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INSTITUTO TECNOLGICO DE MORELIA Jos Mara Morelos y Pavn

COLORIMETRAQumica analtica II Eliel Rafael Romero GraciaINGENIERA BIOQUMICA5st SEMESTRE MARA CRISTINA VIEYRA BRAVO No control: 09120036 Mircoles 04 de Mayo del 2011

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ContenidoINTRODUCCIN....................................................................................................................................................... - 3 HISTORIA ................................................................................................................................................................... - 6 COLOR.......................................................................................................................................................................... - 7 Qu es el color? ................................................................................................................................................. - 7 Propiedades del color....................................................................................................................................... - 7 Tonos coloreados y no coloreados.............................................................................................................. - 7 El crculo cromtico .......................................................................................................................................... - 8 CIRCULO CROMTICO .......................................................................................................................................... - 9 Procedimiento de la medida del color..................................................................................................... - 10 LEY DE LAMBERT-BEER .................................................................................................................................... - 11 Leyes de la absorcin de energa radiante ............................................................................................ - 11 Transmitancia.................................................................................................................................................... - 13 Absorcin ............................................................................................................................................................ - 13 Cromatografa y la ley de Lambert y Beer ............................................................................................. - 14 Medicin de la extincin ............................................................................................................................... - 17 APLICACIN DE LA COLORIMETRA ............................................................................................................ - 20 Industria de la impresin ............................................................................................................................. - 20 Determinacin colorimtrica de fosfato inorgnico.......................................................................... - 21 CONCLUSIN .......................................................................................................................................................... - 22 REFERENCIAS ........................................................................................................................................................ - 22 -

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INTRODUCCINLa luz es un tipo de radiacin electromagntica. Esta radiacin puede presentar diferentes longitudes de onda. La luz visible puede ser separada en los colores del arco iris o del espectro con ayuda de un prisma (del violeta al rojo). El ojo humano no puede apreciar los colores ultravioletas ni los infrarrojos.

La colorimetra es una de las tcnicas empleadas con mayor asiduidad en los laboratorios de Bioqumica. Esta tcnica suministra informacin cualitativa y cuantitativa sobre sustancias en disolucin. El colormetro es un instrumento diseado para dirigir un haz de luz paralela monocromtica a travs de una muestra lquida y medir la intensidad del haz luminoso emergente. Las tcnicas colorimtricas se basan en la medida de la absorcin de radiacin en la zona visible por sustancias coloreadas. En algunas ocasiones, la muestra que deseamos determinar no posee color por s misma; en tal caso, es preciso llevar a cabo un desarrollo de color empleando reactivos que den lugar a sustancias coloreadas con la muestra que interesa estudiar. La colorimetra es la ciencia que estudia la medida de los colores y que desarrolla mtodos para la cuantificacin del color, es decir la obtencin de valores numricos del color. Se denomina equipos de colormetro a aquellos aparatos en los que la longitud de onda con la que vamos a trabajar se selecciona por medio de filtros pticos. En principio, todos los sistemas que cuantifican el color a partir de tres variables poseen aspectos colorimtricos.

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Un color queda definido por 3 parmetros: Luminancia: medicin luminosa de la intensidad de la radiacin. Subjetivamente se habla de luminosidad, y se dice que un color tiene mucho brillo (claro) o poco brillo (oscuro). Se le puede simbolizar con L y su unidad de medida es [Cd/m2]. Longitud de onda predominante: es la longitud de la radiacin monocromtica correspondiente. Subjetivamente se habla de matiz o tono y se dice que un color es amarillo, verde, azul, etc. Se le puede simbolizar con d y su unidad es [nm] o [mm] o tambin el Angstrom (un Angstrom 10-10m). Pureza: magnitud de la dilucin de un color en blanco. Se representa por un ndice variable entre 0 y 1. Subjetivamente se habla de saturacin. Y se dice por ejemplo que un color rosa (mezcla de rojo con blanco) est poco saturado en contraposicin de un rojo que s lo est. Se lo puede simbolizar con .

