Técnicas deBiología Molecular

en Células

Biología Celular y MolecularBiólogo Manuel Fasabi Espinar

1

2

INVESTIGACIÓN DE LAS CÉLULAS Y SUS PARTES

3

MICROSCOPÍA

Aumento total = Objetivo x Ocular

Las células y tejidos vivos carecen de componentes que absorben la luz (invisibles) Es necesario fijar y teñir la muestra

4

MICROSCOPÍA

Microscopia de campo

claro

Microscopia de contraste

de fase

Microscopia de contraste de interferencia

diferencial

5

MICROSCOPÍA DE FLUORESCENCIA (Inmunofluorescencia)

Tinción fluorescente: un químico es fluorescente si absorbe la luz de determinada longitud de onda y emite luz fluorescente

6

7

GFP: Green Fluorescent Protein (proteína verde fluorescente)(medusa: Aequorea victoria)

8

MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA

Resolución 0.1nm

9

FRACCIONAMIENTO CELULAR

Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas

10

FRACCIONAMIENTO CELULAR

Extracción del contenido celular y separación de los componentes según las dife-rencias de sus propiedades físicas y químicas

11

1) Centrifugación

12

2) Electroforesis en gel de poliacrilamida (SDS)

13

3) Electroforesis bidimensional

14

A. Cromatografía por filtración en gel

4) Cromatografía

15

B. Cromatografía de intercambio iónico

4) Cromatografía

16

C. Cromatografía de afinidad con anticuerpos

4) Cromatografía

17

5) Inmunoblot

18

PREGUNTAS

1. Radioisótopos2. Espectrometría de masas3. Espectrometría por resonancia magnética nuclear4. Cristalografía de rayos X