Biotecnologa aplicada al desarrollo de ensayos rpidos y fiables para detectar

alrgenos en alimentos

Cristina Romero Gonzalo

Investigacin de productos biotecnolgicos orientados hacia

la salud humana, animal y de plantas

Desarrollo, produccin y comercializacin de ensayos

para sanidad animal y seguridad alimentaria

ACTIVIDADES

Los productos comerciales estn basados en nuestros proyectos de I+D

Participacin de todos los Departamentos de la empresa: Investigacin, Desarrollo, Produccin, Ventas, QC

EMPRESA

LNEAS COMERCIALES

SANIDAD ANIMAL

SEGURIDAD ALIMENTARIA

GRAN ANIMAL PEQUEO ANIMAL

ENSAYOS PROPIOS

KITS DE DISTRIBUCIN

ALRGENOS

ALRGENOS

GLUTEN CASENA BLG OVOALBMINA

FORMATOS

ELISAS INMUNOCROMATOGRAFAS

INMUNOENSAYOS

Especificidad

Sensibilidad

Multi-matriz

Ensayos basados en reacciones antgeno-anticuerpo

ELISA (Sndwich)PLACAS TAPIZADAS CON

EL AcM

AADIR CONTROLES Y MUESTRAS

INCUBAR

LAVAR LA PLACA

AADIR EL CONJUGADO

LAVAR LA PLACA

AADIR SUBS Y SOLUCIN DE FRENADO

POSITIVONEGATIVO

INCUBAR

GLUTEN

ORIGEN Colaboracin con el Centro Nacional de

Biotecnologa

PRODUCTOS INGEZIM GLUTEN INGEZIM GLUTEN QUICK INGEZIM GLUTEN SEMIQ INGEZIM GLUTEN HIDROLIZADO

INGEZIM GLUTEN (Cuantificacin)

CURVA CON 5 PUNTOS (ng/mL)

