deteccion de acs. clinicamente significativos

UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDESFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA

INMUNOHEMATOLOGIA Y BANCO DE SANGRE(DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

CLINICAMENTE SIGNIFICATIVOS)

2012- ILic. TM. JUAN CORTEZ ALEJANDRO

Transfundir ….. o no transfundir

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Área cautivante de inmuno hematología 0.2 a 2% (38%) del tipo de Población Acs: inmunizacion antigenos extraños

embarazos, transfusiones o inyección Detectado por prueba que use suero Necesario identificación : significado

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Base : AGLUTINACION 1ra Técnica: suero + hematíes sol isot. Incubación de la mezcla a 37ºC Resuspensión de hematíe con plasma Utilización sangre citratada en portas Resuspensión de hematíes en albúmina

Identificación Acs irregulares

Empleo de Células de Genética conocida Cels Pantalla: Estándar, Caliente, otras Cels Panel: A, B y C Uso de Reactivos : Antiglobulina Uso de Potenciadores : Albúmina Bob. 22%

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Polivinilpirrolidona (PVP), Dextrano Prueba de Antiglobulina ( 1942 ) Uso de Enzimas, Tripsina ( 1947 ) Papaina ( 1950 ), Ficina ( 1957 ) Solución L I S S ( 1960 )

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Donantes sangre Candidatos receptor Politransfundidos Evaluación Prenatal Neonatos. EHRN

DETECCION E IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Investigación de RHT

Investigacion AHAI Investigacion de PCM

incompatible Discrepancias ABO

DETECCION DE ANTICUERPOS

Cel. rojas detentoras Ags mas importante Mayor Fza antigénica Estructura Ag. varia

considerablemente 99% Ac sign Clínica

Se realiza variedad condiciones

centrifugación inmed Incubacion Tº Amb. Con/sin Rx estimulo Incubacion a 37ºC Fase Antiglobulina

REACTIVOS UTILIZADOS PARA LA INVESTIGACION DE ANTICUERPOS

Hematíes Genética Conocida

Células Pantalla Células Panel Células dirigidas ANTIGLOBULINAS Poli- Mono especifico

Rx de Estimulo o Potenciadores

Albúmina bovina LISS Enzimas PEG Polibrene

DETECCION DE ANTICUERPOS

NCEL

Rh-Hr KELL LEWIS

I

II

D C E c e K k Lea Leb

+ + 0 0 + + 0 + 0+ 0 + + 0 0 + 0 +

Nro

I

IIFase AGH37ºC

Alb Bov

Salino

I I

Identificación de Anticuerpos

En que fase(s) ocurrió la reacción

Autocontrol Pos / Neg Todas las cels

reaccionaron : igual/dif. fase, fuerza Rx real, hemólisis

Identificación de Anticuerpos

Determinar su especificidad del Ac (s) Se diseña un protocolo: acorde Cel I-II Evaluar características : Rango térmico,

reactivo en uso, clase Ac, hemólisis, etc. Conocer : antecedentes, Hcl, Dx. Utilizar panel de células A, B y/o C.

Que Acs Identificamos ?

Acs simples Acs múltiples Acs para Ag baja

frecuencia Acs para Ag alta

incidencia

Acs Fríos Acs alto titulo baja

afinidad Acs para Ag privado Acs ABH adquiridos

pasivamente

TECNICAS DE IDENTIFICACION

Enzimas Var. Temperatura Modif. del pH Inhibición Ags solub. Absorción y Elución Uso Comp Tiol Cels Rh Nulo

TIPOS DE PANELES EN IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Panel con / sin reactivo de estimulo Panel enzimática Panel frío y Caliente Panel Mono especifico Ig G Panel para Ac. concentrado

TIPOS DE PANELES DE IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS

Panel Acidificado (pH) Panel dirigidos para Ags específicos Panel para Anticuerpo inhibido Panel para Ac. Absorbido y/o Eluido

Modificación de Técnicas de Identificación de Acs. RX DE ESTIMULO Cloruro de sodio Albúmina bovina LISS PEG

CAMBIOS Tº Incubacion a 4ºC Incubacion 12- 24ºC Incubacion a 30ºC Incubacion a 37ºC

MODIFICACION DE TECNICAS EN IDENTIFICACION DE ACS.

