toma de muestra

INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE y MEDICINA TROPICAL“LEOPOLDO IZQUIETA PEREZ” (INHMT)

PROCESO DE INVESTIGACION Y DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICOLABORATORIO DE PARASITOLOGIA

Toma de Muestra para

LeishmaniaDra. Q.F. Yim Yan Wong Ch.

Instituto Nacional de Higiene “LIP”

Sub-Proceso de ParasitologiaMarzo 2011

Toma de Muestra para Leishmania.

Fecha de nacimiento: _____________________________Edad:__________________

Lugar de residencia:______________________________________________________

Sexo: F M

Establecimiento que solicita el examen:______________________________________

Recibe medicación? Si No Si la respuesta es sí, mencione cual_________________

Ud ha presentado:

Fiebre Pérdida de apetito Pérdida de peso

Malestar general Picaduras por mosquitos Lesiones en piel/mucosas

En el siguiente gráfico señale con una cruz dónde presenta las lesiones

:

Fichas Leishmania

: Desde cuando tiene las lesiones? _______________________________   *Estas lesiones le causan : Dolor Picazón *Estas lesiones presentan: Pus Mal olor Enrojecimiento

*Esta lesión es: Nodular Placa *Conoce a alguna otra persona que tenga Lesiones similares a la suya? __________ Dónde? ___________________________

Método Directo

Frotis Biopsia Cultivo

Método Indirecto

Reacción de Montenegro PCR Inmunofluorescencia indirecta

Toma de Muestra para Leishmania.

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Metodo Directo.Frotis

Bisturi romo Guantes Mechero Algodón o gasa Solución salina Placa portaobjeto

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Lesion de ulcera

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Tinciòn

Fijar con alcohol la Placa portaobjeto Colorante Wright o Guiemsa Enjuague y dejar secar la placa

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Microscopio

Objetivo 100X 1 gota de aceite de inmersión

Observacion Microscopio

Amastigotes de Leishmania (tinción)

Presenta: Kinetoplasto y nucleo coloreado intensamente.

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Metodo DirectoBiopsia

Sacabocado Tijeras pinza o pinza Guantes Mechero Algodón o gasa Solución salina Placa portaobjeto

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Metodo Directo Medio de Cultivo

Agar Sangre de conejo al 20% Jeringuillas de insulina (aguja 20-21) Solución Salina Estéril Mechero Guantes

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Método IndirectoReacción de Montenegro

Jeringuilla de Insulina Leishmanina Alcohol y Algodón

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Método IndirectoPCR Equipos Cámara de flujo tipo 2 Vortex Microcentrífuga Congelador de -80ºC Congelador de -20ºC Baño maría o termobloque Balanza

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Areas en Biologia Molecular.

AREA BLANCA O DE MIX.- Espacio destinado a la preparación de reactivos y MIX para la PCR, donde no ingresa material genético ya sea ARN o ADN.

AREA GRIS O DE EXTRACCIÓN DE ACIDOS NUCLEICOS.- Ambiente destinado a la extracción de ARN ó ADN, también se realiza allí se mezclan los reactivos del MIX con los ácidos nucleídos extraidos.

AREA NEGRA.- Es el espacio donde se realizará la corrida electroforética del amplicón, también se observaran y documentaran los resultados obtenidos en los geles de agarosa.

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Reactivos

Kit DNA Blood MINIKIT QIAmp

Muestra

Impresión de la muestras en papel filtro.

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Materiales Papel absorbente Cajas para almacenar muestras de 96 células para tubos de

1,5ml Micropipetas graduable Puntas con filtro para Micropipetas de 0.5, 5, 20 y 200 ul. Gradillas Seguros para microtubo de 1,5ml Papel de parafina Marcadores permanente punta fina Guantes desechables Contenedores desechables Microtubos de 1.5 ml Tijeras

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