La fraccin de luz incidente absorbida por una solucin a una longitud de onda est relacionada con el paso ptico y con la concentracin de la especie absorbente. Estas dos relaciones estn combinadas en la ley de Lambert-Beer: En ptica, la ley de Beer-Lambert, tambin conocida como ley de Beer o ley de Beer-LambertBouguer es una relacin emprica que relaciona la absorcin de luz con las propiedades del material atravesado. La ley de Beer-Lambert relaciona la intensidad de luz entrante en un medio con la intensidad saliente despus de que en dicho medio se produzca absorcin. La relacin entre ambas intensidades puede expresarse a travs de la siguiente relacin:

y

Son las intensidades saliente y entrante respectivamente. Es la absorbancia, que puede calcularse tambin como: Es la longitud atravesada por la luz en el medio, Es la concentracin del absorbente en el medio. Es el coeficiente de absorcin: Es la longitud de onda de la luz absorbida. Es el coeficiente de extincin.

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La aplicacin obvia de la ley de Lambert-Beer es el uso del colormetro para determinar la concentracin de una gran variedad de molculas que absorben luz (p. ej. Carotenos, clorofila, hemoglobina, etc.). La tcnica se extiende a sustancias no coloreadas como azcares o aminocidos despus de alguna reaccin capaz de convertir sustancias incoloras en derivados coloreados

Justamente mediante el empleo de las tcnicas para la realizacin de un anlisis colorimtrico se pondr arriba a un mtodo qumico de los materiales superficiales que son el objeto de los distintos anlisis y cuyo ejemplo radical es el anlisis de la respuesta espectral. En cuanto al origen de la colorimetra, cabe aclararse que Hermann Grassmann, un matemtico de Alemania, fue el autor de una serie de leyes que mencionaban las vicisitudes de las mezclas aditivas de los colores. Es decir, Grassmann enunci a travs de esas leyes que todos los colores pueden efectivamente ser expresados como si se tratara de una suma de los tres colores primarios, o sea, de los colores que no pueden ser de ninguna manera obtenidos mediante la mezcla de colores x. Cuando se aplica la Ley de Grassmann, lo que se obtiene es una ecuacin unitaria del color que, cuando se la representa, da como resultado una forma ms que similar a la de un tringulo. De esta forma, la colorimetra desarrolla continuamente una serie de mtodos, con el objetivo de realizar una cuantificacin de los colores, siempre teniendo en la meta a la obtencin de todos los valores numricos con los que cuentan los colores. La colorimetra se basa en el empleo de un instrumento, que se encuentra constituido por una serie de elementos: tal es el caso de la fuente de radiacin (se trata de una luz blanca); de un sistema dispersivo como lo son las rendijas de entrada y salida, junto con la red de difraccin; del detector que es una especie de fototubo encargado de transformar la seal luminosa en una seal elctrica; y, por el ltimo, del sistema que se ocupa de las medidas de la absorcin, una vez que la misma haya sido previamente amplificada, es decir, se trata de un conversor analgico o digital.

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HISTORIALa colorimetra ha tenido una gran expansin debido a la industria cosmtica por el estudio de sombras, tintas, polvos y colores para el cabello. En la actualidad, otra importante expansin se ha debido a los problemas de grficos por ordenador y a la reproduccin de colores, as como por el anlisis y la documentacin de superficies antiguas, como cuadros y policromados. Utilizando tcnicas para el anlisis colorimtrico es posible llegar a un anlisis qumico del material superficial que se est analizando, como el anlisis de la respuesta espectral. Cuando la percepcin del color fue reconocida hace mucho tiempo, se estableci la correlacin entre la fsica y la fisiologa. En 1704, el fsico Isaac Newton ya haba hecho una contribucin clave a la espectrofotometra y a la colorimetra con sus tentativas de dividir la luz blanca en colores espectrales, pero en realidad el efecto sobre el ojo humano se defini 100 aos ms tarde por el mdico Thomas Young. l fue, segn se informa, el primero en describir cmo el color es percibido con los tres receptores del ojo para los colores primarios: rojo, verde y azul. Ahora se sabe que cada impresin en color puede ser totalmente descrita por tres valores. Antecedentes de la colorimetra: Isaac Newton. Carta a Henry Oldenburg, 1671.

Si estos principios son tales que a partir de ellos un matemtico puede determinar todos los fenmenos de los colores que puedan ser causados por la refraccin, supongo que la ciencia de los colores se admitir matemticamente. Isaac Newton.

