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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y
GRADUACIÓN
“Actividad antifúngica de la infusión de té verde y de manzanilla
sobre cepas de Cándida albicans encontradas en placas Hawley.
Estudio comparativo in vitro”.
Proyecto de Investigación previo a la obtención del Título Académico de
Odontóloga
Viqky Duchicela Perugachi Maldonado
Tutora: Dra. Patricia de Lourdes Álvarez Velasco
Quito, 2016
ii
DEDICATORIA
Este trabajo de investigación está dedicado en primer lugar a Dios, por nunca dejarme sola,
por guiarme, por darme paciencia, sabiduría y sobretodo fuerza para poder levantarme cuando
caía y tenía ganas de rendirme
A mi mami Luz Mi quien supo apoyarme desde que le dije que quería estudiar en otra ciudad,
lejos de casa, gracias mami por ser esa madre y padre que hizo todo lo posible por verme feliz,
y por ser un ejemplo de madre.
A mi esposo Edwin por apoyarme incondicionalmente, por creer y confiar siempre en mí, por
estar siempre a mi lado.
A mi hija Mayerly por ser ese pequeño motor en mi vida, el cual me ayudó a seguir adelante y
me motiva cada día a ser mejor.
Viqky Duchicela Perugachi Maldonado
iii
AGRADECIMIENTO
Quiero agradecer a cada una de las personas que de una u otra manera me han ayudado en la
realización de este trabajo de investigación, en especial a la Dra. Patricia Álvarez quien supo
brindarme sus conocimientos, me tuvo paciencia, me ayudó y me permitió terminar este
trabajo de investigación satisfactoriamente.
De igual forma a la Lic. Yolanda Andrade por brindarme su ayuda, sus conocimientos durante
todo el proceso experimental de mi trabajo de investigación.
Y a cada uno de mis familiares y amigos que durante mi carrera universitaria me supieron
brindarme su ayuda y apoyo incondicional.
iv
AUTORZACIÓN DE LA AUTORIA INTELECTUAL
Yo, Viqky Duchicela Perugachi Maldonado, en calidad de autora del trabajo de Titulación
realizado sobre “ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE LA INFUSIÓN DE TÉ VERDE Y DE
MANZANILLA SOBRE CEPAS DE CÁNDIDA ALBICANS ENCONTRADAS EN
PLACAS HAWLEY. ESTUDIO COMPARATIVO IN VITRO”, por la presente autorizo a
la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR, hacer uso de todos los contenidos que me
pertenecen o de parte de los que contiene esta obra, con fines estrictamente académicos o de
investigación.
Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente autorización,
seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en los artículos 5, 6, 8, 19 y
demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y su Reglamento
Quito, 08 de Agosto de 2016
Viqky Duchicela Perugachi Maldonado
C.I. 100316272-2
Telf. 0995445848
e-mail: [email protected]
v
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN
APROBACIÓN DEL TUTOR
“ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE LA INFUSIÓN DE TÉ VERDE Y DE MANZANILLA
SOBRE CEPAS DE CÁNDIDA ALBICANS ENCONTRADAS EN PLACAS HAWLEY.
ESTUDIO COMPARATIVO IN VITRO”
Quito, 08 de Agosto de 2016
Dra. Alejandra Cabrera
Coordinadora de la Unidad de Investigación, Titulación y Graduación de la Facultad de
Odontología de la Universidad Central del Ecuador
Presente
De mi consideración:
Yo, Patricia de Lourdes Álvarez Velasco, APRUEBO como TUTORA la tesis titulada
“ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE LA INFUSIÓN DE TÉ VERDE Y DE
MANZANILLA SOBRE CEPAS DE CÁNDIDA ALBICANS ENCONTRADAS EN
PLACAS HAWLEY. ESTUDIO COMPARATIVO IN VITRO”, que se desarrolló en el área
de conocimiento de la especialidad de Odontología cuyo autora es la Srta. VIQKY
DUCHICELA PERUGACHI MALDONADO
Dra. Patricia de Lourdes Álvarez Velasco
C.I. 171310878-3
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN
HOJA DE APROBACIÓN DE TESIS
“ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE LA INFUSIÓN DE TÉ VERDE Y DE MANZANILLA
SOBRE CEPAS DE CÁNDIDA ALBICANS ENCONTRADAS EN PLACAS HAWLEY.
ESTUDIO COMPARATIVO IN VITRO”
Quito, 08 de Agosto de 2016
Dra. Alejandra Cabrera
Coordinadora de la Unidad de Investigación, Titulación y Graduación de la Facultad de
Odontología de la Universidad Central del Ecuador
Presente
De mi consideración:
Los abajo firmantes miembros del jurado calificador APROBAMOS la tesis titulada
“ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE LA INFUSIÓN DE TÉ VERDE Y DE
MANZANILLA SOBRE CEPAS DE CÁNDIDA ALBICANS ENCONTRADAS EN
PLACAS HAWLEY. ESTUDIO COMPARATIVO IN VITRO”, cuyo autora es la Srta.
VIQKY DUCHICELA PERUGACHI MALDONADO
Dr. Edison López
Presidente del tribunal
Dra. Tamara Moya Dr. Jorge Muñoz
Miembro del tribunal Miembro del tribunal
vii
ÍNDICE DE CONTENIDOS
DEDICATORIA ..................................................................................................................................... ii
AGRADECIMIENTO .......................................................................................................................... iii
AUTORZACIÓN DE LA AUTORIA INTELECTUAL ................................................................... iv
APROBACIÓN DEL TUTOR .............................................................................................................. v
HOJA DE APROBACIÓN DE TESIS ................................................................................................ vi
ÍNDICE DE CONTENIDOS ............................................................................................................... vii
LISTA DE ANEXOS .............................................................................................................................. x
LISTA DE FIGURAS .......................................................................................................................... xi
LISTA DE TABLAS ........................................................................................................................... xiii
LISTA DE GRÁFICOS ...................................................................................................................... xiv
RESUMEN ............................................................................................................................................ xv
ABSTRACT ......................................................................................................................................... xvi
INTRODUCCIÓN .................................................................................................................................. 1
CAPÍTULO I .......................................................................................................................................... 2
EL PROBLEMA ...................................................................................................................................... 2
1.Planteamiento del problema .................................................................................................................. 2
1.1.Objetivos ........................................................................................................................................ …3
1.1.1.General ............................................................................................................................................ 3
1.1.2.Específicos ...................................................................................................................................... 3
1.2.Justificación ........................................................................................................................................ 4
1.3.Hipótesis ............................................................................................................................................. 6
CAPÍTULO II ......................................................................................................................................... 7
2.Marco teórico ........................................................................................................................................ 7
2.1.Manzanilla .......................................................................................................................................... 7
2.1.1.Clasificación botánica ..................................................................................................................... 7
2.1.2.Descripción botánica ....................................................................................................................... 8
2.1.3.Composición química ...................................................................................................................... 8
2.1.4.Farmacología ................................................................................................................................. 10
2.1.5.Usos ............................................................................................................................................... 10
2.1.6.Efectos adversos ............................................................................................................................ 11
2.2.Té verde ............................................................................................................................................ 11
2.2.1.Clasificación botánica ................................................................................................................... 12
viii
2.2.2.Descripción botánica ..................................................................................................................... 12
2.2.3.Composición química .................................................................................................................... 13
2.2.4.Farmacología ................................................................................................................................. 13
2.2.5.Usos ............................................................................................................................................... 14
2.2.6.Efectos adversos ............................................................................................................................ 14
2.3.Infusión ............................................................................................................................................ 15
2.3.1.Preparación .................................................................................................................................... 15
2.3.2.Usos ............................................................................................................................................... 16
