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VIAS DE ADMINISTRACION DE FARMACOS
OBJETIVOS:
Un medicamento solo puede actuar cuando alcanza su propio lugar
de acción; desde que se administra hasta que ejerce su efecto pasa
por varias fases, el primer paso que debe sufrir es el de penetrar en
el torrente circulatorio, para desde allí ser distribuido a todo el
organismo y alcanzar su lugar de acción; la rapidez con que un
medicamento llega al torrente sanguíneo él lo que caracteriza
fundamentalmente su intensidad de acción, es decir su mayor o
menor actividad, dependiendo todo esto del a vía de administración
utilizada.
Observar los efectos del anestésico Tiopental sódico (Pentotal
sódico®) en ratones blancos, usando diferentes vías de
administración y una misma dosis.
Determinar las ventajas particulares de cada una de las vías de
administración utilizadas
MARCO TEORICO:
Vía Oral (VO): es la más adecuada para administrar un medicamento,
aunque no siempre es la más útil. Cuando se emplee esta vía hay que dejar
que los animales por lo menos en ayunas durante 24 horas antes. Para los
pequeños roedores existen cánulas apropiadas que consisten
generalmente en agujas de grueso calibre con la punta en forma de oliva,
para evitar traumatismos. Para animales más grandes se emplean sondas
de caucho.
Vía Subcutánea (SC): siempre que se inyecta una sustancia por esta vía
conviene asegurarse de que realmente la inyección es subcutánea, para lo
cual una vez atravesada la piel, con la aguja se seguirá el trayecto de la
misma con los dedos. Conviene que le liquido inyectado quede a bastante
distancia del lugar de punción para evitar la salida del mismo. Las zonas de
elección para la punción subcutánea en animales pequeños suelen ser a
nivel del dorso ya sea en la base de la cola o en la parte superior del cuello
algo por detrás de las orejas. Si el volumen es pequeño, la piel se levanta en
la zona afectada, pero si el volumen es mayor se forman grandes masas
edematosas que van desapareciendo lentamente.
Vía Intramuscular (IM): esta vía provee una absorción más rápida que el
anterior puesto que tiene mayor irrigación y es menos dolorosa, pero en
animales pequeños no es una vía útil por lo reducido de sus masas
musculares. En las aves, la inyección se practica a nivel del musculo pectoral
y en los mamíferos grandes en los músculos de las patas traseras.
Vía Intraperitoneal (IP): las punciones deben practicarse en la mitad
inferior del abdomen, por fuera de la línea media, se recomienda utilizar el
método “en bayoneta”, pues asegura la penetración adecuada en la cavidad
abdominal y evita que le liquido pueda refluir.
Vía Intravenosa (IV): es la que produce efectos inmediatos, ya que le
fármaco se deposita para entrega inmediata a los tejidos, esta vía es muy
útil en experimentación animal, que lo mismo sirve para la administración
de una sustancia a dosis exactas, que para extraer muestras de sangre para
su análisis. En el conejo la administración IV se realiza en la vena marginal
de la oreja: en el ratón la inyección se realiza en las venas de la cola; en el
perro la vena que se utiliza es la safena.
Vía rectal: los fármacos se absorben más rápidamente por el recto que por
vía oral, como inconveniente, antes de la administración se debe dejar los
animales 24 horas en ayunas, para evitar que las heces interfieran los
procesos de absorción para lo cual es conveniente colocar a los animales
con las patas traseras más elevadas que la cabeza para evitar el reflujo del
producto administrado.
Vía Conjuntival: de entre las mucosas externas, la conjuntiva es la más
utilizada, sobre todo para la aplicación de colirios y anestésicos locales. De
los animales más utilizados está el conejo. En cualquier caso se debe
procurar que la córnea este siempre indemne.
Vía Inhalatoria: la velocidad de absorción por esta vía es mayor que por el
intestino, los músculos o la piel y es útil en experimentación animal con
analgésicos volátiles.
METODO EXPERIMENTAL
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, jeringuillas hipodérmicas, jeringuilla con cánula para
administración oral, dispositivo para administración IV, embudo,
algodón, marcadores.
SUSTANCIAS Y RACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos
Químicos: Tiopental sódico, concentración 2 mg/ml
Alcohol o xilol
PROCEDIMIENTO:
Cada mesa de trabajo dispone de una jaula con 7 ratones, 6 servirán para
diferentes pruebas y una actuara con testigo.
1. Proceder a pesar a los 6 ratones de prueba, realizar los cálculos
tomando en cuenta que a todos los animales se les dará una misma
dosis de Tiopental sódico de 40 mg/k de peso.
2. Administrar el fármaco a los 6 ratones de la siguiente manera:
Ratón N°1: Vía Inhalatoria: introducir el ratón bajo el embudo de vidrio y
hacer gotear en el algodón el volumen del fármaco correspondiente y
observar el efecto durante 10 minutos. Anotar el resultado.
Ratón N°2: Vía Subcutánea: con una jeringuilla hipodérmica, inyecte le
fármaco a nivel del dorso, ya sea en la base de la cola o en la parte superior
del cuello por detrás de las orejas. Observe los efectos y anote el resultado.
Ratón N°3: Vía Oral: sujete al animal en la forma indicada en la práctica N°1
y mediante una jeringuilla provista de una cánula especial para
administración introducir el fármaco en el hocico del ratón. Observe los
efectos y anote el resultado.
Ratón N°4: Vía Intravenosa: coloque la cola del ratón en el dispositivo
especial, ingurgite las venas de la cola mediante calor o con una torunda de
algodón empapada en alcohol o xilol, con la mano izquierda tomar una
torunda y atirantar la cola, de modo que se haga relieve sobre el dedo
índice, lo que sirve de apoyo para luego introducir la aguja y administrar el
fármaco. Observe los efectos y anote el resultado.
Ratón N°5: Vía Intramuscular: mediante una jeringuilla inyectar el fármaco
en los músculos de las patas traseras. Observe los efectos y anote el
resultado.
Ratón N°6: Vía Intraperitoneal: Mediante una jeringuilla practicar la
punción en la mitad inferior del abdomen, por fuera de la línea media. Con
una mano se levanta la piel dela región, para separar la pared del contenido
abdominal y evitar así su punción. Primero se introduce la aguja
subcutáneamente hasta la mitad de su longitud y luego se acaba de
introducir verticalmente a través de la pared abdominal. El método
utilizado se denomina “en bayoneta”. Observe los efectos y anote el
resultado.
3. Comprar los efectos obtenidos anteriormente con un ratón testigo,
al que no se ha inyectado ningún fármaco.
CUADRO DE RESULTADOS
RATON
N°
VIA DE
ADMINISTRACION
PESO
(g)
VOL.
(u.i)
DURACION
EFECTO
(min)
GRADOS DE
DEPRESION
1 2 3 4 5
1 Inhalatoria
2 Subcutánea
3 Oral
4 Intravenosa
5 Intramuscular
6 Intraperitoneal
7 Testigo
Grados de depresión:
1. Ningún efecto aparente
2. Locomoción incordiada. Ataxia
3. Dormido, se acomoda luego de un estímulo doloroso.
4. Dormido profundamente, pero no se acomoda luego de un
estímulo doloroso.
5. Muerto.
TECNICAS DE ADMINISTRACION:
En el cuadro 7. Observaremos algunas de las técnicas más utilizadas en
Farmacología experimental. (Los gráficos han sido tomados del libro
Esquemas y Prácticas de C. Barastegui Almagro).
CUESTIONARIO:
1. De las siguientes vías de administración: intravenosa, subcutánea,
intramuscular y oral, indique la formas e absorción, utilidad
especial, limitaciones y precauciones de cada una de ellas.
BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, Editorial Espaxs, España, 1976.
Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
ANESTESIA GENERAL
OBJETIVOS:
Para realizar ciertos procedimientos dolorosos como administración
de fármacos, operaciones quirúrgicas, recogida de muestras, medida
de constantes, etc. Se requiere que estas se realicen cómodamente
y sin peligros para el operador y evitando dolor, violencia y
sufrimiento a los animales, esto se consigue por medio de
anestésicos generales.
Conocer experimentalmente y manejar bien los planos y periodos
dela anestesia general, para evitar contratiempos que puedan ser
fatales, sea que se empleen anestésicos generales inhalatorios o no
inhalatorios.
MARCO TEORICO:
Anestesia: significa pérdida de sensibilidad, no sola de la sensibilidad al
dolor sino también a otras formas de sensibilidad, táctil, térmica, etc.
Formas de sensibilidad que reside en los órganos de los sentidos.
Anestesia Inhaladora: emplea gases o líquidos volátiles. Su administración
se hace directamente poniendo al animal bajo una campana de cristal, o
bien poniéndole un bozal con un algodón empapado con el anestésico.
También se puede hacer a través de la anulación endotraqueal, por medio
de una bomba de respiración.
Es útil para manipulaciones cortas. Su inducción es rápida y su eliminación
también son embargo requiere una vigilancia constante por parte del
operador o de un ayudante, para evitar llegas a niveles de depresión bulbar.
