tecnicas de biologia molecular en celulas - sesion 2

Técnicas deBiología Molecular

en Células

Biología Celular y MolecularBiólogo Manuel Fasabi Espinar

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INVESTIGACIÓN DE LAS CÉLULAS Y SUS PARTES

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MICROSCOPÍA

Aumento total = Objetivo x Ocular

Las células y tejidos vivos carecen de componentes que absorben la luz (invisibles) Es necesario fijar y teñir la muestra

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MICROSCOPÍA

Microscopia de campo

claro

Microscopia de contraste

de fase

Microscopia de contraste de interferencia

diferencial

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MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA (Inmunofluorescencia)

Tinción fluorescente: un químico es fluorescente si absorbe la luz de determinada longitud de onda y emite luz fluorescente

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GFP: Green Fluorescent Protein (proteína verde fluorescente)(medusa: Aequorea victoria)

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MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA

Resolución 0.1nm

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FRACCIONAMIENTO CELULAR

Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas

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FRACCIONAMIENTO CELULAR

Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas

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1) Centrifugación

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2) Electroforesis en gel de poliacrilamida (SDS)

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3) Electroforesis bidimensional

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A. Cromatografía por filtración en gel

4) Cromatografía

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B. Cromatografía de intercambio iónico

4) Cromatografía

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C. Cromatografía de afinidad con anticuerpos

4) Cromatografía

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5) Inmunoblot

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PREGUNTAS

1. Radioisótopos2. Espectrometría de masas3. Espectrometría por resonancia magnética nuclear4. Cristalografía de rayos X