1.7.metodos de fijacion

UNIDAD 1. PARASITOLOGÍA.

1.7. Métodos de conservación, fijación y tinción útiles en

parasitología.

RECOLECCIÓN DE MUESTRAS

Muestra de heces

Esputo

Materiales perianales

Tracto urogenital

Biopsias

Material sigmoideo

Extensiones sanguíneas

Aspirados

Los pasos a seguir son:• Obtención. • Conservación.• Fijación.• *Deshidratación.• *Aclaramiento.• Tinción.• *Hidratación.• Montaje .• Observación.• Identificación.

Tipos de Conservadores

• La mayoría de los fijadores son venenos citoplasmáticos y actúan mas rápido en caliente.

• Un buen fijador es aquel que entra rápidamente a la estructura parasitaria, detiene su metabolismo y le provoca poco o nulos cambios morfológicos.

Fijador Componentes Función Utilidad

Bouin •Ácido pícrico

•Formaldehido

•Acido acético glacial

•demuestra la presencia de glucógeno. Coagula proteínas•puentes de metileno en proteínas.•fija las nucleoproteínas por precipitación.

Helmintos

PAF (fenol-alchol-formaldehido)

•Fenol

•Solución salina•Etanol

•Formaldehido

•Desnaturaliza y precipita las proteínas.•puentes de metileno en proteínas.

Quistes, trofozoitos, huevos y larvas

Fijador Componentes Función Utilidad

AFA •Etanol

•Formaldehído

•Agua destilada

•Ácido acético glacial

Desnaturaliza y precipita•Forma puentes de metileno

•Fija las nucleoproteínas por precipitación.

CestodosTrematodos

• Paso previo al montaje.

• Bálsamo no se mezcla con el agua.

• Alcoholes graduales (30%, 50%, 70%, 96% y absoluto).

• Miscible con etanol y bálsamo.

• Sirve de indicador de una buena deshidratación (oscurecimiento).

• Aceites esenciales con transparencia (terpineol).

• Resinas (balsamo de Canada).

• Transparencia.• Índice de refracción

cercano a vidrio de cubre y porta.

• Durabilidad.

• Preparaciones permanentes Nematodos

• Gelatina------------------------8.0ml

• Agua destilada----------------52.0ml

• Glicerina------------------------50.0ml

• Fenol (cristales)---------------0.1ml

• Lugol.• Ziehl-Neelsen.• Tinción de Hematoxilina

y eosina.• Hematoxilina férrica

Heidenhain.• Tinción tricrómica de

Gomori. • Tinción de Noble.• Coloración de Giemsa.• Tinción de Wright.

Tinciones parásitos.

FundamentoIdentificación de estructuras por reacción

del iodo con el glucógeno

contenido en las estructuras

UtilidadPara quistes y huevos

UTILIDAD •Para identificar

parásitos (protozoarios de la sangre y los

tejidos), espiroquetas, levaduras y hongos

(Chlamydia).

UTILIDAD •Para identificar

parásitos (protozoarios de la sangre y los

tejidos), espiroquetas, levaduras y hongos

(Chlamydia).

FUNDAMENTOAfinidad que

demuestran las células y sus componentes a los

distintos colorantes incluidos en el colorante

de Giemsa.

FUNDAMENTOAfinidad que

demuestran las células y sus componentes a los

distintos colorantes incluidos en el colorante

de Giemsa.

• Tinción de Ziehl-Neelsen

(Modificada para observación de coccidias: Cryptosporidium y otros).

FUNDAMENTO:Las paredes celulares de los parásitos contienen ácidos grasos que les confieren la

propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido

Estudio de Entamoeba,

Giardia, Balantidium,

Cyclospora y otros protozoarios.

Permite colorear las estructuras internas de los protozoos para

su caracterización.

FUNDAMENTO

UTILIDAD

UTILIDAD

Colorea protozoarios,

principalmente amebas y

flagelados.

FUNDAMENTO

La Hematoxilina se asocia con mordientes para actuar como un

colorante básico, por lo cual se asocia y colorea estructuras aniónicas

Tinción de Carmín clorhídricoFundamento

Caracteriza el ADN, aunque el carmín tiene carga positiva, con la

adición del ácido clorhídrico se hace de

carga negativa; se deposita en los grupos

fosfatos del ADN

UtilidadColoración de núcleos

de especímenesadultos o segmentos

para el estudio de cestodos y trematodos

FundamentoLa hematoxilina,

que por ser catiónica o básica tiñe los nucleos

celularesLa eosina tiñe

componentes básico como el citoplasma

Utilidadutilizado en histología y medicina diagnostica

para diferenciar estructuras en parásitos