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Comparación de procedimientos de oxidación de materia orgánica para la determinación de fósforo en material vegetal Martínez, Gloria C. - Píccoli, Analía B. - Ortiz, María L. - Schroeder, María A. Departamento Física-Química - Facultad de Cs. Agrarias - UNNE. Sargento Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina. Tel./Fax: +54 (03783) 427131 E-mail: gloriam@ agr.unne.eduar - [email protected] ANTECEDENTES El fósforo es uno de los elementos esenciales para la nutrición de las diferentes especies vegetales. Forma parte de los ácidos nucleicos y fosfolípidos, participa en el almacenamiento y la transformación de la energía, es esencial para algunos procesos tales como la fotosíntesis, síntesis de hidratos de carbono y es indispensable para el cumplimiento de algunas funciones como la división celular y la formación de semillas. La concentración de este elemento en plantas enteras o en órganos indicadores puede verificarse mediante métodos químicos apropiados, que proporcionarán información necesaria sobre la concentración del mismo en la planta y que al compararse con valores de referencia sirven para determinar excesos o carencias. Para realizar el análisis químico, las muestras de tejidos vegetales previamente acondicionadas, son sometidas a procesos de descomposición y/o destrucción de la materia orgánica, también llamados de digestión que permiten destruir los componentes orgánicos y liberar los elementos minerales. Los dos procedimientos más utilizados para llevar a cabo los procesos antes mencionados son la digestión seca (acenización) y la húmeda (digestión ácida). La elección de uno u otro procedimiento, es quizá, lo que más controversia ha generado, dadas las ventajas y desventajas de cada uno de ellos. Si bien ambos métodos están basados en la oxidación de la materia orgánica a través del uso de calor y/o ácidos, algunos analistas previenen sobre posibles pérdidas de algunos elementos, entre los que se encontraría el fósforo, al someter a las muestras a temperaturas altas como las que se utilizan en la acenización. Fue objetivo de este trabajo establecer el procedimiento de destrucción de la materia orgánica que permita la máxima recuperación de fósforo en una muestra vegetal. MATERIALES Y METODOS Se trabajó con una muestra foliar de pimiento (Capsicum anum L.) proveniente de un cultivo bajo cobertura plástica situado en la localidad de Santa Ana (Provincia de Corrientes). La muestra fue desecada en estufa a 60 - 70 o C hasta peso constante, luego molida en molinillo tipo Willey de malla 20. Para la oxidación de la materia orgánica se utilizaron los siguientes procedimientos: Acenización Seca : se pesó 0,5 g de muestra, se colocó en una cápsula de porcelana y se llevó a un horno mufla a 500 o C durante 3 horas, hasta la desaparición de puntos carbonosos. La ceniza, luego de enfriada, se disolvió con HCl 6M y se llevó a ebullición por aproximadamente 10 minutos. Cumplido este tiempo se retiró de la plancha caliente, se filtró y se llevó a volumen (50 mL) con agua destilada. Digestión Húmeda : se pesó 0,5 g de muestra la cual se colocó en un tubo de digestión, se le agregó HNO 3 concentrado, dejando reposar durante una noche. Al día siguiente se colocaron los tubos en un bloque de digestión y se calentaron a 150° C durante una hora, luego se le adicionó HClO 4 y se elevó la temperatura a 210° C por espacio de dos horas. Finalizada la digestión se retiraron los tubos del bloque y una vez enfriado el extracto ácido se llevó a volumen con agua destilada. En ambos casos se utilizó un diseño de Bloques Completos al azar con veinte repeticiones. Con los extractos obtenidos se realizó la determinación de fósforo por espectrometría de absorción molecular (Método Murphy-Riley). Los datos fueron analizados estadísticamente mediante ANOVA y test de Tukey. DISCUSION DE RESULTADOS Al comparar los resultados obtenidos con los valores estándares establecidos por Mills y Benton Jones (1996) se puede observar que las concentraciones de P se encuentran dentro de rangos suficientes para plantas maduras en producción con abundantes frutos. Sin embargo al aplicar ANOVA y Test de Tukey, (Tabla 1), se desprende que existen diferencias significativas entre procedimientos; lo que permite confirmar lo expresado por diferentes autores que establecen que la metodología más adecuada para oxidar la materia orgánica cuando se quiere determinar fósforo es la digestión húmeda, ya que en ésta la temperatura no supera los 340 ° C, a partir de la cual pequeñas cantidades del elemento antes mencionado se pierden por volatilización.

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  • Comparacin de procedimientos de oxidacin de materia orgnica para la determinacin de fsforo en material vegetal

    Martnez, Gloria C. - Pccoli, Anala B. - Ortiz, Mara L. - Schroeder, Mara A.