Económicamente resulta cara. El anestésico más utilizado en
experimentación animal es el éter.
Anestesia no-Inhalatoria: utiliza soluciones anestésicas que se administran
por vía oral o lo que es más frecuente, por vía parental (subcutánea,
Intraperitoneal, intravenosa, en sacos linfáticos).
Para anestesia en animales es preferible el uso de anestésicos No
Inhalatorios. Su ventaja es que se administra una dosis única y permiten
mantener un nivel constante de anestesia durante el tiempo que dura la
experiencia de parte del periodo posoperatorio.
En la anestesia quirúrgica que es la que más interesa, se busca obtener
insensibilidad, la desaparición de los movimientos reflejos, la relajación
muscular manteniendo al paciente en un estado lo más próximo al estado
normal. La anestesia general no se manifiesta de una manera selectiva en
tal o cual parte del sistema nervioso, sino que afecta a todos los centros
nerviosos sin excepción. La anestesia general comprende 4 periodos y el
tercer periodo o anestesia quirúrgica comprende a su vez 4 planos.
Periodo I, Analgesia o Inducción: el anestésico se fija en los centros
corticales superiores y conduce en forma progresiva a la pérdida de la
conciencia. Las funciones sensoriales son las únicas suprimidas. Al comienzo
el paciente aún está consciente pero las percepciones dolorosas se vuelven
imprecisas.
Periodo II, Excitación o delirio: se produce una inhibición de los centros
corticales motores, este periodo comprende desde la pérdida de la
conciencia hasta el establecimiento de la respiración regular, a veces
aparecen pesadillas, gritos y gestos desordenados.
Periodo III, anestesia quirúrgica: se caracteriza por una depresión funcional
de la medula espinal, con abolición de reflejos medulares, sensoriales y
motores. Se produce entonces la relajación muscular y se establece una
respiración regular característica. Consta de 4 planos o fases.
Primera fase o primer plano: los globos oculares oscilan lentamente
de derecha a izquierda, las pupilas presentan una miosis ligera, pero
no aparece modificado el reflejo a la luz. La respiración es regular,
ruidos, más rápida y amplia que la normal. No se produce aun
relajación muscular.
Segunda fase o segundo plano: la respiración se vuelve regular.
Cesan los movimientos oculares, disminuye la miosis y desaparece el
reflejo óculo palpebral, peor persiste le reflejo a la luz. Aparece la
relajación muscular.
Tercera fase o tercer plano: la respiración se hace más superficial por
parálisis de los músculos intercostales y abdominales, en tanto que el
diafragma continúa sus contracciones normales. En esta fase
desparece el reflejo de la luz. El tono muscular se encuentra muy
disminuido, la pupila ligeramente dilatada. Se debe tratar de no llegar
nunca más allá de esta fase.}
Cuarto plano: la respiración es aún más superficial, estrictamente
diafragmática, ocasionada por parálisis completa de los intercostales.
La pupila de halla en franca midriasis, el pulso es rápido, la presión
arterial es baja y la musculatura se encuentra en atonía.
Periodo IV, Parálisis bulbar o paro respiratorio: es la fase tóxica cuya
aparición debe evitarse de cualquier manera, pues si es alcanzado el centro
respiratorio, cesan los movimientos de la respiración, pero sin suspensión
de la contracción cardiaca. En forma simultánea se comprueba una
midriasis total acompañada de sequedad de la boca y el sujeto se torna
cianótico. Luego de 2-3 minutos del paro respiratorio puede producirse el
paro cardiaco.
METODO EXPERIMENTAL:
EQUIPO Y MATERIALES:
Jaula, embudo, algodón
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos
Químicos: Éter dietílico
PROCEDIMIENTO:
1. Saque al animal de la jaula y colóquelo debajo de un embudo sin
vástago, en cuyo extremo superior tiene una torunda de algodón.
2. Haga gotear éter dietílico en la torunda de algodón
3. Anote los efectos más representativos observados en cada uno de
los periodos de la anestesia, señalando la hora de observación.
NOTA: LLEGAR UNICAMENTE AL TERCER PLANO DEL TERCER
PERIODO
4. Retirar al animal del embudo y ventilarlo adecuadamente hasta
que desaparezcan los efectos farmacológicos del éter dietílico.
SIGNOS QUE CARACTERIZAN A CADA UNO DE LOS PERIODOS DE LA
ANESTESIA GENERAL
PRIMER PERIODO, IDUCCION O ANALGESIA
a) Analgesia parcial luego total
b) Amnesia
c) Respiración: ligeramente irregular
d) Movimientos oculares voluntarios
e) Pupilas (sin medicación ): Normales:
f) Reflejos corneal y faríngeo
g) Frecuencia del pulso
h) Presión sanguínea: se eleva ligeramente
i) Tono muscular: normal
j) Respuesta a la incisión cutánea
SEGUNDO PERIODO, EXCITACIÓN O DELIRIO
a) Respiración: amplia e irregular
b) Movimientos oculares
c) Pupilas: dilatadas, midriasis
d) Reflejos corneal y faríngeo
e) Frecuencia del pulso
f) Presión sanguínea
g) Tono muscular: aumentando
h) Respuesta a la incisión cutánea
TERCER PERIODO, ANESTESIA QUIRURGICA
PRIMER PLANO
a) Sueño tranquilo
b) Respiración: rítmica
c) Movimientos oculares
d) Pupilas: pequeñas
e) Reflejos corneal y faríngeo
f) Frecuencia del pulso: Normal
g) Presión sanguínea: Normal
h) Tono muscular: Ligera relajación
i) Respuesta a la inclusión cutánea
SEGUNDO PLANO
a) Respiración: rítmica
b) Movimientos oculares: fijos
c) Pupilas: poco dilatadas
d) Reflejos corneal y faríngeo
e) Frecuencia del pulso: Normal
f) Presión sanguínea: Normal
g) Tono muscular: Relajación moderada
h) Respuesta a la incisión cutánea
TERCER PLANO
a) Respiración: rítmica y superficial
b) Movimientos oculares: Fijos
c) Pupilas: bastante dilatadas
d) Reflejos corneal y faríngeo
e) Frecuencia del pulso
f) Presión sanguínea: disminuye
g) Tono musculas: flacidez
h) Respuesta a la incisión cutánea
CUARTO PLANO
a) Respiración: muy superficial e irregular
b) Movimientos oculares. Fijos
c) Pupilas: completamente dilatadas
d) Reflejos corneal y faríngeo
e) Frecuencia del pulso
f) Presión sanguínea: disminuida considerablemente
g) Tono musculas: flacidez
h) Respuesta a la incisión cutánea.
CUARTO PERIODO, PARALISIS BULBAR
a) Respiración:
b) Movimientos oculares: fijos
c) Pupilas: franca midriasis
d) Reflejos corneal y faríngeo
e) Frecuencia del pulso
f) Presión sanguínea
g) Tono muscular: flacidez externa
h) Respuesta a la incisión cutánea.
EFECTOS FARMACOLOGICOS DEL ÉTER DIETILICO EN EL RATÓN
(ANESTESIA POR INHALACION)
PESO
RATON
(g)
HORA
ADM.
I PERIODO
INDUCCION
ANALGESIA
(tiempo)
II PERIODO
EXCITACIÓN
DELIRIO
(tiempo)
III PERIODO
ANESTESIA
QUIRURGICA
(tiempo)
IV
PEIODO
PARALISIS
BULBAR
(tiempo)
I II III IV
NOTA: RIESGO DELA PRACTICA. DEBIDO A QUE EL ÉTER DIETILICO ES UN
ANESTESICO VOLATIL INFLAMABLE Y EXPLOSIVO, QUEDA ESTRICTAMENTE
FUMAR O PRENDER FUEGO EN EL INTERIOR DEL LABORATORIO DURANTE
EL DESAROLO DE ESTA PRACTICA.
CUESTIONARIO:
1. ¿Cuáles son los modos de combatir algunos accidentes anestésicos?
BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976
Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987
Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica, Editorial Medica Panamericana, 1986.
Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986.
DISECCIÓN DE MAMÍFERO
OBJETIVO:
La experimentación animal requiere de procedimientos de
determinados órganos, aparatos y sistemas, por lo que es necesario
que los estudiantes los identifiquen y ubiquen correctamente para
que las manipulaciones se realicen con éxito y se obtengan los
resultados esperados.
Estudiar la anatomía interna y externa del ratón blanco.
Contrastar con las diferencias existentes en determinados órganos
de animales de otras especies, por ejemplo los anfibios utilizados
también en farmacología experimental.
MARCO TEORICO:
MORFOLOGIA EXTERMA DE RATON BLANCO: el cuerpo del ratón está
recubierto de pelo presenta en la cara ventral unos pequeños mamelones
solo perfectamente visibles en la hembra sexualmente activa.
Está dividido en 3 regiones: cabeza, tronco y extremidades.
