objetivo: conocer las técnicas básicas para el análisis de fertilidad microbiana del suelo...

Objetivo: Conocer las técnicas básicas para el análisis de fertilidad microbiana del suelo

Técnicas mas utilizadas

Abundancia de microorganismos

• Biomasa total

• Determinación de grupos funcionales (fijadores de nitrógeno, celulolíticos, nitrificadores, amonificadores, etc.)

Actividad microbiana

• Heterótrofa total (producción de CO2, consumo de O2)

• Enzimas especificas (nitrogenasa, sacarasa, ureasa, amilasa)

PRÁCTICO N°4

Análisis de fertilidad de los suelos

INCUBAR 7 DIAS

20 g suelo

BlancoMuestra

300-400 cc 300-400 cc

15 ml OHNa

Producción de CO2 en laboratorio: Preparación de muestras

CO2 + 2 OHNa CO3Na2 + H2O

Reacción química que se producen durante incubación:

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

Materiales

OHNa 0.2 N

H2O

Pipeta

Cubeta

Frasco de 300-400 cc Balanza

Muestra

pesar 20 g de suelo

colocar en el frasco

hidratar: 60% cc (3 ml)

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

colocar OHNa en las cubetas (15 ml)

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

preparar un “blanco”

colocar las cubetas en los frascos

incubar a 28-30°C (7 días)

cerrar los frascos herméticamente

sellar con papel parafinado

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

Producción de CO2 en laboratorio: Titulación

2 OHNa + Cl2Ba 2 ClNa + (OH)2Ba

CO3Na2 + Cl2Ba 2 ClNa + CO3Ba

(OH)2Ba + 2 ClH Cl2Ba + 2 H2O

Reacciones químicas que se producen durante la titulación:

colocar en erlenmeyer

agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina

titular con ClH 0.2 N

CALCULAR BlancoMuestra

OHNaCO3Na2

H2O

OHNaCO3Na2

H2O

Cl2Ba 2%

fenolftaleina

OHNa 0.2 N

vaso de precipitado

erlenmeyer bureta

blanco y muestra

pinza

pizeta

Titulación: Materiales

ClH 0.2 N

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

enrasar la bureta con ClH blanco

extraer cubeta con pinzacolocar el OHNa en un erlenmeyer

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

agregar Cl2Ba (1ml)

agregar fenolftaleina (1 gota)

Cambio de color del indicador

registrar lectura del blanco(ml de ClH )

agitar mientras se titula

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

OHNa de la muestra agregar Cl2Ba y fenolftaleina

Cambio de color del indicador titular

registrar la lectura de la muestra(ml de ClH )

agitar mientras se titula

Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio

(Blanco - Muestra) 4.4 = mg CO2 / 7 d / g de suelo peso del suelo

ClH ≡ CO2/2

ClH 0.2 N ≡ ClH/5 ≡ CO2/2 x 5

peso molecular del CO2 = 44

ml de ClH 0.2 N gastados para titular el blanco

ml de ClH 0.2 N gastados para titular la muestra

factor de conversión

entre ClH y CO2

Cálculo para determinar la cantidad de CO2 por gramo de suelo

Ejemplo:

ClH 0.2 N gastados para titular el blanco: 13,4 ml

ClH 0.2 N gastados para titular la muestra: 7,3 ml

suelo: 20 g

(13.4 – 7.3) 4.4 = 1.34 mg CO2 / 7 d / g de suelo 20

INCUBAR 7 DIAS

Síntesis para medir CO2 en laboratorio

20 g suelo

colocar en erlenmeyer

BlancoMuestra

300-400 cc 300-400 cc

agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina

titular con ClH 0.2 N

15 ml OHNa

CALCULAR

recipiente hermético enterrado (10 cm) medición con jeringa

lectura de CO2

Procedimiento para medir la producción de CO2 a campo

jeringa extractora de gases y detector graduado

x tiempo

Actividades

1) CO2 a campo: observar los implementos

2) CO2 en laboratorio: titular muestras incubadas

3) Cálculos: resolver problemas de CO2 en laboratorio

Casos prácticos de análisis microbiano del suelo

Factores a considerar:

1) No hay valores óptimos absolutos para todos los sitios en estudio.

Usar testigo de suelo sin disturbar

2) Valores mayores no significa mejor fertilidad. Procesos

balanceados

3) Índices entre parámetros químicos y biológicos: por ej. Índice de

mineralización de C (CO2/MO)

Efecto de las practicas productivas

Situaciones analizadas: Bosque Chaqueño

tala y sobrepastoreo testigo

testigo

testigo

quema de pastizal

desmonte selectivo y pasturas

Situaciones analizadas: Agroecosistemas

monocultivo – labranza convencional ganadería y pasturas

siembra directa y rotación

Testigo: suelo bajo alambrado

Parámetros analizados

• Químicos:

• Materia Orgánica• pH• N total• Nitrato

• Biológicos:

• Respiración • Grupos Funcionales• Estructura Poblacional• Índice de Mineralización de C

Bosque Chaqueño

Agroecosistemas

Porcentaje (%) de variación con el suelo testigo

Estructura de las comunidades microbianas

Bosque Chaqueño

Agroecosistemas

33 31 29 33

27 3138

26

2427

17

24

16 11 816

0%

20%

40%

60%

80%

100%

testigo sobrepastoreo quema desmonte-pasturas

nitrificadores

celulolíticos

fijadores

amonificadores

36 3748

34

31

28

30

19

25 16

20

154 8

15

34

0%

20%

40%

60%

80%

100%

testigo lab.convencional SD-rotación ganadería

nitrificadores

celulolíticos

fijadores

amonificadores

Índice de Mineralización de C (IMC)

Bosque Chaqueño IMC

Testigo 0.96

Tala y sobrepastoreo 2.29

Quema de pastizal 1.17

Desmonte selectivo y pasturas

0.96

Agroecosistemas IMC

Testigo 1.02

Monocultivo convencional 1.36

Ganadería y pastura 1.18

Siembra directa y rotación 0.93

IMC= 1 balanceado

>1 pierde C

< 1 gana C