BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS LICENCIATURA: FARMACIA

ÁREA ESPECÍFICA DE: FARMACIA NOMBRE DE LA ASIGNATURA: MANUAL LABORATORIO DE

CONTROL Y ANALISIS FARMACEUTICO CÓDIGO: FAR 302 L FECHA DE ELABORACIÓN: PRIMAVERA 2003 NIVEL EN EL MAPA CURRICULAR: FORMATIVO TIPO DE ASIGNATURA: DEL PERFIL PROFESORES QUE PARTICIPARON EN SU ELABORACIÓN:

M.C. IRMA ROSALIA CONTRERAS MORA HORAS PRÁCTICA: 4 INTRODUCCION

La industria farmacéutica, como segmento vital del sistema de asistencia de la salud, conduce la investigación, fabrica y comercializa productos farmacéuticos y biológicos, así como dispositivos médicos usados para el tratamiento agudo / crónico y el diagnóstico de la enfermedad. Los adelantos recientes en el descubrimiento de drogas, están presentando nuevos desafíos al control de calidad y a los sistemas que operan internamente en la industria y por las normas externas establecidas por la Federal Food and Drug Administratión (FDA). El propósito de calidad se aproxima a través del concepto de Gerenciamiento de la Calidad Total y la mejoría continua, donde el gerenciamiento y el trabajo unen fuerzas para crear calidad en los productos mientras ayudan a asegurar el éxito financiero de la compañía. Este énfasis modificado se dirige a la prevención de defectos (proactivo) y no a la detección de defectos (después del hecho). El seguro de calidad y el control de calidad desarrollan y siguen operativos internos convencionales dirigidos a asegurar la calidad, la seguridad, la pureza y la eficacia del aporte principios activos y medicamentos. La FDA ha emitido para la industria LAS BUENAS PRACTICAS DE MANUFACTURA (BPM) que nos llevarán a la obtención de un producto farmacéutico con calidad, LAS BUENAS PRACTICAS DE

LABORATORIO (BPL) Y LAS BUENAS PRACTICAS DE LABORATORIO AUTOMATIZADO (a BPL) que nos ayudan a analizar el producto fabricado y ofrecerlo al paciente con calidad por lo que el objetivo de éste manual de prácticas es familiarizarnos con las metodologías aplicadas a algunas sustancias ya sea en forma de materia prima, material en proceso o bien producto terminado que nos lleven a tener un criterio de ACEPTACION O RECHAZO en función a los criterios oficiales y especificaciones dadas por las FARMACOPEAS (USP, BRITANICA, EUROPEA, ETC.).

INDICE

PREPARACION Y MANEJO DE SOLUCIONES VOLUMETRICAS DETERMINACION DE HUMEDAD (METODO DE KARL FISHER) DETERMINACIÓN DE CLORUROS Y SULFATOS EN MATERIA PRIMA Y

DETERMINACION DEL INDICE DE ACIDEZ. ANALISIS DE MATERIA PRIMA (MONOGRAFÍA DE ACIDO CITRICO) ANALISIS DE PRODUCTO TERMINADO (JARABE) ANALISIS DE PRODUCTO TERMINADO (TABLETAS) ANALISIS DE PRODUCTO TERMINADO (CAPSULAS) DETERMINACIÓN DE VITAMINA B12 (METODO MICROBIOLOGICO) DETERMINACIÓN DE LA CUENTA MICROBIANA EN UN PRODUCTO

TERMINADO (SUSPENSIÓN). ANALISIS DE TALCO PARA GUANTES QUIRURGICOS

BIBLIOGRAFIA

FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS DE NORTEAMERICA, ULTIMA EDICIÓN.

FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS MEXICANOS, ULTIMA EDICIÓN. FARMACOPEA BRITANICA FARMACIA. REMINGTON. EDITORIAL PANAMERICANA ACTUALIZACION DEL CUADRO BASICO DE MATERIAL DE CURACIÓN Y

PROTESIS DEL SECTOR SALUD. DIARIO OFICIAL DE LA FEDERACIÓN.

PREPARACION Y MANEJO DE SOLUCIONES VOLUMETRICAS

OBJETIVO: Que el alumno sea entrenado para preparar soluciones volumétricas y sepa manejarlas. FUNDAMENTO: Las soluciones volumétricas son soluciones de concentración conocida y preparadas con sustancias Q.P. Las concentraciones son expresadas generalmente en términos de NORMALIDAD. SOLUCIONES NORMALES: _________________________________ SOLUCIONES MOLARES:__________________________________ SOLUCIONES PORCENTUALES:_____________________________ _____________________________________________________________ MATERIAL Matraces aforados de 100 ml Vasos de precipitado Pipetas graduadas de 10 ml Probeta de 50 ml Buretas de 25 ml Matraces erlenmeyer de 250 ml REACTIVOS HCl CONCENTRADO ACIDO SULFURICO CONC. ACIDO ACETICO AGUA DESTILADA HIDROXIDO DE SODIO lentejas ACIDO PERCLORICO conc. ANHIDRIDO ACETICO BIFTALATO DE POTASIO CARBONATO DE SODIO FENOLFTALEINA ANARANJADO DE METILO METODOLOGIA 1. PREPARACION DE SOLUCIONES DE NaOH 1 N Aplicando la siguiente relación: 1 litro de solución 1N Peso equivalente Prepare 50 ml de una solución de Hidróxido de sodio 1N y enseguida valore: Pesar con exactitud 500 mg de biftalato de potasio previamente desecado por 2 horas a 120 °C , se disuelven en 75 ml de agua libre de CO2, se le agrega 2 gotas de fenolftaleína y se titula con la solución de sosa hasta el vire a rosa persistente. Cada ml de solución de NaOH 1 N equivale a 204.4 mg de biftalato de potasio.