2.3.3.Ventajas ......................................................................................................................................... 16
2.3.4.Desventaja ..................................................................................................................................... 16
2.4.Aparatos de Ortodoncia Interceptiva ................................................................................................ 17
2.4.1.Placa Hawley ................................................................................................................................. 18
2.4.1.1.Indicaciones ................................................................................................................................ 19
2.4.1.2.Contraindicaciones ..................................................................................................................... 19
2.4.1.3.Modificaciones ........................................................................................................................... 19
2.4.1.4.Elaboración ................................................................................................................................ 19
2.5.Hongos ............................................................................................................................................. 20
2.5.1.Cándida albicans ........................................................................................................................... 22
2.5.1.1.Etiología ..................................................................................................................................... 25
2.5.1.2.Características clínicas ............................................................................................................... 25
2.5.1.3.Diagnóstico ................................................................................................................................ 27
2.5.1.4.Medio de cultivo......................................................................................................................... 27
2.5.1.5.Tratamiento ................................................................................................................................ 28
CAPÍTULO III ..................................................................................................................................... 30
3.Metodología ........................................................................................................................................ 30
3.1.Tipo de investigación ....................................................................................................................... 30
3.2.Universo y muestra........................................................................................................................... 30
3.2.1.Universo ........................................................................................................................................ 30
3.2.2.Muestra .......................................................................................................................................... 30
3.2.3.Criterio de inclusión ...................................................................................................................... 32
3.2.4.Criterio de exclusión ..................................................................................................................... 32
3.3. Variables ......................................................................................................................................... 33
3.3.1. Operacionalización de las variables ............................................................................................. 33
ix
3.4. Materiales y Recursos ..................................................................................................................... 35
3.4.1. Recursos materiales ...................................................................................................................... 35
3.4.2. Recursos humanos ........................................................................................................................ 35
3.5. Procedimiento y Técnicas ............................................................................................................... 35
3.5.1. Sitio de investigación ................................................................................................................... 35
3.5.2. Fase de elaboración de las placas Hawley .................................................................................... 36
3.5.3. Fase de pulido .............................................................................................................................. 37
3.5.4. Fase de esterilización ................................................................................................................... 38
3.5.5. Fase experimental ......................................................................................................................... 39
3.5.5.1. Lectura de cajas Petri ................................................................................................................ 46
3.5.5.2. Preparación de las infusiones .................................................................................................... 47
3.6. Eliminación de material contaminado ............................................................................................. 49
CAPÍTULO IV ..................................................................................................................................... 50
4.Recolección de datos ........................................................................................................................... 50
4.1.Análisis de resultados…… …………………………………………………..……………………50
4.2.Procesamiento de la información ..................................................................................................... 51
4.3.Pruebas de Normalidad .................................................................................................................... 55
4.4.Homogeneidad de las varianzas ....................................................................................................... 57
4.5.Prueba T ........................................................................................................................................... 58
4.6.Discusión .......................................................................................................................................... 63
CAPÍTULO V ....................................................................................................................................... 67
5. Conclusiones y Recomendaciones .................................................................................................... 67
5.1. Conclusiones ................................................................................................................................... 67
5.2. Recomendaciones ............................................................................................................................ 68
CAPÍTULO VI ..................................................................................................................................... 69
6.Referencias bibliográficas ................................................................................................................... 69
ANEXOS ............................................................................................................................................... 75
x
LISTA DE ANEXOS
Anexo 1. Autorización del uso del laboratorio de microbiología de la Facultad
de Odontología de la U.C.E 75
xi
LISTA DE FIGURAS
Figura 1. Modelo de yeso prediseñado 36
Figura 2. Acrílico de autopolimerización: líquido y polvo 36
Figura 3. Alambre calibre 0,07 mm, pinza universal 37
Figura 4. Retiro de excesos de acrílico de las placas Hawley 37
Figura 5. Retiro de excesos de acrílico de las placas Hawley 38
Figura 6. Placas Hawley sin esterilizar 38
Figura 7. Placas Hawley esterilizadas 39
Figura 8. Activación de la cepa de Cándida albicans 40
Figura 9. Contaminación de las placas Hawley 40
Figura 10. Incubación de las placas Hawley 40
Figura 11. Toma de muestra con un isopo estéril 41
Figura 12. Siembra de la muestra en una caja Petri 41
Figura 13. Caja Petri lista para ser llevada a la incubadora 42
Figura 14. Cajas Petri en la incubadora 42
Figura 15. Cajas Petri con colonias de Cándida albicans 42
Figura 16. Placas Hawley sumergidas en infusión de té verde 43
Figura 17. Placas Hawley sumergidas en infusión de manzanilla 43
Figura 18. Placas Hawley guardadas en un recipiente estéril 44
Figura 19. Toma de muestra final 45
Figura 20. Siembra de muestra final 45
Figura 21. Siembra lista para llevar a la incubadora 45
Figura 22. Incubación de las últimas muestras 46
Figura 23. Té verde 46
Figura 24. Manzanilla 47
Figura 25. Embudo con papel filtro, para filtrar las infusiones 48
Figura 26. Cajas Petri con colonias de Cándida albicans al inicio y
al final del estudio 48
xii
Figura 27. Todas las Cajas Petri con colonias de Cándida albicans al inicio y al
final del estudio 48
Figura 28. Distribución lineal de datos normal 59
Figura 29. Distribución lineal de datos normal 59
Figura 30. Tabla T de Student 61
xiii
LISTA DE TABLAS
Tabla 1. Resultado del conteo de las UFC de Cándida albicans después de exponerlos a
las infusiones de té verde y de manzanilla al 20 % 51
Tabla 2. Resultados descriptivos de la Media, Varianza, Desvío estándar 52
Tabla 3. Resultado de la Prueba de Normalidad 56
Tabla 4. Resultado de la Prueba de Levene 57
Tabla 5. Resultado de la Prueba de T 58
xiv
LISTA DE GRÁFICOS
Gráfico 1. Media de las colonias eliminadas por té verde y manzanilla 53
Gráfico 2. Varianza de té verde y manzanilla 53
Gráfico 3. Mínimo y máximo de colonias eliminadas con infusión de manzanilla 54
Gráfico 4. Mínimo y máximo de colonias eliminadas con infusión de té verde 54
Gráfico 5. Comparación entre el mínimo y máximo de colonias eliminadas con
infusión de té verde y manzanilla 55
xv
TÍTULO: “ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE LA INFUSIÓN DE TÉ VERDE Y DE
MANZANILLA SOBRE CEPAS DE CÁNDIDA ALBICANS ENCONTRADAS EN
PLACAS HAWLEY. ESTUDIO COMPARATIVO IN VITRO”
Autora: Viqky Duchicela Perugachi Maldonado
Tutora: Dra. Patricia de Lourdes Álvarez Velasco.
