catalogo bioxon

7/26/2019 Catalogo Bioxon

1/108

1


2/108

2

INDICE ALFABETICO

MEDIOS DE CULTTIVO DESHIDRATADOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 32 AGAR BIGGY

21 43 00 AGAR DE BILIS Y ROJO VIOLETA21 17 08 AGAR DE BILIS VERDE BRILLANTE

21 40 00 AGAR BIOTRIPTASA

21 17 61 AGAR CITRATO DE SIMMONS

AGAR PARA CLAMIDOSPORAS(PRODUCTO FUERA DE LINEA)

21 17 73 AGAR CLED

21 17 76 AGAR DE CZAPECK DOX

22 53 00 AGAR DESOXICOLATO

21 19 00 AGAR DE DEXTROSA Y PAPA21 07 00 AGAR DE DEXTROSA SABORAUD

21 30 02 AGAR DE DEXTROSA Y TRIPTICASEINA

22 44 00 AGAR ENTERICO HEKTOEN

21 06 00 AGAR DE EOSINA Y AZUL DE METILENO

21 05 00 AGAR PARA ESTAFILOCOCOS No. 110

21 17 22 AGAR EXTRACTO, GLUCOSA Y TRIPTICASENA

21 17 85 AGAR DE FENILALANINA

21 02 00 AGAR DE HIERRO DE KLIGLER

21 17 19 AGAR DE HIERRO Y LISINA21 14 00 AGAR DE HIERRO Y TRIPLE AZUCAR

(AGAR TSI)

21 47 00 AGAR INFUSIN DE CEREBRO Y CORAZON

21 09 00 AGAR MAcCONKEY

21 17 24 AGAR PARA METODOS ESTANDAR(PARA RECUENTO EN PLACA)

21 16 67 AGAR DE MUELLER HINTON

21 04 00 AGAR NUTRITIVO

22 04 00 AGAR PROTEOSA No.3

21 46 00 AGAR DE SAL Y MANITOL

21 44 00 AGAR PARA SALMONELLA Y SHIGELLAAGAR SS

21 29 98 AGAR PARA SELECCIN DE HONGOSAGAR MICOBIOTICO

21 08 00 (450 g) AGAR DE SOYA TRIPTICASEINA

21 16 45 (10 Kg) AGAR DE SOYA TRIPTICASEINA

21 17 45 AGAR SULFITO Y BISMUTO

AGAR TERGITOL 7(PRODUCTO FUERA DE LINEA)

21 29 31 AGAR TCBS


3/108

3

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 45 00 AGAR VERDE BRILLANTE

22 17 00 AGAR DE VOGEL JOHNSON21 17 41 AGAR XLD

(XILOSA-LISINA-DESOXICOLATO)

22 39 00 BASE DE AGAR BAIRD-PARKER22 49 00 BASE DE AGAR DE CASMAN

21 17 70 BASE DE AGAR CETRIMIDA

22 40 00 BASE DE AGAR COLUMBIA

21 17 46 BASE DE AGAR GC

21 17 28 BASE DE AGAR SANGRE

21 17 30 BASE DE AGAR SANGRE CON AZIDA

BASE DE AGAR TRIPTICASENA(PRODUCTO FUERA DE LINEA)

22 14 00 BASE DE AGAR UREA

(DE CHRITENSEN)21 17 65 BASE DE AGAR SANGRE CON BAJO pH

22 07 00 BASE DE CALDO KCN DE MOELLER

21 16 83 BASE DE CALDO TETRATIONATO

22 33 00 BASE DE MEDIO DE LOWENSTEIN-JENSEN

21 17 25 (450 g) CALDO BIOTRIPTASA

21 16 50 (10 Kg) CALDO BIOTRIPTASA

21 29 94 CALDO CITRATO DE KOSER

22 24 00 CALDO DE DEXTROSA SABOURAUD

21 29 99 CALDO DE DEXTROSA

25 26 49 (10 Kg) CALDO DEXTROSA Y PAPA

CALDO EE DE MOSSEL (PRODUCTO FUERA DE LINEA)

21 29 97 CALDO PARA SELECCIN DE ESTREPTOCOCOS(CALDO DE ESTREPTOSEL)

22 76 00 CALDO GN HAJNA

21 17 00 CALDO LACTOSADO

22 38 00 CALDO LAURIL SULFATO DE SODIO

21 30 01 CALDO DE LISINA DESCARBOXILASA

22 58 00 CALDO DE MALONATO DE EWING MODIFICADO

21 17 00 CALDO DE MALTOSA SABOURAUD

21 03 00 (450 g) CALDO NUTRITIVO

25 26 21 (10 Kg) CALDO NUTRITIVO

21 29 95 CALDO ROJO FENOL CON LACTOSA

22 08 00 CALDO ROJO DE FENOL CON MALTOSA

21 17 34 CALDO ROJO DE FENOL CON SACAROSA

21 29 96 CALDO ROJO DE FENOL CON DEXTROSA

22 03 00 CALDO SELENITO DE SODIO


4/108

4

21 16 70 (450 g) CALDO DE SOYA TRIPTICASEINA

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA23 01 00 (10 Kg) CALDO DE SOYA TRIPTICASEINA

CALDO TERGITOL 7 (PRODUCTO FUERA DE LINEA)

21 17 21 (450 g) CALDO TIOGLICOLATO (NIH)

21 16 48 (10 Kg) CALDO TIOGLICOLATO (NIH)

22 25 00 (450 g) CALDO DE TRIPTICASENA Y FOSFATO

21 16 46 (10 Kg) CALDO DE TRIPTICASENA Y FOSFATO

22 15 00 CALDO UREA

21 15 00 CALDO VERDE BRILLANTE BILIS AL 2%

21 16 76 GELATINA NUTRITIVA

21 12 00 (450 g) INFUSIN DE CEREBRO Y CORAZON (BHI)

23 02 00 (10 Kg) INFUSIN DE CEREBRO Y CORAZON (BHI)

21 13 00 MEDIO LIQUIDO DE TIOGLICOLATO

22 80 00 MEDIO DE TIOGLICOLATO SIN DEXTROSA Y SININDICADOR

21 17 75 MEDIO MIO

21 16 91 MEDIO MR-VP

22 87 00 MEDIO PARA ANTIBITICOS No.1(AGAR DE SIEMBRE)

21 16 89 MEDIO PARA ANTIBITICOS No.2(AGAR BASE)

22 46 00 MEDIO PARA ANTIBITICOS No.3(CALDO PARA ENSAYO DE ANTIBIOTICOS)

22 43 00 MEDIO PARA ANTIBITICOS No.11(AGAR PARA ENSAYO DE NEOMICINA)

21 01 00 MEDIO SIM22 67 00 MEDIO DE TRANSPORTE STUART

25 25 82 MEDIO DE TRANSPORTE CARY BLAIR

SUPLEMENTOS PARA MEDIOS DE CULTTIVO

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 75 00 HEMOGLOBINA

21 16 54 INHIBIDOR VCN

21 16 53 INHIBIDOR VCNT

21 16 55 POLIENRIQUECIMIENTO

INGREDIENTES PARA MEDIOS DE CULTTIVO

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 50 00 (450 g) AGAR BACTERIOLOGICO

23 07 00 (10 Kg) AGAR BACTERIOLOGICO

21 67 00 (450 g) AGAR PURIFICADO

21 18 06 (50 g) AGAROSA


5/108

5

CARBOHIDRATOS Y GLUCOSIDOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 68 00 (450 g) DEXTROSA (GLUCOSA)

21 18 09 (10 Kg) DEXTROSA (GLUCOSA)

21 59 00 (450 g) MALTOSA CERTIFICADA

23 12 00 (10 Kg) MALTOSA CERTIFICADA

23 18 00 (450g) LACTOSA

21 69 00 (10 Kg) LACTOSA

21 70 00 (450 g) SACAROSA

21 16 56 (10 Kg) SACAROSA

21 16 59 MANITOL

PEPTONAS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA23 05 00 (300 g) PEPTONA BIOTRIPTASA

23 04 00 (10 Kg) PEPTONA BIOTRIPTASA

23 24 00 (300 g) PEPTONA DE CARNE

23 23 00 (10 Kg) PEPTONA DE CARNE

23 22 00 (300 g) PEPTONA DE CASEINA

25 26 06 (450 g) PEPTONA DE CASEINA

21 18 14 (10 Kg) PEPTONA DE CASEINA

23 27 00 (450 g) PEPTONA DE CASEINA H

23 28 00 (10 Kg) PEPTONA DE CASEINA H

23 26 00 (300 g) PEPTONA DE GELATINA

23 25 00 (10 Kg) PEPTONA DE GELATINA

21 18 11 (300 g) PEPTONA DE SOYA

23 19 00 (10 Kg) PEPTONA DE SOYA

21 77 00 (300 g) POLIPEPTONA

23 33 00 (10 Kg) POLIPEPTONA

21 16 52 (10 Kg) NZ AMINA

21 29 32 (10 Kg) NZ CASETT


6/108

6

OTROS INGREDIENTES PARA MEDIOS DE CULTIVO

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA23 31 00 (100 g) DESOXICOLATO DE SODIO

21 18 02 (300 g) EXTRACTO DE CARNE

23 14 00 (10 Kg) EXTRACTO DE CARNE

23 09 00 (300 g) EXTRACTO DE LEVADURA

21 17 92 (10 Kg) EXTRACTO DE LEVADURA

21 80 00 (450 g) EXTRACTO DE MALTA

21 58 00 (450 g) GELATINA BACTERIOLGICA

21 18 15 (10 Kg) GELATINA BACTERIOLOGICA

23 15 00 (100 g) TIOGLICOLATO DE SODIO

23 08 00 (300 g) LECHE PEPTONIZADA


7/108

7

INDICE SELECCIONADO POR APLICACION

ANALISIS MICROBIOLOGICO DE ANTIBIOTICOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA22 87 00 MEDIO PARA ANTIBIOTICOS No 1

AGAR PARA SIEMBRA

22 43 00 MEDIO PARA ANTIBIOTICOS No 11AGAR PARA ENSAYO DE NEOMICINA

21 16 89 MEDIO PARA ANTIBIOTICOS No 2AGAR BASE

22 46 00 MEDIO PARA ANTIBIOTICOS No 3CALDO PARA ENSAYO DE ANTIBIOTICOS

ANAEROBIOSCATALOGO DESCRIPCION PAGINA22 80 00 MEDIO DE TIOGLICOLATO SIN DEXTROSA Y SIN

INDICADOR

21 30 02 AGAR DE DEXTROSA Y TRIPTICASEINA

21 30 02 AGAR DE DEXTROSA Y TRIPTICASENAGERMENES AEROBIOS Y ANAEROBIOS FERMENTACIN DEGLUCOSA Y MOVILIDAD

BASE DE AGAR TRIPTICASENABACTERIAS AEROBIAS Y ANAEROBIAS(PRODUCTO FUERA DE LINEA)

BACTERIAS EXIGENTES

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA

21 08 00 AGAR SOYA TRIPTICASEINA21 16 46 CALDO TRIPTICASEINA Y FOSFATO

21 16 70 CALDO SOYA TRIPTICASENACOCOS GRAM POSITIVOS (ESTREPTOCOCOS), BACILOS GRAM

NEGATIVOS (PROTEUS)22 40 00 BASE DE AGAR COLUMBIA

21 17 28 BASE DE AGAR SANGREBACTERIAS HEMOLITICAS

21 17 65 BASE DE AGAR SANGRE CON BAJO pHBACTERIAS PROTEOLITICAS

21 16 76 GELATINA NUTRITIVAPNEUMOCOCOS

21 12 00 INFUSION DE CEREBRO Y CORAZON

22 04 00 AGAR PROTEOSA No. 3

21 47 00 AGAR INFUSION CEREBRO CORAZON


8/108


9/108

9


21 30 01 CALDO DE LISINA DESCARBOXILASA

22 58 00 CALDO DE MALONATO DE EWING MODIFICADO

21 15 00 CALDO UREA

21 17 75 MEDIO MIO21 01 00 MEDIO SIM

DIFERENCIACION DE PATOGENOS GRAM NEGATIVOS

22 44 00 AGAR ENTERICO HEKTOEN

22 07 00 BASE DE CALDO KCN DE MOELLER

ESTAFILOCOCOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 05 00 AGAR ESTAFILOCOCOS 110

