DIPLOMADO BIOLOGIA MOLECULAR APLICADA

AL DIAGNOSTICO CLINICO.

TEORICO-PRACTICO

PROFESOR TITULAR

Q.C. SALVADOR CONTRERAS HUERTA

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INTRODUCCION. La Biología es la ciencia de la vida que estudia la estructura y función de los organismos vivos y sus componentes. La Biología Molecular es la disciplina científica que busca comprender las bases moleculares de la herencia, la variación genética y los patrones de expresión de los genes. Corresponde a un campo multidisciplinario, incluyendo diversas áreas tales como genética y bioquímica, que ha sentado las bases para el estudio y manipulación del material genético (Ingeniería Genética). En la última década ha jugado un papel muy importante, al ser considerada como herramienta básica en el campo de la investigación biomédica, básica y clínica. Sus aportes en el estudio, manejo y diagnostico de diversas enfermedades han servido para que distintos sectores de la salud se interesen más en conocer sus aplicaciones. En el campo clínico se han efectuado avances importantes para la detección temprana de enfermedades genéticas (por patrones de herencia o ligadas al sexo), infecciosas (virus, hongos, bacterias y parásitos) así como para dar seguimiento y/o pronóstico de aquellas que son de tipo hemato - oncológico. El estudio de los principales componentes como los ácidos nucleicos (ADN y ARN) y de proteínas, aceleran y facilitan un diagnostico que bajo otras condiciones tardarían días en ser detectados, así también permite hacer reproducible el resultado a partir de pequeñas porciones de material biológico, aunado a que la especificidad y sensibilidad es mucho mayor. En el presente programa se abordan los procesos biológicos que involucran a los ácidos nucleicos y proteínas, la terminología más utilizada y las técnicas básicas de Biología Molecular con la finalidad de contribuir a la difusión y aplicación de estas herramientas que permitan hacer un diagnostico adecuado y tratamiento oportuno de las enfermedades, otorgando un apoyo a los profesionales de la salud y alumnos en formación.

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• Dirigido a: Q.F.B., Q.B.P., Químicos Clínicos, Médicos, Pasantes y Profesionales de áreas afines.

• Evaluación: Se exige cómo mínimo un 80 % de asistencia para aprobar el Diplomado, siendo Obligatoria la asistencia a las practicas.

• Duración: 200 horas cronológicas.

• Cupos: El número mínimo de inscritos para que se realice el Diplomado es de 25 participantes. Información de contacto: Q.C. Salvador Contreras Huerta e-mail: qcpatoex@hotmail.com Tel y Whatsapp: +52 1 228 1460406 Facebook: Quimico Inmunologia Genetica

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DESCRIPCIÓN GENERAL Debido a la complejidad existente en el diagnostico asociado al concepto de la Medicina basada en evidencias, es necesario actualizar los conocimientos sobre los cuales se deben sustentar las nuevas técnicas moleculares para el diagnostico. Estas técnicas se han vuelto más sofisticadas con el pasar de los años, permitiendo obtener un diagnostico más certero, con alta especificidad, resultado rápido y confiable de acuerdo a lo que demanda la sociedad actual. El contar con profesionales calificados, capaces de brindar servicios con resultados provenientes de técnicas moleculares y conocimiento de los fundamentos, permite que el equipo de salud pueda identificar la causa primaria de la patología y enfocar el diagnostico de manera dirigida y efectiva, además de monitorear eficientemente su tratamiento y evolución. OBJETIVOS

• Ingreso Se propone estimular el interés por la Biología Molecular en estudiantes en formación así como del profesional en activo. Los participantes de este programa de Diplomado contaran con alta capacitación y actualización en la comprensión de los fundamentos y oportunidad de aplicación de las técnicas moleculares para diagnostico clínico.

• Egreso

Al término del mismo los participantes podrán desarrollar las competencias aprendidas sustentadas en una base sólida de fundamentos teóricos y aplicación práctica que le permitirán actualizar sus conocimientos en los avances moleculares aplicados a técnicas de laboratorio para diagnostico clínico. Contaran con un criterio amplio que les permitirá discernir sobre la calidad del resultado emitido en los diversos protocolos de laboratorio para diferentes objetivos con técnicas moleculares. Finalmente, el graduado tendrá la capacidad de entregar servicios de diagnóstico completos, a través de la aplicación de técnicas moleculares con protocolos de alta resolución y exactitud en los resultados.