2. PREPARACION DE HCl 1 N Prepare 50 ml de solución de HCl 1N y valore como sigue: Se pesan 150 mg de carbonato de sodio anhidro, previamente secado durante 1 hora a 120 o C, se disuelven en 100 ml de agua, y se agregan 2 gotas de rojo de metilo. Se titula lentamente con la solución de ácido hasta que aparezca coloración rosa, se

calienta la solución a ebullición y se sigue titulando hasta que el color rosa no desaparezca. Un ml de ácido clorhídrico 1N equivale a 52.99 mg de carbonato de sodio.

3. PREPARACION DE ACIDO SULFURICO 1 N

Proceder como en los casos anteriores para preparar 50 ml de ácido sulfúrico 1N y continuar con la valoración de la solución de la misma forma que se valoró el ácido clorhídrico. Cada ml de ácido sulfúrico 1 N equivale a 52.99 mg de carbonato de sodio. 4. PREPARACIÓN DEL HClO 0.1N Siguiendo la siguiente metodología: En un matraz aforado de 1000 ml que contenga más o menos 500 ml de ácido acético glacial, agregar 30 ml de anhídrido acético, 8.5 ml de ácido perclórico, mezclar perfectamente y aforar con ácido acético a volumen; ajustar la preparación a 50 ml. Valorar como sigue: En un matraz erlenmeyer de 250 ml colocar exactamente pesados 500 mg de biftalato de potasio previamente secado por 2 horas a 120°C, disolver en 20 ml de ácido acético , calentar lentamente si es necesario y agregar 2 gotas de cristal violeta, titular con la solución de ácido perclórico hasta obtener el vire a verde esmeralda. Hacer un blanco de solventes. Cada ml de ácido perclórico 0.1 N equivale a 204.2 mg de biftalato de potasio.

DISCUSIÓN A partir de una solución de NaOH 1 N obtener un litro de solución 0.1N. A partir de una solución de HCl 1N obtener 1 litro de solución 0.5 n Apartir de una solución de H2SO4 1N obtener 100 de una solución 0.2 N A partir de una solución de ácido perclórico 0.1 N obtener 500 ml de ácido

perclórico 0.01 N.

DETERMINACION DE HUMEDAD (agua) POR EL METODO DE KARL - FISHER EN MATERIA PRIMA.

OBJETIVO: Que el alumno de cuenta de la importancia del contenido de agua ( de hidratación o absorción ) en materias primas, para probar si se ajusta o no a las especificaciones de las farmacopeas. FUNDAMENTO: Método de valoración yodométrica de Karl Fisher de acuerdo al principio de que el yodo reacciona con el dióxido de azufre en presencia de agua según la siguiente reacción: I2 + SO2 + 2H2O 2HCl + H2SO4 Esto fue aprovechado por Karl Fisher para desarrollar su método que permite determinar con exactitud y rapidez pequeñas cantidades de agua utilizando el metanol como disolvente del yodo y del dióxido de azufre y agregando el reactivo piridina al fin de derivar a la derecha el equilibrio de la reacción (oxido-reducción) . Posteriormente se comprobó que en la misma reacción tomar parte la piridina y el metanol. El punto final de la reacción se determina eléctricamente con ayuda de un microamperímetro. MATERIAL BALANZA ANALITICA EQUIPO DE KARL-FISHER ESPATULAS JERINGAS REACTIVOS AGUA DESTILADA METANOL REACTIVO DE KARL-FISHER MUESTRAS: M1=__________________________M2= _____________________ M3= __________________________M4= _____________________ METODO PARA EL FARTOR: Pesar exactamente una jeringa con agua, anotar el peso, agregar el metanol neutralizado (con reactivo de Karl Fisher) contenido en el vaso del aparato, adicionar de 2 a 3 gotas de agua de la jeringa , volver a pesar la jeringa , por diferencia de peso sabrá cuales fueron los miligramos de agua adicionada. FACTOR = PESO DEL AGUA / VOL. DE RVO. DE K.F. PARA EL PROBLEMA: Por diferencia de peso agregar la muestra pesada al vaso con metanol neutralizado (con el reactivo de K.F. ), llenar la bureta al aforo y titular la muestra a punto final. Anotar los mililitros gastados de reactivo de K.F.

% = ml gastados de reactivo de K.F. x FACTOR x 100 peso de la muestra NOTA: Pesar aproximadamente 100 mg del problema. RESULTADOS (%) LIMITE DE HUMEDAD DICTAMEN M1___________________ ________________________ ______________ M2 ___________________ _______________________ ______________ M3 ___________________ ________________________ ______________ M4 ____________________ ________________________ _______________ Anote tres nombres comerciales que tengan entre sus componentes las muestras que se usaron en la práctica como principio activo.

DETERMINACION DE CLOROS Y SULFATOS EN MATERIA PRIMA Y DETERMINACIÓN DEL INDICE DE ACIDEZ

OBJETIVO: Que el alumno determine la presencia o ausencia de cloruros y sulfatos en materia prima y determine el valor de índice de acidez.

FUNDAMENTO: Para la cuantificación de cloros por precipitación de cloruro

de plata con nitrato de plata. Para la cuantificación de sulfatos, al precipitar los sulfatos presentes en la

muestra conel cloruro de bario. Se usan los mismos reactivos y volumenes tanto para la solución muestra,

como para la solución control que contiene la cantidad especificada de cloruros o sulfatos. Cuando se acidifica la solución y no queda perfectamente clara, se filtra a través de un papel filtro que tenga reacción negativa a cloruros y sulfatos.

