CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO INDUSTRIAL Y DE SERVICIOS NO.155

CAMARA DE NEUBAUERMesa No.4

CÁMARA DE NEUBAUER

La Cámara de Neubauer es un instrumento utilizado en medicina y biología para realizar el recuento de células en un medio líquido, que puede ser un cultivo celular, sangre, orina, líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc.

Esta cámara de contaje está adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases. Se trata de un portaobjetos que tiene dos zonas ligeramente deprimidas y que en el fondo de las cuales se ha marcado con la ayuda de un diamante una cuadrícula de dimensiones conocidas. Se cubre la cámara con un cubrecámaras que se adhiere por simple tensión superficial.

Luego se introduce el líquido a contar, al que generalmente se ha sometido a una dilución previa con un diluyente, por capilaridad entre la cámara y el cubrecámara; puesto que tiene dos zonas esto permite hacer dos recuentos simultaneamente. Para contar las células se observa el retículo al microscopio con el aumento adecuado y se cuentan las celulas.

Con base en la cantidad de células contadas, conociendo el volumen de líquido que admite el campo del retículo, se calcula la concentración de células por unidad de volumen de la muestra líquida inicial.

La fórmula de valoración del número de células (válida universalmente) es la siguiente: Partículas por μl=(partículas contadas)/(superficie contada (mm²)∙profundidad de la cámara(mm)∙ dilución)

CARACTERISTICAS

En la Cámara de Neubauer tradicional, está dividido en 16 cuadrados medianos y cada uno de ellos se halla dividido a su vez en 25 cuadrados pequeños (400 cuadrados pequeños en total). Además la última fila y la última columna de cuadrados pequeños está dividi-da al medio. En cambio, en la cámara de Neubauer modificada el cuadrado grande central está dividido en 25 cuadrados medianos y cada uno de ellos está dividido en 16 cuadrados pequeños (400 cuadrados pequeños en total). Cualquiera sea la cámara empleada, este cuadrado grande central es el empleado en el recuento eritrocitario y plaquetario.

RECUENTRO CELULARPara realizar el recuento celular, debe colocarse el cubreobjetos sobre el portaobjetos de esta cámara e introducir entre ambos la muestra celular previamente preparada. Debe evitarse que la muestra rebalse, porque si esto sucede las células a contar también se perderán. La velocidad de llenado de la cámara debe ser homogéneo, evitando así una mala distribución de las células en el preparado que traerá aparejado errores en el recuento. La muestra no debe secarse, por lo tanto es recomendable guardar

la cámara de Neubauer cargada dentro de una cámara húmeda para que sedimenten las células. Luego se coloca la cámara en un microscopio óptico y se procede al conteo, eligiendo para ello los cuadrados apropiados. Se debe elegir un criterio para definir qué células se cuentan y cuáles no, cuando las mismas quedan sobre uno de los bordes del cuadrado.Una vez contadas las células se calcula la concentración en la muestra original, considerando: la dilución de la muestra hecha para el sembrado, la cantidad de cuadrados considerados, el número de células contadas y el volumen de muestra debajo de cada cuadrado

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ihttp://tzel-725.blogspot.com/2009/05/camara-de-neubauer-transcripcion.html

http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/1080022545/1080022545_07.pdf

http://www.auxilab.es/documentos/info/castellano/3045000x.pdf

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