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FAMILIA: ENTEROBACTERIAS BACILOS GRAM NEGATIVOS

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Page 1: YERSINIA

FAMILIA:ENTEROBACTERIAS

BACILOS GRAM NEGATIVOS

Page 2: YERSINIA

Enterobacterias

A pesar de la complejidad de esta familia, menos de 20 especies son las responsables de más del 95% de las infecciones.

Producen una gran variedad de enfermedades en el ser humano:• 30% al 35% de las septicemias, • más del 70% de las infecciones

del aparato urinario (IAU) • Y muchas infecciones

intestinales.

Page 3: YERSINIA

Enterobacterias-GENERALIDADES

Microorganismos que se asocian siempre a enfermedad: Salmonella typhi, Shigella, Yersinia.

Forman parte de la microflora comensal normal

y pueden producir infecciones oportunistas: Escherichia coli, Klebsiella

pneumoniae, Proteus mirabílis

Microorganismos comensales, pero se pueden convertir en patógenas cuando adquieren genes con factores de virulencia presentes en plásmidos, bacteriófagos o islas de patogenicidad: E. coli asociada a gastroenteritis.

Page 4: YERSINIA

Enterobacterias - MORFOLOGÍA

Son bacilos gramnegativos de tamaño intermedio (0,3-1 x 1-6

µm.)

No esporulado

s.

Comparten un antígeno común

(antígeno común

enterobacteriano).

Pueden ser inmóviles o móviles con

flagelos perítricos.

Page 5: YERSINIA

Enterobacterias - CULTIVOLa familia Enterobacteriaceae tiene unos requerimientos nutricionales sencillos:fermentan la glucosa,

reducen los nitratos,

catalasa-positivos,

oxidasa-negativos.

La ausencia de actividad de CITOCROMO OXIDASA es una característica importante, debido a que se puede determinar rápidamente mediante una sencilla prueba, y se utiliza para diferenciar a las enterobacterias de otros bacilos gramnegativos fermentadores y no fermentadores.

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CITOCROMO OXIDASA

La reacción positiva la indica un color azul-violeta intenso antes de 10 segundos.

La imagen muestra varias bacterias que carecen de citocromo c oxidasa terminal y dos que las poseen

Page 7: YERSINIA

Enterobacterias - CULTIVO

Una gran parte de las muestras para investigar e identificar enterobacterias son materiales fecales, y en general, se trata de identificar enteropatógenos.

Por esta razón se han descrito tres tipos de medios de cultivo:

Page 8: YERSINIA

Enterobacterias - CULTIVO

Medios diferenciador

es:Permiten el

crecimiento de enteropatógenos y

saprobios, se preparan con lactosa,

sales biliares y un indicador (eosina, azul

de metileno, el rojo neutro). No se debe considerar que las

bacterias son enteropatógenas por

no fermentar la lactosa.

1. Medio de agar eosina y azul de metileno 2.Medio de Agar-

MacConkey 3.Medio de agar

desoxicolato

Medios selectivos:

Inhiben el crecimiento de los enterosaprobios y

favorecen el desarrollo de los enteropatógenos

debido al alto contenidode sales biliares

1. Agar Salmonella-Shigella

2. Agar desoxicolato-citrato

3. Agar Xilosa-lisina-desoxicolato

Medios enriquecidos:

Contiene mayor variedad de nutrientes

para favorecer el crecimiento de cepas difíciles. Son cepas

lactosa negativas que se subcultivan para

purificar la cepa

1. Agar tetratinato de Muller

2. Agar verde brillante y rojo fenol y agar selectina

Page 9: YERSINIA

Enterobacterias -ESTRUCTURA ANTIGÉNICA.

La clasificación serológica de

las enterobacterias se basa en tres grandes

grupos de antígenos:

Somáticos O

Capsulares K

Flagelares H.

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Enterobacterias-PATOGENIA

Endotoxinas: es un factor de virulencia que comparten las bacterias gramnegativas aerobias y algunas anaerobias. Muchas de las manifestaciones sistémicas de las infecciones por bacterias gramnegativas se inician por la endotoxina.

