[ ]13 [ ]14

Columnas de HPLC Atlantis

La familia Atlantis de columnas de HPLC fue creada para resolver uno de los problemas cromatogrficos

ms complejos, la retencin de compuestos polares. Los analitos polares suelen ser difciles de retener

por cromatografa tradicional de fase reversa (RP) y habitualmente eluyen en el volumen de exclusin de

la columna o coeluyen con especies endgenas presentes dentro de las matrices biolgicas, afectando

adversamente a la precisin y exactitud de los anlisis biolgicos cuantitativos. Gracias a la experiencia

acumulada y a la innovacin en la sntesis, las columnas Atlantis lideran el sector, ofreciendo excepcional

rendimiento, versatilidad, retencin y estabilidad cromatogrfica para compuestos polares, ofreciendo al mismo

tiempo una retencin equilibrada para mezclas complejas de analitos.

[ ]3

Columnas Atlantis T3: versatilidad por innovacin

La cromatografa de fase reversa es la tcnica mas empleada en separaciones por LC debido a su versatilidad para retener y resolver una

amplia gama de compuestos diferentes. La culminacin de ms de tres dcadas de experiencia y conocimientos en el diseo de fases

estacionarias ha permitido la creacin de las columnas Atlantis T3. Con una retencin equilibrada de molculas polares e hidrfobas, las

columnas Atlantis T3 resuelven uno de los mayores problemas analticos que afectan a los usuarios de sistemas cromatogrficos. Adems,

la optimizacin selectiva del dimetro de los poros, de la densidad del ligando C18 y del recubrimiento final permite que las columnas

Atlantis T3 ofrezcan una magnfica retencin para los compuestos polares, excelente forma de los picos y eficiencia para todos los

analitos, as como una estabilidad qumica excepcional en una amplia gama de pH.

El excelente rendimiento que ofrece la tecnologa de fase enlazada T3 puede lograrse en plataformas tecnolgicas HPLC y UPLC. Las

columnas ACQUITY UPLC HSS T3 incorporan la misma tecnologa de fase enlazada T3 y recubrimiento final que las columnas Atlantis,

ofreciendo as las mismas posibilidades independientemente de la plataforma de separacin.

Columnas de slice Atlantis HILIC: mejor retencin de los compuestos polares

Las columnas de slice Atlantis HILIC mejoran la retencin de analitos y metabolitos muy polares, que se retienen mal por

cromatografa de fase reversa, mediante cromatografa de interaccin hidroflica (HILIC). Adems de la retencin mejorada

de los compuestos polares, las columnas de slice Atlantis HILIC ofrecen una mayor respuesta de la espectrometra de masas,

compatibilidad directa con los eluatos de SPE, as como selectividad ortogonal, en comparacin con los materiales de fase reversa, lo

cual convierte a la HILIC en una atractiva tcnica de separacin alternativa.

[ ]4

Redefine la Ret encin de compuestos polaRes

El excepcional rendimiento de las columnas Atlantis T3 HPLC es consecuencia del diseo inteligente de la fase esta-cionaria. El proceso avanzado de funcionalizacin T3 de Waters utiliza una fase alqulica C18 trifuncional,

unida con una densidad intermedia del ligando de 1.6 mol/m2 para promover la retencin de compuestos polares*1. Esta menor densidad del ligando permite que los analitos

accedan con ms facilidad a la estructura de los poros del material, donde tiene lugar ms del 99% de la retencin cromatogrfica, permitiendo una

retencin mejorada.

*1 P.D. McDonald et al. "Topics in Liquid Chromatography Part 1. Designing a Reversed-Phase Column for Polar Compound Retention" Waters W hitepaper 2006, 8 pp;

buscar 720001889EN en waters.com.

CondicionesColumna: Atlantis T3, 4,6 x 150 mm, 5 mReferencia: 186003747Fase mvil A: H2OFase mvil B: ACNFase mvil C: HCOONH4 100 mM, pH 3,0Caudal: 1,0 mL/minGradiente: Tiempo Perfil (min) %A %B %C 0,00 95 0 5 5,00 95 0 5 15,00 70 25 5 20,00 70 25 5 21,00 95 0 5 25,00 95 0 5 Volumen de inyeccin: 10 LTemperatura de la columna: 30 CDeteccin: UV @ 280 nm.