RESUMEN
Los tratamientos dentales en la actualidad están iniciando a edades tempranas, lo cual
favorece de gran manera en el diagnóstico y en el plan de tratamiento de los niños, dentro de
estos tratamientos esta la placa Hawley, que es utilizada como mantenedor de espacios o como
contención, en las cuales al no tener una correcta limpieza pueden formarse colonias de Cándida
albicans. El objetivo de este estudio es comparar la actividad antifúngica de la infusión de té
verde (Camellia sinensis) y de manzanilla (Matricaria chamomilla) sobre cepas de Cándida
albicans, para lo cual se utilizó 30 placas Hawley contaminadas por dicho hongo, se sumergieron
15 placas en infusión de té verde al 20% y las otras 15 placas en infusión de manzanilla al 20%,
por 5 minutos, una vez al día por una semana. Los resultados obtenidos de la media de colonias
eliminadas por la infusión de té verde fue 442,47 UFC y la media de la manzanilla fue 244,33
UFC, demostrando que el té verde tiene mayor actividad antifúngica sobre Cándida albicans.
Palabas claves: CÁNDIDA ALBICANS, CAMELLIA SINENSIS, MATRICARIA
CHAMOMILLA, PLACA HAWLEY
xvi
TOPIC: ANTIFUNGAL ACTIVITY INFUSION OF GREEN TEA AND CHAMOMILE
ON STRAINS OF CANDIDA ALBICANS DISCOVERED IN HAWLEY PLATES.
COMPARATIVE STUDY IN VITRO
Author: Viqky Duchicela Perugachi Maldonado
Tutor: Dr. Patricia Velasco de Lourdes Alvarez
ABSTRACT
Dental treatments today are starting at an early age, which helps greatly in the diagnosis and
treatment plan children within these treatments is the Hawley plate, which is used as maintainer
spaces or containment in which having no proper cleaning can form colonies of Candida
albicans. The objective of this study is to compare the antifungal activity of the infusion of green
tea (Camellia sinensis) and chamomile (Matricaria chamomilla) on Candida albicans strains, for
which 30 Hawley plates contaminated by the fungus was used, 15 plates were immersed green
tea infusion to 20% and the other 15 plates chamomile tea 20%, for 5 minutes once a day for a
week. The results obtained from the mean of colonies eliminated by green tea infusion was
442.47 CFU and mean chamomile was 244.33 CFU, showing that green tea has greater
antifungal activity on Candida albicans.
Clue Words: CANDIDA ALBICANS, CAMELLIA SINENSIS, MATRICARIA
CHAMOMILLA, HAWLEY PLATE
1
INTRODUCCIÓN
En la actualidad la Odontología presenta grandes avances en los tratamientos dentales y óseos
debido al inicio en edades tempranas de dichos tratamientos, con la ayuda de aparatos dentales
fijos y removibles, este último está elaborado en material acrílico y alambre, y al no realizarse
una correcta desinfección de esta placa se produce acumulación de restos alimenticios, y
ocasionando formación de bacterias y hongos.
El objetivo de este trabajo es determinar la actividad antifúngica de la infusión de té verde y
de manzanilla sobre cepas de cándida albicans encontradas en placas Hawley, utilizadas en
odontopediatría, las cuales pueden ser desinfectadas con sustancias químicas o con infusiones,
esta última es un método alternativo que no provoca efectos adverso.
Las infusiones de plantas medicinales, en especial de té verde y manzanilla presentan
propiedades antifúngicas, cuando están a concentraciones del 20%, es decir 20g de la planta en
100 ml de agua destilada, ayudando de esta manera en la limpieza de la placa Hawley
La manzanilla presenta componentes químicos como, ácidos, vitamina C, pigmentos, alcoholes,
mucílago, azuleno, chamazuleno, farneseno, matricarina, patuletina, jaceidina, hiperosido,
colina, azucares, flavonoides, taninos, antemidina, los cuales atribuyen con la propiedad
antifúngica.
De igual forma el té verde presenta compuestos químicos como, aceites esenciales, cafeína,
vitamina C, calcio, Metilsulfonilmetano (MSM) y polifenoles que al ser preparados en una
infusión beneficiara de gran manera en la inhibición de la Cándida albicans y será más
manejable para el paciente cuando realice la limpieza de su placa.
2
CAPÍTULO I
EL PROBLEMA
1. Planteamiento del problema
En la actualidad la atención odontológica en niños ha incrementado notablemente, de tal
modo que se ha podido iniciar con los tratamientos dentales a edades tempranas mejorando
así la salud bucodental de los pacientes, el área encargada de este tipo de tratamientos es la
odontopediatría, por medio de la ortodoncia interceptiva, donde se realizan placas Hawley
que actúan a nivel óseo y dental.
Estas placas han presentado una base de acrílico, un arco vestibular y retenedores, los
cuales al no tener una correcta limpieza pueden provocar acumulación de alimentos y llevar
a la formación de colonias de bacterias y hongos, en especial de Cándida albicans, por lo
que es importante tener un cuidado riguroso con este tipo de aparato removible.
Se ha prestado mayor interés a los resultados obtenidos por las placas, y se ha dejado a
un lado la limpieza que necesitan dichos aparatos, por lo que en este presente trabajo de
investigación daremos una alternativa para realizar una correcta desinfección de la placa
Hawley, a base de infusiones de té verde “Camellia sinensis” y manzanilla “Matricaria
chamomilla”, las cuales presentan actividad antimicótica.
3
1.1. Objetivos
1.1.1. General
Determinar la actividad antifúngica de la infusión de té verde y de manzanilla sobre
cepas de cándida albicans encontradas en placas Hawley, utilizadas en odontopediatría.
1.1.2. Específicos
Establecer la propiedad antifúngica de las infusiones de té verde y de manzanilla sobre
cepas de Cándida albicans.
Identificar cuáles son los principales componentes químicos que le atribuyen a la
manzanilla y al té verde la propiedad antifúngica.
Comparar la eficacia de la infusión de té verde y de manzanilla sobre cepas de cándida
albicans encontradas en placas Hawley, utilizadas en odontopediatría.
4
1.2. Justificación
Las plantas medicinales han sido de gran importancia desde hace mucho tiempo atrás, fueron
utilizadas por nuestros antepasados para diferentes dolencias, aprendieron desde entonces a
diferenciar las curativas y las venenosas, en el primer caso, una de las plantas beneficiosas fue
la manzanilla “Matricaria chamomilla”, conocida por los barbaros como camomilla que es un
diminutivo de manzana (Pardo de Santayana, 2006)
La parte que se ha utilizado de la manzanilla ha sido las flores, porque ahí se encuentran los
compuestos químicos que forman parte del aceite esencial, (Romero, 2014) además estudios
antimicrobianos realizados a esta planta han demostrado que es activa contra Cándida albicans,
debido a que en su composición química está presente el bisabolol, cumarinas, flavonoides y los
sesquiterpenos, dándole así una propiedad antimicótica. (Farinango, 2013)
Un estudio realizado por Medina, (2014) sobre la manzanilla en infusiones al 10 y 20%,
demostró que esta planta presenta un buen efecto antiinflamatorio y antiséptico en tratamientos
de gingivitis y enfermedad periodontal en caninos domésticos, por lo que en este trabajo de
investigación realizaremos infusiones al 20 % sobre cepas de Cándida albicans encontradas en
placas Hawley, cuyo estudio no ha sido realizado antes.