El INDICE DE ACIDEZ se define como la cantidad de NaOH necesarios para neutralizar los ácidos libres en un gramo de grasa o aceite.

MATERIAL Matrces erlenmeyer Tubos de ensaye Tubos Nessler Pipetas graduadas Bureta de 25 ml REACTIVOS Nitrato de plata 0.1N Cloruro de bario NaOH 0.1 N Eter Alcohol etílico Fenolftaleína METODOLOGIA

Determinación de cloros: Colocar en un tubo aproximadamente 500 mg de la muestra, agregar 10 ml de agua destilada, una gota de HNO3 y un ml de AgNO3. Observar si hay precipitado. La prueba que s e realiza solo es cualitativa, se puede usar como materia prima clorferinamina y Ditelbutilnaftaleno monosulfato de sodio.

Determinación de sulfatos: Cdolocar en un tubo aproximadamente 500 mg de la muestra, adicionar 10 ml de agua, mas una gota de HCl y 3 mls de cloruro de bario. Observar la producción de precipitado.

Indice de acidez: Pesar exactamente 1 gr de ácido estéarico y pasar a un

matraz erlenmeyer de 250 ml en el que previamente se agregaron 50 ml de una mezcla 1:1 de éter- etanol neutralizado, agregar fenolftaleína como indicador y titular con NaOH 0.1 N hasta el vire a rosa.

I.A. = Mls gastados x FN x 5.61 Peso de la muestra Límite de acidez para el ácido esteárico = 200-210

ANALISIS DE MATERIA PRIMA

ACIDO CITRICO

OBJETIVO: Que el alumno sea capaz determinar el rechazo o aceptación de una materia prima, basándose en las especificaciones de la farmacopea y libros oficiales. DESCRIPCION: Cristales traslúcidos, incoloros; polvo cristalino granular, blanco, inodoro o prácticamente inodoro y con fuerte sabor ácido. SOLUBILIDAD: Muy soluble en agua, fácilmente soluble en alcohol, poco soluble en éter. IDENTIFICACIÓN: La solución de la muestra responde a la prueba de citratos. Adicionar una porción de materia prima a una mezcla 3:1 de piridina-anhídrido acético SE PRODUCE UNA COLORACION ROJO CARMÍN. OXALATOS: Neutralizar una solución de la muestra en una concentración (1:10) con hidróxido de amonio 6 N, adicionar 3 gotas de solución 3N de HCl, y agregar 2 ml de solución reactiva de cloruro de calcio. NO DEBE PRODUCIRSE TURBIDEZ. SULFATOS: A10 ml de una solución (1:100) de la muestra, adicionar 3 gotas de HCl y 1 ml de cloruro de bario (SR). NO DEBE PRODUCIRSE TURBIDEZ. RESIDUOS DE IGNICION: No más del 0.1 % PAERDIDA POR SECADO: No mas del 0.5 % de su peso. METALES PESADOS: 0.001 % VALORACION: Transferir 2 gr de la muestra , previamente secada, a un matraz erlenmeyer, agregar 40 ml de agua, adicionar solución indicadora de fenolftaleína y valorar con solución 1 N de hidróxido de sodio. Cada ml de hidróxido de sodio equivale a 64.04 mg de ácido cítrico. LIMITES : 99.5 % - 100.5 % USOS: _______________________________________________________________________ _______________________________________________________________________ BIBLIOGRAFIA: FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS MEXICANOS 6ª EDICION

ANALISIS DE UN PRODUCTO TERMINADO JARABE

CITRATO DE PIPERAZINA COMO PRINCIPIO ACTIVO OBJETIVO: Que el alumno sea capaz de valorar el producto terminado y con ello certificar su calidad. APARIENCIA:____________________________________________________ ________________________________________________________________ _______________________________________________________________ VOLUMEN PROMEDIO:____________________________________________ VARIACIÓN DE VOLUMEN:________________________________________ PH: ___________________________________________________________ DENSIDAD:______________________________________________________ IDENTIFICACION: _______________________________________________ VALORACIÓN: __________________________________________________ LIMITES: 90 – 110 % METODOLOGIA: VARIACION DE VOLUMEN: Agitar los envases y vaciar el contenido a probetas individuales, dejando escurrir completamente y medir el volumen. El volumen individual no debe ser menor que el especificado en el marbete y no mayor al 3 %. DENSIDAD: Pesar el picnómetro vacío y seco en una balanza analítica, registrando el peso en gramos, hasta la cuarta cifra decimal. Llenar el picnómetro con agua destilada recientemente hervida y enfriar a 20°C, colocar el tapón esmerilado, adaptado cuidadosamente y dejar que el exceso de agua salga por el tubo capilar. Calcular el peso del agua contenida en el picnómetro. Desechar el agua del picnómetro, secar perfectamente el mismo. Calcular el peso de la muestra, siguiendo el procedimiento anterior. Calcular la densidad.

VALORACION: METODO VOLUMETRICO: Tomar una alícuota de 2 ml (200mg) de jarabe,

adicionar 10 ml de etanol absoluto y evaporar en baño María a sequedad. Disolver el residuo en 50 ml de ácido acético glacial, calentar si es necesario para disolver, enfriar y titular, con ácido perclórico 0.1 N empleando cristal violeta como indicador. Hacer un blanco para las correcciones necesarias.

