conferencia. bacterias esporuladas

33
INTRODUCCION Las endósporas bacterianas son formas de perdurabilidad de ciertos grupos de bacterias frente al calor, la desecación, la radiación y las influencias químicas. Las esporas bacterianas comienzan a formarse durante la fase estacionaria de crecimiento cuando se han agotado uno o más nutrientes del medio, pueden sobrevivir en ambientes adversos durante meses o años, y una vez que las condiciones de crecimiento sean apropiadas pueden germinar y desarrollarse para formar células vegetativas. Las endosporas se caracterizan por un bajo contenido de agua, no tienen un metabolismo detectable, y carecen de compuestos de alta energía como ATP y otros nucleósidos trifosfatos. Además, son resistentes a la desecación, congelación, radiación y a la acción de ciertas sustancias químicas. Formación de una espora bacteriana.

Upload: giancarlo-yagual-flores

Post on 21-Jan-2016

272 views

Category:

Documents


0 download

DESCRIPTION

Clasificacion de bacterias esporuladas

TRANSCRIPT

Page 1: Conferencia. Bacterias Esporuladas

INTRODUCCION

Las endósporas bacterianas son formas de perdurabilidad de ciertos grupos de

bacterias frente al calor, la desecación, la radiación y las influencias químicas. Las

esporas bacterianas comienzan a formarse durante la fase estacionaria de

crecimiento cuando se han agotado uno o más nutrientes del medio, pueden

sobrevivir en ambientes adversos durante meses o años, y una vez que las

condiciones de crecimiento sean apropiadas pueden germinar y desarrollarse para

formar células vegetativas.

Las endosporas se caracterizan por un bajo contenido de agua, no tienen un

metabolismo detectable, y carecen de compuestos de alta energía como ATP y otros

nucleósidos trifosfatos. Además, son resistentes a la desecación, congelación,

radiación y a la acción de ciertas sustancias químicas.

Formación de una espora bacteriana.

Page 2: Conferencia. Bacterias Esporuladas

El DNA de una célula procarionte sufre lesiones espontáneas debido a la

depurinización, desaminación, alquilación y oxidación de los nucleótidos o al

efecto de la radiación UV. Sin embargo, en las células vegetativas estos daños son

rápidamente reparados por efectivos sistemas enzimáticos. En cambio, las esporas

bacterianas no presentan actividad enzimática pero han desarrollado distintas

estrategias que evitan la acumulación de daños potencialmente letales en su DNA

durante el estado de latencia. Estas son:

1. El bajo contenido de agua retarda o altera las reacciones químicas que

afectan al DNA. Este menor contenido de agua disminuye la tasa de

depurinización y la fotoquímica del DNA frente al UV respecto a las de una

célula vegetativa. La radiación UV no genera dímeros de timina en el DNA de

una espora sino un producto denominado SP (spore photoproduct) que es un

compuesto similar a una timinil-timina.

Page 3: Conferencia. Bacterias Esporuladas

2. El DNA de la espora se encuentra unido a unas proteínas

denominadas alfa/beta-SASP (small acid-soluble proteins) que disminuyen el

daño térmico del DNA evitando la depurinización y cambian la reactividad

fotoquímica del DNA frente al UV formando los SP. Estas proteínas se hallan

altamente conservadas en los géneros Bacillus y Clostridium, y son

sintetizadas durante la esporulación y degradadas durante la germinación.

3. El DNA alterado durante la latencia es reparado en los primeros momentos de

la germinación.

Las esporas presentan una elevada concentración de ácido dipicolínico que permite

complejar grandes cantidades de calcio iónico (Ca2+). El ácido dipicolínico es una

sustancia característica de la espora pero no se encuentra en la célula

vegetativa. La termorresistencia de las endósporas es una de sus principales

características. Mientras que las bacterias o las formas vegetativas de las bacterias

esporuladoras sometidas a 80 ºC durante diez minutos (pasteurización) mueren, las

endósporas sobreviven e incluso soportan un calentamiento superior. Para

eliminarlas son necesarias técnicas de esterilización.

Germinación de las Endosporas

La germinación de una espora que lleva a la formación de una célula vegetativa

consiste de tres fases secuenciales:

Activación: Es una proceso reversible que condiciona a la espora para

germinar en un ambiente adecuado. Involucra la desnaturalización

reversible de algunas proteínas.

Germinación: Es una proceso irreversible en el que participan enzimas

que contiene la espora. En esta etapa hay actividad metabólica, y se

pierden las características de la espora como refractariedad y resistencia a

agentes físicos y químicos.

Page 4: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Crecimiento: Hay una alta actividad biosintética con síntesis de proteínas,

RNA mensajero y componentes estructurales como en una célula

vegetativa. Se desarrolla la pared celular. Se forma la célula vegetativa.

Clasificación de las bacterias esporuladas y no esporuladas:

BACTERIAS GRAM POSITIVAS AEROBIAS ESPORULADAS

Bacillus cereus

Características generales:

Es una bacteria perteneciente al género Bacillus.

Vista al microscopio, es un bastón alargado, gram

positivo que es mótil por medio de flagelos

perítricos. Las células son de 1,0-1,2 µm en el

diámetro x 3,0-5,0 µm de largo.

Bacterias Gram positivas

Esporuladas:

Aerobias:

Bacillus subtilis

Bacillus cereus

Anaerobias:

Clostridium botulinum

Desulfotomaculum nigrificans

No esporuladasAerobias:

Listeria monocytogenes

Erysipelothrix rhusiopathiae

Bacterias Gram negativas

No esporuladas

Aerobias:

Brucella abortus

Haemophilus influenzae

Anaerobias:

Plesiomonas shigelloides

Enterobacter aerogenes

Taxonomía

Reino: Bacteria

Filo: Firmicutes

Clase: Bacilli

Orden: Bacillales

Familia: Bacillaceae

Género: Bacillus

Especie: B. cereus

Page 5: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Una endospora simple puede formarse en posición central o paracentral sin hinchar

el esporangio.