Compuestos: 1. Norepinefrina (NE) 2. Epinefrina (E) 3. 3,4-dihidroxifenilalanina (DOPA) 4. Dopamina (DA) 5. cido 4-hidroxi-3-metoximandlico (VMA) 6. Serotonina (5-HT) 7. 3-metoxi-4-hidroxifenilglicol (MHPG) 8. cido 3,4-dihidroxifenilactico (DOPAC) 9. cido 5-hidroxi-3-indolactico (5-HIAA)10. cido 4-hidroxi-3-metoxifenilactico (HVA)

1

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75

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6 10 12 14 18 20 min0 2 4 8 16

ATLANTIS T3

[ ACQUITY UPLC SYSTem ACCeSSorIeS ]

[ ]5

Ret encin equil ibRada de mezclas de div eRsos analitos

Ante la tarea de analizar una serie de compuestos con una amplia gama de polaridades, existen pocas opciones que permitan una retencin adecuada de las especies polares sin excesiva retencin de los componentes menos polares. En el desarrollo de frmacos, hay que cribar gran nmero de candidatos, muchas veces con poca o ninguna definicin previa de sus propiedades qumicas. Muchos candidatos polares se pasan a veces por alto, debido a su elucin en el volumen de exclusin de la columna, mientras que las especies hidrfobas pueden unirse de forma permanente a la fase estacionaria.

Las columnas Atlantis T3 estn diseadas para ofrecer un rendimiento excepcional para una extensa gama de polaridades de compuestos, lo cual las hace muy adecuadas como columnas universales de fase reversa para entornos de acceso abierto.

CondicionesColumna: Atlantis T3, 4,6 x 150 mm, 5 mReferencia: 186003747Fase mvil A: H2OFase mvil B: ACNFase mvil C: HCOOH al 1%, pH 2,3Fase mvil D: MeOH.Caudal: 2,0 mL/minGradiente: Tiempo Perfil (min) %A %B %C %D 0,00 55 17,5 10 17,5 4,00 35 27,5 10 27,5 6,00 9 40,0 10 41,0 15,00 9 40,0 10 41,0 16,00 55 17,5 10 17,5 20,00 55 17,5 10 17,5Volumen de inyeccin: 10 L Temperatura de la columna: 30 C.Deteccin: UV @ 280 nm. 0 2 4 6 8 10 12 14 min

1 2

3

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6

7

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Hidrfobos: antioxidantes liposolubles

CondicionesColumna: Atlantis T3, 4,6 x 150 mm, 5 mReferencia: 186003747Fase mvil A: H2OFase mvil B: ACNFase mvil C: CH3COONH4 100 mM, pH 5,0Caudal: 1.0 mL/minGradiente: Tiempo Perfil (min) %A %B %C 0,00 90 0 10 10,00 84 6 10 11,00 90 0 10 15,00 90 0 10Volumen de inyeccin: 10 LTemperatura de la columna: 30 C.Deteccin: UV @ 254 nm.

Compuestos: 1. Citosina2. 5-fluorocitosina3. Uracilo4. 5-fluorouracilo5. Guanina6. Timina7. Adenina

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 min

1

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6

7

54

polares: bases de cidos nucleicos

Retencin de uracilo

AtlAntis t3

Compuestos: 1. Galato de propilo2. 2,4,5-trihidroxibutirofenona3. Terc-butilhidroquinona4. Hidroxianisol butilado5. 2,6-di-terc-butil-4-hidroximetilfenol6. Galato de octilo7. Hidroxitolueno butilado8. Laurilo

AtlAntis t3

5

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1 2

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0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 min

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 min

La prueba de interrupcin de flujo de Waters determina la susceptibilidad de una fase estacionaria a la deshumectacin de los poros utilizando fases mviles 100% acuosas. Bajo estas difciles condiciones de prueba, las columnas Atlantis T3 presentan una prdida de retencin insignificante, mientras que la columna C18 de alta funcionalizacin sufre una prdida de retencin completa.

CondicionesColumnas: 4,6 x 100 mm, 3 mFase mvil: HCOONH3 10 mM, pH 3,0Caudal: 1,2 mL/minVolumen de inyeccin: 7,0 LDeteccin: UV @ 254 nm.

Compuestos:1. Tiourea2. 5-fluorocitosina3. Adenina4. Guanosina-5-monofosfato5. Timina

atlantis t3, c18 de funcionalizacin intermedia

zorbax eclipse plus c18, c18 de alta funcionalizacin

100% de retencin perdida

7% de retencin perdida

Atlan

tis T3

[ ]6

Ret encin sin React ivos de paR inico

El uso de reactivos de par inico en columnas de fase reversa es un enfoque frecuente para retener compuesto ionizables altamente polares. A medida que la espectrometra de masas se ha convertido en una tcnica de deteccin importante en muchos laboratorios, los reactivos de par inico se vuelven una opcin menos atractiva a causa de la supresin de la respuesta de MS que provocan. Las columnas Atlantis T3 presentan una retencin mejorada sin necesidad de dichos reactivos, lo cual permite obtener lmites de deteccin y cuantificacin ms bajos para mtodo de LC/MS.