1,56

25y = 15,154x2 - 6,4417x + 2,4497R2 = 0,9974

05

1015202530

0,0 0,5 1,0 1,5 2,0

Abs 450nm

ng/ml

LMITE DE DETECCIN

Grfico4

25

12.5

6.25

3.12

1.56

Abs 450nm

ng/ml

Recta 0302

Curva patrn

Abs 450nmng/ml

1.5425

0.9112.5

0.436.25

0.313.12

0.271.56

Placa 0302

CONJ 0302PAN 1PAN 2PAN 5PAN 6PAN 7

Dilucin2001001002525Dilucin

Abs1.180.901.131.251.43Abs

ng/ml18.3413.3517.3619.5222.78ng/ml

ppm293.43106.81138.8639.0345.56ppm

Dilucin4002002005050Dilucin

Abs0.750.770.770.980.97Abs

ng/ml10.6510.9511.1214.7714.53ng/ml

ppm340.92175.27177.9659.0758.11ppm

Media317.18141.04158.41100100Dilucin

Teoricos2901311600.660.71Abs

9.1610.04ng/ml

73.2780.35ppm

57.1261.34Media

5369Teoricos

Recta 0302

25

12.5

6.25

3.12

1.56

Abs 450 nm

ng/ml

Poli 0302

PRELAVADO

LOTE 0302CURVA RING TEST

Puntos ng/mlNORMALNORMALNORMALPan 1Pan 5Pan 7

1002.4812.4312.1991.4131.3081.592

502.1881.9811.9061.3841.3721.569

251.7341.5621.5450.9940.9521.115

12.51.2391.1021.0760.960.9451.13

6.250.8230.7451.2031.6060.323

3.120.5230.4920.4721.211.6560.33

1.560.3720.3230.3120.8791.1710.246

Sur Select0.1370.1280.1310.881.2090.266

Pan 2Pan 6Pan 4817

Curva patrn

Abs 450nmng/ml

1.5525

1.0912.5

0.756.25

0.483.12

0.321.56

Placa 0302

CONJ 0302PAN 1PAN 2PAN 5PAN 6PAN 7PAN 4817

Dilucin200100100252525Dilucin

Abs1.401.211.341.631.580.33Abs

ng/ml20.3515.3118.7427.4625.821.72ng/ml

ppm325.66122.47149.9054.9251.653.44ppm

Dilucin400200200505050Dilucin

Abs0.980.880.951.191.120.26Abs

ng/ml10.268.439.7014.9113.341.31ng/ml

ppm328.17134.89155.2359.6453.345.23ppm

Media326.91128.68152.5757.2852.504.33Media

Teoricos2901311605369

INGEZIM GLUTEN QUICK

Reduccin en los tiempos de extraccin y del ELISA

Validado vs INGEZIM GLUTENDILUTION Theoretical ppm Gluten Quick Gluten

Spike 0 ppm 50 0

INGEZIM GLUTEN SEMIQ

Deteccin SEMI cuantitativa Tiempos de incubacin cortos Realizacin sencilla (sin curva estndar) Posibilidad de interpretacin visual

LMITE DE DETECCIN

INGEZIM GLUTEN HIDROLIZADO

EL ELISA SANDWICH NO FUNCIONA CON GLUTEN HIDROLIZADO

ELISA SANDWICH R5

INGEZIM GLUTEN HIDROLIZADO

ELISA R5 DIRECTO

INGEZIM GLUTEN HIDROLIZADO (Matrices)

CERVEZAS SIROPESPAPILLAS

INFANTILES

ALRGENOS

LECHE Ingezim Casena Ingezim Beta-lactoglobulina

HUEVO Ingezim Ovoalbmina

Ingezim BLG

ALRGENOS

ELISA tipo sndwich Estndares directamente en ppm Cuantificacin con ajuste lineal Posibilidad de interpretacin visual

Ingezim Casena

Ingezim BLG

IngezimOvoalbmina

Lmites de Deteccin

ALRGENOS: Int. de resultados

-Lac

Abs 450 ppm

1,196 0.8

0,789 0.4

0,549 0.2

0,406 0.1

0,233 CN

y = 0,8946x - 0,2825R2 = 0,9961

0

0,2

0,4

0,6

0,8

1

0,0 0,5 1,0 1,5Abs.

ppm

Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3

Abs. 3,335 0,950 0,200

ppm 2,70 0,567

INMUNOCROMATOGRAFA Tcnica in situ

Ensayo en una sola etapa. Adicin directa de la muestra

T C

Soporte: nitrocelulosa

AcM anti-Alrgeno

Pt controlAcM anti-pt control

T CFLOW

T C

T C

Resultado CUALITATIVO:POS: 2 bandas coloreadasNEG: 1 banda coloreada

INMUNOCROMATOGRAFA Tcnica in situ

Interpretacin de Resultados

POSITIVO NEGATIVO NO VLIDO

ENSAYOS INGEZIM CROM DISPONIBLES

NOMBRE DEL KIT LMITE DE DETECCIN (ppm)

INGEZIM CROM CASENA 2.5

INGEZIM CROM BLG 2.5

INGEZIM CROM OVOALBMINA 1.25

OBJETIVOS LNEA ALIMENTARIAExperiencia en el desarrollo de ensayos INMUNOLGICOS

Ampliacin de la gama de productos propios

Menor dependencia productos

distribucin

Mayor control de los productos

Mayor flexibilidad en los formatos

Mayor rapidez de respuesta en el soporte tcnico

Posibilidad de comercializacin en el extranjero

GRACIAS POR SU ATENCIN

Biotecnologa aplicada al desarrollo de ensayos rpidos y fiables para detectar alrgenos en alimentosNmero de diapositiva 2Nmero de diapositiva 3Nmero de diapositiva 4Nmero de diapositiva 5Nmero de diapositiva 6Nmero de diapositiva 7Nmero de diapositiva 8Nmero de diapositiva 9Nmero de diapositiva 10Nmero de diapositiva 11Nmero de diapositiva 12Nmero de diapositiva 13Nmero de diapositiva 14Nmero de diapositiva 15Nmero de diapositiva 16Nmero de diapositiva 17Nmero de diapositiva 18Nmero de diapositiva 19Nmero de diapositiva 20Nmero de diapositiva 21Nmero de diapositiva 22Nmero de diapositiva 23