cromatografía de exclusión
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7/21/2019 Cromatografía de Exclusión
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Cromatografía de exclusión
• La cromatografía es una técnica quepermite la separación de moléculasdiferentes presentes en una misma
muestra.• El método está basado en la
circulación de una fase móvil (que
arrastra a la mezcla de compuestos aseparar! a través de una faseestacionaria.
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• La cromatografía de exclusiónmolecular (a menudo tambiénllamada "ltración en gel o de tamizmolecular es una de las técnicasmás sencillas de las empleadas en laseparación de proteínas # ácidos
nucleicos. ($%C&'$'LECL%)
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• *extranos con enlaces cruzados (sep+adex.
• %garosa (sep+arose! ,io-gel %.
• oliacrilamida (,io-gel ,.
/odos estos geles (fase estacionaria se+allan constituidos por gránulos (partículasde un material espon0oso +idratado! quecontiene poros con un tama1o de diámetrodeterminado.
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• Cuando se +ace pasar una mezcla demoléculas de distinto tama1o! a travésde una columna de "ltración en gel2
aquellas moléculas con un tama1o ma#orque el diámetro de los poros de laspartículas! sólo podrán moverse en sucamino! a través de la fase estacionaria!en el espacio que queda entre laspartículas2 # por lo tanto! no se veránretrasadas en su descenso.
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• En cambio aquellas moléculascapaces de penetrar en las partículasse verán retrasadas por la fase
estacionaria2 en ma#or medida!cuanto menor sea su tama1o. or lotanto! las moléculas elu#en en este
tipo de cromatografía por ordendecreciente de tama1o molecular.
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$ecanismo de la cromatografía deexclusión
Las mallas del gel permiten la entrada selectiva de laspartículas de menor masa molecular. *e a+í que las partículas
de ma#or peso molecular salgan primero.
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