CondicionesColumnas: Atlantis T3, 2,1 x 50 mm, 3 mReferencia: 186003717Fase mvil A: HCOOH al 0,1%Fase mvil B: ACNCaudal: 0,5 mL/minGradiente: Tiempo Perfil (min) %A %B 0,00 98 2 5.00 2 98Volumen de inyeccin: 15 LTemp. de la columna: 45 C.MRM: morfina 286 > 201 morfina-3-D-glucurnido 462 > 286 morfina-6-D-glucurnido 462 > 286 N-xido de morfina 302 > 162 6-acetilmorfina 328 > 165 10-hidroximorfina 302 > 58

Compuestos:1. 10-hidroximorfina2. Morfina-3-D-glucurnido3. Morfina-6-D-glucurnido4. Morfina5. N-xido de morfina6. 6-acetilmorfina

6

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1.0 1.5 min.50

HO

O

HO

NCH3

HOH

HO

O

O

NCH3

H

O

OHOH

OHOHO

O

O

HO

NCH3

H

O

HO HO

OHOHO

HO

O

HO

NCH3

H

HO

O

O

NCH3

H

O

HO

O

HO

NH +

O

10-Hydroxymorphine

Morphine-3-D-glucuronide Morphine-6-D-glucuronide

Morphine

Morphine N-oxide

6-Acetylmorphine

Resist encia opt imizada a la desHumectacin en fases mviles 100% acuosas

En la cromatografa de fase reversa, se intenta aumentar la afinidad de una molcula polar hacia la fase estacionaria reduciendo el contenido orgnico de la fase mvil, incrementando as la retencin. Bajo estas condiciones, las columnas C18 de alta funcionalizacin son propensas a perder repentinamente la retencin si se detiene e inicia de nuevo el flujo. Esto ocurre cuando se libera la presin de la columna, provocando que la fase mvil acuosa sea expulsada de los poros del material (donde se halla la mayor parte de la superficie)*2. Si los poros permanecen in-accesibles, los analitos pasan a travs de la columna sin ser retenidos. Este fenmeno se llama deshumectacin de los poros. Otro indicador claro que respalda esta teora es un cambio del marcador de volumen muerto. Las columnas Atlantis T3 fueron optimizadas con un cociente equilibrado entre el tamao de los poros y la densidad del ligando, para reducir al mnimo la deshumectacin de los poros.

*2 T.H. Walter, P. Iraneta y M. Capparella J. Chromatogr. A 2005, 075 177-183.

AtlAntis t3

exc elent e duRacin de la columna a pH bajo

Cuando se exponen a fases mviles con fuerte acidez (esto es, pH < 2,0), las columnas C18 tradicionales pueden presentar hidrlisis de la fase enlazada, que da lugar a una prdida gradual de retencin, prdida de eficiencia as como cambio de selectividad. El proceso de funcionalizacin T3 es resistente a la escisin del ligando gracias a una fijacin trifuncional de la fase C18 a la superficie de la partcula, lo cual procura una excepcional duracin de la columna a pH bajo.

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20 horas de exposicin a tfa al 0,5% a 60 c

% d

e p

rdid

a de

rete

nci

n pa

ra e

l met

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aben

o

excepcional foRma de los picos

Adems de la densidad intermedia del ligando, el equilibrio ptimo de forma de los picos y retencin que presentan las columnas Atlantis T3 es consecuencia de la baja concentracin de silanoles superficiales residuales. El proceso de recubrimiento final patentado de la T3 es notablemente ms efectivo en la reaccin con los sitios activos de los silanoles superficiales residuales que el trimetilsilano (TMS) tradicional, lo cual da lugar a una excelente forma de los picos y estabilidad.

1 2 34

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43,5

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5

1 2

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1 23

45

0 1 2 3 4 5 6 7 8 min

Atlantis T3

Agilent Zorbax SB-AqThermo

Thermo Hypersil Gold aQ

Phenomenex Synergi Hydro-RP

Shiseido Capcell PAK C18 AQ

Compuestos:1. Tiourea2. 5-fluorocitosina3. Adenina

4. Guanosina-5'-monofosfato5. Timina

Atlan

tis T3

SunFi

re C 1

8

Pheno

mene

x Sy

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o-RP

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pcell P

AK A

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mene

x Sy

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Polar

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Atlan

tis dC 1

8

Pheno

mene

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YMC H

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here

C 18

GL Sci

ences

Inert

sil O

DS-SP

YMC-P

ack O

DS AQ

[ ]7

AtlAntis t3

[ ]8

minimice el Riesgo con un Rendimiento fiable de las columnas

La evolucin de las prcticas correctas de fabricacin actuales (cGMP) dentro de los organismos reguladores ha estimulado a las industrias farmacu-ticas y de productos biolgicos a poner en prctica principios basados en la gestin de calidad y riesgos a lo largo de todo el proceso de desarrollo farmacutico. Con un estricto control del proceso de fabricacin, Waters est posicionado de manera singular como proveedor para rebajar los riesgos asociados con la variabilidad asociada a las columnas.

