![Page 1: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/1.jpg)
BIOTECNOLOGÍA Y BIOPROCESOSINTEGRANTES
ANDREA DE LA LUZ RAMOSOSCAR GARCÍA RODRÍGUEZ
OSCAR ZARATEOMAR ROMERO MEZA
Artículo Evaluación de la bioestimulación en la biodegradación en la TPHs en suelos
contaminados con petróleo
![Page 2: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/2.jpg)
Evaluación de la bioestimulación en la biodegradación en la TPHs en suelos contaminados con petróleo
Centro de investigación : Pontificia Universidad de BogotáAutores: Victoria Vallejo. Bacteióloga.Laura Salgado. Estudiante de microbiología industrial.Fabio Roldán. Microbiólogo y coordinador de la Unidad de
Saneamiento y Biotecnología Ambiental.Objetivo : evaluar el efecto de la adición de nutrientes (N y P) en
forma de Sales Inorgánicas Simples (SIS) y un Fertilizante Inorgánico Compuesto (FIC) en la biodegradación de hidrocarburos totales de petróleo (TPHs).
![Page 3: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/3.jpg)
INTRODUCCIÓN
Problemática ambiental = Vertido de hidrocarburos totales de petróleo
Hid
roca
rbur
os t
otal
es d
e pe
tról
eo
TO
Hs
Grupo de sustancias químicas derivadas del
petróleo
Componentes formados por H2 y C
características
líquidos incoloros o de color claro
líquidos espesos de color oscuro
semisólidos que no se evaporan.
Indicador del tipo de contaminación
procesos de embarque y desembarque de crudo en puertos
extracción
almacenamiento
refinamiento
![Page 4: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/4.jpg)
Daños ambientales y económicos Biorremediación: acelerar la degradación
parcial o total de un contaminante orgánico disminuyendo su toxicidad, movilidad e impacto ambiental
Biodegradación de TPHs
pH
Humedad
nutrientesT°
Aceptores de
electrones
(AEs)
Alta [] de C y carencia d N y P
bioestimulación
Suministrar factores limitantes como nutrientes para estimular el metabolismo y la velocidad de crecimiento de los degradadores
![Page 5: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/5.jpg)
Términos
Meso cosmos: recintos físicos de confinamiento dentro de ecosistemas y son usados en experimentos que permiten llevar a cabo múltiples repeticiones, proporcionando resultados cercanos a las condiciones reales de los ecosistemas naturales.
![Page 6: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/6.jpg)
Materiales y métodos
MESOCOSMOS*POLIETILENO DE ALTA DENSIDAD*BAJA PERMEABILIDAD Y MÍNIMA
ABSORCIÓN DE TPH*SE ESTUDIÓ LA ADICIÓN DE SIS Y FIC
![Page 7: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/7.jpg)
Los fertilizantes se agregaron los días 0 y 63.
Adicionalmente se utilizo un control abiótico.
Un control sin nutrientes.Todos los controles y tratamientos se
hicieron tres veces (n=3).El estudio se realizo durante 125 días con 5
eventos de muestreo cada 25 días, se tomaron dos muestras aleatorias por mesocosmo.
![Page 8: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/8.jpg)
Localización.
El estudio se realizo en el invernadero de la facultad de ciencias de la Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá.
Los análisis fisicoquímicos y microbiológicos se llevaron a cabo en el laboratorio de la unidad de saneamiento y biotecnología ambiental.
![Page 9: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/9.jpg)
Suelo
El suelo se obtuvo de la finca de san Javier-PUJ (Sipaquira, Cundinamarca).
Este suelo no había sido contaminando con petróleo ni fertilizado.
La muestra se tomó hasta una profundidad de 20 cm.
Para la caracterización inicial del suelo se realizaron análisis fisicoquímicos en el laboratorio del instituto geográfico Agustín Codazzi.
![Page 10: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/10.jpg)
Montaje de los mesocosmos.
Se contaminaron 500 kg de suelo con 10 kg de crudo para una concentración final de 20 mg TPH/kgps.
Con base en las concentraciones de P y N se realizó el balance y adición de nutrientes, con el objetivo de ajustar la relación final de C:N:P.
Se utilizo una relación 100:10:1
![Page 11: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/11.jpg)
Para evaluar el efecto de la adición FIC, se utilizó el fertilizante triple quince.
Se adicionaron 534 g de FIC.Y de SIS 229 g de HN4NO3 y 44 g de
K2HPO4por mesocosmo.
![Page 12: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/12.jpg)
Metodo de recuento en placa en medio agar infusión suelo. Para el recuento de organismos heterótrofos.
Para organismos degradadores de HC, se utilizo el método del numero mas probable.
En placas de 96 pozos.Indicador yodonitrotetrazolium.Se empleo el medio minimo de sales
Bushnell-HaasDiesel como fuente de energia.
![Page 13: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/13.jpg)
Las bacterias degradadoras fueron aisladas.Se creo un atmosfera saturada de HC, usando
sensidiscos impregnados con 20 microgramos de diésel, localizadas en la tapa de la caja.
Las cajas se incubaron durante 15 días a temperatura ambiente.
Las colonias que presentaron características diferentes fueron seleccionas e identificadas mediante pruebas bioquímicas.
![Page 14: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/14.jpg)
Métodos analíticos para la determinación de TPH
Método modificado de extracción por agitación mecánica y gravimétrica (EAMG).
Método estándar para la determinación de combustibles en suelos D-5831.
Para comparar la eficiencia en los procesos de extracción y determinación de TPH por los método analíticos se usaron diferentes matrices.
![Page 15: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/15.jpg)
Suelo sin contaminar Suelo contaminado.Arena contaminada.Arena sin contaminar.
![Page 16: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/16.jpg)
Se compararon con relación a:
Sus limites de cuantificación.Limites de detección del método.Coeficientes de variación.Y porcentajes de recuperación.
![Page 17: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/17.jpg)
Para el método EAMG
Proceso de extracción de TPH.acetona: diclorometano (1:1).Agitación a 120 rpm.30 minutos.El sobrenadante se recogió.X 3 veces.El sobrenadante de filtro, con un g de gel silica
que se secó previamente.El filtrado se puso en tubos de vidrio de 50 ml,
colocados en baño maria.La concentración de TPH se obtuvo por la
diferencia del tubo antes y después de la evaporización.
![Page 18: Artículo Evaluación de La Bioestimulación en La Biodegradación](https://reader030.vdocuments.co/reader030/viewer/2022032701/563db9d3550346aa9aa04824/html5/thumbnails/18.jpg)
Análisis fisicoquímicos.
pH por el metodo 9045c.Nitratos amonio y fosforo por los metodos
366,391,531.