    Departamento Fsica-Qumica - Facultad de Cs. Agrarias - UNNE. Sargento Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina. Tel./Fax: +54 (03783) 427131 E-mail: gloriam@ agr.unne.eduar - [email protected] ANTECEDENTES

    El fsforo es uno de los elementos esenciales para la nutricin de las diferentes especies vegetales. Forma parte de los cidos nucleicos y fosfolpidos, participa en el almacenamiento y la transformacin de la energa, es esencial para algunos procesos tales como la fotosntesis, sntesis de hidratos de carbono y es indispensable para el cumplimiento de algunas funciones como la divisin celular y la formacin de semillas. La concentracin de este elemento en plantas enteras o en rganos indicadores puede verificarse mediante mtodos qumicos apropiados, que proporcionarn informacin necesaria sobre la concentracin del mismo en la planta y que al compararse con valores de referencia sirven para determinar excesos o carencias. Para realizar el anlisis qumico, las muestras de tejidos vegetales previamente acondicionadas, son sometidas a procesos de descomposicin y/o destruccin de la materia orgnica, tambin llamados de digestin que permiten destruir los componentes orgnicos y liberar los elementos minerales. Los dos procedimientos ms utilizados para llevar a cabo los procesos antes mencionados son la digestin seca (acenizacin) y la hmeda (digestin cida). La eleccin de uno u otro procedimiento, es quiz, lo que ms controversia ha generado, dadas las ventajas y desventajas de cada uno de ellos. Si bien ambos mtodos estn basados en la oxidacin de la materia orgnica a travs del uso de calor y/o cidos, algunos analistas previenen sobre posibles prdidas de algunos elementos, entre los que se encontrara el fsforo, al someter a las muestras a temperaturas altas como las que se utilizan en la acenizacin. Fue objetivo de este trabajo establecer el procedimiento de destruccin de la materia orgnica que permita la mxima recuperacin de fsforo en una muestra vegetal. MATERIALES Y METODOS

    Se trabaj con una muestra foliar de pimiento (Capsicum anum L.) proveniente de un cultivo bajo cobertura plstica situado en la localidad de Santa Ana (Provincia de Corrientes). La muestra fue desecada en estufa a 60 - 70 oC hasta peso constante, luego molida en molinillo tipo Willey de malla 20. Para la oxidacin de la materia orgnica se utilizaron los siguientes procedimientos: Acenizacin Seca: se pes 0,5 g de muestra, se coloc en una cpsula de porcelana y se llev a un horno mufla a 500o

    C durante 3 horas, hasta la desaparicin de puntos carbonosos. La ceniza, luego de enfriada, se disolvi con HCl 6M y se llev a ebullicin por aproximadamente 10 minutos. Cumplido este tiempo se retir de la plancha caliente, se filtr y se llev a volumen (50 mL) con agua destilada. Digestin Hmeda: se pes 0,5 g de muestra la cual se coloc en un tubo de digestin, se le agreg HNO3 concentrado, dejando reposar durante una noche. Al da siguiente se colocaron los tubos en un bloque de digestin y se calentaron a 150 C durante una hora, luego se le adicion HClO4 y se elev la temperatura a 210 C por espacio de dos horas. Finalizada la digestin se retiraron los tubos del bloque y una vez enfriado el extracto cido se llev a volumen con agua destilada. En ambos casos se utiliz un diseo de Bloques Completos al azar con veinte repeticiones. Con los extractos obtenidos se realiz la determinacin de fsforo por espectrometra de absorcin molecular (Mtodo Murphy-Riley). Los datos fueron analizados estadsticamente mediante ANOVA y test de Tukey. DISCUSION DE RESULTADOS

    Al comparar los resultados obtenidos con los valores estndares establecidos por Mills y Benton Jones (1996) se puede observar que las concentraciones de P se encuentran dentro de rangos suficientes para plantas maduras en produccin con abundantes frutos. Sin embargo al aplicar ANOVA y Test de Tukey, (Tabla 1), se desprende que existen diferencias significativas entre procedimientos; lo que permite confirmar lo expresado por diferentes autores que establecen que la metodologa ms adecuada para oxidar la materia orgnica cuando se quiere determinar fsforo es la digestin hmeda, ya que en sta la temperatura no supera los 340 C, a partir de la cual pequeas cantidades del elemento antes mencionado se pierden por volatilizacin.

  • Tabla 1: Concentracin foliar de P, expresado en g . Kg-1, promedio de veinte repeticiones para los dos procedimientos empleados.

    Tratamiento P g . Kg-1 Acenizacin 2.70 a

    Digestin Hmeda 3.46 b

    Letras distintas en columnas difieren significativamente, 0.05.

    CONCLUSION

    El procedimiento de digestin ms adecuado para una mayor recuperacin de P en esta muestra vegetal es la digestin hmeda (nitroperclrica). BIBLIOGRAFIA

    Alcntar Gonzlez, G.; Snchez Garca, P. 2000. "Actualizacin en Nutricin de Cultivos". IRENAT. Colegio de postgraduados. Mxico.

    Campbell, C.R.; Owen Plank, C. 1998. "Preparation of plant tissue for laboratory analysis". In: Handbook of reference methods for plant analysis. Ed.: Yash P. Kalra.

    Chapman, Homer D.; Pratt, P.F. 1973. "Mtodos de anlisis para suelos, plantas y aguas." Ed.: Trillas, S.A. pg. 45-50.

    Etchevers, J. D. 1999. Tcnicas de diagnstico del sistema de produccin y del estado nutrimental de los cultivos. Conferencia. (comisin V). 14 Congreso latinoamericano de la ciencia del suelo. Pucn Chile. CD. Comisin V N4.

    Lpez Ritas, Julio; Lpez Mlida, J. 1990. " El diagnstico de suelos y plantas (mtodos de campo y laboratorio)." Ed.: Mundi-Prensa.

    Mills, Harry A.; Benton Jones, J. Jr. 1991. "Plant analysis handbook II." Ed.: MicroMacro Publishing, Inc.

    Ministry Of Agriculture, Fishieries And Food. 1981. Tcnicas de anlisis de suelos, vegetales y piensos. Ed. Academia. Len. Espaa. 60 p.