Las columnas Atlantis se fabrican en nuestras instalaciones certificadas cGMP, ISO 9001 e ISO 13485 para garantizar a los cientficos dedicados a la separacin que los resultados obtenidos hoy sern repetibles y reproducibles ao tras ao.

Lote A 5 m

Lote B 3 m

Lote C 3 m

Lote D 5 m

Lote E 3 m

Lote F 5 m

Nota: el cociente de longitud de columna (L) a tamao de partcula (Dp) fue escalado para mantener constante la resolucin. Las columnas Atlantis T3 eran de 4,6 x 150 mm, 5 m o de 4,6 x 100 mm, 3 m.

sist emas de calidad

Las organizaciones multinacionales estn limitando el nmero de opciones de columnas de LC disponibles para sus cientficos dedicados a separaciones cromatogrficas, mediante la evalua-cin previa de una serie de columnas frente a cierto conjunto de criterios de rendimiento, entre ellos la selec-tividad, la escalabilidad, la reproducibilidad, la robustez y la resistencia. Estos esfuerzos de armonizacin constituyen un intento de ofrecer una transferencia de mtodos simplifi-cada a lo largo de toda la organizacin, costes de consumi-bles controlados y predecibles, as como una reduccin de la diversidad de proveedores, con objeto de rebajar el riesgo.

Waters ha establecido la referencia del sector para la reprodu-cibilidad entre lotes. Como fabricante original de partculas de slice e hbridas, los procesos de fabricacin se vigilan y controlan meticulosamente para garantizar una definicin coherente y completa de los materiales a lo largo de la vida til del producto.

AtlAntis t3

0 1 2 3 4 5 6 7 8 min

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18

CondicionesSistema de LC: Sistema ACQUITY UPLC.Columna: ACQUITY UPLC HSS T3, 2,1 x 100 mm, 1,8 mReferencia: 186003539Fase mvil A: CF3COOH al 0,15% en H2OFase mvil B: CF3COOH al 0,02% en ACN:MeOH 75:25 (v/v)Gradiente: Tiempo %A %B 0 99,9 0,1 0,5 99,9 0,1 1,7 87,0 13,0 3,6 67,0 33,0 7,5 1,0 99,0 8,0 1,0 99,0 8,5 99,9 0,1 9,5 99,9 0,1 Caudal: 0,6 mL/minInyeccin: 1,0 LTamao del bucle: 2,0 LModo de inyeccin: Bucle parcial con sobrellenado de agujaTemp. de la columna: 30 CDeteccin: UV @ 254 nm.Velocidad de adquisicin: 20 HzConstante de tiempo: 0,2

Orden de elucin TR Resolucin USP 1. 4-aminofenol 0,858 - 2. Maleato 1,042 4,25 3. Fumarato 1,506 12,58 4. Fenilefrina 2,027 17,72 5. Paracetamol 2.340 10,71 6. Fenilpropanolamina 2,778 14,17 7. Feniramina 2,864 2,83 8. Doxilamina 2,939 2,62 9. Seudoefedrina 3,016 2,5110. Mepiramina 3,336 10,0811. Clorfenamina 3,622 8,9212. Bromofeniramina 3,782 4,8813. Guaifenesina 3,938 4,1114. cido acetilsaliclico 4,040 2,4215. 4-nitrofenol 4,310 6,3616. 4-cloroacetanilida 4,708 9,9317. Dextrometorfano 4,970 7,6918. Difenhidramina 5,022 1,6419. Clemastina 5,997 30,9520. Ibuprofeno 6,448 14,09Los picos 1, 15 y 16 son impurezas del paracetamol.

Referencia: E.S. Grumbach, D.M. Diehl, J.R. Mazzeo "Quantitation of Over-The-Counter Cold Medications Using UPLC Technology" Waters Application Note 2007, 5 pp; buscar 720002005EN en waters.com.

escalabilidad entRe platafoRmas tecnolgicas

Basadas en diferentes sustratos de partculas, las columnas Atlantis T3 y HSS T3 permiten lograr una selectividad y retencin similares en plata-formas tecnolgicas HPLC y UPLC, facilitando la transferencia de mtodos a lo largo de una organizacin.

la unin t3 permite la transferencia de Hplc a uplc

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Hplc Atlantis T3

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80% de reduccin del tiempo de anlisis

uplc ACQUITY UPLC HSS T3

Compuestos Tiempo de Resolucin retencin (min) USP1. Citosina 2,77 -2. 5-fluorocitosina 3,58 4,563. Uracilo 3,93 1,714. 5-fluorouracilo 4,59 3,415. Guanina 5,92 7,766. Timina 7,63 11,017. Adenina 8,39 4,70

Compuestos Tiempo de Resolucin retencin (min) USP1. Citosina 0,34 -2. 5-fluorocitosina 0,44 5,023. Uracilo 0,48 1,504. 5-fluorouracilo 0,56 3,175. Guanina 0,80 8,166. Timina 1,25 14,657. Adenina 1,33 3,50La unin T3 permite la transferencia de mtodos de HPLC a UPLC.