Cada ml de ácido perclórico 0.1 N equivale a 10.71 mg de citrato de piperazina. % = ( ml Pb – ml Bco) x FN x Mequiv. x 100 200 mg

METODO ESPECTROFOTOMETRICO: PREPARACION DEL ESTANDART: Disolver 25 mg de citrato de piperazina en 25 ml de agua [1 mg / ml ] PREPARACION DEL PROBLEMA: Tomar una alícuota equivalente a 100 mg (1ml), llevar a 100 ml con agua [ 1 mg / ml ] Tomar 5 ml de cada solución (Problema y std), olocar respectivamente en dos embudos de separación, añadir a cada embudo 5 ml de agua y 10 ml de solución de azul de bromotimol 0.0004 M. Añadir 20 ml de cloroformo y agitar ambos embudos por 60 según dos, repetir ésta última operación, filtrar el cloroformo, recibirlo en matraces de 50 ml y aforar a volumen con

cloroformo. Leer el espectrofotómetro a una longitud de onda de 420 nm, usando cloroformo como blanco. % = Absorvancia del problema x F.D. x 100 Absorvancia del estándart

ANALISIS DE UN PRODUCTO TERMINADO

TABLETAS

OBJETIVO: Familiarizar al alumno con el manejo de datos sea capaz de establecer los límites y establecer una gráfica de control. DESCRIPCION: ________________________________________________________________ ______________________________________________________________ ________________________________________________________________PESO PROMEDIO:________________________________________________ Pesar 20 tabletas individualmente, sumar los resultados y dividir entre 20 VARIACIÓN DE PESO: ________________________________________ + = PESO MAYOR x 100 PESO PROMEDIO - = PESO MENOR x 100 PESO PROMEDIO TIEMPO DE DESINTEGRACION: _____________________________ Colocar 6 tabletas, una en cada cilindro correspondiente a la canastilla en el desintegrador y mida el tiempo de desintegración, colocando las condiciones adecuadas como agua acidulada como medio de desintegración y 37 ± 1ºC. DUREZA: ______________________________________________________ FRIABILIDAD: _____________________________________________ GRAFICA: Pesar 4 grupos de 10 tabletas y marcarlas como la 1ª,2ª,3ª y 4ª hora de compresión. Establecer la media de la gráfica de acuerdo al peso teórico de 10 tabletas y graficar en papel milimétrico. CONCLUSIÓN: ________________________________________________________ ______________________________________________________________________ NOTA: Especificar de que forma farmacéutica se trata (tableta o gragea), el nombre comercial de la forma farmacéutica y el nombre del principio activo.

ANALISIS DE PRODUCTO TERMINADO

CAPSULAS

INDOMETACINA COMO PRINCIPIO ACTIVO

OBJETIVO: Familiarizar al alumno con el manejo de datos y sepa establecer los límites de aceptación de un lote de cápsulas. Las cápsulas de indometacina contienen no menos de 90.0 % y no más de 110.0 % de la cantidad de C19H16ClNO indicada en el marbete. SUSTANCIA DE REFERENCIA: INDOMETACINA, secar 2 hrs a 100°C bajo la presión diferencial de 5 mm de Hg ENASAYOS DE IDENTIDAD: El espectro de absorción obtenido en la región U.V. con la preparación de la muestra como se indica en la valoración debe corresponder al obtenido con la solución de referencia de indometacina. La longitud de onda máxima observada realmente en el instrumento que se maneja, de preferencia a especificada en la monografía, siempre que la diferencia entre una y otra no pase de ±0.5 nm en el intervalo de 240-280 nm, de ±1nm en el intervalo de 280- 320 nm o de + 2 nm arriba de 320 nm. Si la diferencia es mayor debe ser calibrado nuevamente el instrumento. Generalmente las lecturas se realizan entre 380 y 770 nm para la región visible y 90-700 nm para la región U.V. VARIACION DE PESO Y UNIFORMIDAD DE CONTENIDO: Cumple con los requisitos. VARIACIÓN DE PESO: Pesar con precisión individualmente 10 unidades, identificar cada una, vaciar el contenido de cada recipiente con un procedimiento adecuado, pesar con precisión cada envase vacío y calcular cada peso neto individual por diferencia de peso bruto menos el peso de las cápsulas o envases vacíos correspondientes. Obtener el promedio de los pesos de los 10 contenidos.

UNIFORMIDAD DE CONTENIDO: Con el resultado obtenido de la valoración como se indica en la monografía calcular el contenido del ingrediente activo en cada una de las 10 unidades.

Seleccionar no menos de 30 unidades, analizar 10 unidades individualmente como se indica en la monografía de la valoración. Cuando la cantidad de ingrediente activo en una unidad de dosis sea mayor de la requerida en la valoración, ajustar el grado de dilución de la solución y / o el volumen de las alícuotas hasta que la concentración de los ingredientes activos en las soluciones finales sea de la misma magnitud que el obtenido en el procedimiento para la valoración; o en el caso de análisis por titulación si es necesario, use un titulante más diluido, hasta que se consuma el volumen adecuado de titulante.

Los requerimientos para uniformidad de dosis se cumplen si la cantidad del ingrediente activo en no menos de 9 de las 10 unidades de dosis determinado por el método de variación de peso o el de uniformidad de contenido queda dentro del rango de 85 % a 115 % de la cantidad teórica indicada en el marbete y ninguna unidad está fuera del rango de 75 a 125 % de la cantidad teórica indicada en el marbete.

SOLUCION DE REFERENCIA: Pesar 10 mg de indometacina SR depositar en

un matraz volumétrico de 100 ml, disolver con 40 ml de agua , llevar al aforo con

metanol y mezclar. Pasar 25 ml de la solución anterior a un matraz volumétrico de 100 ml, llevar al aforo con una mezcla de solución reguladora de fosfatos pH 7.0 METANOL (1:1) y mezclar. Esta solución contiene 25µg / ml de indometacina.

