4:00pm 1.1 o O
DIA 6 10:00ám 1.1 o o 4:00pm 1.1 o O 10:00am 1.1 o o
DIA 7 4:00pm 1.1 o o 10:00am „ 1 o o
DIA 8 4:00pm 1 o o 10:00am , 1 o o
DIA 9 4:00pm -1 o 0 10:00atn o O o
DIA 10 4:00pm o o o
Recopilación de resultados durante el tratamiento —GA05
GA05 MAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 5 0 0 4:00pm 5 0 O
DIA 1 10:00am 5 0 0 4:00pm $ O O
DIA 2 10:00am 5 0 0 4:00pm 5 0 0
DIA 3 1000am 5 0 0 4:00pm 5 0 0
DIA 4 10:00am 5 0 0 4:00pm 4 0 0
DIA 5 10:00am4 O O 4:00pm 4 0 0
DIA 6 10:00am 2 0 0 4:00pm 2 0 0
DIA 7 10:00am 2 O 0 4:00pm 2 0 0
DIA 8 10:00am O O O 4:00pm O O O
DIA 9 10:00am O O O 4:00pm O O O
DIA 10 10:00am O O O 4:00pm O O O
TAMA190 PROMEDIO DE LESIONES (cm)
DIA O 10:00am 1.2 0 0 4:00pm 1.2 0 O
DIA I 10:00am 1.2 0 0 4:00pm 1.2 0 0
DIA 2 10:00am 1.2 0 0 4:00pm 1.2 0 0
DIA 3 10:00am 1.2 0 0 4:00pm 1.1 0 0
DIA 4 10:00am 1.1 0 0 4:00pm 1.1 0 0
DIA 5 10:00am 1.1 0 0 4:00pm 1.1 0 0
DIA 6 10:00am 1 O 0 4:00pm 1 0 O
DIA 7 10:00am 1 0 0 4:00pm 1 0 0
DIA 8 10:00am O O O 4:00pm O O O
DIA 9 10:00am O O O 4:00pm O O O
DIA 10 10:00am O O O 4:00pm O O O
ANEXO 7
RECOPILACION DE DATOS DE GRUPO CONTROL
Recopilación de resultados durante el tratamiento -GB01
GB01 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 4 I 1 4:00pm 4 1 1
DIA 1 10:00am 4 1 1 4:00pm 4 1 1
DIA 2 10:00am 4 1 1 4:00pm 4 1 1
DIA 3 10:00am 5 1 I 4:00pm 5 1 1
DIA 4 10:00am 5 2 1 4:00pm 5 2 1
DIA 5 10:00am 5 2 1 4:00pm 7 2 1
DIA 6 10:00am 7 2 1 4:00pm 7 2 1
DIA 7 10:00am 7 2 1 4:00pm 7 2 1
DIA 8 10:00am 7 2 1 4:00pm 7 2 1
DIA 9 10:00am 8 2 I 4:00pm 8 2 1
DIA 10 10:00am 8 2 1 4:00pm 8 2 1
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES (cm)
DIA 0 10:00am 1.5 0.8 0.3 4:00pm 1.5 0.8 0.3
DIA 1 10:00am 1.5 0.8 0.3 4:00pm 13 0.8 0.3
DIA 2 10:00am 1.5 0.8 0.5 4:00pm 1.5 0.8 0.5
DIA 3 10:00am 1.5 0.8 0.5 4:00pm 1.8 0.8 0.5
DIA 4 10:00am 1.8 1 0.8 4:00pm 1.8 1 0.8
DIA 5 10:00am 2 1 0.8 4:00pm 2
DIA 6 10:00am 2 1.5 0.8 4:00pm 2.2 1.5 0.8
DIA 7 10:00am 2.5 1.5 0.8 4:00pm 2.5 1.8 0.8
OLAS 10:00am 2.5 2 1.2 4:00pm 2.7 2 1.2
DIA 9 10:00am 2.7 2 1.4 4:00pm 3 2.3 1.4
DIA 10 10:00am 3 2.3 1.4 4:00ptn 3 2.3 1.6
Recopilación de resultados durante el tratamiento ---GB02
GB02 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 5 0 0 4:00pm 5 0 0
DIA 1 1000am 5 0 0 4:00pm S 0 0
DIA 2 10:00am 5 0 0 4:00pm 5 0 0
DIA 3 10:00am 5 0 0 4:00pm 5 O 0
DIA 4 10:00am 6 1 0 4:00pm 6 1 0
DIA 5 1000am 6 1 0 4:00pm 6 1 0
DIA 6 10:00am 6 , 1 0 4:00pm 7 1 0
DIA 7 10:00am 8 1 0 4:00pm 8 1 0
DIA 8 10:00am 8 I 0 4:00pm 8 I 0
DIA 9 10:00am 8 2 0 4:00pm 8 2 0
DIA 10 1000am 8 2 0 4:00pm 9 2 0
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES' cm)
DIA O 10:00am 0.8 0 0 4:00pm 0.8 0 O
DIA 1 10:00am 1.2 0 0 4:00pm 1.2 0 0
DIA 2 10:00am 1.2 0 0 4:00pm 12 0 0
DIA 3 10:00am L2 O O 4:00pm 1.2 0 0
DIA 4 10:00am 1.3 1 0 4:00pm 1.3 1 0
DIA 5 4:00pm
10:00am 1.5 1 0 1.5 1 O
DIA 6 10:00am 1.8 1.3 0 4:00pm 1.8 13 0
DIA 7 10:00am 1.8 1.3 0 4:00pm 1.8 1.5 0
DIA 8 10:00am 2 1.6 0 4:00pm 2 1.6 0
DIA 9 10:00am 2 1.6 0 4:00pm 2.2 1.6 0
DIA 10 10:00am 2.2 1.6 0 4:00pm 2.3 1.6 0