En la cabeza se observan los pabellones auditivos muy desarrollados
móviles, los ojos, redondeados, situados a ambos lados de la cabeza y
protegidos por los parpados móviles. En el extremo anterior se sitúan
orificios nasales y por debajo de ellos el hocico presenta una hendidura
vertical que deja entrever los incisivos superiores a ambos lados del hocico
se encuentran unos pelos largos llamados vibrisas (bigotes) de función
táctil.
En el tronco puede observarse en la zona ventral 2 pares de tetillas
inguinales y dos pares de tetilla pectorales. El ano está situado en la parte
posterior del cuerpo por detrás del orificio excretor y reproductor.
Respecto a las extremidades, los miembros anteriores son bastantes cortos
y la mano posees 4 dedos, los miembros posteriores son más largos y el pie
posee 5 dedos. Todo los dedos están provistos de uñan. La cola es casi tan
larga como el cuerpo y está formado por anillos recubiertos de escamas
entre las que se inserta pelos cortos y rígidos.
ANATOMIA INTERNA: Para el estudio de la antinomia interna debe
colocarse el animal previamente anestesiado en una cubeta de disección
con la cara ventral hacia arriba. Se fija por los pies y las manos se produce
en una cubeta a efectuar una incisión por la línea dentro- medial desde el
extremo posterior del abdomen hasta cerca del mentón y también a lo largo
de los cuatro miembros (Ver cuadro 9). Una vez efectuadas las incisiones se
separa la piel lateralmente fijándose con las pinzas separadoras a la cubeta.
Luego se procede de la misma forma con la capa muscular subyacente. La
musculatura se separa lateralmente y se fija a la cubeta, quedando así al
descubierto las vísceras del animal.
En la región del cuello se encuentra la tráquea reforzada por anillos
cartilaginosos que comunican mediante los bronquios con los pulmones. El
esófago queda oculto por la tráquea y comunica directamente con el
estómago. A ambos lados del esófago se sitúan las glándulas salivales que
están muy desarrolladas.
En la cavidad torácica se observan a ambos lados los pulmones y en el
centro el corazón (formado por dos aurículas y dos ventrículos) rodeado por
el pericardio. Entre la cavidad torácica y la abdominal existe una delgada
capa muscular llamada diafragma.
En la cavidad abdominal aparece en primer lugar el hígado, muy
voluminoso y recortado en varios lóbulos y la vesícula biliar. En la parte
izquierda se sitúa en el estómago del que parte el intestino delgado. Cerca
del estómago está el bazo y en la zona del duodeno, muy cerca de la parte
final del estómago, se encuentra el páncreas. La mayor parte de la cavidad
abdominal está ocupada por las circunvoluciones del intestino, que se
mantienen en su lugar gracias a una fina membrana trasparente muy
vascularizada que es el mesenterio.
Aparato excretor: situados en posición dorsal a ambos lados de la zona
media de la columna vertebral, se encuentran los riñones. Sobre ellos se
sitúan las glándulas suprarrenales. De la zona central del riñón sale el
conducto urinario o uréter. Los dos uréteres comunican con la vejiga
urinaria y de ella parte la uretra que desemboca al exterior.
Aparato genital: en las hembras, el aparato genital está formado por dos
ovarios pequeños, granulosos, situados en el borde posterior externo de los
riñones. En la proximidad de cada ovario se encuentran la Trompa de
Falopio, destinadas a captar los óvulos, que se continua a través de un corto
oviducto cuya parte final se dilata dando lugar al útero. Los dos cuernos de
dicho útero se unen en la parte inferior originando la vagina que se abre al
exterior a través de la vulva.
En el macho el aparato genital está formado por dos testículos ovalados y
blanquecinos que se alojan en la cavidad abdominal cuando aquella no esa
sexualmente activo y en el escroto durante la época de celo. De los
testículos parten conductos deferentes o espermiductos que se enrollan
para formar el epidídimo desembocando finalmente en la uretra. En esta
también desembocan las vesículas seminales, muy desarrolladas durante la
época de celo.
METODO EXPERIMENTAL:
EQUIPOS Y MATERIALES:
Equipo de disección, cubeta de disección, jaula, embudo, piolas,
esparadrapo, algodón.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones lancos
Químicos: Éter dietílico para anestesia.
PROCEDIMIENTO:
1. Saque al animal de la jaula y colóquelo debajo de un embudo, en cuyo
extremo superior tienen una torunda de algodón.
2. Anestesie al animal, haciendo gotear éter dietílico en la torunda.
Podrá darse cuenta que la anestesia ha tenido efecto y que el animal
se encuentre en el tercer plano del tercer periodo de anestesia
cuando al hacerlo rodar por la cubeta no ofrezca resistencia.
3. Coloque al animal de espaldas y sujete las extremidades inferiores y
superiores mediante piolas a la cubeta de disección.
4. Valiéndose del bisturí o tijeras, practique un corte en la piel del
animal a nivel inferior del abdomen y nuevo en la línea media
practique un corte de la piel longitudinalmente, desplazando el
bisturí o la tijera hasta la altura de las extremidades anteriores,
continúe el corte de la piel por la parte del abdomen hasta la altura
de las extremidades posteriores. Practique ahora 2 cortes
transversales perpendiculares al anterior y en posteriores. Practique
ahora 2 cortes transversales perpendiculares al anterior y en
dirección a las extremidades.
5. Separe la piel del animal, utilizando para esto el lado romo del
buscador
6. Mantenga la anestesia necesaria para evitar el sufrimiento del
animal.
7. Ahora tiene la vista la pared abdominal cuya cara anterior está
recubierta por el peritoneo.
8. Proceda de la misma forma con la capa muscula subyacente (cortes)
9. La musculatura se separa lateralmente y se fija a la cubeta,
quedando así al descubierto las vísceras dela animal.
10. Para abrir el tórax se practica un corte a un lado del esternón
teniendo siempre cuidad de no lastimar los órganos internos.
Proceda a distinguir los distintos órganos y sistemas, tanto de la
cavidad abdominal como de la torácica.
BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976
Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986.
Litter, M., Compendio de Farmacología, Tercera Edición, Editorial Ateneo, Argentina, 1984.
Fernández, M., Manual de Principios y Técnicas en Farmacología Experimental, Primera edición, Loja, 1982.
ABSORCION DE FARMACOS
OBJETIVOS:
Cualquiera que sea la vía de administración, la absorción depende de
la solubilidad de fármaco. Un medicamento solo puede actuar
cuando alcanza su propio lugar de acción. Desde que se administra
hasta que ejerce su efecto pasa por varias fases. El primer proceso
que debe sufrir es el de penetrar en el torrente circulatorio, para
desde ello ser distribuido a todo el organismo y alcanzar su lugar de
acción. La rapidez con que un medicamento llega al torrente
sanguíneo es lo que caracteriza fundamentalmente su intensidad de
acción, es decir su mayor o menor actividad.
En esta práctica se observara la distribución del Azul de Metileno
(colorante) en ratones blancos, administrando por diferentes vías y
en una misma dosis.
MARCOTEORICO:
Distribución de fármacos en el organismo: en el organismo los
medicamentos ya sean inyectables directamente en la circulación o bien
absorbidos por la vía sanguínea o linfática, llegan a la sangre, plasma, desde
donde se distribuyan a los diferentes tejidos del organismo.
La concentración del fármaco en el plasma adquiere una importancia
enorme en relación con el efecto farmacológico, pues dicho efecto depende
de que la sustancia alcance las células que responden al mismo a una
determinada concentración, la que depende a su vez de la concentración
plasmática.
Los fármacos pasan desde la sangre al líquido intersticial por transporte
pasivo a través de los capilares por difusión y filtración, actuando algunos
en la superficie celular, mientras que otros pasan luego al líquido
extracelular.
La velocidad de distribución de los fármacos, es generalmente rápida, una
vez llegados a la circulación comienzan a pasar a los tejidos a los 15 a 20
segundos, y se distribuyen en el líquido extracelular, en el agua total del
organismo o se fijan en las celular en pocos minutos.
Desde el líquido intersticial los fármacos pasan a las células de los tejidos,
atravesando la membrana plasmática, a menos que se fijen en los
receptores de la superficie celular, este pasaje sigue las leyes generales de
transporte por las membranas en relación a su liposolubilidad.
Pasaje de los fármacos al Sistema Nervioso Central (SNC) y al líquido
cefalorraquídeo (LCR): el pasaje de fármacos desde el plasma sanguíneo al
cerebro y al LCR se realiza a través de una membrana lipídica (barrera
hematoencefálica) y sigue los principios generales de transporte, debiendo
señalarse que solo pasa la porción libre de los fármacos y no la combinada
con las proteínas plasmáticas. Las sustancias muy ionizadas son incapaces
de penetrar; lo fármacos que en el plasma se encuentran en forma no iónica
penetran en el cerebro y en el LCR a una velocidad que depende del
coeficiente de partición lípidos/agua. Ejemplo: el Tiopental sódico,
atraviesa esta barrear de forma tan veloz que en 1 o 2 minutos alcanza su
máxima concentraciones el SNC, los no electrolitos penetran si son
liposolubles. Ejemplo el éter.