PRERARACION DE LA MUESTRA: Pesar el contenido de la cápsula a un matraz volumétrico de 100 ml agregar 10 ml de agua, dejar reposar 10 min, agitando ocasionalmente, diluir a volumen con metanol, mezclar y filtrar. Pasar 10 ml del filtrado a un matraz volumétrico de 100 ml llevar al aforo con una mezcla de solución reguladora de fosfatos pH 7.0 metanol (1:1) y mezclar.

PROCEDIMIENTO: Determinar las absorbancias de las soluciones de referencia y de la preparación de la muestra, a la longitud de onda de máxima absorbancia a 318 nm aprox. Utilizando celdas de 1 cm y la mezcla de solución reguladora de fosfatos pH 7.0 metanol (1:1) como blanco de ajuste. Calcular los mg de indometacina por cápsula mediante la fórmula siguiente: C (Am / Sref ), en la que C es la concentración en µg / ml de indometacina en la solución de referencia ; Am y Sref son las absorbancias de la preparación de la muestra y de la solución de referencia respectivamente.

DISOLUCION: APARATO 1 Se utiliza el disolvente indicado en la monografía. Si el medio de disolución es

una solución reguladora, ajustarla ± 0.05 unidades de pH especificado en la monografía. Se debe evitar la presencia de gases disueltos en el medio de disolución.

PROCEDIMIENTO: Colocar el volumen de medio de disolución indicado y calentar a 37º C ± 0.5 º C. Colocar las unidades de dosis en la canastilla seca y ésta en el aparato antes de iniciar la operación. Después de transcurrir el tiempo establecido, tomar la alícuota para la determinación, en la zona intermedia, entre la superficie del medio de disolución y la parte superior de la canastilla o la paleta y a no menos de 1 cm de la pared del vaso, filtrar inmediatamente. El filtro debe ser inerte, sin causar absorción significativa del ingrediente activo de la solución, no debe contener materiales extraíbles por el medio de disolución y no interferir con los procedimientos analíticos prescritos, con un tamaño de poro nominal no mayor de 1 µ.

INTERPRETACION: Realizar la prueba de 6 muestras y ninguno de los resultados individuales será mayor de Q + 5 %. Si esto no se cumple repetir la prueba de 6 cápsulas adicionales y el promedio de los 12 resultados debe ser igual o mayor de Q y ninguna de los resultados será menor de Q – 15 %. Si esto no se cumple probar 12 muestras más y el promedio de las 4 determinaciones debe ser igual o mayor que Q y no más de 2 de las muestras tendrán resultados menores de Q – 15%. Donde Q es la cantidad de ingrediente activo disuelto, indicado para cada producto, expresado en % de la cantidad etiquetada; 5 y 15 % son los resultados en % de la cantidad etiquetada.

MEDIO DE DISOLUCION: Solución reguladora de fosfatos pH 7.2 – AGUA (1:4); 750 m L.

SOLUCION DE REFERENCIA: pasar 10 mg de indometacina Sust. ref a un matraz volumétrico de 100 ml, diluir y llevar al aforo con medio de disolución y mezclar. Esta solución contiene 30 µg / ml de indometacina.

BLANCO DE LAS CAPSULAS. Vaciar y limpiar tan completamente como sea posible, 5 cápsulas y disolverlas en 750 ml de medio de disolución, pasar 1 mL de ésta solución a un matraz volumétrico de 5 mL, llevar al aforo con medio de disolución.

PREPARACION DE LA MUESTRA: Colocar cada cápsula en el aparato con 750 mL del medio de disolución, accionarlo a 100 rpm durante 20 min, filtrar inmediatamente una porción del medio de disolución empleando un filtro inerte. Medir las absorbancias de las soluciones de referencia, de la muestra y de la solución de las cápsulas vacías, a la longitud de onda de máxima absorbancia de 318 nm aprox.,

utilizando celdas de 1 cm, y medio de disolución par ajustar el aparato. Calcular el % de indometacina disuelta en la solución por medio de la siguiente fórmula: 3C (Am - Ab / Aref) en la que C es la concentración en µ/ml de indometacina en la solución de referencia; Am Ab y Aref son las absorbancias de la solución de la muestra, de la solución de las cápsulas vacías y de la solución de referencia respectivamente.

VALORACION SOLUCION DE REFERENCIA: Pesar 12.5 mg de indometacina S ref, pasar a

un matraz volumétrico de 100 ml, disolver con 1 ml de metanol, llevar al aforo son solución reguladora de fosfatos p H 7.2 y mezclar. Llevar 25 ml de la solución anterior a un embudo de separación, extraer 3 veces con porciones de 25 ml cada una de cloruro de metileno, filtrar los extractos a través de una torunda de algodón recibiendo el filtrado en un matraz volumétrico de 100 ml, lavar el residuo y llevar al aforo con cloruro de metileno. Esta solución contiene 31.25 µg / ml de indometacina.

PREPARACION DE LA MUESTRA: pesar no menos de 20 cápsulas, vaciar su contenido tan completamente como sea posible a un recipiente; limpiar perfectamente las cápsulas vacías con ayuda de corriente de aire, pesarlas y por diferencia de peso obtener el peso promedio. Mezclar perfectamente la muestra y pesar el equivalente a 25 mg de indometacina, pasar a un matraz volumétrico de 200 ml, agregar 4 ml de metanol, agitar 10 min mecánicamente, llevar al aforo con solución reguladora de fosfatos pH 7.2 y mezclar. Pasar a un tubo de centrífuga, 50 ml de la solución y centrifugar 15 min., llevar una alícuota de 25 ml del líquido sobrenadante a un embudo de separación de 125 ml, extraer con 3 porciones de 25 ml de cloruro de metileno. Filtrar los extractos a través de una torunda de algodón, recibiendo el filtrado en un matraz volumétrico de 100 ml; llevar al aforo con cloruro de metileno y mezclar.