Identificación:

El organismo esporula libremente en muchos medios

bajo condiciones bien aireadas, aunque las células

vegetativas pueden crecer anaeróbicamente. B.

cereus es capaz de utilizar glucosa, fructuosa y

trehalosa pero no las pentosas ni muchos azúcares

alcoholes. La mayoría de las cepas hidroliza

activamente el almidón, la caseína y la gelatina.

Colonias típicas de color rosado rodeadas de un halo de precipitación por la

lecitinasa fácilmente identificables. El crecimiento y la multiplicación de las células

vegetativas ocurren típicamente dentro del rango de temperaturas de 10-48 °C,

mientras que el óptimo se encuentra entre 28-35 °C.

Bacillus cereus en microscopio óptico 450x con Tinción de Gram.

Colonias de B. cereus en Agar BC (Bacillus cereus).

Page 6: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Sin embargo, se han identificado variantes psicrotróficas de B. cereus en leche cruda

y pasteurizada capaces de crecer e iniciar la descomposición a temperaturas tan

bajas como 5 °C. El pH óptimo de crecimiento se encuentra entre 4,3 y 9,3. El rango

mínimo de actividad del agua para el crecimiento vegetativo es de 0,912-0,950. Su

tiempo de generación en medio artificial a 30 °C es de 18-27 min. Cuando carecen

de nutrientes esporulan, lo cual le permite sobrevivir largos períodos de carencia

nutricional.

Hábitat:

Su hábitat natural el suelo, plantas y utensilios. Se encuentra en los alimentos

vegetales contaminan con frecuencia cereales, leche, budines, cremas

pasteurizadas y especias, entre otros alimentos. También se extiende fácilmente a

los cárnicos.

Patogenia:

Bacillus cereus causa intoxicaciones alimentarias a través de la ingesta de alimentos

contaminados. La bacteria puede producir dos enterotoxinas durante su crecimiento

exponencial: la toxina diarreica y la toxina emética. Que dan lugar a dos formas

clínicas distintas de intoxicación alimentaria: síndrome emético y síndrome diarreico.

Síndrome diarreico: provocado por la toxina diarreica, un grupo de proteínas

lábiles. Síntomas a partir de las 8-16 horas después del consumo del alimento,

siendo la duración de 12 a 24 horas. Dolor abdominal, copiosa diarrea acuosa y

tenesmo rectal, siendo la nausea y el vómito menos frecuentes.

Síndrome emético: provocado por la toxina emética, péptido termoestable. Período

de incubación entre 1-5 horas. Síntomas son naúseas y vómitos que duran 6-24

horas. Se asocia frecuentemente con arroz frito contaminado.

Page 7: Conferencia. Bacterias Esporuladas

La resistencia térmica de esporas de

B. cereus en un medio con elevado

contenido de agua vuelve a este

microorganismo un potencial peligro

para el desarrollo de una

intoxicación, si las medidas higiénico

sanitarias y de elaboración no son las

adecuadas.

La espora de B. cereus es un factor importante en la enfermedad alimentaria ya que

es más hidrófoba que cualquiera de las demás esporas de Bacillus spp., lo que le

permite adherirse a varios tipos de superficies. También poseen apéndices y/o pelos

que están implicados, al menos en parte, en la adherencia. Estas propiedades de

adherencia permiten que las esporas resistan los procedimientos normales de la

desinfección y también coadyuvan a la fijación a las células epiteliales.

Esporas teñidas de Bacillus cereus. Las flechas indican esporas de color verde en una célula vegetativa rosa.

Cultivo y alimento contaminado por Bacillus cereus.

Page 8: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Alimentos vinculados a brotes han sido carne y verduras cocidas, arroz frito o

hervido, crema de vainilla, sopas, leche y brotes de vegetales crudos.

Los niveles reportados de B. cereus en alimentos envenenados van de 102 a 108

UFC/g. Se cree que cualquier alimento con un excedente de 104 a 105 células o

esporas por gramo no pueden ser buenas para el consumo. Este número es algunas

veces excedido en gran cantidad de alimentos que en la actualidad son ingeridos.

Sin embargo, la enfermedad es relativamente rara considerando los altos niveles de

B. cereus (>105 UFC) que son consumidos. Esto probablemente se representa en

una gran variedad de potencial patogénico y en conjunto con la diversidad entre las

cepas B. cereus.

Tratamiento

La intoxicación alimentaria por Bacillus cereus es autolimitada y no requiere

tratamiento antimicrobiano, el tratamiento es sintomático y ocasionalmente es

necesario la rehidratación.

Brotes seleccionados

El 22 de septiembre de 1985, la oficina de Maine de salud fue notificada de una

enfermedad gastrointestinal en un restaurante japonés. Los clientes exhibieron

síntomas de la enfermedad, los resultados clínicos y del laboratorio apoyan

substancialmente al Bacillus cereus como la causa del brote.

Page 9: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Bacillus subtilis

Características generales:

Bacillus subtilis es una bacteria Gram positiva,

aerobio facultativa comúnmente encontrada en el

suelo. Miembro del género Bacillus, B. subtilis tiene la

habilidad para formar una resistente endospora

protectora, permitiendo al organismo tolerar

condiciones ambientalmente extremas.

Otros de los elementos que caracteriza a

los Bacillus spp. es la producción de

enzimas hidrolíticas que ayudan a mejorar

la utilización de los alimentos. Dentro de

estas se encuentran las proteasas,

amilasas y las glicosidasas que

descomponen las complejas moléculas de

los alimentos y las transforman en

nutrientes más simples. Estos

compuestos son absorbidos más

rápidamente por el animal o pueden ser empleados por otras bacterias

beneficiosas para el establecimiento de una microbiota intestinal balanceada.

El empleo de las bacterias del género Bacillus y sus endosporas también viene dado

por su capacidad de producción de enzimas, estas además de mejorar la digestión

en el hospedero, son capaces de inhibir el crecimiento microbiano de bacterias

dañinas.