Cápsula: las enterobacterias encapsuladas se protegen de la fagocitosis mediante los antígenos capsulares hidrofílicos, los cuales repelen la superficie hidrofóbica de la célula fagocítica.

Variación de fase antigénica. La expresión del antígeno K y del antígeno H están bajo control genético del microorganismo. Cada uno de estos antígenos puede NO expresarse en absoluto (variación de fase), una característica que protege a las bacterias de la destrucción celular mediada por anticuerpos.

Exotoxinas: casi todas son productos que funcionan como enterotoxinas y pueden ser termolábiles o termoestables.Factores de adherencia: fimbrias colaboran a la adherencia de la bacteria a la superficie del huésped.Bacteriocinas: son sustancias bactericidas contra cepas de la misma especie, pero no contra sí mismas; las principales son colicina y marcelina.

FACTORES DE VIRULENCIA:

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Enterobacterias - CLASIFICACIÓN

Cepas fermentadoras de lactosa

Escherichia,Klebsiella, Enterobacter,

Citrobacter y Serratía

Cepas que no fermentan lactosa o lo hacen lentamente

Proteus, Salmonella,

Shigella y Yersinia spp.

Las bacterias de esta familia no pueden clasificarse en base a la coloración Gram, puesto que todos sus miembros se presentan con la misma forma y afinidad tintorial.

Las características de las colonias de estos microorganismos en los diferentes medios se han utilizado para distinguir a los miembros más frecuentes de la familia Enterobacteriaceae.

Por ejemplo, la capacidad de fermentar lactosa se ha utilizado para distinguir a:

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YERSINIA

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YERSINIA- GENERALIDADESGénero Yersinia formado por 11

especies.

Y. pestis, Y. enterocolítica, Y. pseudotuberculosis

PATÓGENOS HUMANOS.

Las enfermedades causadas por cualquiera de estas especies se

consideran INFECCIONES ZOONÓTICAS que con frecuencia afectan roedores, pájaros y otros animales, siendo el hombre un

hospedero accidental.

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YERSINIA- GENERALIDADES

Y. pestis (agente causal de la peste) y Y.

Pseudotuberculosis (agente causal de adenitis

mesentérica), son raramente identificadas y

en nuestro país no hay aislamientos reportados.

Por el contrario Y. Enterocolítica en las

últimas dos décadas ha sido reportada como importante causa de

enteritis y enfermedad diarreica.

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YERSINIA- MORFOLOGÍA

NO FERMENTADORES DE LACTOSA.

Bacilos gramnegativos tinción bipolar anaerobios facultativos.Pleomórficos

(se observa sobretodo en Y. Pestis).

Son bacterias móviles por flagelos polares o perítricos.

Y. pestis está cubierta por una cápsula proteica.

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YERSINIA- MORFOLOGÍA

Psicrófilas

Algunas especies (p. ej., Y. enterocolitica) pueden crecer a bajas temperaturas (p. ej., pueden crecer hasta alcanzar un número elevado en los productos alimentarios o sanguíneos contaminados y refrigerados).

La membrana externa hace al microorganismo sensible a la desecación.

El lipopolisacárido consiste en un polisacárido externo somático O, un núcleo polisacárido (antígeno común) y un lípido A(endotoxina).

Page 17: YERSINIA

YERSINIA- CULTIVOYersenia crece igual en agar-sangre, agar-nutrientes o MacConkey agar.

Las colonias son pequeñas, puntiformes.

Y. Pestis -Y. Seudotuberculosis se asemejan en su crecimiento, aunque esta última se desarrolla más rápidamente que Y.Pestis. Ambas crecen a 37°C.

Y. Enterocolica crece mejor a 25°C; se observa como colonias muy pequeñas, translúcidas y lisas. En medios diferenciales y selectivos se aprecian colonias no fermentadoras de la lactosa, muy pequeñas.

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YERSINIA- PATOGENIA

YERSINIA ENTEROCOLÍTICA Y PSEUDOTUBERCULOSA.