Pasaje de fármacos por la placenta: Las sustancias atraviesan en general
esta membrana lipídica por difusión pasiva. Es fácilmente permeable a la
fracción libre.
Almacenamiento de los fármacos en el organismo en muchas ocasiones los
fármacos no se distribuyen de modo uniforme y se acumulan
selectivamente en ciertas regiones. En estos dispositivos de
almacenamiento los fármacos se encuentran en equilibrio con el plasma
sanguíneo y se van liberando lentamente de aquellos a medida que se
metabolizan y se excretan, en esta forma se mantienen niveles
medicamentosos efectivos en el plasma que permiten obtener acciones
farmacológicas prolongadas hasta el agotamiento de dichos dispositivos.
Las proteínas del plasma pueden construir un dispositivo o reservorio, pero
los principales depósitos del fármaco se encuentran en los tejidos.
METODO EXPERIEMENTAL:
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas hipodérmicas, cánula para
administración oral, dispositivo para administración intravenosa,
equipo de disección, cubeta de disección, embudo son vástago,
algodón, esparadrapo, piolas.
SUSTANCIAS REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos
Químicos: Azul de metileno, solución al 1% en suero fisiológico
Éter dietílico.
PROCEDIMIENTO:
1. Cada mesa de trabajo. Dispone de 5 ratones blancos.
2. Administrar el colorante por las siguientes vías y volúmenes.}
RATON VIA DE
ADMINISTRACION
VOLUMEN
ADMINISTRADO RESULTADO
1 Oral 10 u.i
2 Subcutánea 10 u.i
3 Intravenosa 10 u.i
4 Intraperitoneal 10 u.i
TESTIGO ------------------- ---------------------
3. Para visualizar mejor la distribución del Azul de Metileno, al cabo de
unos 15 minutos de haberles administrado por las diferentes vías se
precede a hacer La disección de los animales, previa anestesia.
COMENTARIO DE LOS RESULTADOS:
Es importante conocer en qué forma se absorben los fármacos, ya que,
aparte de los diferentes factores que condicionan la distribución de un
fármaco en los tejidos, la absorción influye en la elección de la vía de
administración.
En la administración oral, se comprobara que el colorante permanece en el
tracto digestivo, sin apenas ser absorbido. En la administración subcutánea
se podrá especial atencional territorio vascular próximo al punto de
aplicación del colorante una intensa coloración azulada en todo el sistema
circulatorio con amplia difusión por todos los tejidos. En ratones albinos
incluso antes de hacer la disección, se puede comprobar la intensa
tonalidad azulada que adquieran los ojos y las partes acras del animal
(orejas, patas y morro) ya que inmediatamente después de la
administración intravenosa. En la administración Intraperitoneal el
colorante ocupara la cavidad abdominal y el territorio vascular al punto de
aplicación.
Comparar los resultados con la coloración que presentan tracto digestivo,
territorio vascular en general y la cavidad abdominal del ratón testigo al
cual no le fue administrado el colorante.
CUESTIONARIO:
1. ¿Cuáles sin los mecanismos que rigen el pasaje de las drogas a través
de membranas corporales o barreras?
BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976
Bevan, J., et. al., Fundamentos de Farmacología, Introducción a los Principios de Acción de Fármacos, Segunda Edición, Harla Harper & Row Latinoamericana, México, 1982.
De la Vega, E., Manual de Farmacología Practica, Ecuador, 1985.
Fernández, M., Manual de Principios y Técnicas en Farmacología Experimental, Primera edición, Loja, 1982.
Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica, Editorial Medica Panamericana, 1986.
Litter, M., Compendio de Farmacología, Tercera Edición, Editorial Ateneo, Argentina, 1984.
Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986.
San Martín Casamada, E., Tratado de Farmacodinamia, Editorial Científico – Medica, Buenos Aires, Argentina, 1974.
Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
EXPERIMENTO DE STARKENSTEIN
OBJETIVOS:
La absorción depende entera uno de los factores más importantes de
la solubilidad del fármaco de ahí la necesidad de conocer los
mecanismos para interpretar las interacciones medicamentosas que
tienen significancia clínica.
En esta práctica se observara la importancia de la solubilidad frente
a la acción de la estricnina actuando sobre ratón blanco.
MARCO TEORICO:
Absorción de fármacos en el organismo: la absorción es el traslado de un
fármaco desde el sitio de su aplicación hasta la sangre o la linfa a través de
membranas celulares, utilizando como mecanismos físico-químicos de
transferencia difusión simple, transporte activo, difusión facilitada,
transporte conectivo o pinocitosis. La absorción influye directamente en la
elección de la vía de administración del fármaco.
La absorción está influenciada por varios factores entre los cuales se
anotan.
a) Factores dependiendo del fármaco: gradiente de concentración,
liposolubilidad, grado de ionización, tamaño de la molécula.
b) Factores dependientes del sitio de absorción: superficie, riego
sanguíneo, pH del medio, tiempo de contacto, complejidad de la
barrera de transferencia.
Absorción desde el tubo digestivo:
Cavidad bucal su epitelio delgado, buena irrigación y medio acuoso
ligeramente acido favorecen la absorción rápida.
Estomago:
1. Absorción generalmente proporcional a la solubilidad en lípidos
de los fármacos.
2. Compuestos básicos del tipo -N- generalmente no serán
absorbidos si el plan es alto las bases con pKa bajo, por ejemplo
1,5 se absorberán en cierta proporción.
3. Los ácidos débiles pKa 3 o más serán absorbidos.
4. La alcalinización del estómago disminuye la absorción de ácidos
débiles y aumenta la de las bases débiles.
5. La absorción es más completa mientras mayor es el tiempo que
permanece el fármaco en el estomago.
6. La velocidad de vaciamiento, gástrico influye tanto en la
absorción en el estómago como en la que se produce en el
intestino.
7. La magnitud de la absorción a nivel gástrico es difícil de predecir
porque depende de numerosos factores, pero en todo casi en
considerablemente menos que la del intestino delgado.
Intestino delgado:
1. Es el principal tipo de absorción del tubo digestivo
2. El pH aparente de la barrea intestinal baria entre 6 y 7
3. Ácidos débiles con pKa mayor de 3 se absorben
4. Bases débiles con pKa menos de 7 se absorben
5. Los fármacos hidrosolubles relacionados con azucares,
aminoácidos y elementos nutritivos polares se absorberán por
transporte especializado.
6. El aumento de la velocidad del tránsito intestinal, diarrea, por
ejemplo puede disminuir la absorción.
Colon y recto: La absorción de fármacos desde el colon es similar a la
del intestino delgado, en efecto los ácidos y bases débiles se
absorben fácilmente pero los ácidos y bases fuertes lo hacen con
bastante dificultad. En el recto, el pKa de los fármacos juega un papel
determinante, dependiendo de la velocidad de absorción no solo del
grado de ionización sino también de la concentración intraluminal y
del coeficiente de reparto lípidos/agua. En todo casa, es irregular e
incompleta y tiene la ventaja de que el fármaco llega a la circulación
general sin pasar por el hígado.
MÉTODO EXPERIMENTAL:
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas hipodérmicas, cánula para
administración oral, equipo de disección, cubeta de disección,
embudo sin vástago, esparadrapo, piolas.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: Ratones blancos5
Químicos: Éter dietílico para anestesia
Solución de estricnina al 25%
Alcohol etílico
PROCEDIMIENTO:
1. Realizar previa anestesia con éter dietílico a la ligadura de pilono,
suturar y esperar la recuperación completa del animal.
2. Una vez que el ratón está en condicione debe de tomar por vía oral,
introdujo una dosis toxica de estricnina (0,2 ml de la solución al 25 %)
3. Dejar al animal en observación durante 24 horas.
4. A otro animal en las mismas condiciones que el anterior, introducirle
además de la dosis toxica de estricnina una pequeña cantidad de
alcohol etílico (0,3 ml).
5. Observar el comportamiento del animal y ver el desenlace al cabo de
unos minutos.
RATO
N
N°
PROCEDIMIENT
O
FARMACO
S
TIEMPO DE
OBSERVACIO
N
RESULTADO
S
1 Ligadura de
píloro Estricnina 24 horas
2 Ligadura de
píloro
Estricnina
+ EtOH Enseguida
5 Adaptación de Janeth Montalvo Jaramillo (la técnica original sugiere la utilización de ranas para este
experimento sin embargo yo las he sustituido por ratones blancos obteniéndose los mismo resultados).
El animal solo ha recibido la estricnina apenas sufre la más mínima
intoxicación mientras que el que ha recibido además alcohol etílico
presenta inmediatamente convulsiones, debido a que este favorece la
liposolubilidad de la estricnina y acelera así el proceso de absorción
gástrica.