Hábitat:

Debido a sus características, Bacillus subtilis, microorganismo cuyo hábitat natural

es el suelo, se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza.

Taxonomía

Reino: Bacteria

Filo: Firmicutes

Clase: Bacilli

Orden: Bacillales

Familia: Bacillaceae

Género: Bacillus

Especie: B. subtilis

Bacillus subtilis en microscopio óptico con Tinción de Gram.

Page 10: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Entre sus principales características se encuentra su capacidad para formar esporas

en diversas condiciones de estrés, crecer en un intervalo amplio de temperaturas

(desde 15 hasta 55 ºC), presentar motilidad, aerotaxis y velocidades de crecimiento

altas, sobrevivir en concentraciones salinas (hasta el 7% de NaCl), producir una

amplia variedad de antibióticos y enzimas hidrolíticas extracelulares.

Patogenia:

Se considera un organismo benigno, ya que no poseen

rasgos que causan enfermedades. No se considera

patógeno o tóxico para los seres humanos, animales o

plantas. El riesgo potencial asociado con el uso de esta

bacteria en las instalaciones de fermentación es bajo.

Sin embargo Es capaz de infectar y causar la

mortalidad delas larvas del mosquito

segundo, Anophelis culicifacies, que es el insecto

vector primario de malaria en el centro de la India.

Esporas de Bacillus subtilis.

Estructura de la toxina Subtilisina de Bacillus subtilis.

Page 11: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Produce una toxina extracelular conocido como subtilisina. Aunque subtilisina tiene

propiedades toxigénicas muy baja, este compuesto proteínico es capaz de causar

reacciones alérgicas en individuos que están expuestos repetidamente a la misma.

Aplicación de Bacillus Subtilis en la Industria:

Es una bacteria que se utiliza como fungicida para semillas de flores y

ornamentales, y en semillas de productos agrícolas, semillas de

algodón, hortalizas, maní y soja. La bacteria coloniza el sistema

radicular de la planta en desarrollo y por lo tanto compite con

determinados organismos de la enfermedad por hongos.

Se utilizan en la producción comercial de enzimas extracelulares, como

B. amyloliquefaciens alfa-amilasa.

En la segunda guerra mundial fue el medicamento contra la disentería.

Una tensión de B. subtilis conocido antes como Bacilo natto se utiliza

en la producción comercial de la delicadeza japonesa natto así como el

alimento coreano similar cheonggukjang.

B. subtilis tiene una actividad fungicida natural, y se emplea como

agente biológico del control.

Bacillus subtilis es usado como componente principal de la Serena de

que es un agente microbiano de control biológico, este bacilo protege

contra patógenos de las plantas de hongos y bacterias. Bacillus subtilis

se puede utilizar para controlar enfermedades de las plantas como el

tizón, manchas de roña, el moho gris, y varios tipos de moho.

Page 12: Conferencia. Bacterias Esporuladas

BACTERIAS GRAM POSITIVAS ANAEROBIAS ESPORULADAS

Clostridium botulinum

Características generales:

Clostridium botulinum es un bacilo recto o

ligeramente curvados de 2-10 x 0,5-2 micras, Gram

positivo, anaerobio que se encuentra por lo general

en la tierra y es la bacteria productora de la toxina

botulínica, el agente causal del botulismo. Es móvil

mediante flagelos peritricos, no produce cápsula y es

proteolítico y lipolítico.

Sus esporas son resistentes al calor y pueden sobrevivir en aquellos alimentos

mínima o inadecuadamente procesados. La espora es ovalada subterminal y

deforman la célula cuando se producen.

La vitalidad de la forma vegetativa es

débil, pero las formas de resistencia

(esporas) son muy resistentes, ya que se

requieren 110 °C durante 36 min, o 115

ºC durante 12 min, para su destrucción.

Habitat y distribución

Se encuentran comúnmente en los suelos y sedimentos marinos en todo el mundo y

C. botulinum se puede encontrar en cualquier región del mundo. Sus esporas están

distribuidas en la naturaleza tanto en el suelo, puede contaminar verduras cultivadas

en o sobre el suelo. También coloniza el tracto gastro-intestinal las vías de peces,

aves y mamíferos.

Taxonomía

Reino: Bacteria

División: Firmicutes

Clase: Clostridia

Orden: Clostridiales

Familia: Clostridiaceae

Género: Clostridium

Especie: C. botulinum

Clostridium botulinum en microscopio óptico con Tinción de Gram

Page 13: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Identificación

Medio de cultivos: Medio carne cocida (CMM), Agar hígado de ternera, Agar para

esporulación de Eklund; medio selectivo: Caldo tripticasa peptona glucosa extracto

de levadura (TPGY), caldo tripticasa peptona glucosa extracto de levadura

adicionado con tripsina (TPGYT).

Agar para asilamiento

de C. botulinum (CBI): El agar CBI

es una modificación del medio agar

McClung Toabe para el aislamiento

selectivo y diferencial

de C. botulinum, el cual puede

aislarse de los cultivos toxigénicos

de CMM, provenientes de muestras

de heces, líquido gástrico o alimentos.

Para identificar C. botulinum se realizan las siguientes. Pruebas bioquímicas:

Utilización de carbohidratos: glucosa, sacarosa, lactosa, manosa, ribosa,

arabinosa, adonitol, xilosa, trealosa, manitol.

Producción de lipasas y lecitinazas.

Indol.

Hidrólisis de la gelatina

Patogenia

Las intoxicaciones alimentarias por Clostridium botulinum se producen por la

ingestión de las toxinas producidas por el crecimiento microbiano en los alimentos, o

por el crecimiento del microorganismo. Los tipos de alimentos involucrados con el

botulismo varían según los hábitos de conservación y de alimentación en las

diversas regiones.

Colonias de Clostridium botulinum en agar CBI (izquierda) y en agar Sangre (derecha).

