electroforesis capilar

Electroforesis capilar

•Alta resolución (105 a 106 platos teóricos)-HPCE •Requiere pequeño volumen de muestra (1-10 nl) •Rápida separación (1 a 45 min.) •Aplicable a todo tipo de sustancias•Automatización •Cuantificación (lineal) •Reproducibilidad•Puede acoplarse a espectrometría de masa•Datos fundamentales

Ventajas de la electroforesis capilar

Esquema de equipo de CE

•Proteínas •Péptidos •Amino ácidos •Ácidos nucleicos•Iones inorgánicos•Bases orgánicas•Ácidos orgánicos

Tipos de moléculas que pueden ser separadas por CE

•Se utilizan altos voltajes 10-30kV.(>500V/cm; 10-20 mA) •Moléculas positivas, negativas o neutras puede separarse. •La separación se realiza en un tubo capilar de sílica fundida cubierta con poliamida para darle flexibilidad. • El tubo capilar tiene 30-100cm. De longitud y 25-100de diámetro interno.•Los grupos hidroxilos de la sílica se disocian dejando el tubo con una carga negativa.

Condiciones de CE

Tubo capilar de sílica con grupos OH expuestos

Flujo electroendosmótico

Migración

Movilidad en CE= v/E = Q/ 6r

Modalidad Criterio de separación Sustancias

EC de zona

(CZE)

Densidad de carga Moléculas pequeñas, péptidos, proteínas, DNA pequeño.

Electroenfoque pl Péptidos, proteínas.

Cromatografía micelar electrocinética capilar (MECC)

Densidad de carga y coeficiente de reparto en las micelas, según la hidrofobicidad

Moléculas pequeñas, péptidos, DNA.

EC en gel

Desnaturalizante

No desnaturalizante

Masa molecular

Tamaño y densidad de carga.

Péptidos, proteínas, DNA

Surfactantes en MECC

Inyección de la muestra