antibiograma
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Conferencia de la Maestra Lilia Fragoso MoralesTRANSCRIPT
ANTIBIOGRAMA
MSP Lilia E. Fragoso MoralesApril 12, 2023
Pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos
CLSI Pruebas de susceptibilidad por el
método de difusión con discos
Materiales Nefelómetro de Mac Farland 0.5 que equivale
aproximadamente a 1x108 ufc/ml Agar de Mueller Hinton Caldo Mueller Hinton, caldo tripticasa de soya o
solución salina Sensidiscos estandarizados producidos por el
propio productor del antibiótico o de casas comerciales.
Cepas Bacterianas ATCC Cultivos puros para aplicar las pruebas
Inoculación de las placas
Antes de 15 min de haber ajustado la turbidez inocular las placas
Tomar con el hisopo la muestra del tubo presionando en las paredes del tubo para eliminar el exceso
Rotar el hisopo por la superficie del agar por lo menos tres veces para extender el inóculo, rotando la placa 60°
Aplicar los discos entre 3 y 15 min después No deben estar más cerca de 24 mm de
centro a cetro Aplicar los discos con una pinza estéril No aplicar más de 5 discos por placa de 100
mm de diámetro No mover los discos una vez que han hecho
contacto con el medio Incubar por 18 a 24h y los EMR y los
Enterococos resistentes a vancomicina por 6 a 8 hs más
Con la ayuda de una lámpara mida el diámetro con la ayuda de un Bernier
En los medios opacos como MH suplementado con sangre remover la cubierta y leer con la lámpara arriba
Leer la zona de inhibición y no confundir con la zona de inhibición de la hemólisis
Cuando se emplee un método de prueba como H. influenza y N gonorrhoeae, reportar que se realizó por un proceso no estandarizado. S pneumoniae y otros estreptococos se prueban en AMH adicionado con sangre de carnero al 5%
Lectura de las placas
Procedimiento para la dilución en Agar
El caldo MH debe tener un pH entre 7.2 y 7.4 a 25°C
Si se van a probar cepas para a resistencia a meticilina suplementar el agar con NaCl (4% w/v; 0.68 mol/L) y 6 g de oxacilina por ml
Observar con luz la aparición de colonias pequeñas
Reportar la resistencia como resistencia a todas las drogas beta lactámicas (incluyendo cefalosporinas e imipenem) y puede significar resistencia a otros agentes como aminoglycocidos, eritromicina, clindamicina y tetraciclinas
Cepas de referencia
Enterococcus faecalis ATCC 29212 Escherichia coli ATCC 35218 Haemophilus influenza ATCC 49247 Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Streptococcus pneumoniae ATCC 49619 El control de calidad debe hacerse cada vez que se inicie
un nuevo lote de medio, discos, etc Si cualquier valor esta fuera de lo normal Cada inicio de semana Si los resultados son erróneos cada día hasta controlar
la falla
Consideraciones importantes
Los antibióticos beta lactámicos, imipenem y ácido clabulánico oxacilina son los más lábiles
Los discos de los AB anteriores se mantienen inalterados una semana después de descongelarlos
Antes de usar las placas de MH incubarlas a 37° durante un tiempo no mayor de 30´
Las placas de 100 mm de diámetro deben medir 4 mm de profundidad
La sangre contiene timidina (excepto la de caballo), la cual interfiere con la prueba para SxT, por lo que hay que probar el medio con la cepa de Enterococcus faecalis ATCC29212. Una zona > de 20mm indica aceptabilidad
Interpretación Susceptible Intermedio Resistente
Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles
de antimicrobianos. Programa 2002
Haemophilus influenzaeNitrocefin
1ª elección Ampicilina Cloramfenicol SXT Eritromicina Levofloxacina Ampicilina/sulbactam
2ª elección Claritromicina Imipenem Ciprofloxacina Ceftriaxona
Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles de
antimicrobianos. Programa 2002
Streprococcus pneumoniae Cefotaxima Cloramfenicol Eritromicina Levofloxacino Oxacilina (< 19 mm de inhibición reportar
penicilino resistente) Tetraciclinas SXT Vancomicina
Programa de resistencia bacteriana en México.
Paneles de antimicrobianos. Programa 2002
Enterococcus sp Ampicilina Ciprofloxacino Gentamicina 120 Linezolid Nitrofurantoina (Uro) Piperacilina/tazo Quinupristina Vancomicina
1ª elección Ampicilina Gentamicina Ciprofloxacina Nitrofurantoina
Ampicilina/sulbactam 2ª elección
Vancomicina Levofloxacino Teicoplanina B lactamasa
Programa de resistencia bacteriana en México.
Paneles de antimicrobianos. Programa 2002
Staphylococcus spp Ciprofloxacino Clindamicina Eritromicina Gentamicina Linezolid Oxacilina Rifampicina SXT Vancomicina
1ª elección Oxacilina Eritromicina Gentamicina Clindamicina SXT Levofloxacino cefalotina
2ª elección Ciprofloxacina Vancomicina Amikacina Netilmicina Teicoplanina
Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles
de antimicrobianos. Programa 2002
Streptococcus pyogenes Ampicilina Azitromicina Cefotaxima Clindamicina Claritromicina Cloramfenicol Eritromicina Ofloxacino Tetracicinas SXT Vancomicina
Streptococcus sp no neumococo
1ª elección Oxacilina Eritromicina Tetraciclina SXT Levofloxacina Clindamicina penicilina
2ª elección Vancomicina Cefotaxima ofloxacino
Programa de resistencia bacteriana en México.
Paneles de antimicrobianos. Programa 2002
E. coli, Proteus sp y Morganella Amikacina Ampicilina Ampicilina/sulbactam Cefepime Ceftazidima Ceftriaxona Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Nitrofurantoína (uro) SXT Piperacilina Tazobactam
1ª elección Amikacina Ampicilina Amoxicilina clavulanato SXT Cefalotina Ciprofloxacina Nitrofurantoina
2ª elección Netilmicina Imipenem Levofloxacina cefepime
Βlactamasas de espectro extendido son resistentes a penicilinas, cefalosporinas y aztreonam
Programa de resistencia bacteriana en México. Paneles
de antimicrobianos. Programa 2002
Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Citrobacter
Amikacina Aztreonam Cefepime Ceftazidima Ceftriaxona Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Nitrofurantoína (uro) SXT Piperacilina/tazo
1ª elección Amikacina Ampicilina Amoxicilina clavulanato SXT Cefalotina Ciprofloxacina Nitrofurantoina
2ª elección Netilmicina Imipenem Levofloxacina cefepime
Βlactamasas de espectro extendido son resistentes a penicilinas, cefalosporinas y aztreonam
Programa de resistencia bacteriana en México.
Paneles de antimicrobianos. Programa 2002
Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter
Amikacina Ampicilina/sulbactam Aztreonam Cefepime Ceftazidima Ciprofloxacino Gentamicina Imipenem Ticarcilina/clavulanato Trimetoprim/sulfametoxazol Piperacilina/tazo
1ª elección Amikacina Gentamicina Ceftazidima Aztreonam Ticarcilina/clav Ciprofloxacina Cefepime
2ª elección Piperacilina/tazo Imipenem Levofloxacina Ceftazidima
IMIPENEM –ACINETOBACTERSXT- STENOTROPHOMONAS