Selectividad similar

[ ]9

Rendimiento de las columnas t3 con la t ecnologa uplc

Las columnas ACQUITY UPLC HSS T3 utilizan la misma tecnologa de fase enlazada y recubrimiento final que las columnas de HPLC Atlantis T3, ofreciendo as la misma versatilidad y rendimiento para mezclas de diversos analitos, independientemente de la plataforma de separacin.

[ ]12

cRomatogRafa de inteRaccin HidRfila (Hilic)

La HILIC es una tcnica cromatogrfica alternativa que ofrece una selectividad complementaria a la fase reversa, y con frecuencia retiene especies muy polares que no pueden ser retenidas por medios tradicionales. Las columnas de slice Atlantis HILIC han sido diseadas para retener molculas orgnicas demasiado polares para ser retenidas por fase reversa*3. A diferencia de las fases mviles altamente acuosas necesarias para la retencin polar en las separaciones de fase reversa, las columnas de slice Atlantis HILIC emplean fases mviles de elevada volatilidad (> 80% orgnicas) que son ideales para la respuesta y la sensibilidad de la espectrometra de masas (MS). Adems, la compatibilidad directa con los eluatos de SPE altamente orgnicos aumenta espectacularmente el nmero de muestras que se pueden manejar, incrementando as sustancialmente el rendimiento de la separacin.

*3 E.S. Grumbach et al. LCGC N. Am. 2004, 22, 1010-1023.

mejoR Ret encin paRa los compuestos polaRes

Los mecanismos de retencin de la HILIC son una compleja combinacin de particin, intercambio inico y enlaces de hidrgeno, dando lugar a una retencin mejorada para analitos polares*3,4. Las columnas de slice Atlantis HILIC, utilizadas en combinacin con fases mviles altamente orgnicas (> 80% de acetonitrilo), ocasionan la retencin de analitos que son simplemente demasiado polares para ser retenidos por cro-matografa de fase reversa tradicional.

*4 E.S. Grumbach et al. J. Sep. Sci. 2008, 31, 1511-1518.

0 1 2 3 4 5 min

0 1 2 3 4 5 min

NH

HN

O

OHNH2N

O

fase reversaFactor de retencin = 0

HilicFactor de retencin = 1,1

Atlantis HILIC Silica

Alantona

AtlAntis HiliC siliCA

las columnas estndaR paRa sepaRaciones Hil ic

Para obtener la mejor combinacin de forma de los picos y retencin, las columnas de slice Atlantis HILIC establecen el estndar del sector para las separaciones por HILIC.

1 2

1 2 3 4 min0

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1

2

12

1 2 Atlantis HILIC Silica 3 m

XBridge HILIC 3,5 m

Phenomenex Luna HILIC 3 m

Tosoh TSKgel Amide-80 3 m

SeQuant ZIC HILIC 3,5 m

v0 = 0.37 min

v0 = 0.35 min

v0 = 0.29 min

v0 = 0.29 min

v0 = 0.34 min

[ ]10

1. Acetilcolina (Ach) 2. Colina (Ch)

ON+

O

HON+

[ ]12

AtlAntis HiliC siliCA

Respuesta mejoRada de la espectRometRa de masas

La utilizacin de HILIC ha adquirido popularidad, principalmente debido a la amplia adopcin de la espectrometra de masas como detector, y a la necesidad de mejorar la sensibilidad para la cuantificacin de analitos polares. A diferencia de la fase reversa, que utiliza fases mviles altamente acuosas para inducir la retencin, la HILIC emplea una fase mvil rica en acetonitrilo. Esta fase mvil altamente orgnica se desolvata con facilidad, permitiendo una mejora en la eficiencia de la ionizacin y en la respuesta de la espectrometra de masas. Por estos motivos, la HILIC se ha convertido en una tcnica popular para los laboratorios bioanalticos.