Si nos preguntsemos que significan las palabras "rojo", "azul", "negro", "blanco"... podremos sealar de forma inmediata y con certeza cosas que tienen esos colores, pero nuestra capacidad de explicar el significado de estas palabras no va ms all. Ludwig Wittgenstein, Observaciones sobre los colores, 1950.

El objeto de la colorimetra es expresar los colores y sus atributos perceptuales mediante nmeros. Para conseguirlo, es necesario establecer una correlacin entre los distintos atributos perceptuales del color y las magnitudes de la radiacin visible.En este sentido, la colorimetra es una parte de la psicofsica, la disciplina que estudia las relaciones entre las magnitudes fsicas y las respectivas magnitudes percibidas.

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COLORQu es el color? El color es un atributo que percibimos de los objetos cuando hay luz. La luz es constituida por ondas electromagnticas que se propagan a unos 300.000 kilmetros por segundo. Esto significa que nuestros ojos reaccionan a la incidencia de la energa y no a la materia en s. Las ondas forman, segn su longitud de onda, distintos tipos de luz, como infrarroja, visible, ultravioleta o blanca. Las ondas visibles son aquellas cuya longitud de onda est comprendida entre los 380 y 770 nanmetros. Los objetos devuelven la luz que no absorben hacia su entorno. Nuestro campo visual interpreta estas radiaciones electromagnticas que el entorno emite o refleja, como la palabra "Color". Propiedades del color Las definimos como el tono, saturacin, brillo. Tono, matiz o croma es el atributo que diferencia el color y por la cual designamos los colores: verde, violeta, anaranjado. Saturacin: es la intensidad cromtica o pureza de un color Valor (value) es la claridad u oscuridad de un color, est determinado por la cantidad de luz que un color tiene. Valor y luminosidad expresan lo mismo. Brillo: es la cantidad de luz emitida por una fuente lumnica o reflejada por una superficie. / Luminosidad, es la cantidad de luz reflejada por una superficie en comparacin con la reflejada por una superficie blanca en iguales condiciones de iluminacin. Tonos coloreados y no coloreados. Los tonos que contienen una mezcla negra y blanca se denominan no coloreados. Todos los dems tonos se denominan coloreados. La mezcla de tonos coloreados y no coloreados se expresa con el concepto de saturacin (Pureza). Una tonalidad coloreada por ejemplo, rojo se denomina saturada, cuando no contiene mezcla de blanco o negro. Para la evaluacin de una tonalidad se emplean tres criterios: color, brillo y saturacin/pureza.

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Dependencia entre y colores coloreados y no coloreados

Mezcla de colores. En la teora cromtica se distinguen dos tipos de mezclas de colores. Por un lado, la mezcla aditiva, en la que se basa por ejemplo el principio de funcionamiento de la televisin color. Este tipo de mezcla consiste en reunir (sumar) luz de diferentes longitudes de onda. Luz roja y luz verde producen conjuntamente luz amarilla. El otro procedimiento es la mezcla sustractiva, que forma la base de nuestro mtodo de mezcla de colores en el taller. Colores primarios (los tres bsicos): El mtodo de mezcla sustractiva permite obtener cualquier tonalidad partiendo de los colores ROJO, AZUL y AMARILLO. Por esta razn, el rojo, el azul y el amarillo se denominan primarios. Colores secundarios: Se llaman colores secundarios a los tres colores VERDE, VIOLETA y NARANJA resultante de la mezcla de los tres colores primarios.

El crculo cromtico El crculo cromtico de Ostwald. Existen diferentes teoras para la clasificacin de los colores. L a m s importante para nosotros fue formulada por Wilhelm Ostwald, que dispuso los colores del espectro en forma de crculo. Esta forma de representacin se denomina Crculo cromtico de Ostwald, en honor a su inventor. Este crculo es de gran importancia para el matizado de colores

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Colores compuestos. Se denominan complementarios a los colores que se encuentran opuestos diametralmente en el crculo cromtico. Estos colores no son muy recomendables mezclarlos para ajustar un color, ya que son mutuamente refrigerantes, y producen mezclas sucias. En otras palabras: conducen a colores acromticos. Colorea afines Se denominan colores afines a los yuxtapuestos en el crculo cromtico. Mezclando dos colores afines se obtienen tonalidades puras. Por esta razn, son recomendables para el ajuste de colores.

