UNIVERSIDAD NACIONAL DEL LITORALFACULTAD DE Cs. VETERINARIASCÁTEDRA DE FISIOLOGÍA I TRABAJO COMPLEMENTARIO N° 7

TEMA: LA FUNCIÓN RENAL

OBJETIVOS:Que mediante esta clase el alumno logre:1. Conocer los mecanismos básicos del funcionamiento renal.2. Valorar la importancia del conocimiento profundo del tema para la comprensión

de la homeocinesis.3. Reconocer los valores normales de cada uno de los componentes del sedimento

urinario.4. Evaluar las características físicas de la orina.5. Interpretar químicamente los diferentes elementos que conforman la orina.6. Recalcar la importancia de las características fisiológica de la orina, que nos

sirven como base para la evaluación de otros parámetros.7. Destacar la valoración normal de la orina en las diferentes especies domésticas.8. Observar como se evalúa indirectamente el funcionamiento del umbral renal para

una sustancia.

ACTIVIDAD DEL ALUMNO:

Que el alumno asista con la debida indumentaria y materiales necesarios, requeridos por la cátedra para el correspondiente trabajo práctico. Escuchar la exposición del docente. Responder al interrogatorio oral durante la exposición. Observar las demostraciones. Interrogar al docente, ayudando a aclarar o enriquecer el tema.

MATERIALES:Perro macho. Orina. Sondas nasogástricas (K-31 y K-33).Equipo de electroestimulación o anestésico general. Tiras reactivas. Reactivos (ácido nítrico, ácido sulfosalicílico al 5 %. etc) Portaobjetos .Pipetas. Centrífuga. Tubos de centrífuga. Vasos de precipitado. Microscopio. Colorantes .Solución de glucosa al 25% (estéril).Perfus, buterfly. Jeringas y agujas. Vaso de precipitado (500 ml).Tijera, banda de goma. Desinfectante. Cintas de DIASTIX, para medir la glucosa.

CONTENIDOS:Teóricos:Introducción. Importancia del tema. Circulación renal. Mecanismos de filtración. Importancia del conocimiento de la circulación para comprender la fisiología del riñón. Mecanismos de resorción. Histofisiología de las células tubulares de las distintas células de la nefrona. Mecanismos de excreción. Influencia de la circulación renal sobre estos mecanismos. Resorción de las distintas sustancias a lo largo de la nefrona.

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Mecanismo de contracorriente. De sodio y de urea. Importancia para la formación del volumen urinario. Cómo influye la circulación en este mecanismo.Regulación de la función renal. Mecanismos hormonales, neurohormonales, nerviosos, metabólicos, circulatorios.Integración del riñón al resto de los sistemas. Por ejemplo en la detoxicación de sustancias extrañas. Su íntima relación e interdependencia con los sistemas circulatorios, digestivo (hígado), respiratorio, y demás, para la mantención de la salud orgánica o homeocinesis.

Prácticos:El alumno observará:1. Sondaje uretral en canino macho.2. Canalización venosa con buterfly.3. Perfusión con solución glucosada hipertónica.4. Todo el proceso realizado bajo estimulación electrónica.

El alumno realizará:1. Medición de los niveles de glucosa en orina, antes y después de la perfusión de

glucosa.2. Analizar las características físicas.3. Medición de volumen.4. Observación de color, olor, turbidez, consistencia y densidad.5. Medir utilizando tiras reactivas las distintas variantes químicas (pH, glucosa,

proteínas, cuerpos cetónicos, etc.) del fluido urinario.6. Reconocimiento de las células epiteliales que conforman las distintas partes del

tracto urinario.7. Identificación de glóbulos blancos en el sedimento.8. Reconocer la presencia de cilindros mas comunes en la orina normal.9. Identificación de los diferentes tipos de cristales presentes en la orina normal,

teniendo como base el tipo de pH de la orina (ácidas - alcalinas) sobre la cual se realiza el examen.