Page 14: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Cualquier alimento que sea adecuado para el crecimiento del microorganismo y la

producción de la toxina, cuyo procesamiento permita la supervivencia de la espora, y

que además, no sea calentado antes de su consumo, puede ser asociado con el

botulismo. Casi cualquier tipo de alimento cuyo pH no sea muy ácido (mayor a 4.6)

puede ser un soporte para el crecimiento de este microorganismo y para la

producción de su toxina.

La toxina botulínica ha sido hallada en una considerable variedad de alimentos, tales

como el maíz enlatado, la pimienta, los frejoles verdes, las sopas, la remolacha, los

espárragos, los hongos, las olivas maduras, la espinaca, el atún, los pollos, los

hígados de pollo así como los patés de hígado, las carnes para merienda, los

jamones, las salchichas, las berenjenas rellenas, la langosta y además el pescado

ahumado y salado. La miel es la principal reserva dietética de las esporas del

Clostridium botulinum relacionadas con el botulismo infantil.

Desulfotomaculum nigrificans

Características generales:

Son bacterias en forma de bacilos Gram-

positivas, anaerobias obligadas, 3-6 um de

largo; móviles, son bacterias sulfato reductoras,

que utilizan el sustrato H2, Lactato, Propionato,

Ácidos grasos, Etanol, La fuente de energía se

oxida hasta acetato, que se excreta. Son

bacterias formadoras de endosporas.

Hábitat:

Este microorganismo se encuentra en la tierra, aguas negras, termales, azúcar,

cereales, vegetales y productos enlatados. En el caso del maíz enlatado las latas no

se deforman con la presencia del gas, pero al abrirlas se presenta olor

desagradable, con el contenido color negro, alteración de la superficie de los

Taxonomía

Dominio: Bacteria

Filo: Firmicutes

Clase: Clostridia

Orden: Clostridiales

Familia: Peptococcaceae

Género: Desulfotomaculum

Especie: D. nigrificans

Page 15: Conferencia. Bacterias Esporuladas

guisantes con manchas de color negro, partículas negras flotando, el

ennegrecimiento se debe a la reacción del ácido sulfhídrico con el hierro de la lata

dando coloración negruzca, cuando las latas no están barnizadas adecuadamente.

Patogenia:

Es un tipo de bacterias reductoras de sulfato que

puede echar a perder los alimentos conservados

mal procesados. Su presencia se puede identificar

por el desprendimiento de gas sulfuro de

hidrógeno, que tiene un olor a huevos podridos.

La alteración se presenta en chícharos,

maíz, hongos y alimentos de origen vegetal.

El microorganismo es ligeramente proteolítico, no

es sacarolítico, degradan la cisterna produciendo

ácido sulfhídrico. La temperatura máxima de

crecimiento esa 65-70°C. Dependiendo de la cepa, con un óptimo de 55c. y un

mínimo de 30c.

El pH óptimo para el crecimiento oscila entre 7.2 y 7.4, no se presenta crecimiento a

5.8 o a 7.6, las esporas de este microorganismo sobreviven a 100°C por 8 horas

de exposición a un pH 7.0. Se ha reportado sobrevivencia de esporas en maíz

procesado a 118°C por 70 min.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS AEROBIAS NO ESPORULADAS

Listeria monocytogenes

Características generales:

Listeria monocytogenes es un bacilo Gram-

positivo, aerobio y anaerobio facultativo, móvil,

No esporulado. Produce hemólisis en placas de

agar sangre. La temperatura óptima de

crecimiento está entre 30º C y 37º C.

Taxonomía

Dominio: Bacteria

Filo: Firmicutes

Clase: Bacilli

Orden: Bacillales

Familia: Listeriaceae

Género: Listeria

Especie: L. monocytogenes

Bacilo de D. nigrifcans bajo microscopio electrónico.

Page 16: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Puede ser aislada del suelo, del forraje ensilado y de otras fuentes ambientales.

L. monocytogenes es altamente resistente a los efectos de la congelación, el secado

y el calentamiento. Esta última característica es especialmente notoria ya que se

trata de una bacteria que no forma esporas.

Identificación bioquímica y aislamiento:

Se desarrolla muy bien en agar sangre generando

colonias grisáceas y presentando beta hemolisis.

Es un bacilo, catalasa positivo, móvil y se

evidencia en medios de cultivo semisólido donde a

los 25 °C el microorganismo forma una especie de

sombrilla. L. monocytogenes presenta un

metabolismo fermentativo al generar ácido a partir de la glucosa y por producir

acetona, lo que conlleva a una reacción de Voges-Proskauer positiva y no fermenta

la xilosa.

L. monocytogenes se aísla habitualmente de muestras estériles (LCR,

hemocultivos). Las muestras no estériles se pueden refrigerar para favorecer el

crecimiento de esta bacteria sobre el resto.

Patogenicidad:

L. monocytogenes es un patógeno intracelular que posee: factores antifagocitarios

de superficie, adhesinas, listerolisina O (hemolisina) que le permite romper la

membrana del fagolisosoma, catalasa y superóxido dismutasa, que le permiten

sobrevivir en el interior de los leucocitos, filamentos de actina (movimiento) y

sideróforos (replicación).

Cultivo en sangre de caballo de Listeria monocytogenes.

Page 17: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Puede crecer en los macrófagos, las células epiteliales y los fibroblastos en cultivo.

Tras la ingesta de alimentos contaminados, L. monocytogenes puede sobrevivir a la

exposición a enzimas proteolíticas, ácido gástrico y sales biliares. Principalmente

contiene una proteína denominada internalina la cual interactúa con el receptor de

las células del hospedero para la adhesión celular, esta se denomina E-cadherina la

cual induce la fagocitosis, siendo estas específicas para cada tejido.

La presencia de internalinas facilita la entrada del microorganismo a las células. El

organismo reacciona creando una especie de fagosoma con el fin de encapsular la

bacteria pero esta produce listeriolisina O y fosfolipasas C que le permiten destruir

el fagosoma hidrolizando los lípidos de su membrana. Esta listeriolisina esta

codificada por el gen hly. Al estar dentro del citosol L. monocytogenes utiliza una

proteína de superficie denominada ActA la cual genera la polimerización intracelular

de la actina.