100

%

2

1

0,5 1,0 1,5 2,5

1,92

1,53

2,0 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 min

0

100 1,84

1

2100

1 2 3 4 5 min0

%

0

%

1,84 2,181 2

2,18

0,5 1,0 1,5 2,52,0 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0 min

fase reversa0 50% ACN

HilicAtlantis HILIC Silica

95 50% acn

mayoR Rendimiento de anlisis

Cuando se utilizan mtodos de extraccin en fase slida (SPE) para la limpieza de las muestras, con frecuencia se utiliza una fraccin altamente orgnica, para eluir selectivamente del dispositivo los analitos de inters. Antes de inyectar esta fraccin en una columna de fase reversa, hay que evaporar primero la fraccin orgnica y despus reconstituirla con una porcin de disolvente acuoso. Estos dos pasos son frecuentemente los pasos ms largos de un procedimiento de SPE. Con las columnas de slice Atlantis HILIC, la fraccin altamente orgnica se puede inyectar directamente, con lo que se elimina la necesidad de evaporacin y se aumenta el rendimiento del anlisis.

1.49 1.84

0

100

0.50.0 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 min

%

21

N H

HO

O H

H3C

HOCH3

CH3H3C NH

OH

OH

1. Albuterol 2. Bametan

1. Bametan

2. Albuterol

HO

HN

OH

HO

HO

OH HN

[ ]11

Elucin

75 L de IPA:ACN 60:40 con HCOOH al 2%

Lavado 1

1200 L de MeOH al 5% en H2O

Carga 75 L de plasma enriquecido, 75 L de

estndar interno con NH4OH al 2%

Broncodilatador en plasma de rata

Placa Oasis HLB Elution

Acondicionamiento/equilibrado

200 L MeOH/200 L H2O

Inyeccin directa del eluato

Elimina prolongados pasos de evaporacin y reconstitucin.

[ ACQUITY UPLC SYSTem ACCeSSorIeS ]

[ ]12

EstrAtEgiA dE rEtEnCin polAr

gua para retener compuestos polares

Atlantis T3

Retencin insuficiente?

Tcnica de separacin alternativa, como

pares inicos o intercambio inico.

Si

Si

Bsico cido o neutro

No No

Si

No

El compuesto polar es cido,

neutro o bsico?

Atlantis T3o

XBridge C18

Puede ser retenido por fase

reversa?

Suficiente sensibilidad para espectrometra

de masas?

Atlantis HILIC Silica o

XBridge HILIC

Puede ser retenido por fase

reversa?

Si

leyenda:

atlantis t3 = pH bajo (pH 3), altamente acuosa (> 95%).

xbridge c18 = pH alto (pH 10), altamente acuosa (> 95%).

atlantis Hilic silica = pH bajo (pH 3), formiato amnico 10 mM con cido frmico al 0,2% en 95% ACN:5% H2O.

xbridge Hilic = pH medio (pH 5), acetato amnico 10 mM con cido actico al 0,02% en 95% ACN:5% H2O.

Cuaderno de aplicaciones de las columnas Atlantis, referencia bibliogrfica 720000472EN.

Nota tcnica de las columnas Atlantis T3 y ACQUITY UPLC HSS T3 , referencia bibliogrfica 720001887EN.

Topics in Liquid Chromatography: Part 1. Designing a Reversed-Phase Column for

Polar Compound Retention White Paper, referencia bibliogrfica 720001889EN.

Folleto de las columnas XBridge, referencia bibliogrfica 720001255EN.

Folleto de las columnas OBD, referencia bibliogrfica 720002336EN.

Tabla interactiva de selectividad de las columnas de fase reversa de Waters www.waters.com/selectivitychart

Calculadora para HPLC preparativa OBD www.waters.com/prepcalculator

para obtener una copia en formato pdf de la bibliografa, buscar la referencia en www.waters.com.

Referencias bibliogrficas

[ ]12

[ ACQUITY UPLC SYSTem ACCeSSorIeS ]