Otra planta medicinal es el té verde que es originario de China y que llegó por primera vez a
Europa, exactamente a Ámsterdam y París en el siglo XVII por medio de comerciantes, el té
verde “Camellia sinensis” ha mantenido intacta sus propiedades esenciales debido a que no ha
sufrido procesos de fermentación, sus propiedades medicinales son muchas entre estas tenemos:
sedante, adelgazante, digestivo, anticancerígenas, antiinflamatorias, antioxidantes, antifúngico
5
entre otras, gracias a sus compuestos principales como: aceites esenciales, cafeína, vitamina C,
calcio, Metilsulfonilmetano (MSM) y polifenoles. (Heredia, 2003)
La manzanilla y el té verde al presentar estos componentes químicos ayudan de gran manera
a la limpieza diaria de la placa Hawley, la cual está elaborada de un material acrílico y de
alambre, la base es de acrílico y debe tener un espesor de 2mm, amplia, anatómica, de suave
textura y el color puede ser de elección del niño/a, los retenedores son de alambre y estos
dependerán de la edad dentaria, anatomía dentaria y de acuerdo a la fuerza que necesitemos
realizar en este. (Guardo, 1992)
Los hongos, específicamente la Cándida albicans puede reproducirse en la placa Hawley
debido a la inadecuada limpieza de la placa y además porque este hongo presenta un sistema
complejo de adherencia por medio de adhesinas, (Sapp, 2005) produciendo así una porosidad,
cambio de color y mal olor en la placa por lo que es necesario hacer una correcta desinfección
de las mismas y evitar infecciones posteriores. (Rodríguez. 2011)
Este trabajo de investigación no ha sido realizado anteriormente, por lo que este estudio
ayudará de gran manera a comprobar que las plantas medicinales presentan excelentes
propiedades antimicrobianas, además permitirá comparar cuál de las dos infusiones, la de té
verde o la de manzanilla tiene mayor actividad antifúngica sobre Cándida albicans, de igual
manera el profesional inducirá a los pacientes a utilizar una nueva alternativa de bajo costo en
la limpieza de su placa dental.
6
1.3. Hipótesis
La actividad antifúngica de la infusión de té verde “Camellia sinensis” es mayor que la
infusión de manzanilla “Matricaria chamomilla” sobre cepas de Cándida albicans
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CAPÍTULO II
2. Marco teórico
2.1. Manzanilla
La manzanilla es una planta herbácea traída de Europa, exactamente de España en la época
de la conquista, según Cosco (2010), fue introducido por los españoles al Perú como insecticida
y es considerada como una planta curativa desde la antigüedad, (Pardo de Santayana, 2006)
Hipócrates la consideraba sagrada y la consagraba al sol porque curaba la fiebre, (Ryman, 1995)
se cultiva en zonas templadas y tropicales, presenta propiedades; antiinflamatoria, antiséptica,
antimicrobiano, analgésico, sedante, entre otras.
El nombre “chamomilla” proviene del griego “chamaemelum” que significa “manzanas en el
suelo” debido a que la planta es pequeña y rastrera y desprende un aroma a manzana, de igual
forma la palabra “matricaria” proviene del latín “matrix” que significa matriz y se la llamaba
así porque era utilizada para tratar a las menstruaciones difíciles. (Ryman, 1995)
2.1.1. Clasificación botánica
Familia: Asteraceae (Compositae)
Género: Matricaria
Especies: Matricaria chamomilla
Nombre científico: Matricaria chamomilla
Nombre común: Manzanilla (Corrales, 2014)
8
2.1.2. Descripción botánica
La manzanilla es una hierba erecta de origen europeo, la cual puede desarrollarse en climas
tropicales y templados, (Corrales, 2014) en suelos arenosos y abundantes en calcio, se propaga
a través de semillas y se trasplantan a una distancia de 30 cm entre sí, tienen como destino el
comercio y el consumo doméstico, (Fonnegra, 2007) aproximadamente mide de 30 a 50 cm de
alto, su tallo es de forma cilíndrica y presenta ramificaciones de color verde, sus hojas son
finamente divididas y de color blanco, sus botones florales son de color amarillo intenso y
hueco. (Cruz, 2009)
2.1.3. Composición química
El componente principal de la Matricaria chamomilla es el aceite esencial (0,3% - 1,5%) que
se encuentra en los botones florales y aproximadamente el 50% de esta esencia está formado
por: azulenos, sesquiterpenos, lactonas sesquiterpénicas, carburos terpénicos, flavonoides,
cumarinas, como también por ácidos (valeriánico, ascórbico, grasos, salicílico, fenólicos,
angélico), taninos, mucílagos urónicos, esteroides, mucopolisacáridos, xiloglucuranos, sales
minerales, triacontano, principio amargo (ácido antémico) y fitosterina (resinas). (Cosco, 2010)
El azuleno (26% - 46%) es un compuesto orgánico volátil, su nombre deriva de la palabra
azul, y es el que le da el color azul a la esencia y aparece por la acción del calor, tiene un olor
fuerte, es antiinflamatorio, antiséptico, espasmolítico, entre los principales tenemos al
camazuleno en mayor cantidad (6% - 15%) y el guajazuleno. (Cosco, 2010)
Los sesquiterpenos (50%) son diversos compuestos orgánicos que están presentes en los
aceites esenciales y pueden actuar como fitoalexinas, que son metabolitos secundarios que
9
aumentan en las plantas debido a la reacción que presentan frente a la invasión microbiana,
(Domingo, 2003) tenemos a α-bisabolol y sus óxidos A y B, óxido de bisabolona. (Cosco, 2010)
Lactonas sesquiterpénicas es un tipo de compuesto químico que se encuentra en las plantas
de la familia Asteraceae y presenta actividad antimicrobiana, citotóxica, antinflamatoria,
antibacteriana, anticancerígena, antiviral, antifúngica, (Reyes, 2015) dentro de este grupo está
la matricina, matricarina y desacetilmatricarina. La matricina forma al camazuleno. (Medina,
2012)
Carburos terpénicos (25%) son compuestos orgánicos como: farneseno, cadineno, cis-en-in-
dicicloeter y trans-en-in- dicicloeter.
Flavonoides son pigmentos naturales de las plantas que fueron descubiertos por Szent-
György en 1930 y tiene una gran actividad antioxidante por ser un compuesto fenólico hidroxilo,
además tiene otras funciones como son: antifúngicas y bactericidas, se clasifica en flavanos
(catequina), flavonoles (quercitina), flavonas (diosmetina, apigenina) y antocianidinas.