FUNCION RENAL

Para evaluar la función renal en la práctica diaria se utiliza en primera instancia el análisis de orina. En los casos especiales se recurre a las pruebas de aclaramiento plasmático. El análisis de orina, que comprende: a) observación de características físicas como color, volumen, densidad, y b) determinación química de algunas sustancias, proteínas, glucosa, sangre, etc., puede suministrar valiosa información acerca del estado funcional renal. Por ej., el volumen y peso específico de la orina informan acerca de la capacidad de concentrar o diluir la orina; las proteínas solo se filtran en muy pequeña cantidad y se absorben luego, por lo tanto solo se encontrarán en orina en los casos patológicos; algo semejante ocurre con la glucosa. La determinación química de diversas sustancias en sangre también pueden indicar datos sobre el funcionamiento renal, por ej., urea y creatinina. Como complemento de estas pruebas se utilizan también los Rayos X y los radioisótopos.

1. ANÁLISIS DE ORINA2

RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA:La realización de un análisis de orina comienza con una adecuada técnica de recolección. El primer paso consiste en utilizar envases limpios y secos, de preferencia descartables estériles (disminución del riesgo de contaminación).Existen diversos métodos:a) Durante la micción espontánea. Se utiliza la fracción del medio de la micción, se descarta la primer orina por posible contaminación con bacterias y secreciones propias de las vías genitourinarias.Como riesgo existe la contaminación externa (impide la utilización de urocultivos).El volumen puede ser escaso.Como ventaja se evitan traumas en las vías urinarias.b) Por compresión manual de vejiga. Se realiza en especies de difícil sondaje (gatos). las ventajas y desventajas son las mismas que en el método anterior.c) Por cateterización. Como ventaja existe escasa o nula contaminación (ideal para urocultivo), como desventaja no se puede realizar en especies de difícil acceso uretral.Materiales:* Felinos (sonda PC 40)* caninos (sonda nasogástricas K 31 y K 33). d) Por punción vesical o cistocentesis. Muestras ideales para urocultivos.Precaución: no lesionar otros órganos.

PROCESAMIENTO:En muestras en fresco antes de los 30 minutos de recolectada. Se evita de esta forma la disolución de cilindros y células, degradación de glucosa, etc.Conservantes por ejemplo una gota de formalina al 40% cada 30 ml. de orina.

ANÁLISIS FÍSICO:1- Volumen: Influido por variables como: a) tamaño del paciente (peso y superficie corporal). b) alimentación. c) humedad, etc.

Volumen urinario normal y frecuencia de micción en diferentes especies:

ESPECIE VOLUMEN / DIA FRECUENCIABOVINO 6-12 litros 5-8 veces/ díaEQUINO 6-12 litros 5-8 veces /díaCERDO 2-3 litros 2-3 veces/día

OVEJAS -CABRAS 2-5 litros 1-3 veces / díaCANINOS 0,5-2 litros(20-50

ml/kg/día)Machos : intervalos

frecuentes hembras: 4-5 veces /día

FELINOS 0,25-0,75litros (15-35ml/kg/día)

Varias veces por día

2- Color y turbidez:3

En la mayoría de las especies domésticas es de color amarillo ámbar, poco viscosa (acuosa), excepto en caballo que tiene gran contenido de moco y cristales de carbonato de calcio, tornándola turbia.

3- Densidad:Representa la capacidad renal para concentrar o diluir la orina.a) Bovino: 1025 - 1050b) Equino: 1025 - 1060c) Ovino y caprino: 1015 - 1070d) Cerdo: 1010 -1050e) Canino: 1016 - 1050f) Felino: 1016 - 1050

ANÁLISIS QUIMICO:1- pH:Este es modificado por el tipo de dieta.Especies carnívoras pH: ácido (5,5 - 6,0).Especies herbívoras pH orina: (7,0 - 8,0).