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PROGRAMACION DE CONTENIDO Consta de 10 Módulos teórico-prácticos.

Consta de 10 Módulos teórico-prácticos. Módulo I. GENERALIDADES.

(Introducción a la Biología Molecular y Técnicas básicas de laboratorio

Módulo II. ENFERMEDADES DE TRANSMISION SEXUAL.

Módulo III. DETECCION DE FAMILIA HERPES VIRUS HUMANO E IDENTIFICACION DE ESPECIES.

Módulo IV. DETECCION DE HEPATITIS VIRUS B y C.

Módulo V. DETECCION DE ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR VECTORES (Virus Dengue).

Módulo VI. DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS.

Módulo VII. DIAGNOSTICO MOLECULAR DE CANCER. (Taller de Inmunohistoquímica).

Módulo VIII. DIAGNOSTICO DE HEMOGLOBINOPATIAS.

Módulo IX. APLICACIÓN DE BIOLOGIA MOLECULAR EN MICOLOGIA.

Módulo X. APLICACIÓN DE BIOLOGIA MOLECULAR EN MICROBIOLOGIA.

Nota: Todos los módulos son prácticos e incluyen: Aislamiento de ácidos nucleicos (ADN y ARN), PCR y Electroforesis, a excepción del Modulo VII.

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Módulo I GENERALIDADES.

• Objetivo General. En este primer módulo los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicado al Diagnóstico Clínico aprenderán los conceptos generales sobre la Biología Molecular, fundamentos y descripción de lo que se verá a lo largo de los módulos siguientes. Se abordaran las principales técnicas empleadas en el laboratorio de Biología Molecular. Recibirán la instrucción teórica y posteriormente práctica, que les será de utilidad a lo largo de todo el diplomado.

• Objetivos específicos.

a) El alumno aprenderá los fundamentos teórico – prácticos de las medidas de seguridad empleadas en el laboratorio de Biología Molecular. b) El alumno conocerá los fundamentos teórico – prácticos de las técnicas empleadas en la selección de muestras biológicas y aislamiento de ácidos nucleicos. c) El alumno recibirá las bases teóricas en la metodología de amplificación de ácidos nucleicos y análisis de bases.

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TEMARIO Introducción a la Biología Molecular. Cronología y evolución histórica. Aspectos básicos de la Biología Molecular. Terminología y conceptos aplicados.

La Célula (estructura y función). Célula procariota. Célula eucariota. Material Genético. DNA, RNA y Proteínas. Proteínas y métodos de estudio. Composición y estructura de los ácidos nucleicos.

Aplicaciones de la Biología molecular en el Diagnóstico Clínico. Microbiología y Parasitología. Virología. Hematología. Inmunología. Oncología. Enfermedades monogenéticas.

Introducción a la Bioseguridad en el laboratorio de Biología Molecular. Preparación de muestras. Recolección y transportación de material biológico. Selección de material biológico para análisis. (líquidos, secreciones, tejidos,

exudados y sangre).

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Extracción y Análisis de ácidos nucleicos y proteínas. Métodos principales para obtención y preparación de muestras. Extracción de DNA, RNA y Proteínas.

Amplificación de ácidos nucleicos y análisis de bandas. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Fundamento. Variantes.

Electroforesis Fundamento. Variantes.

Análisis de imágenes.

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Módulo II ENFERMEDADES DE TRASMISION SEXUAL.

• Objetivo General. En el segundo módulo, los alumnos aprenderán a identificar las principales entidades etiológicas asociadas a ETS. Podrán adquirir los conocimientos necesarios para realizar el diagnóstico por técnicas empleadas en el laboratorio de Biología Molecular.