CIRCULO CROMTICO

El crculo cromtico es una distribucin de los colores primarios, secundarios y terciarios alrededor de un crculo. Los colores en un crculo cromtico son: amarillo, anaranjado, rojo, violeta, azul y verde. La mezcla los colores primarios produce los colores secundarios. Rojo y amarillo producen anaranjado, amarillo y azul producen verde, etc.

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Estos colores a su vez pueden ser representados en un crculo de 12 colores, haciendo una mezcla de un color con el siguiente y as sucesivamente se puede crear un crculo cromtico con millones de colores. El crculo cromtico: Nos sirve para observar la organizacin bsica y la interrelacin de los colores. Tambin lo podemos emplear como forma para hacer la seleccin de c olor que nos parezca adecuada a nuestro diseo. Podemos encontrar diversos crculos de color, pero el que aqu vemos est compuesto de 12 colores bsicos.

Procedimiento de la medida del color Existe una necesidad de estandarizar el color para poderlo clasificar y reproducir. El procedimiento utilizado en la medida del color consiste sustancialmente en sumar la respuesta de estmulos de colores y su normalizacin a la curva espectral de respuesta del foto receptor sensible al color. Como referencia, se utiliza la curva espectral codificada de la Comisin Internacional de Iluminacin, la llamada funcin colorimtrica. Debe notarse que el color es una caracterstica subjetiva, pues solo existe en el ojo y en el cerebro del observador humano, no siendo una caracterstica propia de un objeto. Los fotorreceptores del ojo humano son los conos de la retina, de los que existen diferentes tipos, con sensibilidades diferentes a las distintas partes del espectro luminoso. El matemtico alemn Hermann Grassmann enunci unas leyes sobre la mezcla aditiva del color. Estas muestran que cualquier color puede expresarse como suma de tres colores primarios, es decir, de tres colores, cada uno de los cuales no puede obtenerse por la mezcla de los otros dos. Aplicando sus leyes, se obtiene la denominada ecuacin unitaria del color, que representada, da una forma parecida a un tringulo, el tringulo internacional de color. El rea dentro de las tres curvas que se obtienen al fin del procedimiento dan origen a tres valores: las coordinadas triestmulo X, Y y Z ligadas a las coordinadas de cromaticidad x e y por relaciones lineales. El paso de un espacio de colores a otro son datos de relaciones de transformacin de coordenadas.

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LEY DE LAMBERT-BEERDentro de un fotmetro de ptica, se utiliza un haz de luz enfocado de manera precisa para penetrar el elemento del procesado. Una clula fotoelctrica de silicio mide la intensidad resultante de luz. La alteracin de la intensidad de la luz, causada por la absorcin y/o difusin est explicada en la Ley Lambert-Beer. La Ley Lambert Beer es un medio matemtico de expresar cmo la materia absorbe la luz. Esta ley afirma que la cantidad de luz que sale de una muestra es disminuida por tres fenmenos fsicos:

La cantidad de material de absorcin en su trayectoria (concentracin) La distancia que la luz debe atravesar a travs de la muestra (distancia de la trayectoria ptica) La probabilidad de que el fotn de esa amplitud particular de onda sea absorbido por el material (absorbencia o coeficiente de extincin)

Leyes de la absorcin de energa radiante Se refieren a las relaciones existentes entre la cantidad de absorbente y el grado con el que es absorbida la energa radiante. En trminos generales, puede decirse que hay dos variables capaces de afectar al grado de absorcin: la concentracin del absorbente y la longitud del trayecto que el rayo luminoso recorre a travs de la solucin. La relacin entre ambas se expresa con la frmula denominada Ley de Beer: P =P0 10-abc P = potencia radiante transmitida Po = potencia radiante incidente una cantidad proporcional a la misma, medida colocando en la cubeta el solvente puro

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a = absortividad, constante caracterstica del absorbente y de la longitud de onda de la radiacin incidente. b = longitud del paso de la luz a travs de la solucin del absorbente, expresada generalmente en cm. c = concentracin del absorbente

