PRACTICA: 01

DIVERSIDAD MICROBIANA Y USO DEL MICROSCOPIO

INTRODUCCIÓN

La diversidad microbiana, requiere conocer las raíces evolutivas de las células. Debido a que la evolución ha forjado todas las formas de vida en la Tierra, la diversidad estructural y funcional que apreciamos en las células representa un conjunto de éxitos evolutivos que, a través del proceso de la selección natural, confieren un valor de supervivencia (adaptabilidad) a los microorganismos de hoy.

La diversidad microbiana puede ser apreciada en términos de variaciones en el tamaño celular y la morfología, estrategias metabólicas, movilidad, división celular, biología del desarrollo, adaptación a ambientes extremos y muchos otros aspectos estructurales y funcionales de la célula.

Para poder comprender la gran diversidad de microorganismos existentes es preciso agruparlos y organizar los grupos generales en una estructura jerárquica sin superposiciones. De eso se encarga la Taxonomía, que es la ciencia de la clasificación biológica.

Un microscopio óptico es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le conoce como microscopio de luz, microscopio de campo claro, es un tipo de microscopio compuesto que utiliza una combinación de lentes agrandando las imágenes de pequeños objetos. Los microscopios ópticos son antiguos y simples de utilizar y fabricar.

Un microscopio compuesto es un aparato óptico hecho para agrandar objetos, consiste en un número de lentes formando la imagen por lentes o una combinación de lentes posicionados cerca del objeto, proyectándolo hacia los lentes oculares u el ocular. El microscopio compuesto es el tipo de microscopio más utilizado.

Un microscopio electrónico es uno de los más avanzados e importantes tipos de microscopios con la capacidad más alta de magnificación. En los microscopios de electrones los electrones son utilizados para iluminar las partículas más pequeñas. El microscopio de electrón es una herramienta mucho más poderosa en comparación a los comúnmente utilizados microscopios livianos.

OBJETIVOS:

Idetificar los componentes ópticos y mecánicos de u microscopio óptico usado en el laboratorio.

Manipular los aumentos del microscopio del laboratorio. Comprender los campos de campo oscuro en una microscopia. Manipulara decusadamente las muestras microscópicas de campo claro para

obtener una observación nítida con los diferentes objetivos. Conocer los diferentes tipos de microorganismos presentes en el agua estancada.

EQUIPOS Y MATERIALES:

Microscopio óptico compuesto Microscopio óptico Láminas y lamillas Mechero Pipetas Sol. Salina Preparado de bacillus subtilis Agua estancada

PROCEDIMIENTO:

Observar la muestra de agua estancada

1. Con una pipeta sacamos lo suficiente de agua estancada del fondo de la botella.

2. Colocamos de 1-2 gotas en una lamina porta objetos cubrimos con una laminilla. Todo hacer con mucho cuidado e higiene.

3. encendemos el microscopio VERIFICANDO QUE EL OBJETIVO ESTE 4X que es el campo de visualización.

4. Manipular el tornillo micrométrico para subir la plantilla hasta llevar la muestra a observarse dentro de la distancia aproximadamente 25 mm, y luego bajar ligeramente buscando la observación del microorganismo que encontremos en el agua estancad.

Observar la muestra de bacillus subtilis

1. Prendemos el mechero con una mano cogemos el asa bacteriológica ponemos en contacto con el mechero que este al rojo vivo lo sacamos, con la otra mano cogemos el frasco conteniendo la bacteria bacillussubtilis como todo tiene que estar estéril lo tenemos que tener cerca del fuego para no contamínalo.

2. En una lamina se coloca dos gotas de solución salina 3. Sacamos con el asa el bacillussubtilisy lo ponemos aun a un costado de la

solución salina luego empezamos a homogenizarlo bien y cubrimos con una laminilla.

4. Lo llevamos a observar al microscopio.

RESULTADOS:

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

http://www.tiposdemicroscopio.com/ http://www.ipb.csic.es/servicios/Microscopia/uploads/3/6/2/2/3622788/

microscopia_a_grandes_rasgos.pdf http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_%C3%B3ptico https://?gws_rd=ssl#q=microscopia+optica https://books.google.com.pe/books?

id=Nxb3iETuwpIC&printsec=frontcover#v=twopage&q&f=true

ANEXOS:

MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO

MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO – CAMPO CLARO

Utiliza la luz visible como fuente de iluminación; no puede resolver estructuras con un tamaño menor de 0,2um; la muestra aparece contra un fondo claro. Su uso es económico y sencillo. Para observar muestras señidas y contar microbios; no resuelve elementos muy pequeños como los virus.

MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO – CONTRASTE DE FASE

Los microorganismos también pueden observarse con un microscopio de contraste de fase, que es especialmente útil porque permite la observación detallada de estructuras internas en los microorganismos vivos. Además, no es necesario fijar (adherir los microbios al portaobjeto) ni teñir la muestra, procedimientos que podrían distorsionar a los microorganismos. El principal de la microscopia de contraste de fase se basa en la naturaleza ondulatoria de los rayos de luz y en el hecho de que esos rayos pueden estar en fase (sus picos y sus valles coinciden) o fuera de fase. Si el piso de la onda de los rayos de luz de una fuente coinciden con el pico de la onda de los rayos de luz de otra fuente de luz, los rayos interactúan para producir interferencias (oscuridad relativa). En un microscopio de contraste de fase un conjunto de rayos luminosos proviene directamente de la fuente de luz. E otro conjunto proviene de la luz que se refleja o difracta por una estructura particular de la muestra. (La difracción es la dispersión de los rayos de luz cuando los “tocan” el borde de una muestra. Los rayos difractados se separan de los rayos paralelos de luz que atraviesan la muestra.) Cuando los dos conjuntos de rayos de luz- rayos directos y rayos reflejados o difractados – se unen, forman una imagen de la muestra en el ocular, que contiene áreas que van desde relativamente luminosas (en fase) a matrices de gris hasta el negro (fuera de fase) en la microscopia de contraste de fase las estructuras internas de una célula se definen con mayor claridad.

MICROSCOPIO ÓPTICO COMPUESTO – FLUORESCENCIA

Este microscopio de fluorescencia aprovecha las ventajas de la fluorescencia, es decir la capacidad de ciertas sustancias de absorber la luz de longitudes de onda corta (ultravioleta) y emitir una luz de una longitud de onda mayor (visible). Algunos organismos fluorescen naturalmente bajo la luz ultravioleta; si la muetsra que se debe examinar no fluoresce de modo natural, se la tiñe con alguno de los colorantes fluorescentes denominados fluorocromos. Cuando los microorganismos teñidos con un fluorocromo se examinan mediante un microscopio de fluorescencia con una fuente de luz ultravioleta o cercana a ella aparecen como objetos luminiscentes y brillantes contra un fondo oscuro.

UN CUADRO DE REFERENCIA SOBRE LOS TIPOS DE MICROSCOPIA