(Martínez, 2002)
Cumarinas son compuestos orgánicos tipo éster cíclico que pertenecen al grupo de los
metabolitos secundarios, son solubles en metanol, etanol y agua, su nombre proviene del
término “Coumarou” referido al haba tonca que es un árbol tropical sudamericano y se clasifica
en cumarinas simples (umbeliferona), cumarinas complejas como son la furanocumarinas y la
piranocumarinas y a la vez estas se subdividen en lineal y angular y por ultimo las cumarinas
diversas o preniladas (dicumarol, cumesrtol), las cumarinas tienen actividad anticoagulante,
vasodilatador, insecticida y antibiótica. (Cueva, 20013)
10
Taninos son sustancias capaces de combinarse con proteínas de piel animal evitando su
putrefacción y convirtiéndola en cuero, son sustancias fenólicas poliméricas, hay más de 30
taninos que pueden inhibir hongos y bacterias, además los taninos pueden ser hidrolizables y
condensados, son solubles en agua. (Domingo, 2003)
Otros componentes como: resina, vitamina C, ácido valeriánico, , ácidos grasos, ácido
salicílico, ácido angélico, ácidos fenólicos, mucílagos urónicos, triacontano, xiloglucuranos,
mucopolisacáridos, esteroides derivados del estigmasterol, principio amargo (ácido antémico)
y sales minerales (Cosco, 2010)
2.1.4. Farmacología
Han comprobado que el aceite esencial de la manzanilla tiene propiedades antiinflamatorias,
sedante, espasmolíticas, debido a la presencia de las cumarinas y flavonoides, además el
alfabisabolol disminuye la actividad proteolíca de pepsina y protege de la acción irritante de la
aspirina, de igual manera los mucílagos, el camazuleno y el bisabolol, tienen un efecto
reepitelizante y como también las lactonas sesquiterpénicas son responsables de su actividad
aperitiva, digestiva y colerético analgésica, digestiva, sedante, antiinflamatoria, antiséptica,
antifúngica, antiespasmódica. (Gómez, 2015)
2.1.5. Usos
Se utiliza de la manzanilla las flores y el tallo, ya sean frescos o secos los cuales pueden ser
preparadas de diferentes maneras, la más común es la infusión, de igual forma la tintura, aceite
y extracto de manzanilla, se lo puede administrar de forma oral, tópica, o en colutorio (Corrales,
2014) de los cuales se obtiene muchos beneficios como protectora y reparadora de la membrana
gástrica por lo que resulta muy adecuada en afecciones del aparato digestivo, reduce dolores
11
menstruales, ayuda en la cicatrización, disminuye inflamaciones, ayuda problemas gripales,
ayuda en la desinfección y es sedante. (Gómez, 2015)
2.1.6. Efectos adversos
La manzanilla muy rara vez puede producir efectos adversos, pero en ocasiones la planta
fresca en contacto con la piel puede producir dermatitis, además el consumo de la infusión en
mujeres embarazadas puede producir abortos porque este es un estimulante uterino. (Gómez,
2015)
2.2. Té verde
El té verde es originario de China y llegó por primera vez a Europa, exactamente a
Ámsterdam y París en el siglo XVII por medio de comerciantes, ha existido varios tipos de té,
pero entre el principal tipo está el té verde, llamado también “perlas verdes” y desprende un
aroma ligeramente amargo. (Heredia, 2003)
El té verde “Camellia sinensis” ha mantenido intacta sus propiedades esenciales debido a que
no ha sufrido procesos de fermentación, (Heredia, 2003) sino que se ha dejado secar
naturalmente a la sombra las hojas, retoños, yemas y las partes tiernas del tallo y se las enrolla
a manera de espiral, (Heredia, 2003) las cuales son recolectadas de un árbol de aproximadamente
2 m de altura, sus propiedades medicinales son muchas entre estas tenemos: sedante,
adelgazante, digestivo, anticancerígenas, antiinflamatorias, antioxidantes, antifúngico entre
otras, gracias a sus compuestos principales como: aceites esenciales, cafeína, vitamina C, calcio,
MSM y polifenoles.
12
2.2.1. Clasificación botánica
Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Ericales
Familia: Theaceae
Tribu: Theeae
Género: Camellia
Especie: C. sinensi
2.2.2. Descripción botánica
El árbol de té es originario del sudeste de Asia, crece en zonas subtropicales y tropicales con
abundante lluvia y humedad, tiene la capacidad de desarrollarse en ciertas alturas desde el nivel
del mar hasta los 2200 m, en estado silvestre puede llegar a medir 20 metros de altura, su nombre
botánico es Camellia sinensis. (Stevens, 2003)
Este árbol para reproducirse necesariamente debe cumplir un proceso de polinización, es
podado con frecuencia para evitar su crecimiento, de igual forma para ayudar en la recolección
y para estimular el crecimiento de nuevos brotes, (Stevens, 2003) se caracteriza por tener la
forma de un arbusto, sus hojas son de color verde claro brillante y al revés presenta una suave
pelusa mientas es joven, además son dentadas, miden de 6 a 12 cm de largo y de 2 a 5 cm de
13
ancho, sus flores son de color blanco con 7 u 8 pétalos, las cuales se transforman en frutos.
(López, 2014)
Este arbusto puede ser cultivado durante 50 años, una buena cosecha se da cuando se
recolecta la parte más tierna de cada brote
2.2.3. Composición química
Estudios han demostrado que el té verde presenta más de 300 compuestos químicos, dentro
de estos podemos encontrar: agua, proteínas, hidratos de carbono, vitaminas (A, B, C y
E), además presenta de 4 a 7 % de sales minerales ricas en potasio, manganeso y flúor, de igual
forma presenta ácidos orgánicos (málico, succínico, oxálico y galoquínico), compuestos
glucídicos (inositol), azúcares reductores, gomas, pectinas e incluso una pequeña cantidad de
lípidos. (Sarmiento, 2010)
Entre los principios activos responsables de la actividad terapéutica del té verde encontramos
a los polifenoles, además son muy abundantes los del tipo flavonoides, los principales
flavonoides son las catequinas (30%): epicatequina, epicatequina galato (ECg),
epigalocatequina, epigalocatequina-3-0-galato (EGCG), de entra las cuales la EGCG y ECg,
pueden inhibir el crecimiento de bacterianas Gram positivas y negativas. (García, 2013)
Según Bustamante (2012), el té verde presenta alcaloides (3% al 5 %), principalmente la
cafeína y en menor cantidad la teofilina y teobromina, los cuales son utilizados en farmacología
como broncodilatadores y excitantes del SNC.
2.2.4. Farmacología
El té verde por presentar catequinas y fenoles en su composición química tiene la propiedad
antioxidantes, evitando el envejecimiento prematuro de tejidos causado por los radicales libres
14
(Quintana, 2008), además es hipoglucemiente, ya que disminuye los niveles de azúcar en sangre,
es “hipolipemiante, es decir, capaz de reducir los niveles de LDL-colesterol y de triglicéridos
plasmáticos, al tiempo que eleva los niveles de HDLcolesterol, el colesterol bueno” (Sarmiento,
2010).
De igual forma es muy útil en la prevención del cáncer por su acción inhibitoria sobre la
carcinogénesis, como también presenta efecto antihipertensivo y riesgo de enfermedad
cardiovascular, López, 2014) a nivel odontológico ayuda en el mal aliento por la reducción del
hidrogeno sulfurado (H2S), así mismo los taninos y el flúor evitan el crecimiento, la adherencia
y el almacenamiento de los polisacáridos intracelulares. (Moromi, 2007)
“Los flavonoides inhiben la adherencia, la inhibición de la producción de ácido láctico, el
ácido tánico inhibe la síntesis de dextranos solubles e insolubles y los polifenoles confieren
efecto inhibitorio en el desarrollo del S .mutans y sobre los hongos”, (Moroni, 2007), además el
flúor natural del té verde tiene acción anticaries.