21 46 00 AGAR SAL Y MANITOL

22 39 00 BASE DE AGAR BAIRD PARKER

22 17 00 AGAR VOGEL JOHNSON

ESTERILIDAD DE PRODUCTOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 21 CALDO TIOGLICOLATO (NIH)

21 13 00 MEDIO LIQUIDO DE TIOGLICOLATO

ESTREPTOCOCOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 30 BASE DE AGAR SANGRE CON AZIDA

21 29 97 CALDO ESTREPTOSELCALDO PARA SELECCIN DE ESTREPTOCOCOS

FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 29 96 CALDO ROJO DE FENOL Y DEXTROSA

21 29 95 CALDO ROJO DE FENOL Y LACTOSA

22 08 00 CALDO ROJO DE FENOL Y MALTOSA

21 17 34 CALDO ROJO DE FENOL Y SACAROSA


10/108

10

GRAM POSITIVOS Y GRAM NEGATIVOS EN ORINA

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 73 AGAR CLED

HONGOSCATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 76 AGAR CZAPECK DOX

21 07 00 AGAR DEXTROSA SABOURAUDHONGOS Y LEVADURAS

21 29 98 AGAR PARA SELECCION DE HONGOS

21 19 00 AGAR DEXTROSA Y PAPA

21 37 00 CALDO DE MALTOSA SABOURAUD

22 24 00 CALDO DEXTROSA SABOURAUD

25 26 49 CALDO DEXTROSA Y PAPA

MEDIO DE TRANSPORTE

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA22 67 00 MEDIO DE TRANSPORTE STUART25 25 82 MEDIO DE TRANSPORTE CARY BLAIR

MEDIOS NO SELECTIVOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 04 00 AGAR NUTRITIVO

21 03 00 CALDO NUTRITIVO

23 05 00 PEPTONA BIOTRIPTASA

MICOBACTERIAS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA22 33 00 BASE DE MEDIO LOWENSTEIN JENSEN

NEISSERIAS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA22 49 00 BASE DE AGAR CASMAN

NEISSERIAS PATOGENAS, GONOCOCOS Y MENINGOCOCOS

21 17 46 BASE DE AGAR GC

PRUEBA DE SENSIBILIDAD A ANTIBIOTICOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 16 67 AGAR MUELLER HINTON


11/108

11

PSEUDOMONAS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 70 BASE DE AGAR CETRIMIDA

RECUENTO DE BACTERIASCATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 24 AGAR METODOS ESTANDAR

21 17 22 AGAR EXTRACTO DE GLUCOSA Y TRIPTICASEINA

SALMONELLA, ARIZONA Y CITROBACTERCATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 17 19 AGAR HIERRO Y LISINA

Salmonella y Arizona d e Citrobacter

21 17 45 AGAR SULFITO DE BISMUTO

Salmonella TyphiY OTROS BACILOS ENTERICOS21 45 00 AGAR VERDE BRILLANTE

21 17 41 AGAR XLD (XILOSA-LISINA DESOXICOLATOShigella,Salmonella y Arizona

21 16 83 BASE DE CALDO TETRATIONATO


22 76 00 CALDO GN HAJNA

22 03 00 CALDO SELENITO DE SODIO

VIBRIOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 29 31 AGAR TCBS

SUPLEMENTOS PARA MEDIOS DE CULTIVO

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 75 00 HEMOGLOBINA

21 16 54 INHIBIDOR VCN

21 16 53 INHIBIDOR VCNT

21 16 55 POLIENRIQUECIMIENTO

INGREDIENTES DE MEDIOS DE CULTIVO

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 50 00 AGAR BACTERIOLOGICO

21 67 00 AGAR PURIFICADO

21 18 06 AGAROSA


12/108

12

CARBOHIDRATOS Y GLUCIDOS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA21 68 00 DEXTROSA

23 18 00 LACTOSA

21 59 00 MALTOSA CERTIFICADA

21 70 00 SACAROSA

21 16 59 MANITOL

PEPTONAS

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA23 05 00 PEPTONA BIOTRIPTASA

23 22 00 PEPTONA DE CASEINA

23 24 00 PEPTONA DE CARNE

23 28 00 PEPTONA DE CASEINA H

23 26 00 PEPTONA DE GELATINA

21 18 11 PEPTONA DE SOYA

21 77 00 POLIPEPTONA

21 16 52 NZ AMINA

21 29 32 NZ CASE TT

OTROS INGREDIENTES DE MEDIOS DE CULTIVO

CATALOGO DESCRIPCION PAGINA

23 31 00 DESOXICOLATO DE SODIO21 18 02 EXTRACTO DE CARNE

23 09 00 EXTRACTO DE LEVADURA

21 58 00 GELATINA BACTERIOLOGICA

23 15 00 TIOGLICOLATO DE SODIO

23 08 00 LECHE PEPTONIZADA

21 80 00 EXTRACTO DE MALTA


13/108


14/108

14

Esterilizacin

En general la temperatura del autoclave debe ser 121C. El mantenimiento del autoclave es importante. Debe consultar al fabricante para

corroborar los rangos fro y caliente. El tiempo recomendado de esterilizacin de 15 minutos es para un volumen de

1 litro o menor. Los volmenes ms grandes requieren mayores ciclos detiempo. Verificar con el fabricante del autoclave para la configuracinrecomendada de carga.

Volmenes superiores a 2 litros de medio de cultivo requieren mayor tiempopara completar su esterilizacin. Los ciclos de esterilizacin mayores puedencausar que los nutrientes cambien su concentracin y generar substanciasinhibitorias.

Adicin de enriquecimientos y suplementos

Los enriquecimientos y suplementos suelen ser sensibles al calor. Enfriar el medio a 45-55C en bao mara antes de la adicin de

enriquecimientos o suplementos. Asegurar un adecuado mezclado del medio basal con el enriquecimiento o

suplemento, revolviendo para mezclar totalmente. Los caldos estriles deben enfriarse a temperatura ambiente antes de agregar

el enriquecimiento.

pH

Los medios deshidratados comerciales estn diseados para tener un rangoespecfico de pH despus de la esterilizacin por vapor. El pH tiende a bajaraproximadamente 0.2 unidades durante la esterilizacin por vapor.

En la esterilizacin por filtracin, ajustar el pH si es necesario, antes de filtrar. Evitar excesivos ajustes de pH.

Vaciado del medio

Asegurar el mezclado rotando ligeramente el medio durante el vaciado. Enfriar el medio a 50-55C antes de vaciar para reducir la formacin de agua de

condensacin. Vaciar rpidamente. Al utilizar dispensadores automticos en placas, vaciar primero los medios para

todo propsito antes que los medios selectivos. Cubrir inmediatamente o colocar las tapas a los tubos para reducir el riesgo de

contaminacin. Deje la tapa de las placas petri ligeramente abierta por 1-2horas para obtener una superficie seca.


15/108

15

Almacenamiento y caducidad

En general, almacenar los medios preparados en placa, en forma invertida enuna bolsa de plstico u otro contenedor en un refrigerador oscuro por 1 o dossemanas.

Control de Calidad

Para medios preparados en laboratorio usuario, cada lote de cada medio debeser examinado.

Conservar adecuadamente los microorganismos de Control de Calidad. Mantener registros adecuados. Reportar deficiencias al fabricante.

La siguiente tabla es una gua de problemas para asistir en la preparacin de

medios de cultivo confiables.

PROBLEMA A B C D E F G HOTRAS CAUSAS

Color anormal delmedio

pH incorrecto Almacenamiento a altas temperaturasHidrlisis de ingredientespH determinado a temperatura incorrecta

Precipitado atpico Solubilidad

incompleta

Calentamiento inadecuado

Inadecuada conveccin frasco muypequeo

Oscurecimiento ocaramelizacin

Toxicidad Quemado

Trazas de sustancias(vitaminas)

Aire fuentes ambientales de vitaminas

Prdida degelificacin

Hidrlisis del Agar debido a una cada depHMedio no hervido

Prdida de valornutritivo o

propiedadesselectivas odiferenciales

Quemado del medioPresencia de electrolitos fuertes,soluciones de azcar, detergentes,antispticos, venenos metlicos,

materiales proteicos u otras sustanciasque pueden inhibir l inoculo

Contaminacin Esterilizacin inadecuadaMala tcnica al agregar enriquecimiento yvaciado en placaNo hervir los medios que contienen agar


16/108

16

Clave

A Medio Deshidratado deteriorado D Pesado incorrecto G Volver a liquificar

B Inadecuado lavado del E Mezclado incompleto H Dilucin por un inoculo muy grandematerial de vidrio

C Agua con impurezas F Sobrecalentamiento

ESTERILIZACION DE MEDIOS

La esterilizacin es cualquier proceso o procedimiento diseado para eliminar porcompleto los microorganismos viables de un material o medio. La esterilizacin nodebe confundirse con desinfeccin, sanitizacin, pasteurizacin o antisepsisquienes tienen el propsito de inactivar microorganismos, pero pueden no matartodos los microorganismos presentes. La esterilizacin puede llevarse a cabo conel uso de calor, qumicos, radiacin o filtracin.

ESTERILIZACIN POR CALOR

Los principales mtodos de esterilizacin trmica incluyen 1) Calor hmedo (vaporsaturado) y 2) Calor seco (aire caliente). El calor mata a los microorganismos pordesnaturalizacin o coagulacin de protenas. El calor hmedo tiene la ventaja derequerir menos tiempo o ms bajas temperaturas que el calor seco. El calorhmedo es el ms empleado en la esterilizacin de medios de cultivo. Adems es

el ms econmico, seguro y confiable mtodo de esterilizacin.

ESTERILIZACIN POR CALOR HMEDO

El agua hierve a 100C pero se requieren mayores temperaturas para mataresporas resistentes al calor de algunas bacterias en un tiempo razonable. Un rangode temperatura de 121C por 15 minutos es una condicin standard aceptada paraesterilizar hasta un litro de medio. La presin de vapor de 15 libras por pulgadacuadrada a esta temperatura ayuda a la penetracin del calor en el material a seresterilizado.

Muchos factores pueden afectar el aseguramiento de la esterilidad, incluyendo eltamao y contenido de la carga y el tiempo de secado o enfriado. Algunosproductos pueden desnaturalizarse a mayores temperaturas o ciclos de tal maneraque es necesario validar adecuadamente las cargas.

Para mejores resultados en la esterilizacin de medios de cultivo, debe taparse losfrascos o tubos con algodn no absorbente y capuchn de papel o tapn de roscaaflojado. Los tubos deben colocarse en gradillas o canastas. Los frascos nuncadeben llenarse ms de dos tercios. Es importante no sobrecargar el autoclave,colocar la carga en tal forma que el flujo de vapor circule libremente alrededor delcontenido.


17/108

17

Para operar correctamente el autoclave, todo el aire de la cmara debe salir y sersustituido por vapor antes de cerrar la vlvula. El sobrecalentamiento puedecambiar la composicin del medio. Por ejemplo, se sabe que los carbohidratos sedescomponen al sobrecalentar, adems se presentan otros problemas: pH incorrecto Decremento en las propiedades de gelificacin del agar Desarrollo de precipitados atpicos Caramelizacin u oscurecimiento de los medios Prdida de valor nutritivo Prdida de las propiedades selectivas o diferenciales.

Hay algunos medios como (Agar Entrico Hektoen y Agar Bilis Rojo Violeta) queno deben esterilizarse. Para disolver estas formulaciones, se calienta a ebullicinpara disolucin completa. Es importante seguir las instrucciones de la etiqueta decada medio. Los suplementos de los medios pueden esterilizarse y agregarseaspticamente a los medios esterilizados y enfriados a 45- 50C.