CUESTIONARIO:
1. En una tabla coloque las sustancias que se absorben en las distintas
porciones del tubo digestivo (mucosa bucal, estomago; intestino
delgado, colon, y recto), de acuerdo a los distintos valores de pH que
presenta esas zonas.
BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976
Bevan, J., et. al., Fundamentos de Farmacología, Introducción a los Principios de Acción de Fármacos, Segunda Edición, Harla Harper & Row Latinoamericana, México, 1982.
De la Vega, E., Manual de Farmacología Practica, Ecuador, 1985.
Fernández, M., Manual de Principios y Técnicas en Farmacología Experimental, Primera edición, Loja, 1982.
Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica, Editorial Medica Panamericana, 1986.
Litter, M., Compendio de Farmacología, Tercera Edición, Editorial Ateneo, Argentina, 1984.
Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986.
San Martín Casamada, E., Tratado de Farmacodinamia, Editorial Científico – Medica, Buenos Aires, Argentina, 1974.
Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
TRANSPORTE DE FARMACOS
OBJETIVOS:
Cuando los fármacos han llegado a la sangre se distribuyen en el
plasma en dos formas: unidos a las proteínas plasmáticas y libres. La
fracción que se une a las proteínas lo lace por fuerzas iónicas, de Van
der Waals y de hidrógeno, en una proporción que es específica para
cada fármaco. La capacidad fijadora de las proteínas no es ilimitada,
si se ha suturado, la administración de pequeñas cantidades
adicionales puede producir efectos tóxicos.
Mediante la Experiencia de Chaplin6, se demostrara como el
Tiopental sódico (Pentotal sódico®),el Ácido acetil salicílico
(Aspirina®) y la Fenilbutazona (Butazolidina®) compiten entre sí por
la fijación proteica.
MARCO TEÓRICO:
La unión de los fármacos con las proteínas plasmáticas produce algunas
consecuencias:
1. Como únicamente la fracción libre de los fármacos es capaz de
atravesar las membranas y ejercer por tanto efectos
farmacodinámicos, los complejos farmacoproteína disminuyen las
concentraciones plasmáticas terapéuticamente eficaces.
2. Mientras mayor es la afinidad de ligadura, mayor es el tiempo de
acción de un fármaco: así: la suramina (utilizada en el tratamiento de
la tripanosomiasis) puede actuar hasta por 3 meses, debido a que se
une fuertemente a las albúminas y se va desprendiendo de ella muy
lentamente.
3. Mientras el fármaco no se libera de las albúminas no puede ser
metabolizado ni eliminado por el riñón.
4. Algunos fármacos que son insolubles pueden circular en el plasma
gracias a su fijación en las proteínas, ejemplo: bishidroxicumarina.
5. Varios fármacos pueden competir entre ellos por su fijación proteica
o competir con sustancias fisiológicas, en el primer caso tenemos un 6La adaptación y búsqueda de dosis efectivas para esta práctica han sido realizadas por la autora de este manual
ejemplo muy demostrativo en las experiencias realizadas por
Chaplin: si se administra tiopental a una rata, esta pierde, por efecto
de la droga, el reflejo de enderezamiento, queda inmóvil sobre la
mesa, si se administra aspirina o Fenilbutazona en momento que le
animal empieza a enderezarse se observa que nuevamente cae
dormido, esto es, el tiopental que se fijó a las proteínas plasmáticas
es desplazado por el ácido acetil salicílico, queda libre y ejerce su
acción depresora. Un ejemplo del segundo casose refiere a la fijación
de bilirrubina por las proteínas del plasma, si una droga con alta
afinidad llega a la sangre la desplaza, tal ocurre con el sulfisoxazol que
por este mecanismo produjo graves accidentes administrando a
recién nacidos.
MÉTODO EXPERIMENTAL
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas hipodérmicas, marcadores.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: Ratones blancos ambos sexos, peso 25 ± 2g.
Químicos: Solución de Tiopental sódico, concentración 5 mg/ml
Solución de ácido acetil salicílico, concentración 2 mg/ml
Solución de Oxifenilbutasona, concentración 2 mg/ml
PROCEDIMIENTO:
1. Cada grupo de estudiantes trabajará con 2 ratones blancos.
RATON N°1:
Pesarlo, administrar por vía intraperitoneal, en dosis de 40 mg/kg. De
peso, una solución de Tiopental sódico.
Observar el efecto y anotar el tiempo de duración.
En el momento en que el animal empieza a enderezarse, administrar
por vía Intraperitoneal, una solución de Ácido Acetil Salicílico, en una
dosis de 15 mg/kg de peso.
Observar el efecto y anotar el tiempo de duración del mismo.
RESULTADOS:
RATON TIEMPO DE DURACION DEL EFECTO (min)
1
2
COMENTARIO DE LOS RESULTADOS:
Por efecto del tiopental en un ratón, este pierde, el reflejo de
enderezamiento, queda inmóvil sobre la mesa, si le administra Aspirina o
Fenilbutazona en el momento que el animal empieza a enderezarse, se
observa que nuevamente cae dormido, esto es, el tiopental que se fijó a las
proteínas plasmáticas es desplazado por el ácido acetil salicílico, queda libre
y ejerce su acción depresora.
CUESTIONARIO:
1. Esquematice la unión de proteínas plasmáticas y fármacos utilizados
en la práctica.
BIBLIOGRAFIA
Samaniego, E., Fundamentos de Farmacología, Editorial
Universitaria, Quito, 1987.
Goodman y Gilman, Las Bases Farmacológicas de la Terapéutica,
Editorial Medica Panamericana, 1986.
Díaz Alejandro, et. al., Manual de Farmacología, Tomos I Y II ,
Universidad de Concepción , Facultad de Ciencias Biológicas y
Recursos Naturales, Chile, 1986.
ACCIÓN FARMACOLÓGICA-FENÓMENO DE STRAUB
OBJETIVOS:
Los fármacos pueden ejercer su acción sea tomando contacto con la
célula, penetrándola o desde fuera de ella, según esto, hay varios
niveles de acción farmacológica.
La acción principal de los opiáceos, a nivel de la fibra lisa, es un
aumento del tono llegando a ser incluso al espasmo. sobre el esfínter
anal del ratón este aumento del tono llega a ser tan intenso que
puede provocar la erección de la cola. Este hecho, típico de los
opiáceos, se conoce con el nombre de Fenómeno de Straub.
MARCO TEÓRICO:
Niveles de acción farmacológica: los fármacos pueden ejercer su acción sea
tomando contacto con la célula, penetrándola o desde fuera de ella, según
esto, hay varios niveles de acción farmacológica.
1. Nivel extracelular: cuando el fármaco produce cambios físicos o
fisicoquímicos en el líquido intersticial que modifican los
intercambios de la célula, así, el manitol alcanza altas
concentraciones en el túbulo renal aumentando la presión osmótica
en la luz del túbulo, ellos impide que la célula tubular pueda
reabsorber agua desde la luz; el agua escapa aumentando el
volumen.
2. Nivel de membrana: la mayoría de fármacos actúan a este nivel, sitio
celular en el cual se ubican la mayor parte de receptores
farmacológicos, la unión del fármaco con el receptor casi siempre
altera las propiedades de permeabilidad de la membrana y por tanto,
el potencial eléctrico de reposo de la célula, permitiendo la entrada
o salida de iones; este desequilibrio iónico intracelular es el
responsable de los efectos que produce el fármaco en la célula.
3. Nivel intracelular: algunos fármacos deben ingresar al citoplasma y
aun al núcleo para producir sus efectos que estarán en relación con
el cambio bioquímico que a ese nivel determinen: inhibir la síntesis
proteica, alterar la cadena de reacciones oxidativa de la respiración
celular, destruir la membrana de los organoides celulares, interferir
con la síntesis de ADN y ARN, etc. Varias sustancias como los
hipnóticos, analgésicos, hormonas, antibióticos, citotóxicos, etc.
Actúan de esta manera.
La reacción ante los opiáceos varía según la especie animal. Así existen
reacciones características como la observada en el ratón (Fenómeno de
Straub); en el gato (Agresividad Morfínica), debido a una acción estimulante
central, y en el perro se manifiesta como un vomitivo de acción segura.
MATERIALES:
Biológicos: Ratones blancos
Jeringas y agujas
Reactivos: Clorhidrato de morfina
METODO:
Se inyecta a los ratones por vía intraperitoneal, una solución de clorhidrato
de morfina y se observa a los animales.
MESA DOSIS DE Clorhidrato de Morfina
1 10 mg/kg peso
2 20 mg/kg peso
3 30 mg/kg peso
4 40 mg/kg peso
RESULTADOS: al cabo de unos 15 minutos se puede observar la erección de
la cola que puede llegar a arquearse sobre el lomo del animal. El grado
mayor o menor de inclinación estará en función de la dosis.
MESA DOSIS GRADOS DE INCLINACION DE LA COLA
1 10 mg/kg peso
2 20 mg/kg peso
3 30 mg/kg peso
4 40 mg/kg peso
CUESTIONARIO:
1. Clasificación de los medicamentos opiáceos
BIBLIOGRAFIA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología,
Editorial Espaxs, España 1976.