PROCEDIMIENTO: Determinar la absorbancia de la solución de referencia y de la preparación de la muestra a la longitud de onda de máxima absorbancia de 318 nm aproximadamente, usar celdas de 1 cm y cloruro de metileno como blanco de ajuste. Calcular los mg de indometacina en la porción de la muestra por medio de la siguiente fórmula:

0.8C ( Am / Aref ) En la que la C es la concentración en µg / ml de indometacina Sref en la

solución de referencia, Am y A ref son las absorbancias obtenidas con la preparación de la muestra y de la solución de referencia respectivamente. Relacionar el valor obtenido con el contenido promedio por cápsula calculado al principio de la valoración.

BIBLIOGRAFIA: FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS MEXICANOS, ULTIMA EDICIÓN.

PRACTICA No. 5

DISOLUCIÓN

OBJETIVO: Que el alumno conozca el manejo del equipo disolutor y el fundamento de la prueba para sólidos

DISOLUCION: APARATO 1 Se utiliza el disolvente indicado en la monografía. Si el medio de disolución es

una solución reguladora, ajustarla ± 0.05 unidades de pH especificado en la monografía. Se debe evitar la presencia de gases disueltos en el medio de disolución.

PROCEDIMIENTO: Colocar el volumen de medio de disolución indicado y calentar a 37º C ± 0.5 º C. Colocar las unidades de dosis en la canastilla seca y ésta en el aparato antes de iniciar la operación. Después de transcurrir el tiempo establecido, tomar la alícuota para la determinación, en la zona intermedia, entre la superficie del medio de disolución y la parte superior de la canastilla o la paleta y a no menos de 1 cm de la pared del vaso, filtrar inmediatamente. El filtro debe ser inerte, sin causar absorción significativa del ingrediente activo de la solución, no debe contener materiales extraíbles por el medio de disolución y no interferir con los procedimientos analíticos prescritos, con un tamaño de poro nominal no mayor de 1 µ.

INTERPRETACION: Realizar la prueba de 6 muestras y ninguno de los resultados individuales será mayor de Q + 5 %. Si esto no se cumple repetir la prueba de 6 cápsulas adicionales y el promedio de los 12 resultados debe ser igual o mayor de Q y ninguna de los resultados será menor de Q – 15 %. Si esto no se cumple probar 12 muestras más y el promedio de las 4 determinaciones debe ser igual o mayor que Q y no más de 2 de las muestras tendrán resultados menores de Q – 15%. Donde Q es la cantidad de ingrediente activo disuelto, indicado para cada producto, expresado en % de la cantidad etiquetada; 5 y 15 % son los resultados en % de la cantidad etiquetada.

MEDIO DE DISOLUCION: Solución reguladora de fosfatos pH 7.2 – AGUA (1:4); 750 m L.

SOLUCION DE REFERENCIA: pasar 10 mg de indometacina Sust. ref a un matraz volumétrico de 100 ml, diluir y llevar al aforo con medio de disolución y mezclar. Esta solución contiene 30 µg / ml de indometacina.

BLANCO DE LAS CAPSULAS. Vaciar y limpiar tan completamente como sea posible, 5 cápsulas y disolverlas en 750 ml de medio de disolución, pasar 1 mL de ésta solución a un matraz volumétrico de 5 mL, llevar al aforo con medio de disolución.

PREPARACION DE LA MUESTRA: Colocar cada cápsula en el aparato con 750 mL del medio de disolución, accionarlo a 100 rpm durante 20 min, filtrar inmediatamente una porción del medio de disolución empleando un filtro inerte. Medir las absorbancias de las soluciones de referencia, de la muestra y de la solución de las cápsulas vacías, a la longitud de onda de máxima absorbancia de 318 nm aprox., utilizando celdas de 1 cm, y medio de disolución par ajustar el aparato. Calcular el % de indometacina disuelta en la solución por medio de la siguiente fórmula: 3C (Am - Ab / Aref) en la que C es la concentración en µ/ml de indometacina en la solución de referencia; Am Ab y Aref son las absorbancias de la solución de la muestra, de la solución de las cápsulas vacías y de la solución de referencia respectivamente.

BIBLIOGRAFIA: FARMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS MEXICANOS, ULTIMA EDICIÓN.

DETERMINACION MICROBIOLOGICA EN PRODUCTOS FORMULADOS

VITAMINA B12 (CIANOCOBALAMINA)

REACTIVOS 1. Medio de ensayo BACTO B12 DESHIDRATADO U.S.P. (medio basal) catalogo

0457-15-1 laboratorios DIFCO. Preparar tubos de ensaye con 10 ml de medio. 2. Caldo par inócilo BACTO B12 DESHIDRATADO U.S.P. catálogo 0542-15-8 de

laboratorios DIFCO 3. Agar par cultivo stock BACTO B12 DESHIDRATADO U.S.P. catálogo 0541-15-9

de laboratorios DIFCO. Prepare los medios anteriores de acuerdo a las instrucciones del productor (en la etiqueta del contenedor).

4. Medio de suspensión. Coloque 10 ml de medio basal en tubos de ensaye de 25 x 150 mm con un tapón correspondiente y coloque una cantidad adecuada (según experiencia) a matraces de 500 ml con tapón apropiado. Esterilice ambos a 121 ˚ C por espacio de 15 min, en autoclave.