ESTERILIZACIN POR CALOR SECO

El calor seco se emplea para materiales como instrumentos metlicos que puedenafectarse por el calor hmedo, ej. materiales densos, polvos, etc. Requieremayores tiempos y temperaturas de esterilizacin, Un protocolo aceptado es 120minutos a 160C.

ESTERILIZACIN QUMICA

Esta emplea gases o lquidos para instrumentos mdicos o industriales. Los gasesincluyen el xido de etileno, formaldehdo y beta propiolactona. Los lquidosesterilizantes incluyen glutaraldehdo, perxido de hidrgeno, cido peractico,dixido de cloruro y formaldehdo. Prcticamente no se emplea para medios decultivo.

ESTERILIZACIN POR RADIACIN

Es un tratamiento opcional para materiales sensibles al calor. Esto incluye la luzultravioleta y la radiacin ionizante.

Luz ultravioleta es qumicamente activa y causa excitacin de los tomos de lapared celular, cido nucleicos por lo cual produce mutaciones y la bacteria detienesu reproduccin. El rango microbicida de LUV es 240 280 nm. Solo sirve paraesterilizacin de superficies

Radiacin ionizante. Rayos gamma, rayos X, esta radiacin si penetra losmateriales, teniendo mayor efectividad, el material plstico empleado en losmedios preparados, se esteriliza de esta forma.


18/108

18

ESTERILIZACIN POR FILTRACIN

Es til para esterilizar lquidos o gases. La filtracin excluye las clulas bacterianasms que destruirlas. La membrana o filtro depende del tamao de su poro para suefectividad, tambin son importantes las fuerzas electrostticas. Para remover las

bacterias se utiliza generalmente un poro de 0.2 micras, para virus y mycoplasmasse recomienda un poro de 0.01 micras.Los filtros de membrana esterilizantes son capaces de retener el 100% de uncultivo de Pseudomonas diminutaATCC 19146 de 107 a una presin no menorde 30 psi. Tienen 0.22 micras de tamao de poro y se conocen como membranasanalticas.Se utilizan para esterilizar inyectables, sueros, y suplementos de medios de cultivo.

ASEGURAMIENTO DE LA ESTERILIDAD

El aseguramiento de la esterilidad se calcula por la probabilidad de que un

microorganismo sobreviva a la esterilizacin. Se mide como SAL, SterilityAsurance Level, grado de esterilidad. Para evaluar se emplea Bacillusstearothermophilusque contiene esporas resistentes al calor hmedo, se empleaen esterilizacin a 121C.

AGENTES EMPLEADOS PARA LA PRUEBA DE ESTERILIDAD

Los mtodos de esterilizacin y sus respectivos indicadores incluyen:

METODO DE ESTERILIZACION INDICADOR BIOLOGICO

Vapor Bacillus stearothermophilus

Calor Seco Bacillus subtilis var. niger

Oxido de etileno Bacillus subtilis var. globigii

Radiacin ionizante Bacillus pumilus

Filtracin Pseudomonas diminuta

Las esporas resistentes de B. stearothermophilusse encuentran en tiras de papelsecas con medio nutritivo y qumicos. Despus de la esterilizacin, las tiras seincuban para germinacin y crecimiento, un cambio de color indica si se activarono no. Deben usarse en cada ciclo de esterilizacin.


19/108

19

VOCABULARIO

Biocarga es la poblacin inicial de microorganismos vivos en un producto osistema a considerar.

Biocidaes el agente qumico o fsico cuyo uso previsto es producir la muerte demicroorganismos

Calibracin es la demostracin de que un dispositivo de medicin produce unresultado dentro de los lmites esperados especificados a aquellos producidos pordispositivos standard sobre un apropiado rango de medidas.

Valor Destablecido para reduccin de tiempo decimal y es el tiempo requerido enminutos a una temperatura especificada para producir reduccin de 90% en elnmero de microorganismos.

Muerte microbiana es la inhabilidad de la clula microbiana para metabolizar yreproducirse dentro de condiciones favorables para su reproduccin.

Proceso de validacin establecimiento de evidencia documental de que unproceso hace lo que est propuesto que haga.

Nivel de Aseguramiento de la Esterilidades generalmente aceptado cuando losmateriales son procesados en el autoclave y alcanzan una probabilidad desobrevida microbiana de 10-6, una oportunidad en un milln de que unmicroorganismo viable se presente en el artculo esterilizado.

BIBLIOGRAFIA

1. Block, S. 1992. Sterilization, p. 87-103. Encyclopedia of microbiology, vol. 4 Academic Press. Enc, SanDiego CA.

2. Cote, R.J:, and R.L. Gherna. 1994. Nutrition and media, p. 155-178. In P. Gerhardt R.G.E., Murray W.A.,Wood, and N.R. Krieg (ed). Methods for general and molecular bacteriology. Americn Society forMicrobiology, Washington, D:C:

3. The United Prhamacopeia (USP XXIII) and The National Formulary (NF 18). 1995. Sterilization and sterilityassurance of compendial articles, p. 1976-1980. United States Pharmacopeial Convention Inc, Rockville,MD.

4. Perkins, J.J. 1969. Principles and methods of sterilization in health sciencies, 2nded. Charles C. Thomas,Springfield, IL.

5. Leahy, T.J. 1986. Microbiology of sterilization processes. In F.J. Carleton and J.P. Aglloco (ed). Validation

of aseptic pharmaceutical processes. Marcel Dekker, Inc. New York. N:Y:6. Simko, R.J. 1986. Organizing for validation. In F.J. Carleton and J.P. Agalloco (ed). Validation of asepticpharmaceutical processes. Marcel Dekker, Inc. New York, N:Y:


20/108

20

AGAR BIGGY

Cat. 211732 450 g

El Agar de Glicina, Glucosa, Levaduray Sulfito de Sodio es til para elaislamiento y la identificacinpresuntiva de Candida por medio dela reaccin del sulfuro.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADACitrato de Amonio y Bismuto 5.0 gSulfito de Sodio 3.0 gDextrosa 10.0 gGlicina 10.0 gExtracto de Levadura 1.0 gAgar 16.0 g

pH final 6.8 0.2

Preparacin:1.- Suspender 45 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar agitando frecuentementey hervir durante no ms de un minuto.4.- Dejar enfriar a 45 - 50 C.

5.- Agitar circularmente para dispersarel material insoluble y distribuir encajas Petri estriles, utilizandoaproximadamente 20 mL para cadaplaca.NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE.

Usos:

El Agar Biggy es til para aislar C.albicans y C. tropicalis y para la

diferenciacin de especies en la formasiguiente segn Nickerson:

C. albicans:

Colonias lisas, hemisfricas ocirculares, cafs o negras, con unligero borde micelial. Elennegrecimiento no se difunde almedio.

C. tropicalis:

Colonias discretas de color cafobscuro, con prominencia negracentral y ligero borde micelial.

Ennegrecimiento difuso del medio,nicamente con esta especie,despus de incubar 72 horas.

C.krusei:

Colonias rugosas, planas, grandes,con la periferia que vara del caf,rodeadas de un halo amarillo.

C. parakrusei:

Colonias de tamao mediano, planas,de color que varia del caf rojizoobscuro brillante, a caf rojizo claro ycon un borde micelial extensoamarillento.

C. stellatoidea:

Colonias de tamao mediano, planasde color caf muy obscuro, casi sindesarrollo micelial.

Deben emplearse placasrecientemente preparadas. Lassiembras en cultivos inclinados nofueron satisfactorias.

AGAR DE BILIS Y

ROJO VIOLETA

Cat. 214300 450 g

Medio selectivo para deteccin decoliformes en agua, productos lcteosy otros alimentos. Los grmenesGram positivos son marcadamenteinhibidos por las sales biliares y elcristal violeta que contiene.


21/108

21

Las colonias de las bacteriasfermentadoras de la lactosa son colorrosa, dependiendo de su tamao y delnmero de bacterias que existan en laplaca.

En ocasiones los cocos del contenidointestinal se pueden desarrollar en elmedio como colonias pequeas,puntiformes y de color rosado.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAExtracto de Levadura 3.0 gPeptona de Gelatina 7.0 gSales Biliares 1.5 gLactosa 10.0 gCloruro de Sodio 5.0 gAgar 15.0 gRojo Neutro 0.03 gCristal Violeta 0.002 g

pH final 7.4 0.2

Preparacin:1.- Suspender 41.5 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.-Calentar agitando frecuentemente y

hervir durante un minuto.4.- Dejar enfriar a 42 - 44 C, usar deinmediato, o esterilizar a 121 Cdurante 15 minutos.5.- Una vez esterilizado enfriar a unos40 - 45C y vaciar en cajas Petri.Nota. Para anlisis de alimentos serecomienda no esterilizar.

Usos:

El Agar de Bilis y Rojo Violeta puedeser empleado en la prueba presuntivapara coliformes en leche y otrosalimentos, segn lasrecomendaciones de la APHA(mtodos estndar para el examen deproductos lcteos).

El material en estudios siembra enpequeas alicuotas, y se vaca enseguida el Agar de Bilis y Rojo

Violeta. Si se desea, despus de quelas cajas se han solidificado, se les

puede agregar otro poco del medio decultivo a manera de formar una capasuperficial. Algunos laboratoriosacostumbran hacer esto ltimo puesas se descarta todo desarrollo que se

presente en la superficie ya que sterepresenta una contaminacinposterior y no propia del producto enestudio.

En estudios realizados por Hartmanse demostr que el medio preparadoy solamente hervido, da los mismosresultados que el medio esterilizadoen autoclave.

AGAR DE BILISVERDE BRILLANTE

Cat. 211708 450 g

Para determinar el grado decontaminacin causada por grmenesdel grupo coliforme en aguas de usocomn, potables y de drenaje.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Gelatina 8.250 gLactosa 1.9 gAgar 10.150 gSulfito de Sodio 0.205 gFuscina Bsica 77.6 mgErioglaucina 64.9 mgCloruro Frrico 20.5 mgFosfato Monopotsico 15.3 mgBilis de Buey 2.95 mgVerde Brillante 29.5 mcg

pH final 6.9 0.2

Preparacin:1.- Suspender 20.6 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada de buena calidad.2.- Dejar en reposo de 5 a 10 minutospara que el agar se hidratecorrectamente.3.- Calentar agitando frecuentemente

y hervir durante un minuto.


22/108

22

4.- Esterilizar en autoclave a 121Cdurante 15 minutos.5.- Dejar enfriar entre 45 a 50C ydistribuir en cajas de Petri o en otrosrecipientes apropiados. El medio

preparado es sensible a la luz.

Usos:

Puede emplearse para apreciar elgrado de contaminacin de muestrasde aguas, de diversos alimentos ascomo de otros materiales. Para elrecuento de bacterias coliformesdebern emplearse diluciones de lamuestra, que den cuando menos un

nmero de 10 a 50 colonias por placa,utilizando la tcnica del vaciado. Esdecir, practicar siembras de variasdilaciones del material en estudio enel medio fundido, mezclar y vaciar ensus placas respectivas. Una vezsembradas stas, incubarlas entre 35a 37C de 17 a 19 horas.

Las colonias de coliformes presentanuna zona central roja intensarodeadas de un borde de color rosa,destacndose ntidamente del fondoazul obscuro del medio de cultivo.El medio es sensible a la luz lo que leprovoca una disminucin en laefectividad y en el color del mismo,pasando del azul fuerte al prpura o alrosado. Se recomienda que el mediose prepare inmediatamente antes deusarlo, y en caso necesario,

almacenarlo en la obscuridad ydurante el menor tiempo posible.

AGAR BIOTRIPTASA

AISLAMIENTO DE BRUCELLA

Cat. 214000 450 g

Es un medio muy empleado enbacteriologa sanitaria, y en el cualdesarrollan adecuadamente losgneros Brucellay Listeria.El medio se prepara de acuerdo a lafrmula del APHA.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona Casena 20.0 gDextrosa 1.0 gCloruro de Sodio 5.0 gAgar 15.0 g

pH final 7.2 0.2

Preparacin:1. Suspender 41 g del medio

deshidratado en un litro de aguapurificada.

