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Proteinas

Disciplina: BioquímicaCurso: Análises Clínicas

3º. MóduloDocente: Profa. Dra. Marilanda Ferreira Bellini

Proteinas

• Moléculas orgânicas;

• Alto peso molecular;

• Fundamentais estrutural e funcionalmente;

• ≥ 50% peso seco• ≥ 50% peso seco

• Formadas por aminoácidos

– Ligações peptídicas.

Proteinas

• 20 aminoácidos ≠;

• Combinação ≠;

– ≠ tamanhos,

– ≠ formas, – ≠ formas,

– ≠ estruturas,

– ≠ propriedades e

– ≠ funções;

Proteína

A seqüência de aminoácidos, que define as características das proteínas, é determinada pelas informações genéticas contidas no núcleo da célula.núcleo da célula.

Classificação das Proteinas

• Enzimas;

• Proteinas Transportadoras;

• Proteinas de Armazenamento;

• Proteinas Contráteis;• Proteinas Contráteis;

• Proteinas Estruturais;

• Proteinas de Defesa;

• Proteinas Reguladoras.

Funções das Proteinas

• Atividade enzimática;

• Transporte;

• Manutenção da pressão coloidosmótica;

• Tamponamento de ΔpH;• Tamponamento de ΔpH;

• Imunidade humoral;

• Coagulação;

• Resposta da fase aguda.

Proteínas totais

• A concentração das proteínas plasmáticas é determinada por três fatores:– Velocidade de síntese:

• A maioria produzida no fígado. Cerca de 25g/dia num indivíduo de 70kg

– Volume de líquido: – Volume de líquido: • Cerca de 250g de proteínas são encontradas no

compartimento vascular de um homem de 70kg, dando uma concentração ao redor de 7,0g/dl

– Velocidade do catabolismo: • As proteínas totais são degradadas, liberando aminoácidos

para a síntese de proteínas celulares.

Proteínas totais

• Determinação de proteinas totais:

– Paciente: Jejum de 8 horas

– Amostra: soro sem hemólise e não lipêmico

Proteínas totais

• Determinação das proteínas totais:

– Método do Biureto:

O cobre, em meio alcalino, reage com a ligação peptídica. O produto apresenta bandas de absorção.peptídica. O produto apresenta bandas de absorção.

Interferentes: Substâncias que possam reagir com o íon cúprico.

Ex: Bilirrubina aumentada, triglicerídeos acima de 500mg/dl

– VR soro: 6,0 – 8,0g/dl

Proteínas totais

Hiperproteinemia

• Desidratação (vômito, diarréia ou acidose diabética)

• Mieloma múltiplo

Hipoproteinemia

• Hemodiluição

• Perda renal de proteínas

• Queimaduras severas• Mieloma múltiplo

• Cirrose hepática

• Hepatite ativa crônica

• Lupus eritematoso sistêmico

• Infecções bacteriana crônica

• Queimaduras severas

• Desnutrição

• Hipertireoidismo

• Hemorragia grave

Albumina

• Representa cerca de 60% das proteínas do plasma humano;

• Meia vida de 15-19 dias;

• Produção de cerca de 15g/ dia.• Produção de cerca de 15g/ dia.

Albumina

• Funções

– Regulação osmótica

– Transporte e armazenamento : Ácidos graxos e esteróides; bilirrubina; fármacosesteróides; bilirrubina; fármacos

• Síntese : no fígado, na forma de pro-albumina.

• Degradação: mecanismo desconhecido.

Albumina

• Determinação da albumina

– Métodos de corantes: Metil orange, HABA, verde de bromo cresol(VBC) e púrpura de bromocresol

• VR: 3,5 a 5,5g/dl

– Eletroforese

– Fracionamento salino

Albumina

• Paciente : – Não consumir dieta rica em gordura por 48hr antes da

prova

• Amostra: – soro, observar postura dos pacientes, pois em – soro, observar postura dos pacientes, pois em

pacientes ambulatoriais o teor de albumina é cerca de 0,3g/dL maior que em pacientes hospitalizados.

• Interferências: – Elevação� agentes citotóxicos.

– Redução � Paracetamol, aspirina, ampicilina

Albumina

Hiperalbuminemia

• Rara;– Carcinomatose metastática,

– desidratação aguda,

– diarréia,

Hipoalbuminemia

• Redução da síntese– Cirrose

– Ingestão inadequada de proteínas: A síntese é – diarréia,

– estresse,

– febre reumática,

– meningite,

– osteomielites,

– traumatismo,

– tuberculose,

– hemoconcentração

proteínas: A síntese é reduzida a um terço durante um jejum de 24hr

– Perda protéica extravascular

– Síndrome nefrótica(proteinúria massiva) e enteropatia perdedora de proteínas

Fracionamento eletroforético

• Eletroforese de proteínas (EFP) no soro:– Técnica simples para separar as proteínas do soro. – Teste de triagem mais utilizado para investigação de

anormalidades das proteínas séricas. – Em condições normais, são separadas cinco bandas do

soro: soro: • albumina, • alfa-1, • alfa-2, • beta e • gamaglobulinas. • Eventualmente, pode ser observada a presença da pré-

albumina.

Fracionamento eletroforético

Fracionamento eletroforético

Globulinas

• Região α1

– Alfa1-antitripsina (AAT)

– Inibição de várias proteases provenientes dos neutrófilos.neutrófilos.