2.2.5. Usos
La parte utilizada del té verde son las hojas en especial las más jóvenes y flexibles, se
administra en forma de infusión y se la prepara de acuerdo al uso que se le va a dar, si se quiere
emplear como estimulante se le deja reposar durante 2 minutos, o como antidiarreico se la deja
reposar por 10 minutos. El máximo efecto estimulante se da en un corto tiempo de contacto con
el agua caliente, debido que la cafeína se disuelve rápidamente. (López, 2002)
2.2.6. Efectos adversos
Los efecto adversos que se pueden producir por el consumo excesivo de té verde es la
disminución del efecto anticoagulantes, debido a que la vitamina K que posee el té verde la hace
15
menos efectiva, además la cafeína puede causar insomnio, ansiedad, irritabilidad, molestias
estomacales, nauseas, y diarrea, de igual manera puede inhibir la absorción de hierro en el tracto
gastrointestinal. (Quintana, 2008)
2.3. Infusión
La infusión es una preparación herbaria muy conocida y tradicional, la misma que tiene el
objetivo de extraer los componentes activos de la planta que sean solubles en agua, esto se da
cuando se verte agua caliente sobre las hojas, flores, semillas, cortezas o raíces ya sean frescas
o secas, el tiempo de infusión debe durar de 10 a 15 minutos y es necesario filtrar. (White,
2002)
2.3.1. Preparación
Para preparar una infusión se debe elegir de preferencia las partes blandas de la planta, como
son las hojas o flores, y se las puede realizar de varias formas entre estas tenemos la preparación
individual, donde se debe colocar cualquier parte de la planta, ya sea las hojas o flores en una
taza, la dosificación va a depender si las parte de la planta este seca o fresca, en el caso de la
última la cantidad de planta será el doble de la seca, se recomienda colocar una cucharada de
planta, luego se verte agua caliente y se debe dejar reposar la preparación de 10 a 15 minutos,
filtrar y está listo para consumir.(Loureiro, 2013)
El procedimiento para preparar la infusión en cantidades más grandes es la siguiente, se debe
hacer hervir agua en un recipiente que no sea de aluminio, ya que este metal podría contaminar
nuestra preparación, una vez que a hervido el agua apagar la hornilla, y colocar la cantidad
necesaria de plantas, tapar y dejar reposar de 10 a 15 minutos y filtrar, cuando se desea preparar
infusiones con concentración se sigue el mismo procedimiento, lo único que cambia es que se
16
debe pesar la cantidad justa de planta que se utilizará para las diferentes concentraciones.
(Loureiro, 2013)
Hay varias plantas que se pueden usar para hacer infusiones entre las más comunes tenemos:
manzanilla, menta, anís, melisa, eucalipto, tila, romero, verbena, hinojo, valeriana, hierba luisa,
escaramujo, malva, salvia, tomillo, ginseng, te, entre otros.
2.3.2. Usos
Las propiedades de las infusiones son muy variadas y se las puede utilizar para diferentes
partes del cuerpo, entre las utilidades que se les da: relajante, diurética, adelgazante, digestiva,
antiséptica, desinfectante, antigripales, analgésica, antifúngica, entre las más importantes.
2.3.3. Ventajas
Las infusiones son utilizadas desde la antigüedad gracias a las propiedades medicinales que
presentan, además tiene grandes ventajas ya que son de origen natural y son seguras no causan
reacciones desfavorables en la gran mayoría de personas, este tipo de bebidas se las puedo
consumir ilimitadamente, de igual forma son fáciles y rápidas de preparar, de igual forma esta
preparación puede durar doce horas sin perder sus propiedades.
2.3.4. Desventaja
Es poco común encontrar desventajas en este tipo de infusiones, pero en ocasiones pueden
ocasionar alergias, en especial en la piel y cuando no se las utiliza en dosificaciones correctas
puede producir mareos, diarrea o vómitos o incluso puede alterar el estado de salud de las
personas.
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2.4. Aparatos de Ortodoncia Interceptiva
Los aparatos de Ortopedia/ Ortodoncia tienen la finalidad de corregir las maloclusiones y
devolver al paciente una normoclusión, esto se consigue cuando cambiamos la posición
individual de un diente, o de un grupo de dientes, como también de una arcada completa, de esta
manera lograremos alcanzar una estabilidad dental, esqueletal y muscular. (Grohmann, 2004)
A los aparatos de Ortodoncia se les ha clasificado en activos y pasivos, según Grohmann
(2004) los aparatos de ortodoncia activos son los que actúan con fuerza mecánica directamente
sobre los dientes, el periodonto, las suturas, el maxilar y la ATM, estos pueden ser fijos o
removibles, mientras que los aparatos de ortodoncia pasiva son los que actúan con fuerzas
funcionales, es decir de su propio cuerpo y además de actuar sobre los elementos ya
mencionados, actúa sobre la musculatura y por lo general son removibles.
La placa activa removible presenta las siguientes partes: la placa acrílica, retenedores,
resortes, arcos y tornillos (Quirós, 2010).
La placa acrílica es confeccionada en resina acrílica transparente de
autopolimerización, debe estar adaptada correctamente a la mucosa y cuellos dentarios,
amplia con un espesor aproximadamente de 2mm, debe ir desde la cara palatina de los
dientes hasta la cara distal del último molar erupcionado, en la parte posterior esta
deberá tener una escotadura para evitar el reflejo nauseoso. (Guardo, 1993)
Los retenedores según Quirós (2010) son los que permiten mantener al aparato en una
posición adecuada, aumentando el anclaje del aparato, facilitando la deglución y la
fonética, para elegir un buen retenedor debemos tomar en cuenta la edad dentaria,
18
anatomía dentaria, cronología eruptiva, como también la fuerza que vamos a ejercer.
(Guardo, 1993)
Los resortes son los que realizan los desplazamientos de las piezas dentales
individualmente, ejerciendo presión constante y poco traumática, están constituidos por
tres elementos, uno que es el segmento adherido al diente, el otro es el cuerpo elástico
y por último la retención los cuales ayudan a realizar movimientos como
vestibularización, inclinación, musicalización, distalización y extrusión. (Rodríguez,
2011)
Los arcos vestibulares según Quirós (2010) se encarga de retraer los incisivos
superiores e inferiores, además presentan otras funciones como retenedor, para guiar la
erupción dental, como elemento activo y como soporte para resortes.
Los tornillos tienen como finalidad realizar expansión en el maxilar, esto depende de
la anatomía del maxilar, pueden ser de diferente tamaño y forma. (Quirós, 2010)
2.4.1. Placa Hawley
Definición
Es una placa removible muy popular y de fácil activación que es utilizado como un retenedor
y como también para retraer dientes anteriores ligeramente protruidos (Quirós, 2010).
La placa Hawley fue diseñada por el doctor Hawley en 1919, se ha caracterizado por
presentar un arco vestibular que pasa por el tercio medio de las caras vestibulares de los dientes
anteriores y a nivel de los caninos presenta unas asas, en la parte posterior tiene retenedores de
Adams y además presenta el cuerpo de acrílico que se adapta a los tejidos blandos y sirve como
unión con los otros elementos. (Espinar, 2011)
19
2.4.1.1. Indicaciones
Según Guardo (1993), la placa Hawley se la utiliza como contención después de un
tratamiento activo, es decir ayuda a fijar en una posición estable a las piezas dentales que fueron
movidas, debido a que presenta un arco labial circundante. (Grohmann, 2004) Además la placa
está indicada para retraer dientes anteriores ligeramente protruidos. (Quirós, 2010)
2.4.1.2. Contraindicaciones
No se recomienda en dientes muy protruidos
Pacientes no colaboradores
2.4.1.3. Modificaciones
La placa Hawley puede presentar una gran variedad de modificaciones de acuerdo a la
función que vaya a realizar, por lo que se puede añadir, resortes, tornillos, dispositivos que
controlan hábitos, entre las más utilizadas:
2.4.1.4. Elaboración
La placa Hawley está constituida por una base de acrílico que brinda estabilidad y retención,
para su elaboración primero debemos dibujar el diseño que necesitemos sobre el modelo de
yeso, luego hacer una escotadura en la parte posterior del modelo para evitar el reflejo nauseoso,
seguidamente se debe colocar una capa de aislante sobre el modelo para evitar la introducción
del acrílico al yeso, facilitando así su retiro, después se fija con cera el arco vestibular y los
retenedores de Adams, luego se coloca el acrílico, en este paso se puede realizar con cualquiera
de las dos técnicas utilizadas, ya sea la “técnica en masa” o “la técnica sal y
pimienta”.(Rodríguez, 2011)
20
Se debe tener en cuenta lo siguiente, el área de trabajar debe estar en posición horizontal, el
grosor de la placa debe ser aproximadamente 2mm, no debe tener zonas retentivas, recortar los
excesos, respetar las indicaciones del fabricante caso contrario se perderán las propiedades
físicas y químicas del acrílico y sobretodo hacer una correcta mezcla para evita poros en la placa,
luego de la polimerización sigue el proceso de pulido el cual es muy importante porque ayuda
a dar un mejor acabado, mayor dureza, disminuir las fracturas, cambios de color u olor.