Algunos autores prefieren utilizar trminos de Io e I, expresando entonces intensidad en lugar de potencia. En la prctica lo que tiene importancia es la proporcin P / P0 denominada transmitancia (T) o cuando se multiplica por 100, porcentaje de transmitancia (%T). La ley de Beer tambin puede escribirse de la siguiente forma log (P0 / P) = abc El trmino log (P0 / P) se define como la Absorbancia. Cuando las medidas se efectan utilizando siempre la misma cubeta (o bien un grupo de cubetas estandarizadas que posean un paso de luz constante) y los efectos pticos debidos a la cubeta son reproducibles, el trmino b de la expresin de la absorbancia se hace constante. Dado que a es tambin constante para un determinado absorbente y una concreta longitud de onda, resulta entonces que la absorbancia es directamente proporcional a la concentracin: A = kc (k = ab). La ventaja fundamental que ofrece el empleo de la Absorbancia en lugar de la Transmitancia es que la relacin existente entre la concentracin y la absorbancia es lineal, cosa que no sucede con el %T.

Dado que la Absorbancia es proporcional a la concentracin, tendremos que: A1 / A2 = C1/ C2 donde, A1 = Absorbancia del problema A2 = Absorbancia de un estndar de concentracin conocida C1 = Concentracin del problema C2 = Concentracin del estndar Concentracin (problema) = A1 (problema) / A2 (estndar)* Concentracin estndar

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Transmitancia A medida que un haz de luz atraviesa un medio absorbente, la cantidad de luz absorbida en cualquier volumen es proporcional a la intensidad de luz incidente multiplicado por el coeficiente de absorcin. Consecuentemente, la intensidad de un haz incidente decae exponencialmente a medida que pasa a travs del absorbente. Esta relacin cuando se expresa como Ley de Lambert es: Donde T= = c= d=

Transmitancia Coeficiente molar de extincin Concentracin molar del absorbente Distancia en cm

T = 10-cd o T = 10-AEn un enfoque simplificado, la transmitancia puede ser expresada como la intensidad de la radiacin incidente, I0, que divide a la luz emergente de la muestra, I. Se refiere a la relacin I/I0 como transmitancia o sencillamente T Absorcin La transmitancia puede ser trazada en relacin a la concentracin, pero la relacin no es lineal. El logaritmo negativo en base 10 de la transmitancia s es, sin embargo, lineal con la concentracin. De esta manera, la absorcin es medida como: A = -log10 (I/Io) or A = -log10 (T)

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Cromatografa y la ley de Lambert y Beer Cuando se pasa un rayo de luz monocromtica de intensidad inicial I0 a travs de una solucin en un recipiente transparente, parte de la luz es absorbida de manera que la intensidad de la luz transmitida I es menor que I0. Ocurre alguna disminucin en la intensidad de la luz por dispersin de las partculas reflexin en las interfaces, pero principalmente por absorcin de la solucin. La relacin entre I e I0 depende de la longitud del medio absorbente, l, y de la concentracin de la solucin absorberte, c, estos factores se hallan relacionados en la ley de Lambert y Beer.

Por qu son coloreadas las soluciones

Ley de Lambert. Cuando un rayo de luz monocromtica pasa a travs de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la longitud del medio absorbente aumenta.

Ley de Beer. Cuando un rayo de luz monocromtica pasa a tras de un medio absorbente, su intensidad disminuye exponencialmente a medida que la concentracin del medio absorbente aumenta.

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Estas dos leyes se combinan en la ley de Beer-Lambert:

Absorcin de la luz por una solucin

El cociente de las intensidades se conoce como la transmitancia y se expresa como un porcentaje:

Sacando logaritmos:

La expresin tanto:

se conoce como la extincin E, o absorbancia. La esta se designa

algunas veces como densidad ptica, pero este nombre no se recomienda actualmente, por lo

Si se sigue la Ley de Beer-Lambert y l se mantiene constante, un grafico de la extincin en funcin de la concentracin da una lnea recta que pasa por el origen; en tanto que un grafico del porcentaje de transmitancia en funcin de la concentracin de una curva negativa exponencial.