5. Reactivo de solución extractora acuosa de metabisulfito de sodio. Fosfato de sodio dibásico (Na2HPO4)________________________ 12.9 g Acido cítrico anhidro ( C6H807 )___________________________ 11.0 G Metabisulfito de sodio (Na 290205)_________________________ 10.0 g Este debe adicionarse en el momento de uso de la solución y no antes. Agua destilada c.s.p.___________________________________ 1000.0 ml

6. ORGANISMO : LACTOBACILLUS LEICHMANII (ATCC 7830)

DESARROLLO DE LA PRUEBA CULTIVO STOCK Mantenga el organismo en agar para cultivo stock (C) y diariamente prepare dos placas, de subcultivo, use la otra placa para preparar el caldo de inóculo para el siguiente día de análisis. NOTA: Las transferencias se hacen todos los días laborales para mantener la mayior sensibilidad del organismo de prueba, el máximo de sensibilidad se ha obtenido haciendo dos subcultivos al día con 8 horas de diferencia. El tubo se usa un solo día y se descarta. Transferencias diarias. El día anterior al análisis, transfiera una placa de agar fresco a dos tubos de caldo de inóculo, centrifugue uno (el otro puede conservarse en regrigeración por espacio de 24 horas) por si durante el centrifugado se rompiera el primer tubo) a suficiente velocidad para producir un buen paquete de células descarte el líquido transparente o sobrenadante. Agregue 10 ml de medio de suspensión estéril (D) al tubo conteniendo las células, agite para suspender y centrifugue nuevamente, descarte el líquido transparente sobrenadante, descarte el líquido transparente sobrenadante, repita ésta operación 2 veces más. Finalmente suspenda las células derivadas del tubo de 100 ml de medio de suspensión estéril (D) y disperselas. Aésto le llamaremos “inóculo” (el inóculo puede ser usado hasta 10 días si se consertva en refrigeración entre 2 y 8˚ C. PREPARACION DEL ESTANDART. Usar un estándart de cianocobalamina de concentración conocida, secarlo 4 horas sobre sílica antes de usarlo, almacene el estándart en un frasco bien tapado a 20˚ C o menos, pese aproximadamente 20 mg del estándart seco, en un matraz volumétrico de 1000 ml disuelva y afore con agua destilada, guárdela en refrigeración a 2-8˚ C y se puede utilizar por un mes protegida de la luz, prepare los estándares de trabajo a partir de ésta solución por dilución a la concentración deseada y éstas diluciones solo podrán ser usadas el mismo día de dilución. La concentración final debe ser 0.5 ng / ml.

(5 x 10-10 g / ml)

PREPARACIÓN DE LA MUESTRA Prepare la muestra diluyendo de acuerdo a la concentración esperada par

obtener una solución de trabajo con el contenido teórico de aprox. 0.5 ng / ml. PREPARACION DE LA CURVA ESTÁNDART REALIZAR POR CUADRUPLICADO LA PRUEBA, de la solución estandart de

trabajo (0.5 ng/ ml ) añadir a cada tubo 0.00 ml, 0.02 ml, 0.04 ml, 0.06 ml y 0.10 ml (con un rango de 0.005- 0.05 ng.

MUESTRAS: Diluir la muestra a aproximadamente 0.5 ng / ml con agua destilada y agregar 0.04 ml y 0.06 ml en dos tubos por cuadruplicado.

LLENADO. Después que todas las porciones de muestra y estándart han sido adicionadas agregar 10 ml de medio basal y adicionalmente llene un número suficiente de tubos en blanco con 10 ml de medio para su uso posterior en ajuste del espectrofotómetro tape para todos los tubos y autoclaveelos por cinco minutos a 121º C (se debe alcanzar la temperatura en menos de 10 min) después del autoclaveado enfríe rápidamente a temperatura ambiente (en refrigeración si fuese necesario).

INOCULACION. Inocule todos los tubos (excepto los blancos) con una gota del inóculo (0.1 ml)

INCUBACION. Incube los tubos toda la noche (16-18 horas) a 35-37˚ C MEDICION DE CRECIMIENTO: Después de la incubación permita que estén a

temperatura ambiente con uno de los medios no inoculados (blancos) ajuste el espectrofotómetro a 100 % de transmitancia a 600 nm y lea las mueswtras y los estándares utilizando como blanco un medio no i9noculado.

Prepare la gráfica utilizando el promedio de absorvancia para cada concentración y trace la curva , de la curva obtenga la concentración del rpomedio de lectura de las muestras, multiplique por el factor de dilución, divida entre el volumen, peso de la muestra para obtener la concentración de vitamina B12.

CUENTA MICROBIOLOGICA DE UN PRODUCTO TERMINADO

SUSPENSION

OBJETIVO: QUE EL ALUMNO APRENDA A REALIZAR LA PRUEBA DE CUENTA MICRIBIANA EN UNA SUSPENSION Y PODER DECIDIR SI CUMPLE O NO CON LO ESPECIFICADO.

FUNDAMENTO: La cuenta estándart es una prueba mediante la cual se estima el número de microorganismos mesofílicos aerobios viables, hongos, levaduras, y organismos objetables presentes en productos farmacéuticos.