Los bacilos se ingieren por alimentos contaminados y una vez que se ha ingerido este, llega a la mucosa del ileón. Después son transportados a la lámina propia donde da lugar a una respuesta inflamatoria que se presenta como gastroenteritis o una linfadenitis mesentérica. Y. enterocolica no tiene la capacidad de

crecer en el fagolisosoma. Por tanto es extracelular.Antiguamente se pensaba que también se daba esto en Y. pseudotuberculosis, pero en la actualidad se ha demostrado que tiene la capacidad de sobrevir dentro de los macrófagos.

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YERSINIA- PATOGENIA

YERSINIA PESTIS.

En la pared bacteriana se encuentran los antígenos V-W y F1, cuya función es evitar la fagocitosis por parte de los macrófagos y otras células fagocíticas.

Las cepas virulentas de Y. pestis producen y secretan una exotoxina denominada toxina murina. Los síntomas que produce en el ratón son similares a los que produce en humanos.

Y. pestis también produce una endotoxina altamente inmunogénica que puede dar lugar a una potente respuesta inmune en humanos.

Las cepas invasivas tiene la capacidad de producir antígenos V-W. Y. pestis tiene la capacidad de crecer en el fagolisosoma.

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YERSENIA-MANIFESTACIONES CLÍNICAS.

Yers

inia

p

esti

s. Peste bubónica

Peste neumónica

Peste septicémica

fiebre postración y muerte en 2

días.

Periodo aproximado de incubación de 2 a 7 días

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YERSINIA-MANIFESTACIONES CLÍNICAS.

Peste bubónica

Período de incubación no superior a 7 días desde que la persona ha sido picada por una pulga infectada.

Los pacientes presentan: fiebre alta y un bubón doloroso en la ingle o en

la axila. El bubón es un ganglio linfático donde se

multiplica el bacilo y de allí se difunde al hígado, bazo y los pulmones.

La bacteriemia se desarrolla rápidamente en ausencia de tratamiento, y hasta un 75% de los afectados fallece como consecuencia de ella.

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BACTEREMIA

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Peste neumónica

Período de incubación de 2 o 3 días.

Inicialmente, estos pacientes presentan fiebre y malestar general, y los síntomas pulmonares debutan en el plazo de 1 día.

Estos pacientes presentan elevada infectividad; la transmisión de una persona otra ocurre por medio de partículas aerosolizadas.

La tasa de mortalidad de los pacientes con peste neumónica no tratada supera el 90%.

YERSINIA-MANIFESTACIONES CLÍNICAS.

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YERSINIA-MANIFESTACIONES CLÍNICAS.

Yers

inia

en

tero

colíti

ca.

Periodo de

incubación de 4 a 6 días

(rango de 1 a 14 días).

Manifestaciones

Intestinales

Enterocolitis, con fiebre en niños menores de 5 años.Cursa con heces con sangre en 25 a 30% de casos, en algunas ocasiones se presenta con

enterocolitis necrotizante.Cuadro de seudo-apendicitis en niños mayores y jóvenes, con fiebre,

dolor abdominal en el cuadrante inferior derecho y leucocitosis.

Reportes de ulceras y perforaciones intestinales, intususcepción,

megacolon toxico, colangitis y trombosis venosa mesentérica.

Manifestaciones

extraintestinales.

Faringitis exudativa, adenitis cervical, celulitis, conjuntivitis, meningitis,

piomiositis, neumonía e IVU.

Bacteriemias en niños menores de 1 año o en pacientes inmunodeprimidos

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YERSINIA-MANIFESTACIONES CLÍNICAS.

Yers

inia

p

seu

dotu

berc

ulo

si

s.

Periodo de incubación igual que la enterocolítica.

Incluye fiebre, eritema cutáneo escarlatiniforme, y síntomas

abdominales como pseudoapendicitis, adenitis

mesentérica o ileitis.