[ ]13 [ ]14[ ]13

Columnas analticas Atlantis

Dimensiones Tipo Tamao de partcula T3 HILIC Silica

1,0 x 50 mm Columna 3 m 186003713 1860020031,0 x 150 mm Columna 3 m 186003714 2,1 x 10 mm Precolumna 3 m 1860037561 18600200512,1 x 15 mm DC 3 m 1860020072,1 x 20 mm Precolumna 3 m 2,1 x 20 mm IS Columna 3 m 186003715 2,1 x 30 mm Columna 3 m 186003716 1860020092,1 x 50 mm Columna 3 m 186003717 1860020112,1 x 100 mm Columna 3 m 186003718 1860020132,1 x 150 mm Columna 3 m 186003719 1860020153,0 x 20 mm IS Columna 3 m 186003720 3,0 x 50 mm Columna 3 m 186003721 1860020173,0 x 100 mm Columna 3 m 186003722 1860020193,0 x 150 mm Columna 3 m 186003723 3,9 x 20 mm Precolumna 3 m 1860037573 18600202133,9 x 50 mm Cartridge 3 m 3,9 x 100 mm Columna 3 m 3,9 x 150 mm Columna 3 m 4,6 x 20 mm Precolumna 3 m 1860037583 18600202334,6 x 20 mm IS Columna 3 m 186003724 4,6 x 30 mm Columna 3 m 186003725 1860020254,6 x 50 mm Columna 3 m 186003726 1860020274,6 x 75 mm Columna 3 m 186003727 4,6 x 100 mm Columna 3 m 186003728 1860020294,6 x 150 mm Columna 3 m 186003729 1860020311,0 x 50 mm Columna 5 m 186003730 1860020041,0 x 150 mm Columna 5 m 186003731 2,1 x 10 mm Precolumna 5 m 1860037591 18600200612,1 x 15 mm DC 5 m 1860020082,1 x 20 mm Precolumna 5 m 2,1 x 20 mm IS Columna 5 m 186003732 2,1 x 30 mm Columna 5 m 186003733 1860020102,1 x 50 mm Columna 5 m 186003734 1860020122,1 x 100 mm Columna 5 m 186003735 1860020142,1 x 150 mm Columna 5 m 186003736 1860020163,0 x 20 mm IS Columna 5 m 186003737 3,0 x 50 mm Columna 5 m 186003738 1860020183,0 x 100 mm Columna 5 m 186003739 1860020203,0 x 150 mm Columna 5 m 186003740 3,0 x 250 mm Columna 5 m 186003741 3,9 x 20 mm Precolumna 5 m 1860037603 18600202233,9 x 50 mm Cartridge 5 m 3,9 x 100 mm Columna 5 m 3,9 x 150 mm Columna 5 m 4,6 x 20 mm Precolumna 5 m 1860037613 18600202434,6 x 20 mm IS Columna 5 m 186003742 4,6 x 30 mm Columna 5 m 186003743 1860020264,6 x 50 mm Columna 5 m 186003744 1860020284,6 x 75 mm Columna 5 m 186003745 4,6 x 100 mm Columna 5 m 186003746 1860020304,6 x 150 mm Columna 5 m 186003747 1860020324,6 x 250 mm Columna 5 m 186003748 186002033

Kits de columnas Atlantis para validacin de mtodos

Dimensiones Tamao de partcula T3 HILIC Silica

4,6 x 150 mm 3 m 186003751 1860023154,6 x 150 mm 5 m 186003754 1860023144,6 x 250 mm 5 m 186003755 186002316

1 Requiere soporte para precolumnas Sentry WAT097958.2 Requiere soporte para precolumnas Sentry 186000262.3 Requiere soporte para precolumnas Sentry WAT046910.

4 Requiere conectores para cartuchos WAT037525. Uso previsto

Tipo de partcula Tipos de qumica disponibles Intervalo de pH Presin nominal mxima Tamao de partcula Dimetro/volumen de poros Superficie

Caractersticas de la fase estacionaria

HPLC

Atlantis Silica T3, dC18, slice HILIC

T3: 2-8; dC18: 3-7; slice HILIC: 1-5 6000 psi [400 bar]

3, 5, 10 m 100/1,0 mL/g

330 m2/g

Atlantis Prep Columns Dimensiones Tipo Tamao de partcula T3 HILIC

10 x 10 mm PreColumnaa 5 m 1860036951 10 x 50 mm Columna 5 m 186003691 10 x 100 mm Columna 5 m 186003692 10 x 150 mm Columna 5 m 186003693 10 x 250 mm Columna 5 m 186003694 19 x 10 mm PreColumna 5 m 1860036992 1860039562 19 x 50 mm Columna OBD 5 m 186003696 186003957 19 x 100 mm Columna OBD 5 m 186003697 186003958 19 x 150 mm Columna OBD 5 m 186003698 186003959 19 x 250 mm Columna OBD 5 m 186004026 30 x 50 mm Columna OBD 5 m 186003700 186003960 30 x 75 mm Columna OBD 5 m 186003701 30 x 100 mm Columna OBD 5 m 186003702 186003961 30 x 150 mm Columna OBD 5 m 186003703 186003962 50 x 50 mm Columna OBD 5 m 186004080 50 x 100 mm Columna OBD 5 m 186004081 50 x 150 mm Columna OBD 5 m 186004082 10 x 10 mm PreColumna 10 m 1860037061 10 x 150 mm Columna 10 m 186003704 10 x 250 mm Columna 10 m 186003705 19 x 10 mm PreColumna 10 m 1860037102 19 x 50 mm Columna OBD 10 m 186003707 19 x 150 mm Columna OBD 10 m 186003708 19 x 250 mm Columna OBD 10 m 186003709 30 x 150 mm Columna OBD 10 m 186003711 30 x 250 mm Columna OBD 10 m 186003712 50 x 50 mm Columna OBD 10 m 186004083 50 x 100 mm Columna OBD 10 m 186004084 50 x 150 mm Columna OBD 10 m 186004085 50 x 250 mm Columna OBD 10 m 186004086