2. Mezclar bien. Remojar de 10 a 15minutos. Si el medio se va aemplear para aislar Brucella de laleche o de otros especmenes seaaden 1.4 mL de solucin acuosade cristal violeta al 0.1%.

Calentar agitando frecuentemente yhervir durante un minuto. Distribuir yesterilizar a 121C (15 lb de presin)durante 15 minutos.

Usos:

Se usa para el aislamiento ydesarrollo de Brucella y en algunosprocedimientos estndar de la APHApara el examen de productos lcteos.Cuando se sospecha la presencia deBrucella en algn material de floramixta se puede aadir al medio cristalvioleta al 0.1% . Las colonias aisladasen este medio deben transferirse almedio CTA o Agar Soya Tripticasenadonde es posible conservarlas

adecuadamente.


23/108

23

Para diferenciar las 3 principalesespecies de Brucellas, se debernpreparar por separado y a partir delAgar Biotriptasa, placas con Fucsinabsica al 1: 25,000 y tionina 1:

30,000. incubar ambos medios a 35Cdurante 5 das. Brucella abortuscreceen Biotriptasa con fucsina pero no contionina y requiere CO2, B. suis nodesarrolla frente a fucsina pero s entionina y tampoco requiere CO2.

AGAR CITRATO DE

SIMMONSCat. 211761 450 g

PRUEBA DE UTILIZACIN DE CITRATODE ENTEROBACTERIAS

El Agar Citrato de Simmons se usapara diferenciar las bacteriasentricas Gram Negativas, basndoseen la utilizacin del citrato.

Recomendable para la diferenciacinde coliformes asilados del agua.

FRMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:Fosfato Dihidrogenado de Amonio 1.00 gFosfato Dipotsico 1.00 gCloruro de Sodio 5.00 gCitrato de Sodio 2.00 gSulfato de Magnesio 0.20 gAgar 15.00 gAzul de Bromotimol 0.08 g

pH final 6.9 0.2

Preparacin:1.- Suspender 24.2 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Dejar remojar de 5 a 10 minutos.3.- Mezclar bien y calentar agitandofrecuentemente hasta ebullicin ycompleta disolucin.4.- Distribuir volmenes de 3 mL entubos de 13 x 100 mm.

5.- Esterilizar a 121 C durante 15minutos.

6.- Los tubos se dejan enfriar enposicin inclinada de manera que elmedio de cultivo en el fondo del tuboalcance una profundidad de 1 a 1.5cm. Se puede emplear tambin como

medio en placas.

Usos:

Este medio se puede emplear de lamisma manera que el citrato de Koserpara hacer la prueba de utilizacin decitrato como una de las reacciones delIMViC. Pueden hacerse cultivos enplaca, o si se prefiere el medio

inclinado, se inocula estriando lasuperficie y puncionando el fondo. Loscultivos se incuban durante 4 das de35 a 37C. Si no se obtienenresultados precisos, lo cual puedesuceder con cepas de Providencia, esnecesario hacer nuevas pruebasincubando a temperatura ambientedurante 7 das. Solamente losmicroorganismos que utilizan el citratocomo nica fuente de carbono, crecenen el Agar Citrato de Simmons.

La aparicin de un crecimiento visiblegeneralmente va acompaado de uncambio alcalino (azul) indicador.

Este medio puede ser utilizadoespecialmente en la diferenciacin debacilos entricos como se indica acontinuacin:

PRUEBANEGATIVA

PRUEBAPOSITIVA

Escherichia ArizonaShigella CitrobacterMima(- o +) SalmonellaSerratia HerellaCitrobacter Klebsiella

Listeria


24/108

24

AGAR PARACLAMIDOSPORAS

PRODUCTO FUERA DE LINEA

MEDIO ESPECIAL QUE PROMUEVE YFAVORECE LA FORMACIN DECLAMIDOSPORAS POR Candidaalbicans.

FRMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:Sulfato de Amonio 1.00 gFosfato Monopotsico 1.00 gAzul de Tripn 0.10 gPolisacridos Purificados 20.00 gBiotina 5.0 mcgAgar 15.00 g

pH final 5.1 0.2

Preparacin:1. Suspender 37 g del medio

deshidratado en un litro de aguapurificada.

2. Dejar remojando el mediodeshidratado (agitndoloespordicamente), un lapso de 10minutos para que se hidraten bien

las partculas de Agar.3. Calentar con agitacin continua yhervir un minuto.

4. Esterilizar en autoclave a 121Cdurante 20 min. Vaciar en cajas dePetri ( 12 mL por caja de 9-10 cmde dimetro)

Si se desea preparar este medio anms selectivo: dejarlo enfriar entre 45-

50C y agregar 40 unidades dePenicilina, 40 microgramos deEstreptomicina y de 0.1 a 0.5 mg decicloheximida por mL de medio agarpara Clamidosporas. Hay que teneren cuenta que un cierto nmero deespecies de Candida son inhibidaspor 0.5 mg de cicloheximida. Sinembargo, la mayor parte de las cepasde Candida albicansson resistentes a5 mg / mL de dicha droga.Pueden utilizarse otras mezclas

antimicrobianas como polimixina B

6000 unidades + Bacitracina 100 mg+ 100 mg de cicloheximida en un litrode medio de cultivo, 50 mg decloramfenicol en 1000 mL de medio.

La adicin de antibiticos al medio decultivo permite aislar directamenteCandida albicans a partir de lamuestra clnica en estudio e identificarla formacin de clamidosporas,simultneamente incubar porduplicado a 28 y 35C de 24 a 76horas.

Obtencin de clamidosporas porCandida albicans

Una tensin ligeramente baja deoxgeno favorece la formacin declamidosporas por lo que la resiembradeber hacerse por incisin profunda(ver Agar Czapek Dox Bioxon212950) Las clamidosporas sonformas de resistencia, globulosas,redondas u ovales que presentan unapared doble gruesa, siendo de mayortamao que las blastosporas.Retienen el colorante azul de tripn.Se presentan tanto en la punta delfilamento (terminales) comointercaladas dentro de la hifa(Clamidosporas intercalares)

AGAR CLED

Cat. 211773 450 g

CISTINA-LACTOSA-DEFICIENTE ENELECTROLITOS.

Para cultivar grmenes Grampositivos y Gram negativos eninfecciones urinarias

Para el desarrollo y el recuento enbacteriologa urinaria de grmenes

Gram positivos y Gram Negativos.Impide el swarming delProteus


25/108

25

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Gelatina 4.0 gExtracto de Carne 3.0 gPeptona de Casena 4.0 gLactosa 10.0 gL-Cistina 0.128 gAzul de Bromotimol 0.02 gAgar 15.0 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:1.- Suspender 36 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar lentamente agitando con

frecuencia.4.- Hervir durante un minuto yesterilizar a 121C durante 15minutos.5.- Enfriar a 50C y vaciaraspticamente6.- Vaciar en cajas de Petri.7.- Una vez solidificado, invertir lasplacas para evitar el exceso dehumedad.

Usos:

El Agar Cled (Cistina-Lactosa-deficiente en electrolitos) crecenprofusamente la gran mayora de lasbacterias que provocan infeccionesurinarias pudindose diferenciar oidentificar sus colonias respectivas.Tiene adems la ventaja de impedir ladifusin del Proteus en la superficiedel medio, lo que hara fracasar la

prueba. La presencia de bacteriascontaminantes como difteroides,lactobacilos y otros microorganismos,nos indica el grado de cuidado con elque fue tomada la muestra de orinaen estudio.

Los cultivos urinarios debernrealizarse con la primera muestramatutina y previo aseo escrupulosode las zonas genitales. Utilizar elvolumen medio de la misma para quela primera porcin de la miccin

arrastre los microorganismosestacionados normalmente en lauretra.Los microorganismos que provocaninfecciones en las vas urinarias son

por lo general abundante y de unasola especie. El colibacilo es elgermen que se asla con mayorfrecuencia.La siembra de la muestra puedehacerse por el mtodo de lasdiluciones o por estra sobre lasuperficie del agar con asa calibrada.Efectuar los recuentos de coloniasdespus de 18 horas de incubacin a35 C. Reportar el nmero de 100 000

(10 o ms ya que tiene un gran

significado clnico para considerarsecomo una infeccin en vas urinarias.

Caractersticas de las colonias:

E. coli

Grandes amarillas, elevadas, opacas,con el centro ligeramente msobscuro. Agar amarillo.

Enterobacter

Semejantes a E. colipero mucosas yde mayor tamao. Agar amarillo.

Klebsiellas

Grandes amarillas o blancoamarillentas. Sumamente mucosas y

elevadas. Pueden presentar unaligera tonalidad azulada. Agaramarillo.

Proteus

Azules, translcidas con bordesirregulares. Poco elevadas.

Pseudomonas


26/108

26

Verde azuladas plidas. Consuperficie mate tpica y con contornosirregulares. Olor dulce. Agar azulverdoso.

Salmonella, Shigella, Serratia,Providencia.

Azul a azul intenso.

Streptococus fecalis

Muy pequeas, de 0.4 mm. Amarillas,opacas. Agar amarillo.

Corinebacterias

Muy pequeas, grises.

Estafilococos

Pequeas de color amarillo, opacas,el agar es amarillo.

AGAR DE CZAPECKDOX

Cat 211776 450 g

PARA CULTIVAR HONGOS YPROMOVER LA FORMACIN DECLAMIDOSPORAS.

Ampliamente usado en Microbiologade suelos para cultivar hongos y

bacterias del mismo, as como en laformacin de clamidosporas porCandida albicans.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADASacarosa 30.0 gNitrato de Sodio 3.0 gFosfato Dipotsico 1.0 gSulfato de Magnesio 0.50 gCloruro de Potasio 0.50 gSulfato Ferroso 0.01 gAgar 15.0 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 50 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.

2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar agitando con frecuencia yhervir hasta disolucin completa.

(aproximadamente un minuto)Esterilizar a 121C durante 15minutos.4.- Mezcle muy bien antes de vaciarloen tubos o en cajas de Petri, (12 mLpor caja).5.- Deje que los tubos solidifiquen enposicin inclinada. Si se requiere

bajar el pH a 3.5, agregue 10 mL decido lctico al 10% por litro de mediodespus de la esterilizacin.

El Agar de Czapek Dox es un mediosemisinttico que contiene nitrato desodio como la nica fuente denitrgeno y es uno de los mediosslidos ms tiles para el cultivo dehongos en general, especialmentesaprofticos y fitopatgenos.

TCNICA GENERAL PARA EL CULTIVO DEHONGOS:Evitar la humedad excesiva delmedio. Para ello vaciar el agar fundidoenfriado, entre 45-50C. Almacenarlas placas en posicin invertida.

Inocularlas con asa recta o agujateniendo la precaucin de mantenerlas placas invertidas a fin de no

desparramar las esporas sobre lasuperficie del medio.

El tiempo y la temperatura deincubacin varan considerablementede acuerdo con la clase de hongo.Como regla general incubar de 1 a 2semanas a temperatura ambiente (mas o menos 25C para mohos) y de24 a 48 horas para Candida albicans


27/108

27

AGARDESOXICOLATO

Cat. 225300 450 g

PARA EL AISLAMIENTO Y RECUENTODE BACTERIAS COLIFORMES ENDIVERSOS ALIMENTOS Y EN AGUA.

Este medio se emplea principalmentepara aislar y hacer recuentos demicroorganismos coliformes endiversos alimentos y en agua dediversos tipos.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 5.0 gPeptona de Carne 5.0 gLactosa 10.0 gCloruro de Sodio 5.0 gCitrato de Sodio 1.0 gDesoxicolato de Sodio 1.0 gRojo Neutro 0.033 gCitrato Frrico 1.0 gFosfato Dipotsico 2.0 gAgar 16.0 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 46 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar agitando con frecuencia.4.- Hervir a disolucin completa delmedio(aproximadamente un minuto).5.- Dejarlo enfriar entre 45 - 50C y

vaciar en cajas de Petri, matraces oen tubos de ensaye grandes.NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. NOSOBRECALENTAR.El medio puede guardarse enrefrigeracin. Al momento deemplearse calentarlo en bao de aguapara fundirlo.Hierva nicamente el tiempoindispensable para que se funda.