• Objetivos específicos. a) El alumno conocerá los protocolos utilizados para selección de muestras

biológicas y aislamiento de ácidos nucleicos de las principales entidades etiológicas asociadas con ETS.

b) El alumno aprenderá a realizar el diagnóstico molecular de las principales entidades etiológicas asociadas con ETS, mediante PCR-RFLP y PCR Múltiple.

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TEMARIO Generalidades Virus del Papiloma Humano. Estructura. Patogenia. Clasificación. Asociación VPH-Cáncer. Diagnostico por PCR. Identificación del subtipo viral por RFLP. Análisis de imágenes.

Generalidades Chlamydia trachomatis. Estructura. Patogenia. Diagnostico por PCR múltiple. Análisis de imágenes.

8 Generalidades Neisseria gonorrhoeae. Estructura. Patogenia. Diagnostico por PCR múltiple. Análisis de imágenes.

Generalidades Mycoplasma y Ureaplasma. Estructura. Patogenia. Clasificación. Diagnostico por PCR múltiple. Análisis de imágenes.

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Módulo III DETECCION DE FAMILIA HERPES VIRUS HUMANO E IDENTIFICACION DE ESPECIES.

• Objetivo General. En el tercer módulo, los alumnos aprenderán a realizar la detección de la familia Herpes virus humano e identificar la especie causal. Recibirán la explicación teórica de las especies que componen a la familia Herpes virus humano.

• Objetivos específicos.

a) El alumno aprenderá los fundamentos y generalidades de la familia Herpes virus humano y su importancia clínica. b) El alumno realizara la detección de la familia Herpes virus humano mediante PCR múltiple y la identificación de especies por RFLP. TEMARIO Generalidades Herpes virus humano (HV1, HV2, CMV y EBV). Estructura. Patogenia. Clasificación.

Detección por PCR múltiple.

• Identificación de especies por RFLP. Análisis de imágenes.

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Módulo IV DETECCION DE HEPATITIS VIRUS B y C.

• Objetivo General.

En el cuarto módulo, los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicada al Diagnóstico Clínico aprenderán a realizar los procedimientos requeridos para la detección de los virus de la Hepatitis B y C.

• Objetivos específicos.

a) El alumno recibirá la explicación teórica de las generalidades correspondientes al Virus de la Hepatitis y reforzara los conocimientos acerca de este agente etiológico. b) El alumno realizara la detección de las variantes B y C del Virus de la Hepatitis, mediante las metodologías utilizadas en el laboratorio de Biología Molecular. TEMARIO Generalidades del Virus de la Hepatitis. Estructura. Patogenia. Clasificación.

Detección del Virus B de la Hepatitis por PCR. Detección del Virus C de la Hepatitis por RT-PCR. Análisis de imágenes.

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Módulo V DETECCION DE ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR VECTORES.

• Objetivo General.

En el quinto módulo, los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicada al Diagnóstico Clínico aprenderán a realizar los procedimientos requeridos para la detección de enfermedades transmitidas por vectores: Dengue, Malaria y Virus del Oeste del Nilo (VON).

• Objetivos específicos.

a) El alumno recibirá la información detallada sobre las enfermedades transmitidas por vector, conocerá la importancia sobre su diagnóstico y la intervención oportuna del mismo para su tratamiento.

b) El alumno realizara la detección por técnicas de Biología Molecular de estas entidades etiológicas y ampliara sus conocimientos.

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TEMARIO Generalidades del Virus Dengue. Estructura. Patogenia. Clasificación. Detección por RT-PCR. Identificación del serotipo viral. Análisis de imágenes.

12 Generalidades del Virus del Oeste del Nilo (VON). Estructura. Patogenia. Detección del VON por RT-PCR. Análisis de imágenes.

Generalidades de Malaria. Estructura. Patogenia. Clasificación. Detección por PCR. Análisis de imágenes.

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Módulo VI DIAGNOSTICO DE TUBERCULOSIS.

• Objetivo General.

En el sexto módulo, los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicada al Diagnóstico Clínico aprenderán a realizar los procedimientos requeridos para la detección de Mycobacterium tuberculosis.

