antibiograma

ANTIBIOGRAMA

MSP Lilia E. Fragoso MoralesApril 12, 2023

Pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos

CLSI Pruebas de susceptibilidad por el

método de difusión con discos

Materiales Nefelómetro de Mac Farland 0.5 que equivale

aproximadamente a 1x108 ufc/ml Agar de Mueller Hinton Caldo Mueller Hinton, caldo tripticasa de soya o

solución salina Sensidiscos estandarizados producidos por el

propio productor del antibiótico o de casas comerciales.

Cepas Bacterianas ATCC Cultivos puros para aplicar las pruebas

Inoculación de las placas

Antes de 15 min de haber ajustado la turbidez inocular las placas

Tomar con el hisopo la muestra del tubo presionando en las paredes del tubo para eliminar el exceso

Rotar el hisopo por la superficie del agar por lo menos tres veces para extender el inóculo, rotando la placa 60°

Aplicar los discos entre 3 y 15 min después No deben estar más cerca de 24 mm de

centro a cetro Aplicar los discos con una pinza estéril No aplicar más de 5 discos por placa de 100

mm de diámetro No mover los discos una vez que han hecho

contacto con el medio Incubar por 18 a 24h y los EMR y los

Enterococos resistentes a vancomicina por 6 a 8 hs más

Con la ayuda de una lámpara mida el diámetro con la ayuda de un Bernier

En los medios opacos como MH suplementado con sangre remover la cubierta y leer con la lámpara arriba

Leer la zona de inhibición y no confundir con la zona de inhibición de la hemólisis

Cuando se emplee un método de prueba como H. influenza y N gonorrhoeae, reportar que se realizó por un proceso no estandarizado. S pneumoniae y otros estreptococos se prueban en AMH adicionado con sangre de carnero al 5%

Lectura de las placas

Procedimiento para la dilución en Agar

El caldo MH debe tener un pH entre 7.2 y 7.4 a 25°C

Si se van a probar cepas para a resistencia a meticilina suplementar el agar con NaCl (4% w/v; 0.68 mol/L) y 6 g de oxacilina por ml

Observar con luz la aparición de colonias pequeñas

Reportar la resistencia como resistencia a todas las drogas beta lactámicas (incluyendo cefalosporinas e imipenem) y puede significar resistencia a otros agentes como aminoglycocidos, eritromicina, clindamicina y tetraciclinas

Cepas de referencia

Enterococcus faecalis ATCC 29212 Escherichia coli ATCC 35218 Haemophilus influenza ATCC 49247 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 El control de calidad debe hacerse cada vez que se inicie

un nuevo lote de medio, discos, etc Si cualquier valor esta fuera de lo normal Cada inicio de semana Si los resultados son erróneos cada día hasta controlar

la falla

Consideraciones importantes

Los antibióticos beta lactámicos, imipenem y ácido clabulánico oxacilina son los más lábiles

Los discos de los AB anteriores se mantienen inalterados una semana después de descongelarlos

Antes de usar las placas de MH incubarlas a 37° durante un tiempo no mayor de 30´

Las placas de 100 mm de diámetro deben medir 4 mm de profundidad

La sangre contiene timidina (excepto la de caballo), la cual interfiere con la prueba para SxT, por lo que hay que probar el medio con la cepa de Enterococcus faecalis ATCC29212. Una zona > de 20mm indica aceptabilidad

Interpretación Susceptible Intermedio Resistente

Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles

de antimicrobianos. Programa 2002

Haemophilus influenzaeNitrocefin

1ª elección Ampicilina Cloramfenicol SXT Eritromicina Levofloxacina Ampicilina/sulbactam

2ª elección Claritromicina Imipenem Ciprofloxacina Ceftriaxona

Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles de

antimicrobianos. Programa 2002

Streprococcus pneumoniae Cefotaxima Cloramfenicol Eritromicina Levofloxacino Oxacilina (< 19 mm de inhibición reportar

penicilino resistente) Tetraciclinas SXT Vancomicina

Programa de resistencia bacteriana en México.

Paneles de antimicrobianos. Programa 2002

Enterococcus sp Ampicilina Ciprofloxacino Gentamicina 120 Linezolid Nitrofurantoina (Uro) Piperacilina/tazo Quinupristina Vancomicina

1ª elección Ampicilina Gentamicina Ciprofloxacina Nitrofurantoina

Ampicilina/sulbactam 2ª elección

Vancomicina Levofloxacino Teicoplanina B lactamasa

Programa de resistencia bacteriana en México.

Paneles de antimicrobianos. Programa 2002

Staphylococcus spp Ciprofloxacino Clindamicina Eritromicina Gentamicina Linezolid Oxacilina Rifampicina SXT Vancomicina

1ª elección Oxacilina Eritromicina Gentamicina Clindamicina SXT Levofloxacino cefalotina

2ª elección Ciprofloxacina Vancomicina Amikacina Netilmicina Teicoplanina

Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles

de antimicrobianos. Programa 2002

Streptococcus pyogenes Ampicilina Azitromicina Cefotaxima Clindamicina Claritromicina Cloramfenicol Eritromicina Ofloxacino Tetracicinas SXT Vancomicina

Streptococcus sp no neumococo

1ª elección Oxacilina Eritromicina Tetraciclina SXT Levofloxacina Clindamicina penicilina

2ª elección Vancomicina Cefotaxima ofloxacino

Programa de resistencia bacteriana en México.

Paneles de antimicrobianos. Programa 2002

E. coli, Proteus sp y Morganella Amikacina Ampicilina Ampicilina/sulbactam Cefepime Ceftazidima Ceftriaxona Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Nitrofurantoína (uro) SXT Piperacilina Tazobactam

1ª elección Amikacina Ampicilina Amoxicilina clavulanato SXT Cefalotina Ciprofloxacina Nitrofurantoina

2ª elección Netilmicina Imipenem Levofloxacina cefepime

Βlactamasas de espectro extendido son resistentes a penicilinas, cefalosporinas y aztreonam

Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles

de antimicrobianos. Programa 2002

Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Citrobacter

Amikacina Aztreonam Cefepime Ceftazidima Ceftriaxona Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Nitrofurantoína (uro) SXT Piperacilina/tazo

1ª elección Amikacina Ampicilina Amoxicilina clavulanato SXT Cefalotina Ciprofloxacina Nitrofurantoina

2ª elección Netilmicina Imipenem Levofloxacina cefepime

Βlactamasas de espectro extendido son resistentes a penicilinas, cefalosporinas y aztreonam

Programa de resistencia bacteriana en México.

Paneles de antimicrobianos. Programa 2002

Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter

Amikacina Ampicilina/sulbactam Aztreonam Cefepime Ceftazidima Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Ticarcilina/clavulanato Trimetoprim/sulfametoxazol Piperacilina/tazo

1ª elección Amikacina Gentamicina Ceftazidima Aztreonam Ticarcilina/clav Ciprofloxacina Cefepime

2ª elección Piperacilina/tazo Imipenem Levofloxacina Ceftazidima

IMIPENEM –ACINETOBACTERSXT- STENOTROPHOMONAS