El Desoxicolato y el Citrato inhiben eldesarrollo de los grmenes Grampositivos especialmente el primero.

Para determinar y contar coliformes

en aguas y en leche hay queincorporar el agar fundido (cuando latemperatura baje entre 45 - 50 C) unmL por placa de las diluciones de lamuestra en estudio.

Si se sospecha que el alimentocontiene un escaso nmero debacterias, entonces hacer siembrascon volmenes variables (de 1 a 5mL)de la muestra sin diluir.

Si se vierte una capa delgada de AgarDesoxicolato al medio ya inoculado ysolidificado, se facilita bastante elrecuento de las colonias

Las colonias de los grmenesfermentadores de la Lactosa, quecrecen en el seno del medio, son decolor rojo o rosa brillante y por logeneral, de forma lenticular. Encambio, las que se desarrollan en lasuperficie son grandes y de color rosaen el centro como E. coli mientras quelas colonias de los microorganismosque no fermentan la lactosa comoSalmonella, Shigella y Proteus sonincoloras. Las colonias deEnterobacter son plidas en las orillasy de color rosa en el centro.


28/108

28

AGAR DE DEXTROSAY PAPA

Cat. 211900 450 g

CULTIVO E IDENTIFICACIN YRECUENTO DE HONGOS YLEVADURAS

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAInfusin de Papa 4.0 gDextrosa 20.0 gAgar 15.0 g

pH final 5.6 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 39 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar agitando con frecuencia.4.- Hervir durante un minuto yesterilizar a 121C durante 15minutos.5.- Una vez esterilizado, enfriar a 40 -

45 C y vaciar en cajas Petri.6.- Cuando el medio se va a utilizarpara cuenta en placa para determinarel contenido de levaduras y mohos, lareaccin deber ajustarse, almomento de vaciar las placas, a unpH de 3.5 + 0.1Agregar 14 mL de cido tartricoesterilizado al 10% a cada litro delmedio fundido y enfriado a 45C. Norecaliente el medio despus de la

adicin del cido tartrico.

Usos:Se emplea en el anlisis de productoslcteos, bebidas embotelladas,alimentos congelados y otros tipos dealimentos. Tambin puede usarse enla identificacin de hongos ylevaduras de acuerdo a su morfologacelular o en mtodos de microcultivoen portaobjetos.

No vuelva a calentar el medioadicionado con cido, ya que el agarpuede hidrolizarse y no se solidificar.

AGAR DE DEXTROSASABOURAUD

Cat. 210700 450 g

CULTIVO Y CONSERVACIN DEHONGOS

El Agar de Dextrosa Sabouraud se

recomienda para el cultivo yconservacin de hongos. Es un medioque ha sido extensamente usado parael aislamiento de hongos y propsitosgenerales en trabajos de Micologa.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 5.0 gPeptona de Carne 5.0 gDextrosa 40.0 gAgar 15.0 g

pH final 5.6 0.2

Preparacin:1.- Suspender 65 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Mezclar bien hasta que se obtengauna suspensin uniforme.4.- Calentar agitando frecuentementey hervir durante un minuto hasta

disolucin.5.- Distribuir y esterilizar a 121 Cdurante 15 minutos.

Usos:

Puede emplearse para el aislamiento,identificacin y conservacin dehongos patgenos saprfitos.

Cuando los materiales en estudio

estn altamente contaminados, elaislamiento mejora si se aaden al


29/108

29

medio sustancias antimicrobianasselectivas.

Georg y colaboradores recomiendanagregar aspticamente 0.5 mg de

Cicloheximida, 20 unidades dePenicilina y 40 mg de Estreptomicinapor mL de medio, minutos antes deusarlo, para la inhibicin de la floracontaminante que pudiera estorbar elcultivo de hongos.

Para disminuir el crecimiento de otrosmicroorganismos se usan variosinhibidores como Telurito, SalesBiliares y Colorantes.

La incubacin de las cajas debehacerse a 25 a 35C. La adicin de0.1g de Trifenil Tetrazolio (T.T.C.) porcada 100 mL de medio facilitagrandemente la identificacin dediversas especies del gnero deCndida, ya que las levaduras dancolonias de diferentes colores comoblancas, rosas, rosadas, rojas yvioletas. Puede lograrse unSabouraud muy rico, disolviendo elmedio en 1 litro de Infusin deCerebro Corazn. A este medioenriquecido pueden agregarse losantimicrobianos adecuados, si as sedesea.

AGAR DE DEXTROSA

Y TRIPTICASEINA

Cat. 213002 450 g

PARA EL CULTIVO DE ORGANISMOSAEROBIOS Y ANAEROBIOS

Es un medio semislido de usogeneral en microbilogia adecuadopara el desarrollo de variosmicroorganismos. Se le utiliza para

diferenciar grmenes tanto aerobioscomo anaerobios y para el estudio de

la fermentacin de la glucosa y ladeterminacin de la movilidad

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 20.0 gDextrosa 5.0 g

Agar 3.5 gAzul de Bromotimol 0.01 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:1.- Suspender 28.5 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar 5 minutos.3.- Mezclar bien hasta que se obtengauna suspensin uniforme.4.- Calentar agitando frecuentementey hervir durante un minuto hastadisolucin.5.- Distribuir en tubos llenndoloshasta la mitad de su capacidad,esterilizar a 118 C (No ms de 12 lbde presin) durante 15 minutos.6.- Almacenar a temperaturaambiente en tubos sellados paraprevenir la deshidratacin. El medio

puede ser almacenado y utilizadovarias semanas despus de suelaboracin.

Usos:

El Agar Dextrosa y Tripticasena seinocula por punsin hastaaproximadamente la mitad del mediode cultivo. Las reacciones puedenaparecer de 12 a 18 horas despus

de inoculadas.

La fermentecin de la dextrosa sedetermina por el cambio de color quesufre el medio (reaccin cida del azulde bromotimol).La produccin de gasse manifiesta por la presencia deburbujas en el agar o espuma que seforma en la superficie. La movilidad sedetermina observando el desarrollo demicroorganismos a partir de la linea

de inoculacin.


30/108

30

Si el germen es mvil s difundir portodo el medio perdiendo ste sutransparencia original yenturbindose. Si no lo es, slo habrdesarrollado a lo largo de la lnea de

siembra.

AGAR ENTERICOHEKTOEN

Cat. 224400 450 g

El Agar Entrico Hektoen es usado

para el aislamiento y diferenciacin depatgenos entricos, comoSalmonella, Shigella y otrasenterobacterias.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Carne 12.0 gExtracto de Levadura 3.0 gSales Biliares 9.0 gLactosa 12.0 gSacarosa 12.0 gSalicina 2.0 g

Cloruro de Sodio 5.0 gTiosulfato de Sodio 5.0 gCitrato de Hierro y Amonio 1.5 gAgar 14.0 gAzul de Bromotimol 0.065 gFuscina Acida 0.1 g

pH final 7.5 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 76 g del mediodeshidratado en un litro de agua

purificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar y hervir hasta lograr lacompleta solucin4.- Enfriar a 50 - 60 C y vaciar encajas de Petri.

NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE.

Usos:

La diferenciacin entre coliformes yotros organismos entricos se hacefcilmente. Las colonias de coliformesson de color salmn a naranja

mientras que Salmonella y Shigellason de verde a azul verdoso. ElProteus puede no ser inhibido peroproduce una colonia verde amarillentacuando hay crecimiento. Las coloniasde Proteus y Salmonella puedenpresentar un centro negro si formanH2S. El espcimen se siembradirectamente por estra en lasuperficie del medio, o bien seenriquece en Caldo Tetrationato, tina

o Caldo GN Hajna y se incuba a 35Cde 18 a 24 horas.

Se recomienda sembrar la muestra, almismo tiempo en otro medio selectivopara enterobacterias, porque as selograr un mayor nmero de cultivospositivos. Estos pueden ser porejemplo Agar Eosina y Azul deMetileno Cat. 210600, AgarMacConkey Cat. 210900, Agar SSCat. 214400, Agar Verde Brillante Cat.214500, Agar Desoxicolato Cat.225300 o Agar XLD Cat. 211741.

A partir de colonias aisladas tpicashacen pruebas bioqumicas.El sistema indicador de acidez oalcalinidad es de Azul de Bromotimoladicionado de fucsina cida o sea, el

clsico indicador de Andrade.Caractersticas de las colonias:

Arizona, Citrobacter:

Azul verdosas, con centro negro. Deanaranjadas hasta amarillas concentro negro. Bordes claros.

Enterobacter, Serratia:


31/108

31

De amarillas a rosa salmn.

Escherichia coli:

Moderadamente inhibida. De naranjaa rosa salmn.

Klebsiella:

De naranja a rosa-salmn.

Proteus:

En su mayora inhibidos. Coloniasverdosas y con centro negro si forman

H2S.

Pseudomonas:

Crecen ocasionalmente. Coloniasplanas que van del verde al caf.

Salmonella:

Azul a verdeazuladas. Con centronegro si producen H2S. Bordes claros.Shigella:

Verdes a verdeazuladas.

AGAR DE EOSINA YAZUL DE METILENO

Cat. 210600 450 g

PARA AISLAMIENTO YDIFERENCIACIN DE COLIFORMESDE OTRAS ENTEROBACTERIAS DEINTERES MEDICO Y SANITARIA.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Gelatina 10.0 gLactosa 5.0 gSacarosa 5.0 gFosfato Dipotsico 2.0 g

Eosina Y 0.4 gAzul de Metileno 0.065 gAgar 13.5 g

pH final 7.2 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 36 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada de buena calidad.2.- Mezclar y remojar de 10 a 15minutos para hidratar correctamente

el medio.3.- Calentar agitando con frecuencia4.- Hervir un minuto5.- Esterilizar en autoclave a 121Cdurante 15 minutos.6.- Dejar que se enfre la solucin a50C.7.- Agitar suavemente, evitando laformacin de burbujas, para que lacomposicin del medio se uniformicey vaciar en cajas Petri estriles.

8.- Dejar que el medio se solidifique yluego invertir las placas para que nose deposite demasiada humedadsobre la superficie del mismo.

Usos:

Este es el medio clsico, que al igualque el Agar con Eosina y Azul deMetileno de Levine, se utiliza para elestudio de las enterobacterias. Lamorfologa, aspecto y color de lascolonias es la misma en ambos


32/108

32

medios. Adems de emplearseampliamente en Bacteriologa Mdica,se utiliza en las tcnicasrecomendadas por la American PublicHealth Association y la Sociedad

Americana de Bacterilogos, para ladeteccin y recuento demicroorganismos coliformes, quepueden estar contaminando diversosalimentos y aguas de bebida dediversa ndole, destinadas al consumohumano.Por su contenido en lactosa ysacarosa es posible diferenciar en elprimocultivo: Salmonellas y Shigellas,Lactosa y Sacarosa negativas de

otras enterobacterias lactosanegativas pero sacarosa positivas,tales como Proteus vulgaris,Citrobacter y Aeromonas.

La microflora acompaante, queentorpece el aislamiento de losgrmenes de inters mdico, esampliamente inhibida por loscolorantes de la frmula, sobre todo laflora Gram positiva.

En este medio tambin es posible laidentificacin rpida de Candidaalbicans (incubando en atmsfera conCO2) y en ocasiones se logra aislarNocardia.


Escherichia coli

Elevadas o ligeramente convexas. de2 a 3 mm. de dimetro. presentan a laluz transmitida un centro azul-negro,rodeado de un borde angosto y claro;y brillo metlico azul verdoso, a la luzreflejada. Algunas cepas no muestranbrillo metlico. Poca tendencia aldesarrollo confluente.