PERFIL DE ACTIVIDAD DE FÁRMACOS
(SCREENING FARMACOLÓGICO)
OBJETIVOS:
Mediante la utilización de una batería de pruebas o técnicas fáciles y
baratas de realizar se pueden observar varios tipos de actividades de
fármacos o extractos vegetales con una gran rapidez y una cantidad
mínima de producto las cuales podrán completarse con otras
técnicas más selectivas y complejas que confirmen y amplíen los
resultados obtenidos.
Determinar las acciones de un extracto vegetal (acuoso y
alcohólico),un fármaco estimulante y u depresor de SNC, mediante
las pruebas que constituye el screening farmacológico.
MARCO TEORICO:
La investigación de las múltiples actividades farmacológicas en extractos
vegetales o animales, pueden durar muchos años, por lo que se requiere la
utilización de pruebas sencillas y fáciles para que den una primera
orientación de la acción farmacológica que pudieran tener los extractos
ensayados. Estas pruebas son: test de la catalepsia, reflejo de postura, test
de tracción, test de Haffner, fenómeno de Straub, piloerección, ptosis
palpebral, reflejo pineal, reflejo corneal, reflejo de flexión ipsolateral,
lagrimeo, midriasis, actividad motora, conducta, estado de alerta,
excitación del SNC, postura, incoordinación motora, tono muscular, entre
otras, las que debidamente interpretados mediante el test de Irwin por
ejemplo de podría catalogar al producto ensayado con acciones sobre
Sistema Nervioso Central, Sistema Nervioso Vegetativo, etc. Lugo pueden
completarse esos datos preliminares con ensayos y pruebas más específicos
para determinar la acción con mayor seguridad.
METODO EXPERIMENTAL
EQUIPOS Y MATERIALES:
Cerda rígida, alambre, papel filtro, material quirúrgico, cronometro
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos
Químicos: Clorpromazina, clorhidrato, concentración: 0,5 mg/ml
Fenilpropanolamina, clorhidrato, concentración: 0,25 mg/ml
SoluciónFisiológica (NaCl 0,9%)
Extractos acuoso y alcohólico de planta
PROCEDIMIENTO:
Se utilizara un animal para ensayar cada uno de los fármacos y los
extractos vegetales.
Se miden en todos ellos los parámetros indicados en el cuadro a
tiempo 0, medida que sirve de control, luego a los 5, 10, 15, 30 y 60
minutos.
Ratón 1: suero fisiológico, vía IP; 0,1 ml
Ratón 2: Clorpromazina; vía IP; Dosis 10 mg/kg
Ratón 3: Fenilpropanolamina; vía IP; Dosis 5 mg/kg
Ratón 4: extracto acuoso de la planta
Ratón 5:extracto alcohólico de la planta
Controlar todos los parámetros a los distintos tiempos indicados en
el cuadro, valorándolos de 0 a 4 según la intensidad del efecto
observado y comparándolo con la medida realizada a tiempo cero.
DESCRIPCION DE LOS DIFERENTES TIPOS DE TEST:
TEST DE CATALEPSIA: Se colocan las extremidades anteriores del ratón
sobre un lápiz y se eleva unos 2 a 3 cm. El ratón normal, no cataléptico,
retira las dos patas del lápiz recuperando la posición.
REFLEJO DE POSTURA: un ratón normal colocado de espaldas se restablece
rápidamente sobre las cuatro patas.
TEST DE TRACCION: se coloca un alambre fino a unos 30cm del suelo, se
suspende el ratón por las patas anteriores sobre el alambre. Si el ratón no
es capaz de colocar al menos una de las patas posteriores sobre el alambre,
en menos de 5 segundos, se considera que ha perdido parte del reflejo de
restablecimiento, si el ratón no es capaz de subir ninguna de las patas
posteriores sobre el alambre, o bien cae en este intervalo de tiempo,
entonces ha perdido totalmente el reflejo de restablecimiento. El ratón
normal subirá encima del alambre en unos 5 segundos.
TEST DE HAFFNER: se pinza la base de la cola de cada ratón. El ratón normal
se gira y chilla. La pérdida de este reflejo se produce en los ratones bajo la
influencia de los analgésicos.
FENOMENO DE STRAUB: (Erección De la cola). El ratón levanta la cola en
forma de S.
PILOERECCION: enderezamiento del pelo
PTOSIS PALPEBRAL: caída de los parpados
REFLEJO PINEAL: se coloca una cerda rígida detrás de la oreja del ratón o
dentro de la misma. Un ratón normal presenta el reflejo pineal, sacudiendo
vigorosamente la cabeza.
REFLEJO CORNEAL: mediante una cerda, se toca levemente la córnea del
ratón. El ratón normal parpadea n la primera aplicación
REFLEJO DE FLEXION IPSOLATERAL: Existen dos variantes de este reflejo: el
reflejo de flexión ipsolateral anterior y el reflejo de flexión ipsolateral
posterior.
Se pinza por los dedos una de las patas anteriores o posteriores del ratón
durante unos segundos, un animal normal flexional rápidamente la pata.
LAGRIMEO: se observa con un trozo de papel filtro, que se humedecerá al
contacto o no al contacto con la córnea.
MIDRIASIS: Dilatación anormal y permanente de la pupila
ACTIVIDAD MOTORA: observar si los movimientos espontáneos voluntarios
de los ratones están aumentados o disminuidos, reactividad, respuesta al
dolor.
CONDUCTA: observar el comportamiento del ratón, si es agresivo pasivo o
de temor. Para ellos se estimula al ratón mediante unas pinzas
comprobando la reacción del mismo, auto acicalamiento (arreglo del
pelaje), vocalización (emisión de gritos), irritabilidad.
ESTADO DE ALERTA: observar si se pone alerta al introducir Ud. La mano o
un objeto dentro dela jaula. Ubicación visual (cuando se lo pone en
contacto con un objeto), o si presenta pasividad.
EXCITACIÓN DEL SNC: respuesta al espanto, Sacudida dela cola, temblores,
contracciones, convulsiones.
POSTURA: postura corporal, posición de las extremidades
INCOORDINACION MOTORA: Marcha vacilante, marcha anormal.
TONO MUSCULAR: extremidades (si esta sobre sus 4 extremidades), fuerza
prensil (si se agarra fuertemente de la jaula), Encorvamiento corporal, Tono
corporal, tono abdominal.
CUADRO DE RESULTADOS:
Especie: Sexo: Peso (g): Vía: Fármaco:
PARAMETROS NORMAL TIEMPO (min)
5 10 15 30 60 ESTADO DE ALERTA: Alerta Ubicación Visual Pasividad
4 4 0
ESTADO DE ANIMO: Autoacicalamiento Vocalización Intranquilidad Irritabilidad Temor
4 0 0 0 0
ACTIVIDAD MOTORA: Reactividad
4
Actividad Espontanea Respuesta al dolor
4 4
EXCITACIÓN DEL SNC: Respuesta al espanto Sacudida de la cola Temblores Contracciones Convulsiones
0 0 0 0 0
POSTURA: Postura corporal Posición Extremidades
4 4
INCOORDINACION MOTORA: Marcha vacilante Marcha anormal
0 0
TONO MUSCULAR: Extremidades Fuerza prensil Encorvamiento corporal Tono corporal Tono abdominal Ratón normal
4 4 0 4 4 4
TEST DE CATALEPSIA: Ratón cataléptico Ratón normal
4 0
REFLEJO DE POSTURA: Ratón normal
4
TEST DE TRACCIÓN: Ratón normal
4
TEST DE HAFFNER: Ratón normal
4
FENÓMENO DE STRAUB 0 PILOERECCIÓN 0
PTOSIS PALPEBRAL 0 REFLEJO PINEAL: Ratón normal
4
REFLEJO CORNEAL: Ratón normal
4
REFLEJO DE FLEXION IPSOLATERAL: Ratón normal
4
LAGRIMEO 0 MIDRIASIS 0
CUESTIONARIO:
1. ¿Sabría especificar a la vista de los resultados de que tipo es el
extracto de planta analizado?
BIBLIOGRAFIA:
Cuaderno de Prácticas de Farmacodinamia, Universidad de
Salamanca, Facultad de Farmacia, Departamento de Fisiología y
Farmacología, Farmacognosia y Farmacodinamia, España, 1994.
Prácticas de Farmacología, Universidad Nacional de Colombia,
Colombia, 1994.
Prácticas de Farmacognosia y Farmacodinamia, Universidad de
Granada, Facultad de Farmacia, Departamento de Farmacología,
España, 1994.
