ADENDO AL MANUAL DEL OPERADOR

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PeelPlate YMYEAST AND MOLD

Preparación de Muestras con Esponjas Ambientales y Lavado de Carcasas para Prueba Peel Plate

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IntroducciónEste protocolo es un adendo suplementario que describe preparación de muestras para diferentes métodos de Peel Plate®: AC, Conteo Aeróbico; YM, levadura y moho; CC, Conteo de Coliformes; EB, Enterobacteriaceae; y Peel Plate EC, coliformes y E. coli; y Métodos de Alto Volumen. Consulte los manuales correspondientes, OM-696, OM-697, OM-698, OM-701 , OM-702, OM-703, OM-704 y OM-705 por información adicional y procedimientos.

Preparación de la MuestraEsponja Ambiental de SuperficieEste protocolo puede ser modificado de acuerdo al tipo de bufer, volumen, tamaño de la superficie, etc para seguir las pautas de los procedimientos operacionales estándar. El siguiente procedimiento se basa en el método ISO 18593.

• Use bolsas Nalco Whirl-Pak (ó equivalente) conteniendo una esponja estéril, ó utilice un sistema equivalente de muestreo tal como esponja con mango (sponge-on-stick).

• Humedezca la esponja agregando asépticamente a la bolsa, 25 mL of de agua buferizada con 0.1 % de peptona (conteniendo agentes neutralizantes necesarios para superficies sanitizadas).

• Utilizando guantes exprima la esponja dentro de la bolsa y llévela hasta la parte superior de la bolsa, tómela con la otra mano enguantada o con pinzas estériles (alternativamente, sáquela del mango y tómela con la otra mano).

• Frote 100 cm2 de superficie con movimientos verticales y horizontales hasta cubrir toda el área.

• Colóque la esponja de regreso en la bolsa (remueva el mango si está utilizando ese método). Homogenice ó masajee la esponja dentro de la bolsa por un minuto.

• Como es recomendado, analice en duplicado 1 mL de líquido (5 mL en las pruebas de alto volumen), ver manual del operador.

Interpretación: El total de UFC/100 cm2 de superficie se calcula multiplicando por el conteo observado, por ejemplo promedio de las placas en duplicado, por el volumen total de bufer: 25 para placas de 1 ml y 5 para placas de alto volumen.

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Abra el paquete de la esponja del lado del mango.

Rompa la orilla de la bolsa para sacar la esponja.

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Agua de Lavado, Aves de Corral • Colóque la carcasa en una bolsa plástica (por ejemplo bolsa estéril de lavado).

• Agregue 400 mL de agua peptonada al 0.1 % ó búfer Butterfield, utilice la mitad del volumen dentro de la carcasa y la otra mitad sobre la piel. Para carcasas de pavo utilizar 600 mL de diluyente.

• Selle la bolsa y agite por 1 minuto a una tasa de aproximadamente 30 movimientos/minuto hacia adelante y hacia atrás.

• Prepare diluciones en serie con 10 mL de agua de lavado y 90 mL de agua peptonada al 0.1% o agua buferizada.

• Analice 1 mL del líquido, en duplicado, como se recomienda en el manual del operador.

Interpretación: El total de UFC/carcasa es el conteo total observado, por ejemplo el promedio de placas en duplicado, multiplicado por 400 (volumen de bufer), multiplicado por el factor de dilución. Para pavo el total UFC/carcasa es el conteo total observado x 600 x el factor de dilución.

Agua de Lavado, Carcasas de Animales Grandes (ganado, cerdo, cabra, oveja)

• Siga el procedimiento descrito para Esponja Ambiental, apliquelo a 3 x 100 cm2 areas en los hombros, costillas y area del rabo.

• Prepare diluciones en serie usando 10 mL de agua de lavado en 90 mL de bufer.

• Analice 1 mL del líquido, en duplicado, como se recomienda en el manual del operador.

Interpretación: El total de UFC/300 cm2 de superficie es el conteo total observado, por ejemplo el promedio de placas en duplicado, multiplicado por 25 (tvolumen de bufer), multiplicado por el recíproco del factor de dilución.

PrecaucionesUse bolsas estériles, esponja (como requerido) y guantes al manejar la esponja (de ser requerido). Si no esta usando guantes, evite tocar la esponja o el interior de la bolsa.

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Ponga la esponja y mango dentro de la bolsa abierta.

Suelte la esponja presionando los clips a traves de las paredes de la bolsa y sacando el mango. Remueva el mango.

Usando el mango, presione la esponaja firmemente en un área de 10 cm x 10 cm (100 cm2).

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OM-700-001 (EV OM-649-002) Mayo-2017

OM-700-001

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