Rara vez ocurre, eritema nodoso, septicemia y efusiones

pleurales o articulares

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YERSINIA- EPIDEMIOLOGÍA

Y. pestis, se distinguendos formas de infección: la peste urbana, en la que las ratas constituyen el reservorio natural, y la peste salvaje, que produce infecciones en ardillas, conejos, ratas decampo y gatos domésticos. Todas las infeccione

s por Yersinia

son zoonóticas, de modo que el ser humano

constituye un

anfitrión accidental.

Y. enterocolitica, son los reservorios naturales los cerdos, los roedores, el ganadoy los conejos. Tiene distribución mundial pero su prevalencia es mayor en clima frío.

Y. seudotuberculosis. Reservorios naturales los roedores, los animales salvajes y las aves de caza.La infección por yersenia se da x:1. Ingesta de alimentos o agua contaminados, contacto directo o indirecto con animales portadores. 2. En Y. pestis a través de la picadura de pulgas infectadas y mordedura de ratones.

La transmisión interhumana es rara,

excepto por vía de

aerosoles.

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YERSENIA-

Page 30: YERSINIA

YERSINIA- DIAGNÓSTICOYERSINIA ENTEROCOLÍTICA.

  Muestras: heces fecales recién emitidas. Tinción de Gram: Negativo y búsqueda de PMN en heces, esto

nos sugiere la presencia de una bacteria invaasiva como causa de diarrea, y por tanto es útil su uso en el diágnostico (no permite identificar a Yersinia).

Cultivo: Es el diagnóstico definitivo y confirmatorio. Las colonias crecen en 48 horas a temperatura de 25 a 28°C. Son colonias pequeñas, no fermentadoras de lactosa.

La respuesta ante los citratos presentados es la siguiente: dominación de la urea. fenilalanina negativa citrato no utilizado como fuente de carbono. motilidad positiva a 25°C y negativa 37°C

Estudios serológicos: de aglutinación en lámina para la separación en serotipos según los antígenos O y H.

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YERSINIA- DIAGNÓSTICOYERSINIA PSEUDOTUBERCULOSA.

  Muestras: sangre, pus, esputo, LCR y aspiraciones de ganglios.  Tinción de gram: se puede observar su morfología típica (bacilo en

forma de alfiler)  Inmunofluorescencia: da un diagnóstico rápido y específico.  Cultivo: colonias puntiformes, se cultiva en los medios

convencionales, siguiendo los mismos métodos que los descritos para Y. enterocolítica.

  Estudios serológicos: El diagnóstico serológico para detectar

anticuerpos se hace por métodos de inmunoensayo enzimático (ELISA), aglutinación o hemaglutinación.

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 YERSINIA PESTIS.

Muestras: aspirado de los bubones, la sangre o el esputo. La infección también se puede confirmar examinando muestras de suero obtenidas en las fases tempranas y tardías de la infección (seroconversión).

Cultivo: medio de agar-sangre a 28 °C y hemocultivo Prueba de lisis del bacteriófago Pruebas Serológicas

Pruebas de Aglutinación Pruebas de hemaglutinación pasiva (PHA) e inhibición de la

hemaglutinación (HI) Inmunoensayo enzimático (ELISA, EIA)

Suero humano Prueba de inmunoglobulina total (IG) Prueba de captura de IgM

Técnicas de inmunofluorescencia directa (IFD)

YERSINIA- DIAGNÓSTICO

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YERSINIA- TRATAMIENTO

Y. Enterocólica: La mayoría se resuelvan espontáneamente. Mantener la nutrición e hidratación. En diseminación hematógena y siembra a otros órganos, se ha recomendado el uso de aminoglucósidos unidos a cefalsoporinas de tercera generación, las fluoroquinolonas, rifampicina y trimetropin sulfametoxazol.

Y. Pseudotubercu

losis:

ampicilina, cloranfenicol, tetraciclinas y aminoglucósi

dos.

Y. Pestis:antibióticos usados en el tratamiento son: en la forma bubónica, la estreptomicina intramuscular; en la forma septicémica: el cloranfenicol intravenoso. En los contactos se recomienda el uso de tetraciclina o trimetropin-sulfametoxazol.

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