Enterobacter aerogenes, Klebsiella:

Colonias grandes de 4 a 6 mm dedimetro, elevadas y mucoides contendencia a unirse. Usualmente nopresentan brillo metlico. A la luz

transmitida muestran un centrogrisceo caf y bordes claros.

Salmonella y Shigella

Ligeramente elevadas, de tamaomedio, de 1 a 2 mm de dimetro.Transparentes, desde incoloras hastaambarinas.

Candida albicans:

Despus de 24 a 48 horas deincubacin en atmsfera de un 10%de CO2 y a 35-36C, pueden presentarcolonias plumosas semejantes atelaraas (miceliales). Las colonias nosiempre presentan un aspecto tpico.

Estafilococos Coagulasa positivos.

Muy pequeos, puntiformes, incolorosy bastante inhibidos.

Proteus sp

Cuando no hay swarming, semejantesSalmonella y Shigella. Puede evitarsela difusin del Proteus agregando alMedio de Cultivo huellas de alfa-p-nitrofenil-glicerol.


33/108

33

AGAR PARAESTAFILOCOS N 110

Cat. 210500 450 g

MEDIO SELECTIVO PARA AISLAMIENTODE ESTAFILOCOCOS.

Es un medio altamente selectivo parael aislamiento e investigacin deestafilococos.El medio contiene gelatina y manitolfacilitando as el aislamiento deestafilococos que atacan y degradandichas substancias.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:Extracto de Levadura 2.5 gPeptona de Casena 10.0 gGelatina 30.0 gLactosa 2.0 gD-Manitol 10.0 gCloruro de Sodio 75.0 gFosfato Dipotsico 5.0 gAgar 15.0 g

pH final 7.0 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 149 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.-Homogeneizar y calentar agitandofrecuentemente.4.- Hervir durante un minuto.5.- Esterilizar a 121C durante 15minutos.

6.-Una vez esterilizado homogeneizarpara suspender el precipitado y vaciaren cajas de Petri. El medio puedeemplearse sin esterilizar, hirvindolodurante 5 minutos.

Usos:

El Agar para Estafilococos No.110 seemplea para aislar estafilococos deprocesos purulentos, casos de

neumona, meningitis, forunculosis,uretritis, vaginitis, etc. Tambin se

emplea este medio para aislarestafilococos que contaminanalimentos diversos y que producenintoxicaciones alimentarias

Es posible enriquecer el medioagregando 5% de sangre con lo quese obtiene buenas reacciones dehemlisis y formacin de pigmentoamarillo dorado. Si se agrega a lascolonias seleccionadas unas gotas deazul de bromotimol, podemos apreciarla fermentacin del manitolapareciendo alrededor de ellas unhalo amarillo. Por ltimo, las placas sepueden cubrir con 5 mL de una

solucin saturada de sulfato deamonio. o mejor an, con una gota desolucin de cido Sulfosaliclico al20% e incubarlas durante 12 minutospara apreciar la hidrlisis de lagelatina: se observan zonas claras(reacciones de Stone).

AGAR EXTRACTOGLUCOSA YTRIPTICASEINA

Cat. 211722 450 g

RECUENTO EN PLACAS DEBACTERIAS EN AGUAS POTABLES YDE DRENAJE.

Es un medio altamente nutritivo, yest diseado de acuerdo a la frmuladel agar estndar nutritivo (APHA)

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 5.0 gExtracto de Carne 3.0 gDextrosa 1.0 gAgar 15.0 g

pH final 7.0 0.2


34/108

34

Preparacin:


2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar agitando con frecuencia4.- Hervir un minuto5.- Esterilizar en autoclave a 121Cdurante 15 minutos.Una vez esterilizado enfriar a 40-45Cy vacie en cajas de Petri.

Usos:

El Agar Extracto, Glucosa y

Tripticasena se emplea para elrecuento bacteriano en aguaspotables y de drenaje por el mtodode la cuenta en placas.

Las tcnicas que se siguen parapreparar diluciones, distribuir enplacas, incubar, contar colonias, etc.se ajustan a las indicaciones del librostandard Methods for the Examinationof Water and Waterwaste.

AGAR DEFENILALANINA

Cat. 211785 450 g

Para identificar enterobacterias, por

su capacidad de transformar laFenilalanina, por desaminacinoxidativa, en cido fenil pirvico.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:D-L Fenilalanina 2.0 gExtracto de Levadura 3.0 gCloruro de Sodio 5.0 gFosfato de Sodio 1.0 gAgar 12.0 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:


2.- Remojar de 10 a 15 minutos.3.- Calentar a ebullicin agitandofrecuentemente hasta que se disuelvael medio (aproximadamente unminuto)4.- Envasar en tubos de ensaye yesterilizar en autoclave a 121Cdurante 10 minutos.5.-Solidificar en posicin inclinada.

Usos:

Sembrar el inoculo bacterianomasivamente. Incubar de 18 a24horas a 35C. Agregar de 4 a 5gotas de Cloruro Frrico al 10%. Laaparicin de un color verde intenso(de 1 a 5 minutos) indica la presenciade cido fenil pirvico (A.F.P.)

Proteus y Providencia son las nicasenterobacterias que dan positiva lareaccin del A.F.P., las dems sonnegativas.

Para diferenciar Proteus deProvidencia sembrar masivamente elgermen sospechoso en Base de AgarUrea de Christensen o Caldo Urea.Los Proteus hidrolizan la urea.Providenciaes ureasa negativa.


35/108

35

AGAR DE HIERRO DEKLIGER

Cat. 210200 450 g

DIFERENCIACIN DE ENTEROBACTERIAS

El Agar de Hierro de Klieger es unmedio para diferenciar bacilosentricos Gram negativos en unaforma similar al Agar de Hierro yTriple Azcar (TSI) y se basa en lasmismas propiedades de fermentar laglucosa y Lactosa junto con laformacin de sulfuros.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:Peptona de Casena 10.0 gPeptona de Carne 10.0 gLactosa 10.0 gDextrosa 1.0 gCloruro de Sodio 5.0 gCitrato de Amonio Frrico 0.5 gTiosulfato de Sodio 0.5 gRojo de Fenol 0.025 gAgar 15.0 g

pH final 7.4 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 52 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.-.Agregar 10 mL de glicerol ymezclar muy bien3.- Remojar de 10 a 15 minutos paraque se hidraten correctamente laspartculas de agar

4.- Calentar agitando frecuentementey hervir hasta que se disuelva elmedio completamente por un minuto.NO SOBRECALENTER5.- Distribuir en tubos de ensaye omatraces y esterilizar en autoclave a12C durante 15 minutos.6.- Distribuir en tubos de ensayedejando a estos ltimos que sesolidifiquen en posicin inclinada, demanera a obtener superficies

prolongadas, es conveniente su

utilizacin el mismo da de supreparacin.

Usos:

Inocular los tubos por estrasuperficial con la colonia en estudio ypor picadura en el fondo del medio.

Las bacterias fermentadoras de lalactosa acidifican totalmentesuperficie y picadura desarrollando uncolor amarillo en todo el medio.Los microorganismos que no lafermentan acidifican solamente elfondo del medio, permaneciendo la

superficie roja cereza. La formacinde cido sulfhdrico se observa comoun ennegrecimiento este puede sertan fuerte que casi todo el medio sedesarrolla el color negro o puede serligero y se observa de preferencia enla picadura del medio.

Los resultados se interpretan de igualforma que para el medio Agar deHierro y Triple Azcar.

AGAR DE HIERRO YLISINA

Cat. 211719 450 g

Diferenciacin temprana de

Salmonella y Arizona. Es un medio tilen la diferenciacin temprana de losgneros Salmonella y Arizona deCitrobacter. Se basa en ladescarboxilacin de la Lisina,formacin de cido sulfhdrico yfermentacin de la glucosa. Tambines posible detectar la desaminacinde la lisina.


36/108

36

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Gelatina 5.0 gExtracto de Levadura 3.0 gDextrosa 1.0 gL-Lisina 10.0 gCitrato de Hierro y Amonio 0.05 gTiosulfato de Sodio 0.04 g

Prpura de Bromocresol 0.02 gAgar 13.5 g

pH final 6.7 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 33 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar 15 minutos.3.- Calentar cuidadosamente,agitando con frecuencia y hervirdurante un minuto, o hasta ladisolucin completa del agar.4.- Distribuir en tubos con tapn derosca. Esterilizar a 121C durante 12minutos.5.-Enfriar en posicin inclinada. Cerrarcon cuidado las tapas a fin de evitarprdidas de agua por evaporacin.

Usos:Algunas cepas de Arizona puedenfermentar, o no rpidamente lalactosa y formar colonias incoloras ode color rosa hasta el rojo en mediostales como el MacConkey o el AgarDesoxicolato. Las cepas quefermentan rpidamente la lactosaproducen una gran cantidad de cidocambiando al amarillo el color original

de esos medios. Esto puedeinterpretarse errneamente yconfundir una cepa de Arizona comosi fuera coliforme.

El Agar de Hierro y Lisina estaespecialmente adaptado para evitardicha confusin, Salmonella yArizona alcalinizan el medio aldescarboxilar la lisina, comunicndolea ste un color azulado prpura en

toda la superficie.

Los grmenes Proteus y Providenciapresentan en la superficie del medioun color caracterstico rojo-anaranjado. Y en el fondo existeproduccin de cido que se manifiesta

por un color amarillento, y que esdebido a la desaminacin de la lisina.

AGAR DE HIERRO YTRIPLE AZUCAR

(AGAR TSI)

Cat. 211400 450 gDIFERENCIACIN E IDENTIFICACIN DEENTEROBACTERIAS

Medio diferencial muy usado en laidentificacin de enterobacteriaspatgenas y saprfitas en los anlisisbacteriolgicos rutinarios de heces,principalmente.

Este medio se usa como clave parainiciar la identificacin deenterobacterias en algunos esquemasde la FDA.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 10.0 gPeptona de Carne 10.0 gCloruro de Sodio 5.0 gLactosa 10.0 gSacarosa 10.0 gDextrosa 1.0 gSulfato de Amonio Frrico 0.2 g

Rojo de Fenol 0.025gAgar 13.0 gTiosulfato de Sodio 0.2 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 59.4 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar de 10 a 15 minutos.

3.- Calentar agitando con frecuenciahasta ebullicin y completa disolucin.


37/108

37

4.- Esterilizar a 118 durante 15minutos. Los tubos se deben enfriaren posicin inclinada de manera queel medio de cultivo en el fondo deltubo alcance una profundidad de 1.5 a

2.0 cm.

Usos:

Su modo de acin es semejante almedio de Kliger que contieneazcares, adicionado adems con 1%de sacarosa. Esto permite elreconocimiento y exclusin deProteus.

Hafnia y Providenciano fermentan lalactosa o lo hacen muy lentamente ys en cambio fermentan la sacarosacon bastante rapidez, lo cual permiteexcluir a ese grupo de bacterias deSalmonellay Shigella.

AGAR INFUSION

CEREBRO CORAZONCULTIVO DE BACTERIAS EXIGENTES YDE DIFCIL DESARROLLO

Cat 214700 450 g

Es un medio slido rico en nutrientes,adecuado para el cultivo de variosmicroorganismos exigentes entre loscuales se encuentran diversos tipos de

bacterias, hongos y levaduras.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 16.0 gInfusin de Cerebro Corazn 8.0 gPeptona de Carne 5.0 gFosfato Disdico 2.5 gCloruro de Sodio 5.0 gDextrosa 2.0 gAgar 13.5 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:

1. Suspender 52 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.

2. Remojar de 10 a 15 minutos.3. Calentar agitando frecuentemente yhervir durante 1 minuto.4. Esterilizar a 121C durante 15minutos. En ocasiones se forma unligero sedimento el cual se debedistribuir a travs del medio poragitacin.

Usos:

El Agar Infusin Cerebro y Coraznse utiliza para el cultivo de una granvariedad de microorganismos talescomo estreptococos y neumococo.