Recopilación de resultados durante el tratamiento -GB03
GB03 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMER.0 DE LESIONES
DIA O 10:00am 2 2 1 4:00pm 2 2 1
DIA 1 10:00am 2 2 1 4:00pm 2 2 1
DIA 2 10:00am 2 2 I 4:00pm 2 2 1
DIA 3 10:00am 2 2 1 4:00pm 2 2 I
DIA 4 10:00am 3 2 1 4:00pm 3 2 1
DIA 5 1000am 3 3 1 4:00pm 3 3 1
DIA 6 10:00am 5 3 1 4:00pm 5 3 1
DIA 7 10:00am 5 3 1 4:00pm 6 3 1
DIA 8 10:00am 6 3 1 4:00pm 6 3 I
DIA 9 10:00am 6 3 1 4:00pm 6 3 1
DIA 10 10:00am 7 3 1 4:00pm 7 3 1
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES cm) (
DIA 0 10:00am 1.2 0.8 0.5 4:00pm 1.2 0.8 0.5
DIA 1 10:00am 1.2 0.8 0.5 4:00pm 1.2 0.8 0.7
DIA 2 10:00am 1.5 0.8 0.7 4:00pm 1.5 0.8 0.7
DIA 3 10:00am 1.5 0.8 0.9 4:00pm 1.6 0.8 0.9
DIA 4 10:00am 1.6 1.2 0.9 4:00pm 1.6 1.2 0.9
DIA 5 10:00am 1.7 1.2 1.1 4:00pm 1.7 1.2 1.1
DIA 6 10:00am 1.7 1.2 1.1 4:00pm 1.7 1.3 1.2
DIA 7 10:00am 2 1.3 1.2 4:00pm 2 1.3 1.2
DIA 8 10:00am 2 1.6 1.4 4:00pm 2 1.6 1.4
DIA 9 10:00am 2.2 1.6 1.5 4:00pm 2.2 1.7 1.5
DIA 10 10:00am 2.4 1.7 1.5 4:00pm 2.4 1.8 1.5
Recopilación de resultados durante el tratamiento -GB04
GB04 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 5 1 0 4:00pm 5 1 0
DIA 1 10:00am 5 1 0 4:00pm 5 0
DIA 2 10:00am 5 1 0 4:00pm 5 1 0
DIA 3 10:00am 6 1 0 4:00pm 6 1 0
DIA 4 10:00am 6 2 0 4:00pm 8 2 0
DIA 5 10:00am 8 2 0 4:00pm 8 2 0
DIA 6 10:00am 8 2 0 4:00pm 8 2 0
DIA 7 1000am 8 2 0 4:00pm 8 2 0
DIA 8 10:00am 9 2 0 4:00pm 9 2 0
DIA 9 10:00am 9 2 0 4:00pm 9 2 0
DIA 10 10:00am 9 3 0 4:00pm 9 3 0
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES (cm)
DIA O 10:00am 0.9 0.6 0 4:00pm 0.9 0.6 0
DIA I 10:00am 0.9 0.7 0 4:00pm 0.9 0.7 0
DIA 2 10:00am 1.2 I 0 4:00pm 1.2 1 0
DIA 3 10:00am 1.5 1.3 0 4:00pm 1.5 1.3 0
DIA 4 10:00am 1.5 1.3 0 4:00pm 1.5 1.3 0
DIA 5 10:00am 1.8 1.6 0 4:00pm 1.8 1.6 0
DIA 6 10:00am 2.1 2.1 0 4:00pm 2.1 2 0
DIA / 2 0
14°:00p:°°arn m 2 2141 2.2 0 DIA 8 140 :oo 2.4 2.2 0 :00pr
2.4 2.4 0
DIA 9 10:00am 2.7 2.4 0 4:00pm 2.7 2.4 0
DIA 10 10:00am 3 2.4 0 4:00pm 3 2.4 0
Recopilación de resultados durante el tratamiento -GB05
GB05 DIAS CUELLO ALAS BARBILLA
NUMERO DE LESIONES
DIA O 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA I 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 O
DIA 2 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA 3 10:00am 2 1 0 4:00pm 2 1 0
DIA 4 10:00am 3 1 0 4:00pm 3 1 0
DIA 5 1000am 3 2 0 4:00pm 3 2 0
DIA 6 10:00am 5 2 0 4:00pm 5 2 0
DIA 7 10:00am 5 2 0 4:00pm 6 2 0
DIA 8 10:00am 6 2 0 4:00pm 6 2 0
DIA 9 10:00am 6 2 0 4:00pm 6 2 0
DIA 10 10:00am 7 2 0 4:00pm 7 2 0
TAMAÑO PROMEDIO DE LESIONES (cm)
DIA O 10:00am 1.5 0.5 0 4:00pm 1.5 0.5 0
DIA 1 10:00am 1.5 0.5 0 4:00pm 1.5 0.7 0
DIA 2 10:00am 1.5 0.7 0 4:00pm 1.5 0.7 0
DIA 3 10:00am 1.5 0.9 0 4:00pm 1.8 0.9 0
DIA 4 10:00am 1.8 0.9 0 4:00pm 1.8 0.9 0
DIA 5 10:00am 2 1.1 0 4:00pm 2 1.1 0
DIA 6 10:00am 2 1.1 0 4:00pm 2.2 1.2 O
DIA 7 10:00am 2.5 1.2 0 4:00pm 2.5 1.2 0
DIA 8 10:00am 2.5 1.4 0 4:00pm 2.7 1.4 0
DIA 9 10:00am 2.7 1.5 0 4:00pm 3 1.5 cr
DIA 10 10:00am 3 1.5 0 4:00pm 3 1.5 0