– Proteção contra destruição da parede alveolar.

• VR: 20 - 60μmol/L

Globulinas

- Alfa1-glicoproteína ácida(AAG)Tem como função primária inativar a

progesterona, além de interagir com alguma drogas. Aumentada na artrite reumatóide, Lúpus, queimaduras e infarto. O papel exato da AAG não é conhecidoO papel exato da AAG não é conhecido-Alfa1-Fetoproteína (AFP)

Usada para detectar defeitos de tubo neural em fetos, examinado através do líquido amnióticoVR líquido amniótico: 5 a 25mg/dl-Alfa 1- Lipoproteína

Transportadora de lipídeos

Globulinas

• Região α2-Haptoglobina (HAP)� Transportadora de Hb para o retículo endotelial para ser degradada. Aumentada durante os processos inflamatórios e diminuída em síndromes hemolíticas. - Alfa2-macroglobulina�inibidora de proteases. - Alfa2-macroglobulina�inibidora de proteases. Aumentada durante a infância e na síndrome nefrótica e está diminuída em hepatopatias crônicas. - Ceruplasmina (CER)�é fixadora de cobre. Está diminuída nas anemias e aumentada em neoplasias malignas; proteína de fase aguda tardia.

Globulinas

• Região β1-Transferritina(TRF)�Transporta o ferro do intestino até a medula óssea. Está aumentada na depleção de ferro e diminuída nas perdas protéicas e hepatopatias crônicas. hepatopatias crônicas. -Hemopexina (HX) �Transporta o grupamento Heme até o fígado-Beta-lipoproteína� Transportadora de lipídeos-Complemento C4� Resposta humoral, participa da via clássica do complemento. A deficiência resulta redução da resposta a infecções.

Globulinas

• Região β2- Fibrinogênio� Substrato da trombina, não encontrado em fracionamentos eletroforéticos pois a amostra usada é o soropois a amostra usada é o soro-Complemento fração C3� Atua na resposta imunológica humoral- Beta2- microglobulina (BMG)� Proteína usada para testar a função tubular renal. Elevada em IR

Globulinas

• Região γ-Proteína C reativa� Marcador não-específico de lesão tecidual, infecção ou necrose celular associada com infarto ou malignidadeassociada com infarto ou malignidadeVR: 80-800μg/dl

Globulinas

• Região γ- Imunoglobulinas�Sintetizadas pelo sistema imune em resposta a uma partícula estranha.

-Reconhecem,reagem,neutralizam bactérias, vírus e -Reconhecem,reagem,neutralizam bactérias, vírus e proteínas estranhas.

-Constituídas por proteínas com estrutura em y.-4 cadeias: 2 leves(L) e 2 pesadas(H)- Antígeno se liga a região variável das cadeias.- IgG, IgM, IgA, IgD e IgE

Globulinas

• ImunoglobulinasIgG (1,2,3,4)�85% das Ig totais, atravessa a barreira placentáriaVR:800-1800mg/dlIgM� 5-10% das Ig totaisIgM� 5-10% das Ig totaisVR: 50-150mg/dlIgE� importante papel na atopia e imunidade antiparasitáriaVR:0-0,2mg/dl

Globulinas

• Hipogamaglobulinemia-Imunodeficiências hereditárias-Imunodeficiência adquirida: neoplasias linfóides, IR, terapia imunossupressivalinfóides, IR, terapia imunossupressiva-Mieloma múltiplo, leucemia linfocítica crônica-Crianças prematuras-Fármacos: Fenitoína, carbamazepina, ác. Valpróico

Globulinas

• Gamopatias policlonais-Aumentos difusos das gamaglobulinemias-Causado por: lepra, tuberculose, cirrose

• Gamopatias monoclonais-Encontrada em: Mieloma múltiplo, macroglobulinemia de Waldenström, doença da cadeia pesada (doença de tuberculose, cirrose

biliar primária, cirrose portal, hepatite crônica ativa, doença de Crohn, lúpus eritematoso sistêmico

de Waldenström, doença da cadeia pesada (doença de Franklin)

Globulinas

• Eletroforese de proteínas séricas em gel de agarose, • (1) hipergamaglobulinemia em processo inflamatório; • (2) e (3): fracionamento normal;• (4) gama monoclonal no mieloma múltiplo.

Globulinas

• Perfis eletroforéticos patológicos:

-Mau fornecimento protéico: albumina↓ , α1 e α2↑, β↓, γ↑-Perdas protéicas – Síndrome Nefrótica: albumina↓↓, α1↑, α2↑↑, β↓, γ (varia), α1↑, α2↑↑, β↓, γ (varia)

-Hepatite crônica: albumina↓, γ↑-Hepatite aguda: albumina↓ ou normal, α1↑, α2 normal ou ↓, β e γ↑-Cirrose: albumina↓↓ , α1↓,α2 normal ou ↓, β↓, fusão das frações β e γ

Globulinas

Proteínas totais e séricas

• Bibliografia- Motta, Valter Bioquímica clínica: princípios e

interpretações. Aminoácidos e Proteínas- Capítulo 8

- LabTest. Disponível em: www.labtest.com.br Acesso em 19/09/2011- LabTest. Disponível em: www.labtest.com.br Acesso em 19/09/2011