cultivo de leche de tanque - aprocal.com.ar
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11/04/2019
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Análisis de leche de tanque de frío
Luis Calvinho
Curso de Actualización en Mastitis Bovina
Cnia. Vignaud APROCAL – INTA Rafaela
Resumen temas
Fundamentos e interpretación del
análisis de leche de tanque
Ejemplos y discusión
Introducción
Tambo: punto de
partida para logro de
leche de óptima
calidad
Calidad
bacteriológica:
obtención de bajos
recuentos bacterianos
Recuento viable o
total (usina láctea):
referencia a bacterias
mesófilas aerobias
Incluye organismos de
distintos grupos:
lácticas, coliformes,
termodúricas y otras
Fuentes de contaminación de la leche
Medio ambiente
Glándula mamaria
Exterior de la ubre
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¿Dónde se originan los altos recuentos?
Calidad higiénica y sanitaria estrechamente
relacionadas
Necesidad de detectar problemas para corregir
deficiencias higiénicas y sanitarias
Análisis leche de tanque: década del 70 en California
para reducir muestras diagnóstico
¿Qué información brinda?
Información sobre grupos bacterianos
relacionados con calidad higiénica del tambo y
sanidad del rodeo lechero
Indica fuente probable de contaminación:
¿mastitis, higiene pre-ordeño, higiene del
equipo de ordeño?
Toma de muestras de leche de tanque
¡¡No tomar
muestra del
grifo!!
Mantener refrigerada hasta
proceso (24 hs)
Posible congelar a -20ºC por
cortos períodos
Número y frecuencia del muestreo
Según objetivo
Monitoreo del establecimiento
Diagnóstico de problemas
higiénico-sanitarios
puntuales
Búsqueda de S. aureus
en tanque (seriado)
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Pruebas básicas
Recuento de
mesófilos
Recuento de células somáticas
Recuento de
coliformes
Recuento de
termodúricos
Recuento de
patógenos
(mastitis)
Recuento de mesófilos
• Nº de ufc/mL de aerobios
mesófilos
• Incubación a 30°C x 72 hs
• Agar para recuento en placa
• Excelencia: < 5.000 ufc/mL
Recuento de mesófilos
• Pobre higiene del sistema de leche, ordeño con ubres sucias, deficiente enfriamiento, vacas con mastitis
Agar para recuento en placa
Recuento en Petrifilm
• No indica origen de contaminación
• Tradicional medida de condiciones de higiene del establecimiento
Recuento de coliformes
• Medios selectivos: agar
McConkey, agar violeta
rojo neutro bilis (RVBA)
• Cultivo 37ºc x 24 hs
• Excelencia: menos de 10
ufc/ml www.eolabs.com
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Recuento de coliformes
Presentes en materia fecal y en
el ambiente del tambo
Indica contaminación fecal,
deficiente rutina de ordeño,
higiene del equipo de ordeño
Recuento en Petrifilm
¿Mastitis por coliformes?
Recuento de termodúricos
Tolerantes al calor
Pasteurización (62,3ºc x
30’) previa a la siembra y
luego incubación como
mesófilos
Excelencia: 100 ufc/ml
Recuento de termodúricos
Asociado con deficiente higiene
del equipo de ordeño, ubres
sucias y/o mojadas
Piedra de leche, uniones
sanitarias viejas, material
de goma deteriorado
Prueba Estándar de calidad (expresado en cél./ml o ufc/ml)
Excelente Bueno Pobre
Recuento de células
somáticas
<200.000 200-400.000 >400.000
Recuento estándar
en placa
<5000 <10.000 >10.000
Recuento de
termodúricos
100 100-250 >250
Recuento de
coliformes
<10 10-50 >50
Interpretación sugerida de RCS y grupos bacterianos en leche de tanque de frío. (Adaptado de QMPS, 2005)
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Patógenos de mastitis
• Cultivo en agar sangre
• NMC 2017 sugiere utilizar medios selectivos
• Agar Baird-Parker: Staphylococcus
• Medio Edwards modificado para Streptococcus
Patógenos de mastitis
Strep. agalactiae y Staph.
aureus: glándulas
mamarias infectadas
Strep. no agalactiae:
ambiente y/o glándulas
mamarias infectadas
Patógenos de mastitis
Baja correlación con número de vacas infectadas en el rodeo
Patógenos pueden elevar recuentos de mesófilos (Ej. Str. dysgalactiae: 107 ufc/ml)
Frecuencia de muestreos: según necesidad o tipo de patógenos (patrón de eliminación)
Interpretación
Organismo Estándar de calidad (ufc/ml)
Excelente Bueno Pobre
S. aureus <1 100-500 >500
Strep. ambientales <500 500-1000 >1000
Strep. agalactiae 0 >1
Mycoplasma 0 >1
A. pyogenes 0 >1
SCN <500 500-1000 >1000
Fuente: QMPS
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Recuento de células somáticas
• Información complementaria del recuento de
patógenos de mastitis
• Buena correlación con número de vacas
infectadas en el rodeo
• Valor de excelencia: < 200.000 cél./ml
• Mayor utilidad cuando predominan los
patógenos contagiosos
Recuento de células somáticas
• Métodos directos: recuento microscópico (FIL) y recuento electrónico (Fossomatic, Bentley)
• Otros métodos: buena correlación con método de referencia (elevado costo por muestra)
• Pobre correlación con el número de patógenos en tanque
Otras pruebas
Recuento con incubación preliminar (buena
correlación con psicrótofos)
Recuento de psicrótrofos
Búsqueda de Mycoplasma
Recuento de esporas de Clostridium butíricos
(zonas de elaboración de quesos semiduros)
Ejemplo de interpretación 1
• Rec. de mesófilos: 3.000 UFC/ml
• Rec. de coliformes: 10 UFC/ml
• Rec. de termodúricos: 100 UFC/ml
• Rec. de patógenos: S. aureus 150 UFC/ml
• Rec. Cél. Somáticas: 200.000 cél./ml
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Ejemplo de interpretación 2
Rec. de mesófilos: >125.000 UFC/ml
Rec. de coliformes: 10 UFC/ml
Rec. de termodúricos: 100 UFC/ml
Rec. de patógenos: Strep. agalactiae > 80.000
UFC/ml
Rec. Cél. Somáticas: 700.000 cél./ml
Ejemplo de interpretación 3
Rec. de mesófilos: >80.000 UFC/ml
Rec. de coliformes: 600 UFC/ml
Rec. de termodúricos: 950 UFC/ml
Rec. de patógenos: Org. No patógenos 70.000 UFC/ml
Rec. Cél. Somáticas: 220.000 cél./ml
Ejemplo de interpretación 4
Rec. de mesófilos: >80.000 UFC/ml
Rec. de coliformes: 10 UFC/ml
Rec. de termodúricos: 900 UFC/ml
Rec. de patógenos: Org. No patógenos 70.000 UFC/ml
Rec. Cél. Somáticas: 220.000 cél./ml
Conclusiones
El uso de cuatro pruebas en forma simultánea
brinda información sobre potenciales fuentes de
contaminación de la leche cruda
La información obtenida es útil para la
corrección de problemas tanto higiénicos como
sanitarios
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