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Relacin entre la absorbancia de la luz y la concentracin de una solucin de una solucin absorbente

Algunos colormetros tienen dos escalas, en lineal de porcentaje de transmitancia y ltra logartmica de extincin. Esta ltima escala es que esta linealmente relacionada con la concentracin y se usa en las curvas patrones de concentracin.

Relacin entre el porcentaje de transmitancia y la extincin

Con la ayuda de tales curvas se puede determinar fcilmente la concentracin de una muestra conociendo su extincin.

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Coeficiente molar de extincin. Si l es 1 cm y c es 1 mol/l, la absorbancia ser igual al coeficiente molar de extincin k, el cual se caracterstico para un compuesto dado. El coeficiente molar de extincin k, es por lo tanto, la extincin producida por 1 mol/l en un recorrido de luz de 1 cm y generalmente se escribe ; y se expresa .

Coeficiente de extensin especifica. No se puede conocer fcilmente el peso molecular de algunos compuestos tales como protenas y cidos nuclecos presentes en una mezcla y en este caso se usa el coeficiente de extincin especfica. Este se define como la extincin de 10 g/l (antes conocido como 1% p/v) del compuesto en un recorrido de luz de 1 cm .

Limitaciones de la Ley de Beer-Lambert. Algunas veces no son lineales los graficos de la extincin en funcin de la concentracin y esto probablemente se deba a que no se cumple alguna de las siguientes condiciones: 1. La luz debe ser perfectamente monocromtica o la longitud de onda debe estar entre lmites muy estrechos. 2. La longitud de onda de la luz empleada debe coincidir con el mximo de absorcin de la solucin. Esto permite tambin conseguir la sensibilidad ptima. 3. No debe haber ionizacin, asociacin, disociacin o solvatacin del soluto con respecto a la concentracin o al tiempo. 4. La solucin es muy concentrada, originado un color muy intenso. La ley solo se cumple hasta cierto lmite mximo de concentracin, caracterstica para cada sustancia.

Medicin de la extincin Los primeros colormetros se calibran a ojo comparando el color de una solucin con los de una serie de discos colorados. Los resultados obtenidos eran muy subjetivos y no muy exactos. Los colormetros visuales solo tienen ahora un inters histrico. La clula fotoelctrica tiene la ventaja sobre el ojo humano de poder determinar el grado de absorcin de un color y de ser mucho ms objetiva.

El colormetro fotoelctrico. En esta figura se presenta un diagrama de las partes bsicas de un colormetro tpico. La luz blanca de una lmpara de tungsteno pasa a travs de una rendija,

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luego a travs de un lente condensador, hasta obtener un rayo paralelo que incide sobre la solucin que se investiga, la cual se ha colocado en una celda de absorcin o cubeta. La cubeta es generalmente de vidrio y las paredes a travs de las cuales para el haz fe luz son parelas. En muchos casos, las cubetas tiene una base de 1 cm2 y pueden contener fcilmente 3 ml de lquido. Despus de la cubeta se encuentra el filtro, el cual se selecciona para permitir la trasmisin mxima del color no absorbido. Si se quiere examinar una solucin azul, entonces se absorbe el rojo y por lo tanto se selecciona un filtro rojo. El color del filtro es, pues, complementario a la solucin que se estudia. Relacin entre el color de la solucin estudiada y el filtro escogido para el anlisis colorimtrico. Color de la solucin Rojo-naranja Azul Verde Prpura amarillo Filtro Azul-azul verdoso Rojo Rojo Verde Violeta

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En algunos instrumentos el filtro se encuentra antes de la cubeta. El filtro produce bandas angostas de transmisin y, por lo tanto, da luz aproximadamente monocromtica. Los filtros Ilford son los ms comunes y algunas de las propiedades se presentan a continuacin. Transmisin mxima para filtros Ilford Numero del filtro Ilford 600 601 602 603 604 605 606 607 608 609 Color Violeta intenso Violeta Azul Azul verdoso Verde Amarillo verdoso Amarillo Naranja Rojo Rojo fuerte Transmisin mxima (nm) 420 430 470 490 520 550 580 600 680 700

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APLICACIN DE LA COLORIMETRAIndustria de la impresin Las normas de color se han empleado en la industria de la impresin durante mucho tiempo y para ello diversos aparatos de medir se han usado con el fin de supervisar el cumplimiento de esas normas. Los dos tipos de aparatos de medida utilizados habitualmente son: Densitmetros con o sin conexin a la mquina de imprimir. Espectrofotmetros con o sin conexin a la mquina de imprimir.