• Objetivos específicos.

a) El alumno recibirá la información detallada sobre la importancia del diagnóstico clínico de Tuberculosis, así como de sus diversas expresiones. b) El alumno realizara la detección de Mycobacterium tuberculosis en diversos especímenes mediante técnicas de Biología Molecular. TEMARIO Generalidades de Tuberculosis. Estructura de Mycobacterium tuberculosis. Patogenia. Expresiones clínicas. Detección por PCR Multiplex. Análisis de imágenes.

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Módulo VII DIAGNOSTICO MOLECULAR DE CANCER.

• Objetivo General.

En el séptimo módulo, los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicada al Diagnóstico Clínico aprenderán a realizar los procedimientos requeridos para la detección de células asociadas a cáncer de mama y próstata.

• Objetivos específicos.

a) El alumno recibirá la información necesaria que ampliara sus conocimientos sobre cáncer de mama y próstata. b) El alumno realizara mediante técnicas de Biología Molecular la detección de células presentes en cáncer de mama y próstata, de gran importancia en el diagnóstico y seguimiento posterior a tratamientos de Quimioterapia y/o Radioterapia. TEMARIO Generalidades sobre Cáncer. Actualidades. Tipos de cáncer y sus expresiones. Métodos diagnósticos. Control y seguimiento. Detección de células en cáncer de mama por RT-PCR. Detección de células en cáncer de próstata por RT-PCR. Taller de Inmunohistoquímica. Análisis de imágenes.

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Módulo VIII DIAGNOSTICO DE HEMOGLOBINOPATIAS.

• Objetivo General.

En el octavo módulo, los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicada al Diagnóstico Clínico recibirán la información necesaria para el estudio de las hemoglobinopatías, conocerán el comportamiento de las mismas desde sus raíces genéticas.

• Objetivos específicos.

a) El alumno revisara los aspectos moleculares de las principales hemoglobinopatías. b) El alumno conocerá los procedimientos más utilizados para el diagnóstico molecular de Hemoglobina S y ampliara su panorama con respecto al estudio de la misma. TEMARIO Principales hemoglobinopatías estudiadas por Biología Molecular. Anemia de Fanconi y Disqueratosis congénita. Anemia de Células Falciformes (ACF). Diagnóstico prenatal de hemoglobinopatías. Diagnóstico de Talasemias.

Diagnóstico molecular de ACF y Rasgo Falciforme. Identificación de Haplotipos en ACF. Análisis de imágenes.

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Módulo IX APLICACIÓN DE BIOLOGIA MOLECULAR EN MICOLOGIA.

• Objetivo General.

En el noveno módulo, los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicada al Diagnóstico Clínico recibirán la información necesaria para el estudio de las micosis. .

• Objetivos específicos.

a) El alumno revisara los aspectos moleculares de las principales micosis y su importancia clínica. b) El alumno conocerá los procedimientos más utilizados para el diagnóstico molecular de micosis sistémicas, oportunistas, entre otras. TEMARIO Principales Micosis Sistemicas estudiadas por Biología Molecular. Histoplasmosis. Blastomicosis. Coccidioidomicosis.

Principales Micosis Oportunistas estudiadas por Biología Molecular. Candidosis. Criptococosis. Aspergilosis.

Diagnóstico molecular de Aspergillus e Histoplasma mediante PCR. Análisis de imágenes.

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Módulo X APLICACIÓN DE BIOLOGIA MOLECULAR EN BACTERIOLOGIA.

• Objetivo General.

En el décimo módulo, los alumnos del Diplomado en Biología Molecular aplicada al Diagnóstico Clínico recibirán la información necesaria para el estudio de bacterias de importancia clínica. .

• Objetivos específicos.

a) El alumno revisara los aspectos moleculares aplicables en bacteriología. b) El alumno conocerá los procedimientos más utilizados para el diagnóstico molecular de bacterias de importancia clínica. TEMARIO Principales bacterias estudiadas por Biología Molecular. Campylobacter y Helicobacter Pseudomonas y microorganismos relacionados Brucella Legionella Ehrlichia, Anaplasma y Coxiella. Papel de las bacterias en la enfermedad.

Diagnóstico molecular de Brucella mediante PCR Multiplex. Análisis de imágenes.