(Rodríguez, 2011)
2.5. Hongos
Los hongos son seres vivos que tiene su propio reino llamado Fungi, según Negroni (2009),
estos seres son conocidos desde la antigüedad por el hombre y fueron utilizados en la
fermentación de la cerveza y en la alimentación, además en la industria química en la producción
de ácidos orgánicos como el glutámico y cítrico, y de igual forma en la industria farmacéutica
en la elaboración de antibióticos antibacterianos y antifúngicos.
Los hongos son eucariotas, heterótrofos, es decir necesitan vivir sobre sustancia orgánica
viva o muerta, son aerobios o microaerobios, no tienen clorofila posee un núcleo estructural
pequeño y membrana celular, además no forma tejidos, puede presentar un cuerpo unicelular o
pluricelular, este último también llamado micelio, el cual tiene una forma cilíndrica y
ramificaciones llamadas hifas. (Negroni, 2009)
Se alimentan por medio de su pared celular, la cual está formada de quinina, glucanos,
mananos y proteínas, a través de esta pasan agua, sales, aminoácidos y monosacáridos, además
para degradar sustancias complejas presentan enzimas hidrolíticas. Se reproducen por esporas
21
que son células uninucleadas o multinucleadas, las cuales se diseminan y propagan, las esporas
pueden ser asexuadas o sexuadas. . (Negroni, 2009)
La estructura celular de los hongos es similar a la célula eucariota, por lo tanto presenta los
mismos elementos los cuales describiremos de afuera hacia dentro: (Negroni, 2009)
La capsula formada por polisacáridos como la glucoroxidomananos, la cual le da
protección.
La pared celular está formada de una parte fibrilar que es la quinina, y otra parte amorfo
que es el glucanos o mananos con proteínas, es la que le da la forma al hongo, además
brinda protección, permite la nutrición, eliminación de residuos y presenta proteínas y
polisacáridos que actúan como antígenos que origina una respuesta inmune
La membrana plasmática formada por fosfolípidos y proteínas, presenta el sistema
enzimático citocromo P450 muy importante en el metabolismo y en la síntesis de
ergosterol, que es un esterol principal y representa un blanco utilizado por las drogas
antifúngicas.
El citoplasma presenta estructuras membranosas que se asocian a los ribosomas para
formar el retículo endoplasmático.
Los ribosomas son orgánulos pequeños que producen proteínas propias, están formadas
por ácido ribonucleico y proteínas.
Las mitocondrias poseen acido desoxirribonucleico replicable, en un medio aerobio
producen oxidasas y peroxidasas y en un medio anaerobio interviene en la fermentación.
La vacuola central presenta agua, sales y cristaloides.
El núcleo tiene una membrana porosa y presenta de 2 a 4 cromosomas y un nucléolo.
22
Los hongos pluricelulares se los conoce vulgarmente como moho, su cuerpo o talo se
denomina micelio y sus ramificaciones hifas, los hongos unicelulares se los llama levaduras u
hongos levaduriformes los cuales pueden reproducirse por gemación o escisión, esta última se
da cuando la célula alcanza un tamaño adecuado, se separan en 2 por medios de tabiques, estas
células pueden ser cilíndricas, esféricas u ovoides que se caracterizan por producir brotes
llamados blastoconidios.
El micelio presenta 2 partes: una parte para el crecimiento vegetativo y captación de
nutrientes, llamado micelio vegetativo y la otra parte da origen a elementos de esporulación
llamado micelio de fructificación, aquí las esporas asexuadas externas se las llama conidios y
pueden originarse en cualquier parte del talo o las hifas fértiles llamadas esporóforos y las
esporas asexuadas internas son las esporangiosporas que se produce de una hifa continua la cual
presenta una pared llamada esporangio que contiene muchas esporas inmóviles, a este sitio llega
la esporangióforo que es la hifa fértil y emite prolongaciones hacia el esporangio llamada
columela.
El desarrollo de los hongos, como ya sabemos se da de dos formas; una forma micelial y la
otra de una forma levaduriforme
2.5.1. Cándida albicans
Se estima que hay 300.000 especies de hongos aproximadamente, (Negroni, 2009) de los
cuales el género de Cándida presenta más de 200 especies, pero las que intervienen en
infecciones humanas encontradas en la cavidad bucal como huéspedes o en candidiasis oral es
la Cándida albicans, que se la encuentra en un 80% de las levaduras aisladas, seguida de la C.
glabrata, C. tropicalis, C. krusei, C. guilliermondii, C. kefyr y C. parapsilosis. (Marsh, 2011)
23
Según Negroni (2009) los hongos del género Cándida son levaduras, las cuales no presentan
pigmentación carotenoide o melánico, pueden producir seudohifas o hifas verdaderas, podemos
encontrarlas en la microflora oral normal de la cavidad bucal; en la lengua, paladar, mucosa
oral; en el estómago, intestino, vagina y en el ambiente, los hongos de este género presentan
células de forma redondeadas u oval de 3 a 5 µm, son grampositivas, aerobias, (Liébana, 1995)
su medio de cultivo apropiado es el agar de Sabourand con elementos nutritivos como la glucosa
y la peptona, con un pH acido de 5,6 a 7,2 y a una temperatura entre los 20°C y los 38°C.
Taxonomía de los hongos del género Cándida:
Reino: Fungi
División: Deuteromycota
Clase: Blastomycetes
Familia: Cryptococcaceae
Género: Cándida
Especie: albicans
Sinónimos: Monilia albicans, Cándidas tellatoidea (Inlago, 2014)
Estos microorganismos tienen la capacidad de crecer y multiplicarse fácilmente y además
tienen diversas formas de cómo causar daño al hombre y a los animales, entre estas tenemos la
liberación de toxinas que es de gran importancia debido a que estos tienen la capacidad de
producir hepatotoxinas y neurotoxinas que son mortales y como también pueden causar
alteraciones gastrointestinales, otra forma de dañar es la invasión y proliferación en los tejidos,
24
produciendo una respuesta inmune a los antígenos fúngicos, y la última acción patógena es la
sensibilización, con desarrollo de una respuesta alérgica frente a los antígenos del hongo.
(Negroni, 2009)
De igual forma presentan la capacidad de destruir los tejidos del huésped, ya sea por el
mecanismo de defensa del huésped ante la destrucción o por la acción directa del
microorganismo al liberar enzimas hidrolíticas, la secreción de aspartil proteasa y fosfolipasas.