El inconveniente de los aparatos fuera de lnea es que el impresor tiene que confiar en los valores medidos mostrados para evaluar y ajustar la apertura de la zona de tinta, proceso que requiere extremo cuidado. La ventaja principal del control colorimtrico es la capacidad que ofrece para mantener el resultado de impresin tan cerca como sea posible a la impresin ptica del color deseado del original, y el alertar al impresor cuanto antes si las desviaciones se hacen demasiado grandes. La evaluacin colorimtrica ofrece la misma percepcin que el ojo humano con la ventaja de estar libre de influencias externas subjetivas y variables; en cambio, provee resultados objetivos. Los datos de medicin pueden ser almacenados, registrados y tambin se pueden usar como un certificado de calidad. Adems, los resultados de medicin pueden ser automticamente evaluados con el software de Monitor de Calidad de Heidelberg, un componente integrado en el Profile Toolbox de productos Prinect y en el Calibration Toolbox.

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Bernd Utter y el Dr. Werner Huber del Centro de Investigacin y Desarrollo de Heidelberger Druckmaschinen AG (Heidelberg) nos proporcionan una introduccin a la colorimetra, a la espectrofotometra y a sus usos en las reas de control del color y en la de gestin del color. En este artculo, adems de un poco de historia, se hace un repaso a la colorimetra bsica y a su aplicacin en los sistemas de medicin en el color de Heidelberg.

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Determinacin colorimtrica de fosfato inorgnico La mayora de los compuestos bioqumicos no tiene coloracin y pueden ser analizados colorimtricamente pero solo despus de someterlos a la accin de un reactivo qumico especifico que origine un producto coloreado. Este aspecto puede ilustrarse midiendo fosforo inorgnico, que es, probablemente, una de las determinaciones ms usuales en los laboratorios de bioqumica. El fosfato inorgnico reacciona con molibdato de amonio en solucin acida para formar acido fosfomolbdico. La adicin de una agente reductor reduce el molibdeno presente en el fosfomolibdato produciendo un color azul, sin afectar el acido molbdico libre. En este mtodo el agente reductor es el sulfato de p-metilaminofenol. La presencia de cobre en la solucin amortiguadora aumenta la velocidad de aparicin del color.

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CONCLUSINLos mtodos fotomtricos son tcnicas analticas basadas en la medicin de la radiacin electromagntica absorbida, reflejada o emitida por una sustancia dispersantes en una solucin. Para efectos cuantitativos, todas ellas se basan en la aplicacin de la ley de Lamber Beer, ley que establece bsicamente una proporcin lineal entre la magnitud de la absorcin y la concentracin de las sustancias absorbente. A travs de estos mtodos fotomtricos, es posible medir con gran presicion muchas substancias coloreadas por fotometra visual o colorimetra. la colorimetra consiste en la comparacin visual del color de las soluciones de la substancias problema con una serie de patrones, hasta conseguir la coincidencia. Esta tcnica entonces nos perite la identificacin de muestras a travs de la comparacin de sustancias patrn, y una vez que se consigue la igualar visualmente intensidad de los colores de las soluciones, se miden las longitudes de solucin, aplicando la ley de Beer se calcula la concentracin y la identificacin de nuestra sustancia. La colorimetra a avanzado en diferentes areas industriales y su campo de uso est creciendo a la par con los a veces tcnicos e industriales.

REFERENCIAS Florkin, M. y Stotz, E., Comprehensive Bichemistry, Vol 3, Methods for the Study of Molecules, Amsterdam, Elservier, 1963. Van Holde, K. E., Physical Biochemistry, Englewood Cilffs; N. J., Preentice Hall, 1971. L. Hernndez, C. Gonzlez, Introduccin al Anlisis Instrumental. Editorial: Ariel Ciencia (2002) R. Matissek, F.M. Schnepel, G. Steiner, Anlisis de los Alimentos. Editorial Acribia. S.A McPherson RA, Pincus MR, eds. Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 21st ed. Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2006. http://webs2002.uab.es/ipividori/qca%20analii/T7.pdf

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