2- Proteínas:Orina normal: trazas de proteínas.Existen tres métodos para valorar las proteínas en la orina:a) Tira reactiva: impregnar esta con orina, al cabo de 60 segundos se observa. El resultado se expresa en mgrs/dl o bien de + a ++++. Mide únicamente albúminas.b) Método Heller: una a dos cm de ácido nítrico puro en un tubo de ensayo mas igual cantidad de orina, cuidando que no se mezclen las dos fases. En la zona de contacto se producirá un anillo blanco en caso de posibilidad que se expresa de + a ++++.c) Método sulfosalicílico: se mezclan volúmenes iguales de ácido sulfosalicílico al 5% y orina en un tubo de ensayo. en caso de positividad se producirá una turbidez detectable sobre fondo negro.Grado de turbidez:* 5 mgrs/dl: +* 40 - 100 mgrs/dl: ++* 200 - 500 mgrs/dl:+++* mas de 500 mgrs/dl: ++++. Este último se caracteriza por floculación.

3- Glucosa:No hay presencia de glucosa en orinas normales. Cuando se sobrepasan los 180 mgrs/dl (umbral renal para la glucosa) aparecerá en orina.

4- Cuerpos cetónicos:Producto de degradación de lípidos (acetona, ácido acetoacético , ácido hidroxibutírico), no se encuentran en orinas normales excepto en hembras en gestación y lactación, y en cachorros caninos.

5- Bilirrubina:

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La bilirrubina como tal no está presente en orina, excepto en aquellas muy concentradas pero siempre en muy baja cantidad.Una excepción es el felino donde su hallazgo, siempre es patológico.

6- Sangre:En orinas normales está ausente.EXAMEN DE SEDIMENTO:El hallazgo de las distintas variables mencionadas no puede evaluarse correctamente sino se relacionan con el sedimento urinario.

Procesamiento:Se coloca orina en un tubo de centrífuga. Se centrifuga 5 minutos a 1.500 R.P.M.; el sedimento se coloca sobre un portaobjeto, se puede realizar o no coloración de la muestra.

Observación:* Células epiteliales:Células renales, células escamosas o de transición. No son un hallazgo común. Aparecen en mayor número en procesos inflamatorios.

Células Renales Células del epitelio Células escamosas

de transición agrupadas

* Eritrocitos:Pueden presentarse algunos. La hematuria no es normal.

* Leucocitos:La aparición de unos pocos leucocitos (5 o 6 por campo)

* Cilindros:

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La presencia de algún cilindro por campo es normal. Los cilindros se forman en los túbulos renales y se componen primariamente de mucoproteínas.Por su composición se clasifican en:a) Cilindros hialinos.b) Cilindros epiteliales.c) Cilindros granulares.d) Cilindros de glóbulos rojos.e) Cilindros de glóbulos blancos.f) Cilindros cereos.g) Cilindros grasos.Cabe señalar que la presencia de cilindros es indicativo pero no confirmatorio de patología alguna. Su aumento en el sedimento solo indica un proceso tubular activo.

Cilindros hialinos Cilindros granulosos Cilindros céreos

* Cristales:Su presencia puede considerarse normal o no, dependiendo de su concentración y de las otras variables.

Los cristales más comunes dependiendo del pH de la orina son:

Orinas ácidas: Orinas alcalinasCristales de ácido úrico. Cristales de triple fosfato.

Cristales de oxalato de calcio Cristales de fosfato amorfoCristales de uratos amorfos Cristales de carbonato de calcioCristales de cistina Cristales de fosfato de calcio.

Cristales de leucina. Cristales de biurato de amonio.

Cristales de tirocinaCristales de colesterolCristales de ácido hipúricos

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Cristales de urato de sodio.

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Espermatozoides:Hallazgo común en orina de machos

Actividad: escribir en cada sector del círculo los elementos que observa en el sedimento

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2. UMBRAL RENAL PARA LA GLUCOSA Actividad de los alumnos:Observar la forma de medición indirecta de umbral renal para la glucosa.Medir los niveles de glucosa en orina, antes y después de la perfusión de glucosa.Observar la variación en volumen de orina formado.Sacar conclusiones sobre la filtración renal y el umbral renal.Inyección de solución glucosada hipertónica (diuresis osmótica): se inyectan 30 ml de solución glucosada al 25% y se observa el aumento de la diuresis producida por el aumento de la presión osmótica de la orina, ha consecuencia de no haber sido reabsorbida totalmente la glucosa por los túbulos, por haber sobrepasado éste el umbral renal.