EFECTOS SECUNDARIOS DE LOS MEDICAMENTOS
OBJETIVOS:
Después de administrar un fármaco, es posible observar 2 tipos de
acciones: el EFECTO DESEADO, esto es la acción clínicamente
conveniente y beneficiosa que busco el médico, y los EFECTOS
SECUNDARIOS INDESEADOS (que a veces aparecen con los deseados)
que son fenómenos adicionales no buscados originalmente. Estas
últimas alteraciones pueden ser dañinas o inocuas y si son lesivas
reciben el nombre de reacciones adversas o perjudiciales a los
fármacos.
Demostrar experimentalmente como ciertos fármacos a más delos
efectos farmacológicos esperados, producen efectos secundarios no
deseados.
MARCO TEÓRICO:
El primer concepto que deben formarse al estudiar Farmacología es que
todos los fármacos. Absolutamente todos son potencialmente tóxicos y
varios de ellos no tienen ensayos clínicos suficientes que aseguren y
garanticen su utilización.
En circunstancias óptimas no surgirán efectos adversos si se administra el
fármaco adecuado, al paciente indicado en la dosis conveniente (forma
farmacéutica, cantidad e intervalo) y en la vía más apropiada , en el
momento exacto y para la enfermedad perfectamente diagnosticada , lo
que constituye la filosofía del USO RACIONAL DE LOS MEDICAMENTOS. Sin
embargo esta situación rara vez se observa en la práctica, porque ningún
medicamento es tan específico que origine solo los efectos deseados y
buscados en todos los individuos.
Entonces como concepto de reacción indeseable diremos que es aquella
que produce una droga en forma independiente del efecto terapéutico que
se busca y que generalmente no es la que el medico espera.
Las reacciones indeseables se clasifican en los siguientes grupos:
I. REACCIONES DEL TIPO TOXICO:
a) Intoxicaciones: se producen cuando hay sobredosificación de los
fármacos. Es aguda si ocurre en pocas horas por dosis toxicas; por
ejemplo: la ingestión de grandes cantidades de alcohol.
Intoxicación crónica: cuando es consecuencia de dosis pequeñas
administradas a largo plazo en el mismo caso anterior la intoxicación
alcohólica propia de los bebedores consuetudinarios que lleva a la
necrosis hepática.
b) Reacciones idiosincrásicas: se trata de reacciones atípicas
producidas por los fármacos, distintos a los habituales, no tiene
relación con la dosis o sensibilización previa. Este aumento de la
capacidad reactiva puede ser adquirida si la reacción se produce a
consecuencias de trastornos funcionales u orgánicos a nivel de
órganos que metabolizan las drogas; la insuficiencia hepática llevara
a reacciones indeseables aun con dosis terapéuticas de muchas
sustancias y genéticas cuando el paciente es portador desde el
nacimiento de algún trastorno estructural en uno o más de sus
componentes bioquímicos así: la polineuritis que ocasiona la
isoniacida en algunos sujetos es causada por un defitic congénito de
asetil transferasa.
II. EFECTOS SECUNDARIOS: son las reacciones adversas no deseadas por
los médicos que ocurren cuando se administran fármaco a una dosis
terapéutica mínimas un mismo efecto colateral puede ser productivo
por varios grupos farmacodinámicos, así las discrasias sanguíneas
ocurren con los arsenicales, mostazas nitrogenadas, cloranfenicol, etc.
Otras veces, un mismo fármaco puede producir varios efectos
secundarios, tales es el caso de los cortisolicos que producen
osteoporosis, diabetes, esteroide, irsutismo, alteración de la libido,etc.
III. REACCIONES POR ACOSTUMBRAMIENTO:
a) Acostumbramiento: en la administración repetida de un fármaco sin
que exista necesidad física o psíquica para ello.
b) Habito: el acostumbramiento llega a establecer dependencia
psíquica por el fármaco con escaza necesidad de aumentar la dosis
en forma progresiva, si deja de administrarse el fármaco el sujeto
presenta ansiedad, desasosiego, irritabilidad. Este tipo de reacción
puede observarse con el tabaco y el café.
c) Dependencia o adicción: el acostumbramiento primero, el hábito
luego lleva a un estado crónico de intoxicación en el cual se crea
dependencia tanto física como psíquica hacia el fármaco con las
siguientes características:
1. Necesidad incontenible (estado compulsivo) para administrarse el
fármaco.
2. Tendencia a aumentar la dosis en forma progresiva (de 10 ml de
morfina puede llevarse a 2 g diarios) es decir aparición de tolerancia
crónica.
3. Aparición de signos y síntomas que constituyen el llamado síndrome
de Abstinencia cuando deja de administrársela droga.
4. Efectos nocivos tanto para el sujeto como para la sociedad, para el
por el progresivo deterioro psicofísico que va experimentando y para
la sociedad porque durante los estado compulsivos puede cometer
atropellos contra los demás. Producen dependencia la morfina,
cocaína, barbitúricos.
IV. REACCIONES IRMUNOLOGICAS: siendo la gran mayoría de fármacos de
peso molecular bajo, para provocar trastornos de hipersensibilidad,
requieren actuar como haptenos uniéndose a macromoléculas endógenas,
el conjunto trabaja en calidad de antígeno, en algunos casos inclusive ni
siquiera es el fármaco el que se une a las macromoléculas sino su
metabolismo o alguna impureza.
V. REACCIONES FOTOINDICIDAS:
a) Fototóxicas: la droga actual como un fotocalatizador que acelera y
potencia los efectos nocivos de la luz solar, o bien, la luz convierte al
fármaco en un producto toxico
b) Fotoalérgicas: a consecuencia de la luz a nivel de la piel, algunos
fármacos pueden actuar como antígenos.
VI. REACCIONES TERATOGENICAS Y EMBRIOTOXICAS:
a) Teratogenicidad: el fármaco o su metabolismo pueden, atravesando
la placenta, llegar al embrión durante el primer trimestre del
embarazo para alterar la evolución embriológica del nuevo ser y
producir mal formaciones congénitas.
b) Toxicidad embriotrópica: algunos fármacos que no obstante ser
atóxicos para la madre pueden ser tóxicos para el feto.
c) Toxicidad neonatal: algunos fármacos administrados durante el
trabajo de parto pueden ocasionar trastornos en el recién nacido.
d) Toxicidad selectica sobre el recién nacido: algunos fármacos pueden
alcanzar en el recién nacido mayor concentración y por lo tanto
puede ser tóxicos.
METODO EXPERIMENTAL
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, jeringuillas de insulina, balanza, microscopio, lupa, placas de
soporte.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos
Químicos:Solución Naproxeno sódico, concentración 7 mg/ml,
Solución Indometacina, concentración 5 mg/ml,
Solución Acetil salicilato de lisina, concentracion 20 mg/ml,
Suero fisiológico
PROCEDIMIENTO:
Mantener a los animales en ayuno por 12 horas con agua a voluntad
antes de la practicas
Seis horas antes de la practicas, pesar a los 4 ratones e inyectar
subcutáneamente las siguientes soluciones:
Ratón Nº 1:Solución Naproxeno sódico, en dosis de 50 mg/kg de
peso.
Ratón Nº 2:Solución Indometacina, en dosis de 10 mg/kg de peso.
Ratón Nº 3:Solución Acetil salicilato de lisina, en dosis de 5 mg/kg de
peso
Ratón Nº 4:Suero fisiológico, 5 u.i.
Seis horas después de la administración de los fármacos, se sacrifican
a los animales con anestesia etérea profunda.
Se remueven los estómagos y se abren a lo largo de la curvatura
menor.
Se lava la mucosa con agua destilada y se fijan en placas de soporte
para la inspección de las lesiones gástricas (con ayuda de una lupa o
de microscopio).
Se valoran los resultados comparándolos con el estómago de ratón
que fue administrado suero fisiológico.
CUESTIONARIO:
1. Dibuje las ulceraciones en los estómagos de los 4 ratones.
2. Escriba los conceptos según la Organización Mundial de la Salud de:
reacción adversa, efecto secundario, farmacovigilancia,
teratogenicidad, acostumbramiento, dependencia y adicción.
BIBLIOGRAFIA:
CURSO DE VALIDACION DE PLANTAS MEDICINALES CON ACTIVIDAD
GASTROINTESTINAL, Sao Paulo, Brasil, 1994.
Samaniego, E., Fundamentos de la Farmacología, Editorial
Universitaria, Quito, 1987.
INTERACCION ENTRE FARMACOS (I PARTE)
OBJETIVOS:
Cuando se administran dos o más fármacos que actúan sobre un
sistema biológico, el efecto integral puede resultar en el aumento o
disminución del efecto de uno de ellos, según que actúen en el mismo
sentido o tengan efectos contrarios. Si al consecuencia de la
interacción resulta en un aumento del efecto de alguno de ellos se
denomina SINERGISMO pudiendo el efecto real de los fármacos
asociados, ser igual o mayor que el efecto calculado o virtual de la
suma de las respuestas obtenidas al administrar separadamente los
fármacos; estas formas de sinergismo se conocen como DE SUMA O
ADICION cuando el efecto es igual a la suma y POTENCIACION cuando
el efecto es mayor que la suma.