Si se aade al medio 10% de sangredesfibrinada se puede emplear para elcultivo y aislamiento de Histoplasmacapsulatum, y con la adicin deantibiticos el medio se puede

emplear tambin en el aislamiento deotros hongos.

El Agar Infusin de Cerebro yCorazn con cicloheximida ycloramfenicol se recomienda para elaislamiento de hongos de difcilcrecimiento. Ejemplo H. capsulatum yBlastomyces.

En ocasiones se usan placas conagar sangre para pruebas generalesse sensibilidad. Sin embargo, no debeusarse para la determinacin dereacciones hemolticas ya que estemedio lleva una alta concentracin dedextrosa y puede dar reaccionesatpicas.


38/108

38

AGAR DEMAC CONKEY

Cat. 210900 450 g

Medio empleado ampliamente paraaislar e identificar selectivamente aenterobacterias como Salmonella,Shigellas y coliformes a partir deheces fecales, orinas, aguas negras ydiversos alimentos.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:Peptona de Gelatina 17.0 gPeptona de Casena 1.5 gPeptona de Carne 1.5 g

Lactosa 10.0 gSales Biliares 1.5 gCloruro de Sodio 5.0 gAgar 13.5 gRojo Neutro 0.03 gCristal Violeta 0.001 g

pH final 7.1 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 50 g. del medio

deshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar entre 10 y 15 minutos.3.- Calentar a ebullicin, agitando confrecuencia y hervir durante un minuto.4.- Esterilizar a 121C durante 15minutos.5.-Enfriar a 45-50C y vaciar en cajasde Petri 20 mL por placa.Dejar solidificar y luego invertir lascajas para evitar que se deposite un

exceso de humedad en la superficiedel medio.

Usos:

El espcimen puede sembrarsedirectamente en la placa por estrasuperficial, o bien inocularlo enmedios lquidos de enriquecimiento,tales como Base de CaldoTetrationato Cat 21 16 83, Caldo

Selenito Sodio Cat. 22 03 00 o CaldoGN Hajna Cat. (22 76 00). Incubar

placas y caldos a 35C de 18 a 24horas.

Hacer resiembras de estas ltimas enplacas de Agar de MacConkey y

volver a incubar.

Se recomienda sembrarsimultneamente las muestras enotros medios ms selectivos talescomo Eosina y Azul de Metileno (Cat.21 06 00) Agar SS (Cat. 21 44 00)Agar XLD (Cat. 21 17 41) AgarEntrico Hektoen (Cat. 22 44 00) AgarSulfito de Bismuto (Cat.21 17 45)(altamente especfico para Salmonella

typhi), Agar Verde Brillante (Cat. 2145 00) especial para Salmonellas.Los grmenes Gram positivos soninhibidos por las sales biliares y elcristal violeta. Las enterobacteriasfermentadoras de la lactosa bajan elpH del medio que es detectado por elindicador rojo neutro dando coloniasrojas o rosadas. Las nofermentadoras de la Lactosa dancolonias transparentes, incoloras oambarinas.

En el agar de MacConkey crecentambin bacilos Gram negativos queno pertenecen a la familiaEnterobacteriaceae, comoPseudomonas y Aeromonas.Asimismo, pueden desarrollarse ennmero reducido colonias puntiformesde Streptococus fecalis(enterococos)

de color rojo y de algunosestafilococos cuyas colonias sonpequeas, opacas de color rosaplido.

Por ltimo, este medio puede usarseen la diferenciacin deMycobacterium.



39/108

39

Escherichia coli

De rojas a rosadas. No son mucoides.Pueden rodearse de un precipitado

opaco de sales biliares.

Enterobacter:

Grandes, rosadas mucoides

Klebsiella:

Grandes, rosadas, mucoides.

Serratia:

Rojas o rosas. No son mucoides.

Arizona:

Incoloras, transparentes, rojas sifermentan la lactosa.

Citrobacter:

Incoloras, transparentes, rojas sifermentan la lactosa.

Proteus:

Incoloras transparentes.

Pseudomonas:

Incoloras, hasta caf verdoso. Olordulce caracterstico).

Salmonella

Incoloras, transparentes o ambarinas.

Shigella:

Incoloras, transparentes o ambarinas.

Estafilococos:

Puntiformes, rosa plido, opacas yescasas.

Enterococos:

Escasas, puntiformes, rojas, opacas ycon un halo claro como 1 mm dedimetro alrededor de la colonia.

AGAR PARAMETODOS

ESTANDARCat. 211724 450 g

PARA RECUENTO EN PLACA DEBACTERIAS EN MICROBIOLOGIASANITARIA.

Es un medio de cultivo rico ennutrientes y elaborado de acuerdo a laformulacin de la APHA.

El medio es ampliamente utilizadopara el recuento microbiano de laleche y otros alimentos de importanciasanitaria.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 5.0 gExtracto de Levadura 2.5 gDextrosa 1.0 gAgar 15.0 g

pH final 7.0 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 23.5 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar y mezclar bien de 5 a 10minutos.3.- Calentar, agitando con frecuenciay hervir durante un minuto.4.- Distribuir en tubos de ensayo contapn de rosca o en un matraz si elmedio va a usarse poco despus deesterilizarlo.


40/108

40

5.- Esterilizar a 121C durante 15minutos. Puede volverse a fundir, unasola vez cuando se necesita.

Usos:

Se recomienda segn los mtodos dela APHA para recuento de bacteriasde inters sanitario, las cuales seutilizan como ndice de contaminacino carga microbiana en diversosalimentos. Por lo general se coloca 1mL de las diluciones apropiadas, lascuales se aaden al agar estril a unatemperatura de 44- 45C y se incubadurante el tiempo adecuado y se hace

el recuento de las coloniasdesarrolladas. Consultar las tcnicasespecficas de la APHA para caso enparticular.

AGAR DE MUELLERHINTON

Cat. 211667 450 g

PRUEBA DE SENSIBILIDAD AANTIBITICOS Y CULTIVOS DENeisseria.

En un medio muy rico en nutrientesque se recomienda para elaislamiento y desarrollo de gonococosy meningococos. Tambin se emplea,sobre todo, en las pruebas desensibilidad (antibiogramas).

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAExtracto de Carne 2.0 gPeptona de Casena Acida 17.5 gAlmidn 1.5 gAgar 17.0 g

pH final 7.4 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 38 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar durante 10 a 15 minutos.3.- Mezclar bien agitando

frecuentemente.4.- Hervir durante un minuto yesterilizar a 121 C por un tiempo nomayor de 15 minutos.5.- Enfriar a 40-45C y vaciar en cajasde Petri. Si se desea, puedenprepararse placas o tubos de agarchocolate, previa adicin de sangrede carnero o humana, preferiblementela primera, calentando en bao Maraa 80C 10 minutos.

NO SOBRECALENTAR .

Usos:

Es un medio til para el desarrollo debacterias del gnero Neisseria. Serecomienda incuba las cajas a 35C,en atmsfera de CO2 .El Medio deber mantenerse hmedoen su superficie; esto puede lograrsesi dentro de la jarra de anaerobiosis

se coloca un sobre generador deanaerobiosis cerrandohermticamente.

Para realizar las pruebas desensibilidad con sulfonamidas, lascajas deben examinarse despus de12 a 18 horas de incubacin.

Despus se tendrn que revisarperidicamente las zonas deinhibicin ya que el microorganismopuede desarrollarse cuando laconcentracin del agenteantimicrobiano comienza a disminuir.Se obtienen mejores resultados paraaislar Neisserias patgenaspreparando un agar chocolate con elMueller Hinton adicionndole a cada100 mL del medio terminado y fluido1.0 mL de la suspensin VCN ms 1.0

mL de polienriquecimiento.


41/108

41

AGAR NUTRITIVO

Cat. 210400 450 g

USO GENERAL EN BACTERIOLOGA.

El Agar Nutritivo en un medio de usogeneral en el laboratorio, no selectivoy adecuado para el cultivo demicroorganismos poco exigentes.Puede emplearse en bacteriologasanitaria, mdica e industrial.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Gelatina 5.0 gExtracto de Carne 3.0 gAgar 15.0 g

pH final 6.8 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 23 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar y mezclar de 10 a 15minutos.3.- Mezclar y calentar a ebullicin de 1a 2 minutos hasta disolver elproducto.4.-Distribuir y esterilizar a 121 Cdurante 15 minutos.

Usos:

Muy empleado en los anlisis

bacteriolgicos de aguas potables, deuso industrial y residuales, leches yotros alimentos.Se le emplea tambin en lamultiplicacin de microorganismospara producir vacunas, antgenos engeneral; en las pruebas desensibilidad y resistencia, y comobase para preparar medios de cultivoms ricos adicionados de lquido deascitis, etc.

Lo mismo que en pruebasbioqumicas, por ejemplo lisina-descarboxilasa.

AGAR PROTEOSAN. 3

Cat. 220400 450 g

AISLAMIENTO DE BACTERIASPATGENAS

El Agar Proteosa No. 3 ha sido

utilizado para el aislamiento y cultivode grmenes exigentes,especialmente Neisseriagonorrhoeae.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 10.0 gPeptona de Carne 10.0 gDextrosa 0.5 gCloruro de Sodio 5.0 gFosfato de Sodio 5.0 gAgar 15.0 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 45 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Mezclar bien. Remojar de 10 a 15minutos.3.- Calentar agitando frecuentementey hervir durante un minuto.

4.- Distribuir y esterilizar en autoclavea 121C durante 15 minutos.6.- Enfriar y aadir 5% de sangre decordero desfibrinada y estril. Si elmedio va a usarse para el cultivo deNeisseria, calentar la mezcla a 80C,durante 10 minutos o hasta queadquiera un color caf chocolate;enfriar y vaciar en cajas de Petri sindejar de agitarla. Agregar inhibidorVCN (Cat. 211654), ypolienriquecimiento (Cat. 211655) sise desea.


42/108

42

Usos:

El Agar Chocolate se utiliza endiversas formas. Para obtener un

desarrollo satisfactorio de gonococos,se pueden aadir materiales deenriquecimientos tales como plasmade caballo, hemoglobina y azul Nilo,almidn o sangre.

Al incubar placas para el cultivo deNeisseria deber usarse unaatmsfera reforzada con bixido decarbono, en un tarro con buja o velaencendida. Incubar a 35C pero no

ms de 37C.

Se obtienen mejores resultados paraaislar Neisserias patgenas,agregando a cada 100 mL de agarchocolate, 1.0 mL de la mezclaantimicrobiana VCN Bioxon ms 1.0mL de solucin dePolienriquecimiento Bioxon.

AGAR DE SAL YMANITOL

Cat. 214600 450 g

Es un medio selectivo muy empleadopara aislar estafilococos patgenos demateriales clnicos diversos ( orinas,

genitales, heridas exudadosfarngeos, etc.) Tambin se utiliza enla industria alimenticia con los mismosfines, el aislamiento e identificacin deEstafilococos que se encuentran enla leche y productos lcteos, carne yderivados crnicos incluyendoconservas de pescado.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:Extracto de Carne 1.0 gPeptona de Casena 5.0 gPeptona de Carne 5.0 g

Cloruro de Sodio 75.0 gD-Manitol 10.0 gAgar 15.0 gRojo de Fenol 0.025 g

pH final 7.4 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 111 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Mezclar bien y calentar a ebullicindurante 1 minuto.3.- Esterilizar en autoclave a 121Cdurante 15 minutos.4.- Vaciar en cajas Petri.

Usos:

La degradacin del manitol conproduccin de cido cambia el colordel medio de rosado a amarillo.Debido a su alto contenido de clorurode sodio, puede hacerse una siembramasiva del material en estudio.generalmente se incuban las placasunas 36 horas, apareciendo las

colonias de estafilococos patgenosfermentadores del manitol comocolonias grandes y rodeadas de unazona amarilla el resto tienen untamao pequeo y estn rodeadaspor una zona roja. Si agregamos acada litro del medio, una yema dehuevo en condiciones de esterilidad,los estafilococos que adems defermentar el manitol producen lipasa,darn un precipitado amarillento de

cidos grasos alrededor de la colonia.este fenmeno concuerda bastantebien con la propiedad de coagular elplasma que presentan losestafilococos patgenos coagulasapositivos.


