diagnóstico general de las enfermedades infecciosas
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Diagnóstico General de las Enfermedades Infecciosas
¿Qué debe esperar un clínico del laboratorio de Microbiología?
• Información para una decisión clínica.• Normas de recogida y transporte de
muestras.• Identificación de microorganismos.• Sensibilidad a los antimicrobianos.• Control de antibioterapia.• Procesamiento y respuesta rápida.• Información actualizada.
Diagnóstico Microbiológico
• Confirmar o excluir un diagnóstico clínico– Falso positivo: ITU– Falso negativo: Meningitis
• Relevancia: Actividades a ejercer en el paciente en función del resultado– Clínica: • Tratamiento antimicrobiano precoz y
adecuado• Gravedad del proceso
– Epidemiologica: • Declaración obligatoria• Quimioprofilaxis
Diagnóstico Microbiológico: Fases
1. Recogida de muestras clínicas (Prácticas):• Importancia.• Normas generales.
2. Transporte de muestras clínicas (Prácticas):• Viales.• Condiciones de transporte.• Medios de transporte.
3. Diagnóstico:• Directo.• Indirecto.
• Directo. Implica la demostración del agente o componentes en los fluidos orgánicos.
• Indirecto. Implica la demostración de la huella que el agente ha dejado en su contacto con el sistema inmune (RI adquirida celular o humoral).
Diagnóstico Directo/Indirecto
Diagnóstico Directo
1. Visualización de microorganismos.2. Cultivo.3. Identificación y antibiograma.4. Detección de antígenos microbianos.5. Técnicas moleculares.
Diagnóstico Directo 1. Visualización de microorganismos
1. Examen Directo– Examen en fresco.– Microscopía de campo oscuro.– Microscopía electrónica.
2. Tinciones:– Gram.– Ziehl: micobacterias.– Tinciones fluorescentes.– Giemsa: parásitos.
Microscopía ópticaExamen en Fresco
Hifas
Microscopía de campo oscuro. Treponema pallidum
Microscopía ElectrónicaHerpes simplex
Tinción de Gram
Streptococcus mitis
Uretritis gonocócica
Tinción de GramBacillus anthracis
Tinción de Ziehl NeelsenB.A.A.R
Tinciones fluorescentesAuramina rodamina (MTB)
Tinción de GiemsaFilarias
Diagnóstico Directo2. Cultivo
1. Medios artificiales Tipos. Condiciones de incubación.
2. Cultivos celulares: Efecto citopático.
3. Huevos embrionados.4. Animales de experimentación.
Medios de CultivoMedios sólidos
Jarra para bacterias anaerobias
Cultivos CelularesHerpes Simplex
Diagnóstico Directo3. Identificación y antibiograma
Diagnóstico Directo4. Detección de antígenos
Aglutinación con partículas de látex
(Ag capsular de Cryptococcus neoformans)
Legionella pneumophilaPneumocystis jiroveci
Diagnóstico Directo4. Detección de antígenos
Inmunofluorescencia directa (IFD)
Diagnóstico Directo4. Detección de antígenos
Inmunocromatografía
Otros ejemplos: Ag de Legionella y S.pneumoniae en orina, toxinas de Clostridium difficile en muestras de heces
D. Directo. 5. Técnicas moleculares
1. Análisis de material genético microbiano– Técnicas de hibridación (sondas de ADN).
(Identificación)– Técnicas de amplificación (PCR). (Diagnóstico e
identificación)– Técnicas de tipado epidemiológico molecular
(PFGE, RFLP,...). (Identificación)
2. Análisis de proteínas microbianas:– MALDI-TOF (identificación)
Diagnóstico Directo5. Técnicas moleculares
PCR
Diagnóstico Indirecto
- Fijación del complemento.- Inmuno blot y Western blot
1. Detección de RI específica humoral (Anticuerpos):- Aglutinación- ELISA- IFI
2. Detección de RI específica celular:– Mantoux– IGRAs
Fundamento. D.indirecto
-IgM-Baja avidez
-IgG-Alta avidez
Fundamento. D. indirecto
Suero sin anticuerpos
Suero con anticuerpos
Antígeno libre
Antígeno se une a los anticuerpos
Complemento libre
Complemento se une al complejo Ag/Ac
Sistema indicador: hematíes/ hemolisina
Sistema indicador: hematíes/ hemolisina
Los hematíes intactos se depositan en el fondo del pocillo (punto rojo)
Los hematíes se lisan (ausencia de punto)
Reactivo No reactivo