Observar el SINERGISMO de suma que se produce entre el Tiopental
sódico y el Pentobarbital sódico al actuar sobre el ratón blanco.
MARCO TEORICO:
Sinergismo: Es el fenómeno por el cual el efecto farmacológico de un
fármaco se ve aumentado por la acción de otro que se administra
concomitantemente con aquel. El sinergismo suele ser de suma o de
potenciación.
Sinergismo de suma: Cuando la respuesta farmacológica corresponde a la
suma de los efectos individuales de las drogas que se han combinado. Se
produce este sinergismo cuando los dos fármacos se unen a los mismos
receptores. Si el fármaco A produce un efecto de 10 y el fármaco B de 20,
los dos administrados conjuntamente deben provocar un efecto de 30 para
que el sinergismo se llame de suma.
Sinergismo de potenciación: Cuando la respuesta farmacológica es mayor
que la suma de los dos efectos individuales de los fármacos que se han
combinado. Se produce este sinergismo cuando los dos fármacos se unen a
receptores diferentes. En el caso del ejemplo anterior el efecto
farmacológico debe ser de 40 o más.
Tanto el antagonismo como el sinergismo se producen cuando el medico
administra dos o más fármacos simultáneamente, estas interacciones
medicamentosas son conducta ordinaria en el momento actual,
constituyendo por desgracia un abuso desleal de la práctica médica.
Algunos inconvenientes de las interacciones medicamentosas son: mayor
frecuencia de reacción indeseables y menor probabilidad de identificar al
fármaco reposarle, encarecimiento innecesario del tratamiento, mayor
posibilidad de enmascarar un cuadro clínico y dificultar el diagnostico,
afianzamiento de la terapéutica sintomática y no de la etiológica, etc.
METODO EXPERIMENTAL
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas de insulina
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos
Químicos: Solución de Tiopental sódico, concentración 5 mg/ml
Solución de Pentobarbital sódico, concentración 5 mg/ml
PROCEDIMIENTO:
1. Se trabajara con 3 ratones blancos por grupo.
2. Pesara a cada uno de los animales.
3. Administrar los fármacos de la siguiente manera:
RATON N°1: Administrar por vía IP, una solución de Tiopental sódico, en
dosis de 40 ml/kg de peso. Observar y anotar el tiempo de duración del
efecto.
RATON N°2: Administrar por vía IP, una solución de Pentobarbital sódico,
en dosis de 40 ml/kg de peso. Observar y anotar el tiempo de duración del
efecto.
RATON N°3: Administrar por vía IP, tanto la solución de Tiopental sódico
como la de Pentobarbital sódico, en dosis de 40 ml/kg de peso cada una.
Observar y anotar el tiempo de duración del efecto.
CUADRO DE RESULTADOS:
RATO
N
N°
PES
O
(g)
FARMACO
ADMINISTRAD
O
DOSIS
(mg/kg
)
VOL
.
(u.i)
EFECTOS
OBSERVADO
S
TIEMP
O
(min)
1 Tiopental 40
2 Pentobarbital 40
3 Tiopental +
Pentobarbital 40 + 40
CUESTIONARIO:
1. Menciones 10 ejemplo de interacciones medicamentosas
beneficiosas.
BIBLIOGRAFÍA:
Barastegui, Almagro, C, Esquemas y prácticas de Farmacología, editorial Espaxs, España, 1976
Goodman y Gilman, Las bases Farmacológicas de la Terapéutica, Editorial Medica Panamericana, 1986.
Díaz Alejandro, et. Al, Manual de Farmacología, Tomos I y II, Universidad de Concepción, Facultad de Ciencias Biológicas Y recursos Naturales, Chile, 1986.
Practicas de Farmacología, Universidad Autónoma de México, México, 1980.
Practicas de Farmacognosia y Farmacodinamia, Universidad de Granada, Facultad de Farmacia, Departamento de Farmacología, España, 1994.
Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
INTERACCION ENTRE FARMACOS (II PARTE)
OBETIVOS:
Cuando se administran simultáneamente dos fármacos a un
organismo la respuesta del antagonista puede disminuir o aumentar.
En el primer caso, hablamos de antagonismo farmacológico y el
fenómeno se registra con los mismos caracteres que la inhibición
enzimática, sigue la cinética de acción de las masas e igualmente se
clasifica en competitivo y no competitivo.
Demostrar experimentalmente el antagonismo de tipo competitivo
entre el Clorhidrato de Pilocarpina y el Sulfato de Atropina al actuar
sobre el ratón blanco.
MARCO TEORICO:
El antagonismo competitivo ocurre cuando el antagonista se une en forma
reversible con el mismo receptor del agonista y puede ser desplazado de
ese sitio al aumentar la concentración del agonista. La Acetilcolina contrae
el intestino delgado y la Atropina se opone a este efecto. El antagonismo
no competitivo ocurre cuando el antagonista “inactiva” al receptor de
manera que no se forma un complejo receptor-droga, la actividad intrínseca
del agonista se reduce sin cambio en la afinidad. La unión puede ser
reversible o irreversible.
METODO EXPERIMENTAL
EQUIPOS Y MATERIALES:
Jaulas, balanzas, jeringuillas de insulina, plano inclinado, papel filtro
cuadriculado (4x4), sujetadores.
SUSTANCIAS Y REACTIVOS:
Biológicos: ratones blancos
Químicos: Clorhidrato de Pilocarpina, concentración 0,5 mg/ml
Sulfato de Atropina, concentración 1 mg/ml
PROCEDIMIENTO:
1. Se trabajara con 3 ratones blancos
2. Pesar a cada uno de los animales
3. Administrar los fármacos de la siguiente manera:
RATON N°1: Administrar por vía IP, una solución de Clorhidrato de
Pilocarpina, en dosis de 5 mg/kg de peso. Observar el efecto, para ello se
dispone al animal en posición ventral sobre un plano inclinado recubierto
con un papel filtro cuadriculado, comenzando en la parte inferior. Cada 5
min se desplaza el ratón una cuadricula, marcando el perímetro de
salivación. A los 25 min se obtiene 5 muestras de saliva del ratón. El área de
salivación se pesa o se mide su superficie. Se comparara cada área obtenida
a los distintos tiempos con los de los ratones 2 y 3.
RATON N°2: Administrar por vía IP, una solución de Sulfato de Atropina, en
dosis de 1 mg/kg de peso. Observar el efecto, para ello se dispone al animal
en posición ventral sobre un plano inclinado recubierto con un papel filtro
cuadriculado, comenzando en la parte inferior. Cada 5 min se desplaza el
ratón una cuadricula, marcando el perímetro de salivación. A los 25 min se
obtiene 5 muestras de saliva del ratón. El área de salivación se pesa o se
mide su superficie. Se comparara cada área obtenida a los distintos tiempos
con los de los ratones 1 y 3.
RATON N°3: Administrar por vía IP, una solución de Clorhidrato de
Pilocarpina, en dosis de 5 mg/kg de peso. Observar el efecto durante 10min.
Al cabo de ese tiempo, administra por vía IP una solución de Sulfato de
Atropina, en dosis de 3 mg/kg de peso. Observar el efecto, para ello se
dispone al animal en posición ventral sobre un plano inclinado recubierto
con un papel filtro cuadriculado, comenzando en la parte inferior. Cada 5
min se desplaza el ratón una cuadricula, marcando el perímetro de
salivación. A los 25 min se obtiene 5 muestras de saliva del ratón. El área de
salivación se pesa o se mide su superficie. Se comparara cada área obtenida
a los distintos tiempos con los de los ratones 1 y 2.
CUADRO DE RESULTADOS:
RATON TAMAÑO DE LAS MUETRAS DE PAPEL FILTRO (mm)
N° 5 min 10 min 15 min 20 min 25 min
1
2
3
COMENTARIO:
Cuando se administra en un mismo instante, dos o más fármacos sobre un
sistema biológico, pueden ocurrir cambios en la intensidad de los efectos
de cada uno de ellos y aun anularse por completo, se registran los
fenómenos farmacológicos designados por agonismo y antagonismo. El
antagonismo (acción anticolinérgica) se valorara en el ratón por la
inhibición, más o menos completa de la hipersalivación provocada por el
clorhidrato de Pilocarpina. Pueden observarse otras acciones colinérgicas
como son aumento de la secreción de las glándulas lacrimales y
conjuntivales, acción diaforética, diarrea, etc. Se utilizara un plano inclinado
para visualizar en mejor forma los resultados.
CUESTIONARIO:
1. Mencione 5 ejemplos de fármacos que realicen antagonismo de tipo
competitivo y 5 ejemplos de fármacos que realicen el antagonismo
de tipo no competitivo.
BIBLIOGRAFIA:
Practicas de Farmacología, Universidad Autónoma de México, México, 1980.
Practicas de Farmacognosia y Farmacodinamia, Universidad de Granada, Facultad de Farmacia, Departamento de Farmacología, España, 1994.
Samaniego, E, Fundamentos de Farmacología, Editorial Universitaria, Quito, 1987.
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