UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

DETERMINACIN DE LA CURVA DE CALIBRADO DEL AZUL DE METILENO POR ESPECTROFOTOMETRA-MOLECULAROBJETIVOS Determinar el calibrado del azul de metileno utilizando tres soluciones estndares. Determinar la longitud de onda del azul de metileno.

FUNDAMENTO TEORICO:La espectrofotometra es un conjunto de tcnicas analticas cualitativas y cuantitativas. Se basa en la interaccin de las molculas y las radiaciones electromagnticas la cantidad de luz absorbida por una sustancia a distintas l es como una huella digital y se llama espectro de absorcin.Una radiacin electromagntica se puede describir como un flujo de partculas llamadas fotones, o bien como una onda propagndose en el espacio. De esta ltima descripcin se toma el concepto de longitud de onda, definindolo como la distancia entre dos mximos consecutivos de la onda. La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica.Para descubrir la capacidad de absorcin de una sustancia a distintas longitudes de onda, se hace un barrido espectral. Cada sustancia tiene su espectro caracterstico, lo que permite identificar una sustancia en una solucin cuya composicin desconocemos, y esto se suele emplear en la determinacin de txicos en lquidos biolgicos. Existen dos formas de llevar a cabo los espectros de absorcin:

Manualmente: se lleva a cabo en un espectrofotmetro de haz simple, se coloca en la cubeta la solucin y vamos midiendo las absorbancias a distintas longitudes de onda.Automticamente: se lleva a cabo en un espectrofotmetro de haz doble, en el que se sita la cubeta con el blanco en una de sus celdas y en la otra resolucin problema, se programa el aparato para que haga incidir distintas longitudes de onda y este hace el barrido. Cuando se pretende determinar, espectrofotomtricamente la concentracin de un soluto de una disolucin, es imprescindible conocer las longitudes de onda a las que se produce la mxima absorcin. Lo ideal es hacer incidir sobre la solucin un haz de luz con la longitud de onda en la que se produce la mxima absorcin.PROCEDIMIENTO:

Pesamos 0.01gr de rojo de metilo y colocarlo en fiola de 100ml.

Preparamos las disoluciones diluciones de (0.2, 0.6 y 0.9) ppm

0.3 ppmAforamos la fiola con agua destilada.

0.6 ppm

0.9 ppm

Leer la absorbancia.

Colocamos la muestra en las celdas.

Lo que nos muestra la pantalla es laAbsorbancia vs la concentracin

RESULTADOS:

Graficar la absorbancia vs la concentracin para cada una de las soluciones

SolucionesConcentracinAbsorbancia

Solucin 10.3 mg/L0.58

Solucin 20.6 mg/L0.50

Solucin 30.9 mg/L0.39

DISCUSIONES:La ley de Lambert-Beer se cumple para soluciones diluidas; para valores de C (concentracin molar altos), varia con la concentracin, debido a fenmenos de dispersin de la luz, agregacin de molculas, cambios del medio, etc. Desafortunadamente esta ley no se cumple correctamente cuando la concentracin es excesivamente alta debido a la difusin del haz de luz en el medio o si la intensidad de la fuente luminosa es muy alta ya que se producen variaciones no lineales en las mediciones. Esto tambin se observa en concentraciones diluidas de sustancias absorbentes que contienen concentraciones diluidas de sustancias absorbentes que contienes concentraciones altas de otras especies, electrolitos en particular. Cuando los iones estn muy cerca de analitos, alteran su absortividad molar por interaccin electrosttica ocasionando desviaciones de la ley de Beer.

CONCLUSIONES:

1. La absorbancia depende de factores como la absortividad, la concentracin, el espesor de la celda, longitud de onda, temperatura, velocidad de reaccin, tiempo, no obstante, el barrido espectral que se obtiene para cada sustancia es nico y se puede utilizar para identificar sustancias puras o en diluciones de compuestos desconocidos.2. La absorbancia vara con la concentracin en una relacin lineal, es decir, que a medida que aumenta la concentracin de la dilucin tambin aumenta la absorbancia.3. Segn la concentracin vara la absorbancia del compuesto, variado la cantidad del solvente (siendo agua destilada) se puede disminuir la absorbancia.4. Se identific que el equipo no presenta una adecuada precisin y exactitud determinado que las medidas realizadas en este no son confiables.

BIBLIOGRAFIA:

1. Borfost R. y Scholz, M.1964. SpektroskopischeMethoden in der organischen. Chemise. Berlin2. Snchez, D. 1995, instrumentacin en bioqumica. Consejo nacional de Ciencias y Tecnologa (CONCYTEC) lima