MATERIAL: 6 PLACAS DE PETRI PIPETAS VOLUMETRICAS 2 DE 10 ML Y 2 DE 1 ML MATRACES ERLENMEYER 2 DE 250 ML Y 1 DE 500 ML MATRACES VOLUMETRICOS 2 DE 100 ML Y 1 DE 500 ML

MECHERO DE BUNCEN APARATO: CONTADOR DE COLONIAS AUTOCLAVE PIPETERAS SOLUCIONES Y MEDIOS DE CULTIVO Solución reguladora de K3PO4 p H 7.2 Agar soya tripticasína (agar casoy)

Agar Sabourand Caldo lactosado Agar Mc. Conkey Agar verde brillante Agar sal y manitol o Vogel Johnson Agar cetrimida.

PROCEDIMIENTO: Ala flama de dos mecheros mezclar las muestras de cada equipo, y tomar con una

pipeta estéril 10 ml de la muestra llevar a un matraz volumétrico estéril de 100 ml , aforar con la solución reguladora estéril de de fosfatos p H 7.2 (dilución 1:10).

De la solución anterior tomar 10 ml con pipeta estéril, y llevarlos a otro matraz volumétrico estéril de 100 ml, aforar con la solución reguladora de fosfatos p H 7.2 (dilución 1:100).

Tomar 1 ml de cada una de las diluciones y llevarlos a cuatro cajas de petri estériles, agregar de 20 a 25 ml de los medios de agar soya-tripticaseína y Sabourand estériles previamente preparados y enfriados a 45˚ C.

Mexclar con movimientos rotatorios, dejar solidificar a temperatura ambiente, invertir y dejar incubar durante 48 a 72 horas y a 37˚ C las placas que co9ntienen agar casoy y las que contienen agar sabourand de 20 a 25˚ C

Ala par se prepara un t5estigo que consiste en colocar un ml de diluyente en lugar de la muestra y se procede de la misma manera.

Observar las placas y contar el número de colonias que se desarrollar en cada placa, reportar el número de UFC / ML DE SUSPENSIÓN.

Investigar los límites microbianos para la suspensión o muestra que se haya trabajado y determinar si cumple o no con la especificació0n.

OBSERVACIONES Y CONCLUSIONES BIBLIOGRAFIA:

FARAMACOPEA DE LOS ESTADOS UNIDOS MEXICANOS. ULTIMA EDICIÓN. SYNTEX. DIRECCION DE CONTROL Y GARANTIA DE CALIDAD. AVANCES DEL CONTROL DE CALIDAD EN LA INDUSTRIA FARMACEUTICA.

ANALISIS PARA GUANTES QUIRURGICOS

DESCRIPCION: Polvo fino, blanco, inodoro DESIGANCION: De acuerdo al cuadro básico de curación y prótesis del sector salud (09.01) TALCO: Para guentes quirúrgicos. Compuesto de algodón no aglutinable de maíz y óxido de magnesio. Bolsa con dos Kg PRESENTACION: Bolsa de papel de 2 Kg. Debe cumplir con las especificaciones aplicables establecidas en la norma IMSS-JCC. Requisitos para empaques colectivos de artículos de consumo. INSPECCIÓN DE RECEPCIÓN: Debe cumplir con lo especificado en la Guía de Inspección, material de curación- talcos. ESPECIFICACIONES DETERMINACION ESPECIFICACION PROCEDIMIENTO Aspecto Polvo homogéneo, libre de

partículas extrañas Inspección visual

Contenido neto en Kg 2 mínimo

Utilizar una balanza Granataria con una exactitud de 0.1 g

Identificación Debe presentar un color 08.01 Azul púrpura a azul profundo

Estabilidad a la esterilización: El talco no debe endurecerse, y cualquier grumo que presente debe fácilmente desmenuzarse entre los dedos. (08.01) Sedimentación: El volúmen ocupado por el talco sedimentado debe estar entre 45 y 75 ml (08.01) pH: DE 10.0 a 10.8 ( 08.01) Pérdida al secado. No mayor al 12 % de su peso. Pesar 2 g y proceder como se indica en 0.08.02 utilizando una temperatura de 378˚ K (105˚ C) RESIDUOS DE IGNICION: No mayor al 3 % METALES PESADOS: 0.001 Máx. Método II OXIDO DE MAGNESIO: No contener más del 2 % CUENTA TOTAL MICROBIANA: No más de 100 UFC CUENTA DE HONGOS Y LEVADURAS: NO MÁS DE 10 UFC MICROORGANISMOS PATOGENOS: Ausentes IRRITABILIDAD EN PIEL: Satisface la prueba ETIQUETADO: La bolsa debe tener impreso o adherido en una etiqueta en forma legible e indeleble, los siguientes datos y / o leyendas en español, de acuerdo a la ley general de salud y su reglamento correspondiente.

Marca y / o logotipo , razón social y domicilio del fabricante, importador y proveedor Número de lote Nombre del producto Número de catálogo del proveedor País de origen Contenido neto Número de registro de la SS

Así como los siguientes requerimientos institucionales:

Clave del cuadro básico de material de curación y prótesis del sector salud Propiedad del IMSS no negociable (o leyendas alusivas) Nombre genérico del producto

LABORATORIO DE CONTROL DE CALIDAD

" "

Certificado de análisis de materia prima o producto terminado

" " Nombre:

No. de lote: Cantidad recibida:

Cantidad de muestra:

Fecha de recepción: No. de lote interno:

Tipo de muestreo:

Fecha de muestreo: Nombre del muestreador:

No. de reporte: Fecha de análisis: Nombre del analista: No. de folio:

PRUEBA ESPECIFICACIÓN RESULTADO METODO Analista__________________________________________________________ Revisado por:_____________________________________________________ Firma:____________________________________________________________ Recomendaciones:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________ PREPARADO POR: APROBADO POR: INSPECTOR: PAGINA___DE___

ANALISTA GERENTE DE

GARANTIA DE CALIDAD