43/108

43

AGAR PARASALMONELLA Y

SHIGELLA (AGAR SS)

Cat. 214400 450 g

AISLAMIENTO DEENTEROBACTERIAS PATGENAS.

Medio diferencial selectivo muyempleado en bacteriologa sanitariapara aislar Salmonella y Shigella, apartir de heces, orina y alimentosdiversos, tanto frescos como

enlatados. La inhibicin de bacteriasGram positivas se obtiene por unamezcla de sales biliares.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAExtracto de Carne 5.0 gPeptona de Casena 2.5 gPeptona de Carne 2.5 gLactosa 10.0 gSales Biliares 8.5 gCitrato de Sodio 8.5 gTiosulfato de Sodio 8.5 gCitrato Frrico 1.0 g

Agar 13.5 gRojo Neutro 0.025 gVerde Brillante 0.330 mg

pH final 7.0 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 60 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Remojar unos 15 minutos.

3.- Agitar para obtener unasuspensin homognea.4.- Calentar con agitacin frecuente yhervir durante un minuto.5.- Enfriar entre 45 y 50C y distribuiren cajas de petri empleando 20 mLpor placa6.- Esterilizar en autoclave.

EVITAR CONGELACION

Usos:

Debido a su gran poder de inhibicin,este medio puede sembrarse con unabuena cantidad del material enestudio, pero adems debern

inocularse paralelamente otrosmedios menos inhibidores como AgarDesoxicolato Cat. 225300, AgarMacConkey Cat. 210900, Agar Eosinay Azul de Metileno Cat. 210600 AgarXLD Cat. 211741 y Agar EntricoHektoen Cat. 224400.

Las bacterias no fermentadoras de lalactosa (supuestamente patgenas)dan colonias claras, transparentes e

incoloras, en cambio, los coliformesque son bastante inhibidos formancolonias pequeas que varan de rosaal rojo.

Las bacterias formadoras de sulfurosdan colonias que presentan un centronegro y un halo claro alrededor comoProteus y algunas especies deSalmonella

Las placas del medio se conservan enbuenas condiciones de trabajodurante una semana en elrefrigerador.


Shigella y la mayor parte de lasSalmonellas:

Claras, incoloras, transparentes.Escherichia coli:

Pequeas que van del rosa al rojo.

Enterobacter, Klebsiella:

De mayor tamao que las E. colimucosas, opacas de crema plidohasta rosa.

Proteus y algunasSalmonellas:


44/108

44

Incoloras, transparentes; con uncentro negro si producen H2S.

AGAR PARASELECCION DE

HONGOS

(Agar Micobitico)

Cat 212998 450 g

PARA EL CULTIVO Y AISLAMIENTOSELECTIVO DE HONGOSPATOGENOS.

El Agar Micobitico es un medio paracultivar selectivamente hongospatgenos a partir de muestrasclnicas diversas y de otros materialescontaminados con una flora mixtaasociada. Bsicamente estconstitutido como un Agar Micolgico

(Bioxon 247-1), al cual se le hanaadido los antibiticos: cloramfenicolque abate el desarrollo bacteriano ycicloheximida que inhibe elcrecimiento de hongos saprfitos(mohos).

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Soya 10.0 gDextrosa 10.0 gAgar 15.5 gCicloheximida 0.40 g

Cloramfenicol 0.05 mgpH final 6.9 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 36 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Mezclar cuidadosamente y dejarloen reposo para que se hidratecorrectamente el agar.3.- Esterilizar a 118C durante 15minutos.

4.- Distribuir en cajas de Petri o depreferencia en tubos de ensaye, contapa de rosca, de 20 X 250 mm ydejarlos solidificar en posicininclinada. No sobrecalentar.

El Agar Micobitico es relativamenteestable y puede conservarse bien enrefrigeracin durante varias semanas.

Usos:

El Agar Micobitico Bioxon es muy tilpara aislar hongos patgenos a partirde tipos de muestras altamentecontaminadas con diferentes tipos de

flora acompaante, como soncabellos, raspados de piel, uas,lavados bronquiales, gstricos, tierra,zapatos, etc.

Se recomienda sembrar varias placaso tubos con la misma muestra enestudio, e incubar unas a temperaturaambiente (22 a 25C) y otras a 35C .El efecto txico de la mezclaantimicrobiana es mayor en la estufaque a temperatura ambiente, por loque el nmero de aislamientospositivos es superior a temperaturasinferiores a los 25C, adems dedemostrar la fase de levadura dealgunos hongos patgenos.

Es muy recomendable sembrar almismo tiempo otros medios de cultivo,como el Agar Biggy (Cat. 211732),

etc., con el objeto de lograr un mayornmero de aislamientos.

Los dermatofitos y otro gruponumeroso de hongos patgenos sedesarrollan con mayor rapidez en elAgar Micobitico que la mayora delas bacterias y que los hongossaprfitos o comensalescontaminantes.Sin embargo hay que sealar que

Allescheria boydii, Aspergillusfumigatus, Crytococcus neoformas,


45/108

45

Actinomyces bovis y Nocardiaasteroides, son inhibidos por losantibiticos presentes en el medio.Puede aislarse Nocardia asteroidesen Agar de Soya y Tripticasena

(Cat.210800) adicionados concicloheximida. Actinomyces boviscrece bien en placas de Agar InfusinCerebro Corazn (cat. 214700) y en elMedio de Tioglicolato sin Indicador(Cat. 228000 ).

AGAR DE SOYA

TRIPTICASEINACat. 210800 450 gCat. 211645 10 K

AISLAMIENTO Y CULTIVO DEGERMENES EXIGENTES.

Es un medio slido, muy rico ennutrientes por lo que tiene un usogeneral en los laboratorios de

Microbiologa.

Permite la multiplicacin abundante ysatisfactoria de grmenes dedesarrollo difcil y exigentes, comoneumococos, estreptococos,neisserias, etc. Muy til para pruebasde hemlisis y de sensibilidad a losantibiticos (antibiogramas)

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADA:Peptona de Casena 15.0 gPeptona de Soya 5.0 gCloruro de Sodio 5.0 gAgar 15.0 g

pH final 7.3 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 40 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada.2.- Calentar agitando frecuentementedurante un minuto para que se

disuelva.3.- Esterilizar en autoclave entre 118 y121C por 15 minutos.NOTA: Si se preparan grandescantidades aumentar el tiempo deesterilizacin pero no latemperatura, ni la presin.4.-Enfriar a 45-50C y vaciar enplacas de Petri.Si se preparan placas de agar sangrepara estudios de hemlisis, agregar

de 5 a 10% de sangre de carneropreferiblemente.

Usos:

Por contener dos peptonas obtenidaspor hidrlisis enzimtica a partir decasena y soya, en este medio sedesarrollan ampliamente una granvariedad de microorganismos,incluyendo aquellos de cultivo difcil y

delicado, tanto aerobios comoanaerobios. Como carece decarbohidratos es muy til paraestudiar reacciones de hemlisis ytambin para preparar agar-chocolate.

Si se desea puede agregrseleantibiticos.Tambin se le pueden agregar otrosnutrientes o bien inhibidores parausos especiales.

Una lista somera de microorganismosque se desarrollan en este medio esla siguiente:Estreptococos, Neumococos,Neisseria, Brucella, Corynebacterium,Listeria, Pasteurella, Vibrio,Haemophilus vaginalis, Candida, etc.


46/108

46

AGAR SULFITO YBISMUTO

Cat. 211745 450 g

Es un medio de Wilson Blairmodificado y altamente selectivo paraaislar Salmonella typhi, as comootros bacilos entricos de hecesaguas negras, aguas de bebidas ydiversos alimentos.

FORMULA POR LITRO DE AGUA PURIFICADAPeptona de Casena 5.0 gPeptona de Carne 5.0 gExtracto de Carne 5.0 g

Dextrosa 5.0 gFosfato Disdico 4.0 gSulfato Ferroso 0.30 gIndicador de Sulfito y Bismuto 8.0 gVerde Brillante 0.025 gAgar 20.0 g

pH final 7.5 0.2

Preparacin:

1.- Suspender 52 g del mediodeshidratado en un litro de aguapurificada aunque en general, losautores ingleses recomiendan noreconstituir ms de 400 mL en un slomatraz para lograr una mejoruniformidad de mezclado.2.- Mezclar muy bien y remojar elmedio deshidratado de 10 a15minutos para obtener un buen gel.3.- Hervir no ms de un minutoagitando continuamente el Agar.

4.- Dejar que el medio se enfre a45C (Esto es muy importante) y sindejar de agitarlo, vace en placas dePetri no menos de 20 mL de mediofluido. Las placas deben permanecerparcialmente descubiertas hasta quese seque la superficie del medio yusarlos el mismo da. Evite elsobrecalentamiento.

La selectividad del medio depende engran parte de la dispersin uniformedel precipitado del sulfito de bismutoen el gel final. Es por esta razn queel medio debe mantenerse bien

mezclado y no vaciarse mientras estdemasiado caliente.

En el medio caliente una vezdepositado en las placas, tiende aprecipitarse el sulfito de bismuto enforma irregular y desordenadapropiciando que en unas zonas seencuentre demasiado concentrado yen otras casi sin nada o ausente.

Las placas delgadas con poco mediose desecan pronto y dan reaccionesretardadas inhibiendo elennegrecimiento de las coloniasproductoras de sulfuros, debido a laconcentracin de los ingredientes.

Usos:

Junto a este medio, por serfuertemente inhibido, se aconsejainocular tambin otros mediosselectivos menos inhibidores, talescomo Agar Eosina y Azul de Metileno(Cat. 210600), Agar MacConkey (Cat.210900) Agar XLD (Cat. 211741),Agar Entrico Hektoen (Cat.224400),Agar SS (Cat. 214400), etc.Por lo comn, El Agar Sulfito deBismuto se siembra por estrasuperficial tratando de obtener

colonias muy aisladas. Puedenhacerse inoculaciones por vaciado deuna suspensin de heces como de10% en agua destilada o en solucinsalina estriles. Vaciaraproximadamente 5 mL de lasuspensin en no menos de 20 mLdel medio previamente fundido yenfriado a unos 45-50C. Mezclarperfectamente, dejar que se gelifiquee incube de 24 a 48 horas.


47/108

47

Las placas una vez solidificadasdebern presentar una opacidadcrema uniforme, y gradualmente uncolor verde muy plido. Si se guardaen refrigeracin, el medio que est en

forma reducida se ir oxidando poco apoco hasta adquirir un colorfrancamente verde. al llegar a estemomento descrtelo. Cook (1952)recomienda dejarlo en refrigeradordurante 4 das antes de usarlo paraaislar Salmonella typhimurium con elfin de hacerlo menos inhibidor.

En presencia de H2S las Salmonellasreducen las sales de hierro y bismuto

a sulfuro de hierro negro que sedeposita en la colonia, y a bismutometlico (Mac Coy, 1962) que seprecipita en el medio de cultivo,formando un halo brillante peromenos obscuro alrededor de lamisma. Tanto el color negro de lacolonia como el brillo metlico delhalo aumentan si la placa se deja de 2a 3 horas a temperatura ambiente enpresencia de la luz.

Las colonias de coliformes, Shigella(que generalmente no desarrollan) yProteus presentan un color verde,caf o negro y no ennegrecen elmedio. las placas debern incubarsehasta 48 horas.


Salmonella typhi:

Elevadas con centro negro, bordesclaros y translcidos. Colonias en ojode pescado o de conejo. Se vuelvenuniformemente negras a las 48 horas.Entre las 18 y 24 horas se forma en elmedio de cultivo un halo negrogrisceo y con brillo metlicorodeando a la colonia.

Otras Salmonellas:

Elevadas y generalmente mspequeas que las de S. typhi, Negrassi producen H2S

catalogo bioxon

Documents