Descripcin Referencia

Soporte para cartuchos de 10 x 10 mm 289000779 Soporte para cartuchos de 19 x 10 mm 186000709Junta trica de repuesto, 7,8 mm, 2/paq. 700001019Junta trica de repuesto, 10 mm, 2/paq. 700001436Junta trica de repuesto, 19 mm, 2/paq. 700001020

Soportes para cartuchos de purificacin y aislamiento

1 Requiere soporte para precolumnas preparativas de 10 x 10 mm 289000779.

2 Requiere soporte para precolumnas preparativas de 19 x 10 mm 186000709.

INformACIN PArA PedIdoS

[ ]13

[ ACQUITY UPLC SYSTem ACCeSSorIeS ]

[ ]14

Dimensiones Tipo Tamao de partcula T3 HILIC

10 x 10 mm PreColumnaa 5 m 1860036951 10 x 50 mm Columna 5 m 186003691 10 x 100 mm Columna 5 m 186003692 10 x 150 mm Columna 5 m 186003693 10 x 250 mm Columna 5 m 186003694 19 x 10 mm PreColumna 5 m 1860036992 1860039562 19 x 50 mm Columna OBD 5 m 186003696 186003957 19 x 100 mm Columna OBD 5 m 186003697 186003958 19 x 150 mm Columna OBD 5 m 186003698 186003959 19 x 250 mm Columna OBD 5 m 186004026 30 x 50 mm Columna OBD 5 m 186003700 186003960 30 x 75 mm Columna OBD 5 m 186003701 30 x 100 mm Columna OBD 5 m 186003702 186003961 30 x 150 mm Columna OBD 5 m 186003703 186003962 50 x 50 mm Columna OBD 5 m 186004080 50 x 100 mm Columna OBD 5 m 186004081 50 x 150 mm Columna OBD 5 m 186004082 10 x 10 mm PreColumna 10 m 1860037061 10 x 150 mm Columna 10 m 186003704 10 x 250 mm Columna 10 m 186003705 19 x 10 mm PreColumna 10 m 1860037102 19 x 50 mm Columna OBD 10 m 186003707 19 x 150 mm Columna OBD 10 m 186003708 19 x 250 mm Columna OBD 10 m 186003709 30 x 150 mm Columna OBD 10 m 186003711 30 x 250 mm Columna OBD 10 m 186003712 50 x 50 mm Columna OBD 10 m 186004083 50 x 100 mm Columna OBD 10 m 186004084 50 x 150 mm Columna OBD 10 m 186004085 50 x 250 mm Columna OBD 10 m 186004086

2009 Waters Corporation. Waters, The Science of Whats Possible, Atlantis,

SunFire, UPLC, ACQUITY UPLC, XBridge, Oasis, IS y OBD son marcas comerciales de

Waters Corporation. Todas las dems marcas comerciales pertenecen

a sus respectivos propietarios.

720002861ES Marzo de 2009 KK-WA

Austria y exportacin en Europa (Europa central sudoriental, CEI y Oriente Medio) 43 1 877 18 07

Australia 61 2 9933 1777

Blgica 32 2 726 1000

Brasil 55 11 5094-3788

Canad 1 800 252 4752 x2205

China 86 21 6879 5888

CEI/Rusia +7 495 3367000

Repblica Checa 420 2 617 1 1384

Dinamarca 45 46 59 8080

Finlandia 09 5659 6288

Francia 33 1 30 48 72 00

Alemania 49 6196 400600

Hong Kong 852 29 64 1800

Hungra 36 1 350 5086

India y subcontinente indio 91 80 2837 1900

Irlanda 353 1 448 1500

Italia 02 265 0983

Japn 81 3 3471 7191

Corea 82 2 820 2700

Mxico 52 55 5200 1860

Pases Bajos 31 76 508 7200

Noruega 47 63 84 60 50

Polonia 48 22 833 4400

Puerto Rico 1 787 747 8445

Singapur 65 6273 1221

Espaa 34 93 600 9300

Suecia 46 8 555 11 500

Suiza 41 56 676 70 00

Taiwn 886 2 2543 1898

Reino Unido 44 208 238 6100

Todos los dems pases: Waters Corporation U.S.A. 1 508 478 2000

1 800 252 4752

www.waters.com

oficinas de ventas

El sistema de gestin de calidad de las instalaciones de fabricacin de Waters en Taunton, Massachusetts y en Wexford, Irlanda, cumple los estndares de gestin de calidad y garanta de calidad de la norma internacional ISO 9001:2000. El sistema de gestin de calidad de Waters es auditado peridicamente por el organismo de registro para garantizar su cumplimiento.