1.7.metodos de fijacion
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UNIDAD 1. PARASITOLOGÍA.
1.7. Métodos de conservación, fijación y tinción útiles en
parasitología.
RECOLECCIÓN DE MUESTRAS
Muestra de heces
Esputo
Materiales perianales
Tracto urogenital
Biopsias
Material sigmoideo
Extensiones sanguíneas
Aspirados
Los pasos a seguir son:• Obtención. • Conservación.• Fijación.• *Deshidratación.• *Aclaramiento.• Tinción.• *Hidratación.• Montaje .• Observación.• Identificación.
Tipos de Conservadores
• La mayoría de los fijadores son venenos citoplasmáticos y actúan mas rápido en caliente.
• Un buen fijador es aquel que entra rápidamente a la estructura parasitaria, detiene su metabolismo y le provoca poco o nulos cambios morfológicos.
Fijador Componentes Función Utilidad
Bouin •Ácido pícrico
•Formaldehido
•Acido acético glacial
•demuestra la presencia de glucógeno. Coagula proteínas•puentes de metileno en proteínas.•fija las nucleoproteínas por precipitación.
Helmintos
PAF (fenol-alchol-formaldehido)
•Fenol
•Solución salina•Etanol
•Formaldehido
•Desnaturaliza y precipita las proteínas.•puentes de metileno en proteínas.
Quistes, trofozoitos, huevos y larvas
Fijador Componentes Función Utilidad
AFA •Etanol
•Formaldehído
•Agua destilada
•Ácido acético glacial
Desnaturaliza y precipita•Forma puentes de metileno
•Fija las nucleoproteínas por precipitación.
CestodosTrematodos
• Paso previo al montaje.
• Bálsamo no se mezcla con el agua.
• Alcoholes graduales (30%, 50%, 70%, 96% y absoluto).
• Miscible con etanol y bálsamo.
• Sirve de indicador de una buena deshidratación (oscurecimiento).
• Aceites esenciales con transparencia (terpineol).
• Resinas (balsamo de Canada).
• Transparencia.• Índice de refracción
cercano a vidrio de cubre y porta.
• Durabilidad.
• Preparaciones permanentes Nematodos
• Gelatina------------------------8.0ml
• Agua destilada----------------52.0ml
• Glicerina------------------------50.0ml
• Fenol (cristales)---------------0.1ml
• Lugol.• Ziehl-Neelsen.• Tinción de Hematoxilina
y eosina.• Hematoxilina férrica
Heidenhain.• Tinción tricrómica de
Gomori. • Tinción de Noble.• Coloración de Giemsa.• Tinción de Wright.
Tinciones parásitos.
FundamentoIdentificación de estructuras por reacción
del iodo con el glucógeno
contenido en las estructuras
UtilidadPara quistes y huevos
UTILIDAD •Para identificar
parásitos (protozoarios de la sangre y los
tejidos), espiroquetas, levaduras y hongos
(Chlamydia).
UTILIDAD •Para identificar
parásitos (protozoarios de la sangre y los
tejidos), espiroquetas, levaduras y hongos
(Chlamydia).
FUNDAMENTOAfinidad que
demuestran las células y sus componentes a los
distintos colorantes incluidos en el colorante
de Giemsa.
FUNDAMENTOAfinidad que
demuestran las células y sus componentes a los
distintos colorantes incluidos en el colorante
de Giemsa.
• Tinción de Ziehl-Neelsen
(Modificada para observación de coccidias: Cryptosporidium y otros).
FUNDAMENTO:Las paredes celulares de los parásitos contienen ácidos grasos que les confieren la
propiedad de resistir la decoloración con alcohol-ácido
Estudio de Entamoeba,
Giardia, Balantidium,
Cyclospora y otros protozoarios.
Permite colorear las estructuras internas de los protozoos para
su caracterización.
FUNDAMENTO
UTILIDAD
UTILIDAD
Colorea protozoarios,
principalmente amebas y
flagelados.
FUNDAMENTO
La Hematoxilina se asocia con mordientes para actuar como un
colorante básico, por lo cual se asocia y colorea estructuras aniónicas
Tinción de Carmín clorhídricoFundamento
Caracteriza el ADN, aunque el carmín tiene carga positiva, con la
adición del ácido clorhídrico se hace de
carga negativa; se deposita en los grupos
fosfatos del ADN
UtilidadColoración de núcleos
de especímenesadultos o segmentos
para el estudio de cestodos y trematodos
FundamentoLa hematoxilina,
que por ser catiónica o básica tiñe los nucleos
celularesLa eosina tiñe
componentes básico como el citoplasma
Utilidadutilizado en histología y medicina diagnostica
para diferenciar estructuras en parásitos