Estos filamentos se reorganizan en una larga cola que se extiende desde un solo

extremo de la bacteria. Mediante los movimientos de la cola el microorganismo migra

por el citoplasma hacia la membrana de la célula huésped.

Ciclo biológico de Listeria monocytogenes.

Page 18: Conferencia. Bacterias Esporuladas

En la periferia se forman protrusiones (filópodos) que pueden penetrar en las células

adyacentes y que permiten el ingreso de la bacteria. Esto explica la necesidad de

una inmunidad mediada por células. Puesto que los microorganismos nunca son

extracelulares, los anticuerpos humorales del huésped no serían efectivos.

Parámetros que regulan el desarrollo de Listeria en los alimentos:

Mínima Óptima Maxima

Temperatura ºC -0.4 37 45

pH 4.39 7.0 9.0

Actividad de agua 0.92 - -

Merecen enfatizarse la baja temperatura a que se multiplica la bacteria como el

amplio rango de pH al que crece. La bacteria se ha aislado del agua de deshielo de

congeladoras. L. monocytogenes es relativamente resistente al calor si se encuentra

en concentraciones muy elevadas del orden de 105 a 106 UFC/ml pero en bajos

niveles se destruye a temperaturas de pasterización (71ºC por 15 segundos).

LISTERIOSIS

La listeriosis es una enfermedad de

transmisión alimentaria que se presenta

como casos esporádicos ó en brotes; a

pesar de la amplia presencia de la

bacteria en el ambiente la enfermedad no

es frecuente. La listeriosis es considerada

una infección oportunista; es decir, se

presenta en individuos vulnerables.

Presenta dos tipos de cuadros:

1. Invasivo

2. Gastroentérico

Listeria monocytogenes en microscopio óptico con Tinción de Gram.

Page 19: Conferencia. Bacterias Esporuladas

El cuadro más severo, presenta severas manifestaciones invasivas que dan lugar a

meningitis con o sin septicemia, ó sólo septicemia. Las manifestaciones usuales son:

septicemia, meningitis, conjuntivitis, encefalitis, endocarditis, partos prematuros,

abortos, nacidos muertos. La enfermedad tiene un 20 % de letalidad. El período de

incubación es de 7 a 30 días y el 85 a 90 % requiere hospitalización.

Por otro lado, el cuadro gastroentérico puede presentar desde portadores sin

síntomas hasta individuos con signos gastrointestinales. Los grupos vulnerables

son individuos inmunocomprometidos, embarazadas, neonatos y fetos, enfermos

crónicos y gerontes.

Tratamiento:

Ampicilina a dosis altas o asociadas a gentamicina. En la granulomatosis

infantiséptica se debe de añadir gentamicina. En pacientes alérgicos se recomienda

cotrimoxazol.

Erysipelothrix rhusiopathiae

Características generales:

Erysipelothrix rusiopathiae es un anaerobio

facultativo, pero algunas cepas se ven favorecida

por la incubación en 3-5% de C02. Este

microorganismo puede crecer en un amplio rango

de temperatura (5-44°C) pero su crecimiento

optimo se manifiesta entre 30-37°C.

Identificación:

Erysipelothrix es catalasa, oxidasa, rojo de metilo, indol y Voges Proskauer negativo.

Fermenta hidratos de carbono con producción de ácido, pero sin gas. La

característica más relevante es la producción de H2S.

Taxonomía

Dominio: Bacteria

Filo: Firmicutes

Clase: Erysipelotrichi

Orden: Erysipelotrichales

Familia: Erysipelotrichaceae

Género: Erysipelothrix Especie: E. rhusiopathiae

Page 20: Conferencia. Bacterias Esporuladas

En agar sangre, a las 24 horas las

colonias de E. rhusiopathiae son

diminutas. Una característica relevante

del cultivo de E. rhusiopathiae es que

generalmente a partir de las 48 se

pueden observar dos tipos de colonias.

Una colonia en general más pequeña de

tipo lisa (S) y otra tipo rugosa (R). Las

colonias tipo S miden aproximadamente

0,1 mm de diámetro, son convexas, con

una superficie lisa brillante y de bordes

enteros.

Las colonias R son ligeramente más grandes 0,2-0,4 mm de diámetro, de superficie

mate, aplanada y bordes irregulares. La morfología de la célula está estrechamente

ligada al tipo de colonia. Las células de las colonias S se observan como bacilos

pequeños, rectos o ligeramente curvados con extremos redondeados. Su agrupación

puede ser en pares, cadenas cortas o empalizada tipo difteromorfos. Las células de

las colonias R se observan predominantemente como bacilos largos y filamentosos.

Hábitat:

Se encuentra ampliamente distribuida en el

mundo, puede ser comensal o patógeno para

una gran variedad de animales vertebrados e

invertebrados. Los casos de infección en el

hombre son raros, en general están

asociados a la exposición ocupacional y

puede ocurrir por contacto con animales

infectados, sus secreciones, residuos o

productos, o materia orgánica contaminada.

Colonias de Erysipelothrix rhusiopathiae en agar sangre.

Tinción de Gram de E. rhusiopathiae.

Page 21: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Patogenia:

En los seres humanos, las infecciones causadas por E. rhusiopathiae se presentan

comúnmente como una mancha cutánea rojiza denominada erisipeloide de

Rosenbach.

E. rhusiopathiae puede causar celulitis, principalmentre entre personas que

manipulan pescado o carne cruda. La bacteria se introduce en el cuerpo típicamente

a través de abrasiones en la piel. La bacteremia y endocarditis son secuelas muy

poco frecuentes. Debido a que es una enfermedad rara en humanos, las infecciones

por E. rhusiopathie son a menudo incorrectamente identificadas en el momento de la

consulta.