3.MECANISMOS DE CONCENTRACIÓN Y DILUCIÓN DE ORINAActividad de los alumnos:Medir la densidad urinaria en muestras de orina provenientes de:

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- individuos que hayan ingerido volúmenes de agua superiores a los 500 ml en las ultimas 6 hs.

- individuos que no hayan ingerido líquidos en las últimas 6 hs.- Observar las diferencias, comentar los resultados.

La señal que llega al riñon para la excreción de orina concentrada es la hormona antidiurética ADH (o vasopresina).Cuando la osmolaridad de los líquidos se encuentra por encima de lo normal, la neurohipófisis secreta ADH, que incrementa la permeabilidad al agua de los túbulos distales y túbulos conductores colectores. Esto permite la reabsorción de grandes cantidades de agua, pero no altera la tasa de excreción de solutos. Pero cuando hay exceso de agua, la osmolaridad del cuerpo disminuye, y la secreción de ADH disminuye y con ello la permeabilidad al agua de los túbulos distales y conductores colectores, lo que causa la orina diluida.4. VISUALIZACIÓN DE LOS GLOMÉRULOS RENALES EN EL BUFO ARENARUM HENSEN (SAPO)

TÉCNICA:Es conveniente usar sapos de aproximadamente 70 grs, pues se obtiene de esta manera mejores imágenes. Previa anestesia con etil eretano al 25% (0,2 ml por cada 15 - 20 grs de sapo) por inyección subcutánea; se coloca al animal en una planchuela especialmente diseñada que lo inmoviliza.la operación se realiza con pinza de disección y tijera, pudiéndose dividir la misma en dos tiempos, en el 1ero se incide la piel y músculos abdominales, con cauterización de los vasos, desde la línea media hasta la columna vertebral, teniendo el colgajo forma trapezoidal con la base menor en el abdomen y la base mayor en la columna vertebral. Separando el colgajo se le invierte por detrás, de modo que su base libre vaya hacia el lado opuesto, dos erinas hacen esta tracción enrollándose los hilos en los tornillos. de esta manera suprimimos los planos anteriores y posteriores que impiden la visualización del riñón. Como es posible que órganos abdominales, tales como el estómago y el ovario, se luxen de su lugar, se los rechaza hacia el lado contrario por medio de erinas colocadas por la cara ventral. En este momento, queda el riñón ante nuestra vista, iniciándose el segundo tiempo, que tiene como finalidad el riñón de su ubicación en la pared muscular lumbar, lo que se obtiene traccionando el peritoneo parietal y efectuando en el mismo un corte longitudinal. Una vez realizado éste se tracciona por medio de las erinas el peritoneo parietal desde el labio interno de la incisión arrastrándose, de esta manera, el riñón. La tracción tiene que ser suficiente para desalojar el riñón de su ubicación lumbar, y permitir la visualización microscópica del mismo, pero no debe ser demasiado intensa, pues se distienden los vasos sanguíneos comprometiéndose la circulación.Se procede a enfocar con 100 x el borde externo del riñón visualizándose los glomérulos. Iluminación por transparencia.OBSERVACIONES:Los glomérulos funcionan alternativamente y no simultáneamente. Puede estudiarse la influencia de drogas, por ej. adrenalina.

BIBLIOGRAFIA

-Guyton, A. Tratado de Fisiología Médica. 11 ra edición. Ed. Interamericana. 2006.

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-Willard ,M. Diagnóstico clinicopatológico práctico en pequeñas especies.4 ta edición .Ed. Intermédica.2005-Chew, D ; Dibartola, S. Interpretación del urianálisis canino y felino. Cuadernillos de divulgación técnica –Purina 2005

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