ESPECIFICIDAD AGH Poli especifica AGH Mono específicos Ig

G, Complemento

USO DE ENZIMAS

+

- -- -

--+

+ + +

+

- --- - -

-- -

---

++

+

+++

+ ++

+ +

++

Tratamiento Enzimático

* PANEL ENZIMATICO* TRATAMIENTO DE CELULAS* FICINA* BROMELINA* PAPAINA

VARIACIONES DE TEMPERATURA

37C

4C

* PANEL CALIENTE

* PANEL FRIO

* EVALUACION RANGO TERMICO

VARIACIONES TIEMPO INCUBACION

15 min 60 min* AUMENTO PUEDE SER DE 15 a 60

* DIFERENTES TEMPERATURAS

INCREMENTO PROPORCION DE SUERO

* PUEDE VARIAR DE 2 gts a 10 gts

* REACCIONES MAS FUERTES

MODIFICACION DEL pH

--

- -

--

-

--

+++

++ +

+ +

+ +

+++

+

++ + +

-+

-

-+-

pH

PUNTO ISOELECTRICO

8.5

7.0

6.5

7.5

-

INHIBICION AGS SOLUBLES

+

NO AGLUTINACION

* ORINA : AG Sda* PLASMA: AGS Cha, Rga* LIQ. QUISTE HIDATIDICO: P1* LECHE MATERNA : AG I *SALIVA : SUSTANCIA LEWIS

Detección de anticuerpos inesperados, tamización de anticuerpos, rastreo de anticuerpos, búsqueda de anticuerpos irregulares.

Condiciones de la reacción: Diferentes temperaturas - diferentes medios (salino, potenciadores -albúmina, LISS, polietilenglicol. Polibreno- antiglobulina, enzimas).

ANTICUERPOS INESPERADOS

PAI Positivo

DETERMINACIÓN DEL GRUPO RHDETERMINACIÓN DEL GRUPO RH

Determinación del fenotipo Rh.

Variante D débil Du: Se presenta en individuos que poseen en sus glóbulos rojos pocos determinantes antígenos D o que por causas genéticas se manifiestan débilmente. Para su detección se realiza un coombs indirecto.

Los anticuerpos del sistema Rh, no son naturales, solo se encuentran como resultado de una inmunización por transfusión ó embarazo incompatible.

DETERMINACIÓN DEL GRUPO RH

ANTICUERPOS INESPERADOSANTICUERPOS INESPERADOS

Celulas I, II, IIICon dotación antigenica conocida.Utilidad conocer la presencia deAnticuerpos inesperados. Panel de células

Utilidad determinar el anticuerpoEspecifico.

LISS-Coombs

1- PAI 2- PAI

ANTICUERPOS INESPERADOS

Panel de Glóbulos O con dotación Antigenica conocida.

D ,C, E, c, e, M, N, S, s, P1, Lea,Leb,K, k,Fya , Fyb, Jka, JKb.

Buscar Ag clínicamente significativos

D C E c e Cw K k Fya Fyb Jka

Jkb

Lea

Leb

P1

M N S s Lua Lub

1 + + 0 + + + 0 + + + 0 + 0 0 + + + + + 0 +

2 0 + 0 0 + 0 + + 0 + 0 + 0 0 0 + 0 0 + 0 +

3 0 + 0 + + 0 0 + 0 0 + + + + + 0 + 0 + 0 +

4 + 0 + + 0 0 0 + + 0 + 0 0 0 + + + 0 + 0 +

5 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0 + + +

6 + 0 + + 0 0 + + + + + + + 0 0 0 + 0 + 0 +

7 0 0 0 + + 0 0 + 0 + + + + + + + 0 + 0 + +

8 0 0 + + + 0 0 + 0 + + 0 0 0 + + + + + 0 +

9 0 0 0 + + 0 0 + + + + 0 0 + 0 + + + + 0 +

10 0 0 0 + + 0 0 + + + + 0 0 0 + + 0 + 0 0 +

Rh-hr Kell Duffy Kidd Lewis P MNS Luteran

11 0 0 0 + + 0 + + + 0 + + 0 + 0 + 0 + + 0 +

Fríos IgM

Fya

GRACIAS