BACTERIAS GRAM NEGATIVAS AEROBIAS NO ESPORULADAS

Brucella abortus

Características generales:

Brucella abortus son bacilos Gram negativos, no poseen flagelos o pilis, no son

encapsulados y no son productores de esporas. Esta bacteria heterotrófica presenta

una respiración tanto aerobia como anaerobia por lo que es facultativa.

Hábitat:

Siendo un parasito obligado, esta especie del género Brucella tiene como huésped

natural preferido al bovino, que a la vez sirve como reservorio de la infección. Esta

bacteria tiene predilección por la placenta, fluidos fetales y testículos.

Taxonomía

Dominio: Bacteria

Filo: Proteobacteria

Clase: Proteobacteria alfa

Orden: Rhizobiales

Familia: Brucellaceae

Género: Brucella

Especie: B. abortus

Page 22: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Es excretada en leche y puede permanecer viable en leche, agua y suelos húmedos

más de 4 meses.

Aislamiento e Identificación:

El aislamiento de B. abortus debe llevarse a cabo en medios selectivos y

enriquecidos; aunque crece buen en medios como agar sangre, los contaminantes

presentes en la muestra pueden crecer más rápidamente y enmascarar la presencia

de aquella. Uno de los medios utilizados es Agar-triptosa suero con adición de

antibióticos. La bacteria es de lento crecimiento y normalmente las colonias

características se ven después de 3-5 días de incubación en microaerofilia (10% de

CO2). En el primer aislamiento las colonias son usualmente lisas, de apariencia

opaca y de un diámetro de 2 -3 mm.

Tradicionalmente la identificación de B. abortus se lleva a cabo con unas pocas

pruebas bioquímicas que junto a la apariencia de las colonias y test de coloración de

la bacteria servían para determinar que el aislamiento se correspondía por el B.

abortus. La bacteria es un pequeño bacilo Gram negativo que a menudo ofrece la

apariencia de un cocobacilo.

Tinción de Gram de B. abortus.

Page 23: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Patogenia:

La transmisión es por contacto

directo o indirecto con

excretores efectivos y la ruta de

transmisión más usual es la

oral, aunque puede ocurrir por

vía conjuntival, in útero o por

inhalación.

La brucelosis es esencialmente

una enfermedad de animales

sexualmente maduros, teniendo

predilección por el tracto

reproductivo, especialmente en

el útero grávido. Hay una

reacción piogranulamatosa en

la placenta afectada y el aborto

ocurre en la segunda mitad de

la gestación.

Las vacas abortan usualmente una sola vez y aunque se desarrolla un cierto grado

de inmunidad los animales permanecen infectados y gran número de brucellas

pueden ser excretadas en subsecuentes pariciones.

En el ganado se conoce como aborto contagioso. Su presencia en una granja no

infectada aún, se detecta por presencia de abortos.

Penetra en el interior del organismo a través de la piel dañada o por las mucosas

(digestiva, conjuntival o respiratoria). Son opsonizados y luego fagocitados por

polimorfonucleares (PMN).

Son conducidos a ganglios linfáticos regionales, si el microorganismo resiste el

ataque del sistema inmunitario, se establece la infección crónica: pasa a la sangre,

originando una bacteremia, y se localiza luego en los órganos del sistema retículo

endotelial (bazo, hígado, médula ósea, ganglios linfáticos y riñones).

Ciclo biológico de B. abortus.

Page 24: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Es un parásito intracelular facultativo de este sistema. Puede evadir la respuesta

inmune humoral frente a la infección. Sobrevive intracelularmente a no ser que se

desarrolle inmunidad celular específica.

Los componentes de la envoltura celular de Brucella tienen mucho que ver con la

resistencia. La membrana externa bacteriana representa su primera barrera

defensiva; gracias a ella, las bacterias gramnegativas resisten la acción tóxica de

sales biliares, ácidos grasos y glicéridos, así como de enzimas proteolíticas y

glicosidasas.

Una vez ingerida, o internalizada,

una bacteria, el sistema de defensa

insta la fusión del fagosoma con los

lisosomas para formar

fagolisosomas, los orgánulos donde

se localizan la mayoría de los

agentes tóxicos bactericidas. Pero

puede permanecer en el fagosoma

intacto y bloquear la fusión posterior

con el lisosoma. Ello le protege de la acción de los péptidos catiónicos y enzimas

líticas presentes en los gránulos lisosómicos. Paralelamente, Brucella debe resistir

contra potentes intermediarios del oxígeno (peróxido de hidrógeno y radicales

hidroxilos), formados en los fagocitos durante la explosión respiratoria que

acompaña a la fagocitosis para la destrucción de las bacterias ingeridas. Se sabe

que la superóxido dismutasa y la catalasa, enzimas presentes en Brucella, se

integran en el mecanismo de defensa frente a la toxicidad oxidativa.

Otra forma de evadir este mecanismo bactericida del huésped sería la de inhibir tal

explosión respiratoria, o provocarla muy débilmente y con corta duración. Se trata de

la estrategia adoptada principalmente por B. abortus. Parece guardar relación con la

presencia de la cadena O del LPS y con la liberación de nucleótidos.

Mecanismo de acción de B. abortus.

Page 25: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Esta bacteria se transmite por ingestión de leche o quesos contaminados o por

contacto directo con animales infectados o sus productos (manejo de sangre, orina,

descargas vaginales, fetos abortados y placentas de animales infectados). Por esto

la gente que trabaja en mataderos o granjas, como también los veterinarios están en

riesgo de adquirirla y diseminarla entre el ganado sano cuando no se toman las

medidas sanitarias adecuadas.

BRUCELOSIS

La brucelosis, también llamada fiebre malta o fiebre ondulante, es una enfermedad

bacteriana (infecciosa) que ataca a varias especies de mamíferos dentro de los

cuales se encuentra el hombre, causando la brucelosis humana. También infecta a

otros mamíferos dentro de los cuales se encuentran algunos con alta relevancia

económica como pueden ser los ganados bovino, equino, porcino, ovino y caprino y

a otras especies silvestres.

