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PRÁCTICO N° 7
Objetivos: conocer las técnicas de análisis para el control de calidad de inoculantes, agua y alimentos
Control de calidad microbiana de inoculantes, agua y alimentos
INOCULANTES: Productos formulados con microorganismos vivos
que se aplican a la semilla para mejorar la nutrición de los cultivos
Características de los componentes de un inoculante
Bacterias:
• específicas
• seleccionadas para fijar N2
• adaptadas a las condiciones ambientales del lugar
• número adecuado (fabricación: 10 x 108 bacterias/ g o ml de inoculante y
vencimiento: 10 x 106 bacterias/ g o ml inoculante ). Ley 20466/80
• máxima pureza
Soporte:
• sólido o líquido
• proveer alimento, oxígeno y humedad
• evitar la competencia con otros microorganismos
• no poseer sustancias tóxicas
Recomendaciones al comprar un inoculante
• Características del envase (permeable, cámara de aire)
• Fecha de vencimiento
• No formulado (mezclado) con curasemillas
• Condiciones de comercialización (cadena de frío)
• Análisis de calidad de la muestra
Análisis de control de calidad de inoculantes
Control de calidad: Verificar la cantidad de células viables de las bacterias especificas y las contaminantes
Rizobios: recuento en placa (medio YEM con rojo congo)
Azospirillum: NMP (medio NFB semisólido)
1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
10-3
10-4
10-5
10-6
10-7
10-8
1 ml 1 ml
10-1
10-2
10 °10 °
inoculante líquidoinoculante sólido (X g + X ml H2O)
1 ml
incubar
calcular
9 ml de agua
1 ml
medio YEM
Análisis de control de calidad de inoculantes
Análisis de control de calidad de inoculantes
Rizobios: recuento en placa (medio YEM con rojo congo)
Recuento: 47 colonias contaminantes
Azospirillum: NMP (medio NFB semisólido)
6 6 6 7 7 7 8 8 8
+ + + + + - - - +
número característico: 3 2 1
NMP= 15
Actividades: - observar caja de Petri
- Inocular semillas
- resolver problemas
10 °
10 °Muestra de agua Verdura fresca
(X g en X ml H2O)
1 ml
Análisis de control de calidad de agua y alimentos
1 ml
10-1
10-2
9 ml H2Odestiladapor tubo
1 ml
1 ml
1 ml
1 ml 1 ml
Recuento bacteriano total
Escherichia coli
Organismos coliformes
LECTURA
INCUBAR
Análisis de control de calidad de agua y alimentos
Recuento bacteriano total (RBT)(medio sólido general)
Control de calidad: Verificar la cantidad de bacterias viables presentes en el agua y verdura
Recuento de organismos Coliformes (NMP)
- Totales (35-37ºC): medio liquido Mc Cokey
- Fecales (44-45ºC): medio liquido Mc Cokey o
caldo lactosa bilis verde brillante
0 0 0 -1 -1 -1 -2 -2 -2
Presencia de Escherichia coli (medio sólido Levine)
Presencia de Pseudomonas aeruginosa (medio agar cetrimida y posterior pruebas bioquímicas)
Valores límites permitidos / 100 ml
RBT Coliformestotales
Coliformesfecales
E. coli P. aerugino
sa
Agua potable (CAA)
50000 <3 NE Ausente Ausente
Agua envasada(CAA)
50000 <3 NE Ausente Ausente
Recreacional(EPA)
NE NE NE 126 NE
Efluentes (SRH)
NE < 5000 < 1000 NE NE
Normas de calidad de agua
NE: no especifica. CAA: Código Alimentario Argentino. U.S. EPA: Agencia de Protección Ambiental de los EEUU. SRH: Subsecretaría de Recursos hídricos.
Valores límites permitidos / 100 ml
Coliformesfecales
E. coli
Categoría A: riego para consumidores y trabajadores (cultivos hortícolas, campos de deportes y parques públicos)
NE Ausente
Categoría B: riesgo para trabajadores (cereales, forrajes, arboles)
NE Ausente
Categoría C: sin riesgo para consumidores ni trabajadores (forestaciones)
NE <1
Normas de calidad de agua para riego
Organización Mundial de la Salud
E. coli Salmonella sp.
E. Coli O157:H7
Hortalizas y frutas frescas (CAA) 100/ g Ausente/ 25g Ausente/ 25g
Vegetales medianamente procesados (envasadas listas para consumir) (CAA)
< 3.0/ g Ausente/ 25g Ausente/ 25g
Normas de calidad de alimentos
Actividades: - observar tubos y cajas de Petri
- resolver problemas.
CAA: Código Alimentario Argentino.