Las personas pueden infectarse al ingerir leche de vaca, de oveja o de cabra o sus

derivados (manteca, quesos) que contengan microorganismos viables, es decir

productos que hayan sido fabricados con leche sin pasteurizar. También se adquiere

por contacto directo con animales infectados o sus productos (manejo de sangre,

orina, descargas vaginales, fetos abortados y placentas de animales infectados),

razón por lo que se considera que es una enfermedad profesional de veterinarios,

carniceros, granjeros y ganaderos.

En el ganado bovino, es causada principalmente por B. abortus con menor

frecuencia por B. melitensis y en raras ocasiones por B. suis. La enfermedad afecta

los órganos reproductores y provoca abortos en el último tercio de la gestación,

disminución de la producción láctea, alargamiento del periodo inter-parto del ganado

e infertilidad.

En el humano, esta enfermedad afecta varios órganos o sistemas del cuerpo, y

presenta diversos signos y síntomas inespecíficos, por ello es difícil diagnosticarla

debido a que puede confundirse con otras patologías.

Page 26: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Tratamiento

La brucelosis es una enfermedad de curso crónico con graves repercusiones en la

salud pública y animal. Provoca grandes pérdidas económicas debido a que su

tratamiento propicia altos costos, y a las restricciones tanto en animales infectados

como a sus productos.

La vacuna cepa 19, como agente inmunógeno, ha sido reconocida por más de 30

años, siendo ampliamente usada en diferentes países para vacunar terneras, su

eficiencia en bovinos adultos está bien documentada.

Haemophilus influenzae

Características generales:

Haemophilus influenzae es un pequeño bacilo

Gram negativo inmóvil, que no forma esporas,

con requerimientos nutricionales exigentes,

crece aeróbica o anaeróbicamente. El

crecimiento aeróbico requiere la presencia de

hemina (factor X) y nicotinamida adenina

dinucleótida (factor V). El Haemophilus

influenzae es un patógeno exclusivamente

humano.

Patogenia:

Existen formas capsuladas y no capsuladas del bacilo, identificándose seis tipos

distintos en las formas capsuladas, denominadas con las letras “a” a la “f”. El ser

humano es el único reservorio de Haemophilus influenzae tipo b. El Hib causa

diversas patologías que se han clasificado en dos grupos: infecciones invasivas

(sepsis, meningitis, epiglotitis, celulitis, neumonía y osteoartritis) y formas clínicas no

invasivas.

Taxonomía

Dominio: Bacteria

Filo: Proteobacteria

Clase: Gammaproteobacteria

Orden: Pasteurellales

Familia: Pasteurellaceae

Género: Haemophilus

Especie: H. influenzae

Page 27: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Haemophilus influenzae es un habitante normal

de la vía respiratoria superior y ocasionalmente se

encuentra colonizando el tracto gastrointestinal y

genital. A partir de su nicho en la nasofaringe

invade estructuras anatómicas vecinas, el torrente

vascular y la vía respiratoria inferior, produciendo

las formas invasivas de infección representadas

por los cuadros clínicos de otitis media,

meningitis, nasofaringitis, epiglotitís, conjuntivitis,

septicemia, pericarditis, endocarditis, peritonitis,

artritis, neumonía y otras.

H. influenzae pueden transmitirse por contacto con moco o secreciones de la nariz y

la garganta de una persona infectada persona. Los síntomas aparecen

generalmente en menos de 10 días después de la exposición, generalmente dentro

de 2 a 4 días. Los síntomas de la meningitis pueden incluir fiebre, vómitos, apatía, y

una rigidez en el cuello o la espalda. Otros síntomas dependen de la parte afectada

del cuerpo.

H. influenzae en agar chocolate.

H. influenzae en microscopio óptico con tinción de Gram.

Page 28: Conferencia. Bacterias Esporuladas

BACTERIAS GRAM NEGATIVAS ANAEROBIAS NO ESPORULADAS

Plesiomonas shigelloides

Características generales:

P. shigelloides es una bacteria con forma de un

bacilo corto, Gram-negativo, no esporulado,

anaerobio facultativo, es catalasa y oxidasa

positivo. Su metabolismo es tanto respiratorio

como fermentativo, es capaz de utilizar como

fuente de carbono a la glucosa y al inositol.

Esta bacteria crece a temperaturas que van

desde 8 a 10 °C hasta 40 a 55 ºC, teniendo

como óptima de 25 a 35 ºC .El intervalo de pH

al que crece es de 4.5 a 9.0, además de que

crece a 0 y 3% de cloruro de sodio.

Hábitat:

El ambiente donde vive es acuático, por consiguiente, es posible encontrarla en

agua dulce como ríos, arroyos, estanques, lagos, lagunas; en agua de estuarios y en

agua de mar; incluso se ha encontrado en lugares de recreación acuática, así como

en acuarios.

La podemos encontrar principalmente en alimentos de origen acuático como jaiba,

camarón, ostiones y peces, ya sea de agua dulce o de mar, pero también en

vegetales que se rieguen con aguas contaminadas por esta bacteria.

Los reservorios, es decir, los organismos en los que puede vivir sin causarles algún

daño son, los productos de la pesca como pescado, ostiones, mariscos, además de

aves, mamíferos tales como perros, gatos, vacas, cabras, cerdos, monos y reptiles.

Taxonomía

Dominio: Bacteria

Filo: Proteobacteria

Clase: Gammaproteobacteria

Orden: Enterobacteriales

Familia: Enterobacteriaceae

Género: Plesiomonas

Especie: P. shigelloides

Page 29: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Identificación y medios de cultivo:

Diferentes medios de cultivo se han utilizado para el aislamiento de esta bacteria,

como el agar Salmonella-Shigella (SS). También se ha utilizado el agar MacConkey,

el agar citrato desoxicolato (DC), el agar xilosa lisina desoxicolato (XDC), el agar

entérico Hektoen, el agar lactosa desoxicolato a partir de muestras clínicas y el agar

Endo.

Sin embargo, estos medios presentan dificultades para diferenciar a P. shigelloides

de otras bacterias. Para estos problemas se recomienda el uso del agar inositol

verde brillante sales biliares (IBB).

Patogenia:

Puede producir gastroenteritis, esto es, cuando la persona presente fiebre,

escalofríos, dolor abdominal, náuseas, diarrea y vómito. Pero cuando las personas

no están sanas, puede provocar enfermedades más graves que no son intestinales

como: meningitis, osteomielitis, artritis, pseudoapendicitis.

Tinción de Gram de P. shigelloides.

Page 30: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Las herramientas de las que se ayuda P. shigelloides para provocar la

gastroenteritis o las otras enfermedades: dos enterotoxinas, una resistente al calor y

la otra no; una beta-hemolisina, la cual actúa sobre los eritrocitos de varias especies

de mamíferos, incluyendo el humano; una citolisina resistente a 100°C por 10

minutos; una tetrodotoxina, la cual es una toxina que actúa a nivel de Sistema

Nervioso Central; y plásmidos, los cuales pueden ser transferidos de otras bacterias

patógenas.

Tratamiento:

Esta bacteria es resistente a antibióticos como las penicilinas, pero es sensible a

oxiquinolonas, cefalosporinas, cloranfenicol, tetraciclinas y ácido nalidíxico, entre

otros. Por lo cual, es recomendable que el tratamiento se siga con antibióticos a los

que esta bacteria sea sensible.

P. shigelloides es destruida a 60 °C por 30 minutos. Constatando que, cualquier

alimento que sea cocinado adecuadamente, no contendrá esta bacteria viva.

Enterobacter aerogenes

MORFOLOGIA:

Son bacilos Gram negativos, anaerobio

facultativo, perteneciente a la familia

Enterobacteriaceae. Entre sus principales

características están las siguientes: Oxidasa

negativo, Catalasa positivo, Citrato positivo, Indol

negativo. E. aerogenes es una bacteria patógena

que provoca infecciones oportunistas en piel y

otros tejidos.

Taxonomía

Dominio: Bacteria

Filo: Proteobacteria

Clase: Gammaproteobacteria

Orden: Enterobacteriales

Familia: Enterobacteriaceae

Género: Enterobacter

Especie: E. aerogenes

Page 31: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Hábitat:

Se la puede encontrar en: Suelos, aguas de consumo, aguas residuales, tracto

gastrointestinal, y productos lácteos.

Identificación y Medios de cultivo:

El diagnóstico de se determina por medio de las pruebas bioquímicas (TSI, LIA,

MIO, Citrato de Simmons, Ureasa e Indol .El cultivo se lleva a cabo en agar nutritivo

o EMB, dando lugar a colonias grandes, convexas y blancas (agar nutritivo) o

colonias grandes y convexas de color rojo metálico o negro (EMB).

Patogenia:

Suelen presentar los siguientes síntomas:

Infección en las vías

respiratorias menores.

Infecciones cutáneas.

Infecciones del tracto urinario.

Endocarditis.

Infecciones intrabdominales.

Artritis séptica.

Osteomielitis.

Infecciones en los ojos.

E. aerogenes en agar EMB.

Page 32: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Tratamiento:

Muchas de las infecciones provocadas por E.

aerogenes son resistentes a tratamientos con

antibióticos, por lo que lo recomendable es una

intervención quirúrgica. Las infecciones en la piel

provocados por E. aerogenes se han tratado

exitosamente con neomicina.

Las endosporas bacterianas son mecanismos de sobrevivencia de ciertos

grupos de bacterias, en donde se forman cuando la bacteria se queda sin

nutrientes, y estas forman células vegetativas que son resistentes al calor,

radiación, desecación y tratamientos químicos.

Se puede realizar una identificación bacteriana partir del conocimiento de la

bacteria: si es formadora de endosporas o no, respiración aerobia o anaerobia

y su diferenciación mediante Tincion de Gram.

Los anaerobios esporulados proceden principalmente del suelo, por lo que se

encuentran ampliamente distribuidos en la leche, hortalizas y otros productos

alimenticios. También es posible encontrarlos en la carne, ya que algunas

especies también se desarrollan en los intestinos del hombre y animales.

Dentro de la clasificación de bacterias Gram positivas anaerobias no

esporuladas destaca Clostridium botulinum, que se trata de una bacteria cuyo

crecimiento queda inhibido a pH menor de 4,5. Es el más resistente de los

microorganismos que intoxican los alimentos, por lo que la industria de

enlatado admite de forma general que todos los productos no ácidos tratados

deben cumplir los requerimientos básicos necesarios para destruir a C.

botulinum (esterilización durante 2,8 minutos a 121,1 ºC).

E. aerogenes: Colonias azul metálicas.

Page 33: Conferencia. Bacterias Esporuladas

Listeria monocytogenes es una bacteria ampliamente difundida en la

naturaleza. Su presencia en los alimentos está determinada por su extensa

distribución en el ambiente (tierra, aguas servidas, materia fecal, vegetación,

ensilados y entorno de la producción de alimentos) lo que confiere una

importante oportunidad para contaminarlos.

La brucelosis es una infección originada por una bacteria

denominada Brucella. En el ganado bovino, es causada principalmente por B.

abortus En el ser humano se transmite por ingestión de leche o quesos

contaminados o por contacto directo con animales infectados o sus productos

(manejo de sangre, orina, descargas vaginales, fetos abortados y placentas

de animales infectados). Por esto la gente que trabaja en mataderos o

granjas, como también los veterinarios están en riesgo de adquirirla y

diseminarla entre el ganado sano cuando no se toman las medidas sanitarias

adecuadas.

Descubrimos que aquellas bacterias que no tienen mucha resistencia a

medios extremos son las que producen las esporas para mantener viable de

esta forma su vida, mientras que las no esporuladas, generalmente son más

resistentes a las condiciones extremas ya que, si no sobreviven no tienen otra

manera de mantener viable su supervivencia.