La aspartil proteasa presenta la capacidad de degradar proteinas extracelulares de la matriz del
huésped y las fosfolipasas hidrolizan los fosfolípidos en ácidos grasos, su presencia contribuye
a dañar la membrana celular de la célula del huésped, que provocaría su lisis o la exposición de
los receptores, facilitando así la adherencia. (Marsh, 2011)
El factor de virulencia que presentan estos hongos es la capacidad de adherirse a células del
hospedador o a otros microrganismos e incluso a materia muerta llamándose saprobios, esta
adherencia se da gracias a la composición química que presenta la pared celular de dichos
microorganismos como la manoproteína que es una adhesina y como también la formación de
túbulos germinativos, (Negroni, 2009) al mismo tiempo puede invadir al huésped por la
formación de túbulos germinativos y la formación de fosfolipasa C, de igual forma alteran el
sistema de defensa produciendo la inhibición de la fagocitosis, además inhibe la respuesta de
defensa debido a que las células T supresoras son estimuladas pos sus polisacáridos. (Liébana,
1995)
La Cándida debe estar en una fase levaduriforme para empezar a lesionar (Liébana, 1995) y
es en esta fase donde la pared celular presenta tres capas, la capa externa está formada por
manoproteínas, la capa intermedia formada por β (1,6) glucanos y la capa interna formada por
25
β (1,3) glucanos, manosa y quinina, además presenta material polimérico extracelular que ayuda
a la adherencia de estos hongos, su presencia aumenta la capacidad adherente a las superficies
de las placas acrílicas, como también va a depender del tipo de azúcar con el cual se va a incubar
a este tipo de hongo, aumentando la adhesión la galactosa y la maltosa (Calderón, 2014)
2.5.1.1. Etiología
Los hongos son huéspedes normales del ser humano, pero para que este microorganismo se
transforme en patógeno es necesario que haya una alteración en la inmunidad del huésped, entre
las causas que provocan estas alteraciones pueden ser intrínsecas que son propias del individuo
como son la diabetes, SIDA, neoplasias, tabaquismo, drogadicción, embarazo, vejez y las
extrínsecas son aquellas que necesitan un tratamiento prolongado de antibióticos, radiaciones,
canalizaciones que favorecen la enfermedad. (Marsh, 2011)
Las infecciones por Cándida se las denomina candidiasis, que puede afectar a personas de
cualquier sexo y de cualquier edad, siendo la más común la candidiasis oral que en ocasiones se
propaga por la faringe, laringe o por vía sanguínea, la cual puede producir cuadro grave al llegar
a zonas profundas, (Negroni, 2009), la transmisión entre personas es posible, como en el caso
del muget del recién nacido que puede adquirirlo por la vagina materna y como también se la
puede adquirir en el ambiente hospitalario, por lo que también se la conoce a esta infección
como oportunista. (Ceccotti, 2007)
2.5.1.2. Características clínicas
Según Liébana (1995) las infecciones de C. albicans en la cavidad bucal presentan cuadros
clínicos muy variados y suelen dividirse en candidiasis superficiales y candidiasis profundas, la
primera puede afectar a la mucosa bucal y labial, paladar duro y blando y a la lengua, en niños
26
y adultos mayores, a esta infección se la denomina candidiasis pseudomembranosa, debido a
que presenta pseudomembranas, (Marsh, 2011) las cuales están formadas de células epiteliales
descamativas y necróticas, numerosos micelios de C. albicans, presentan un color blanquecino
cremoso, los cuales pueden removerse fácilmente con una gasa, (Sapp, 2005) dejando un fondo
sanguinolento, por presentar ese aspecto también se lo llama muget. (Negroni, 2009)
Otro tipo de candidiasis superficial es la candidiasis eritematosa que se localiza en la parte
media dorsal de la lengua y en el paladar, cuando se localiza en el paladar se presenta como una
zona roja generalizada de tejido atrófico que provoca una sensación de quemazón y cuando se
presenta en la lengua tiene un aspecto liso y rojo carnoso debido a la hipotrofia de papilas
filiformes, (Sapp, 2005), esta condición está asociada a la administración de antibióticos de
amplio espectro y va a causar ardor y sensibilidad cuando se ingiera comida o líquidos calientes,
ácidos, picantes o saladas. (Ceccotti, 2007)
Las candidiasis profundas son aquellas que afectan a las mucosas del aparato digestivo, al
aparato urinario, al peritoneo, pulmonar, oculares y al sistema nervioso central, (Liébana, 1995)
además la candidiasis puede presentar otras formas clínicas como son: queilitis angulares que
es una infección bilateral de las comisuras labiales que se presenta como manchas rojas o
blancas y grietas que provocan la disminución de la dimensión vertical, otra forma en la que se
presenta es la hiperplásica que es una placa de superficie lisa de color rojo con un punteado
blanco amarillento y se localizan en el paladar, dorso y laterales de la lengua y en las comisuras
labiales. (Ceccotti, 2007)
27
2.5.1.3. Diagnóstico
Cuando se sospecha que hay presencia de candidiasis es necesario realizar pruebas de
laboratorio con técnicas directas como son exámenes microscópicos, cultivos e identificación,
en el caso de realizar exámenes microscópicos de la cavidad bucal es necesario realizar un
raspado en la zona de la lesión con un hisopo, (Negroni, 2009) se puede utilizar cualquier tipo
de tinción microbiológica, entre las más utilizadas está el cloruro de metiltioninio (azul de
metileno), la cual va a permitir ver las células de las levaduras, y como también la tinción de
Gram, además hay otra tinción hematológica que permite observar este tipo de células es la de
Giemsa. (Liébana, 1995)
Según Marsh, (2011) los cultivos son realizados con las muestras orales, las cuales van a ser
cultivadas en agar de la dextrosa Sabouraud, teniendo como ventaja que solo crecerán hongos
de genero Cándida, debido a que presenta un pH acido. La identificación de C. albicans se puede
dar por una prueba de filamentación donde se va a observar la presencia de tubos germinativos,
otra prueba es la formación de clamidosporas, aquí veremos un micelio verdadero y a lo largo
de este aparecen clamidosporas. (Liébana, 1995)
2.5.1.4. Medio de cultivo
El aislamiento del hongo en un cultivo inicia con una correcta toma de muestra, esta es
diferente en zonas superficiales húmedas donde solo se requiere frotar con una torunda de
algodón sobre la zona lesionada, mientras que en las zonas superficiales secas es necesario
realizar un raspado de la zona lesionada con un instrumento de borde agudo. (Liébana, 1995)
El medio de cultivo debe ser apropiado y contener agua, sales, nitrógeno que se obtienen de
nitratos, sales de amonio y proteinas, además debe tener carbono que se obtiene de los
28
polisacáridos, disacáridos, monosacáridos o alcoholes, de igual forma debe presentar minerales
como los fosfatos de sodio, fosfato de potasio, sulfato ferroso, sulfato de amonio, sulfato de
magnesio y cloruro de sodio. (Negroni, 2009)
De todos los medios de cultivo utilizados para aislar Cándida en micología se utiliza el medio
convencional que es el agar de Sabouraud que contiene glucosa y peptona como elementos
nutritivos, además tiene un pH ácido que ayuda a frenar el desarrollo de bacterias que puedan
existir en la muestra, en este medio se puede o no utilizarse antibióticos, en el caso de utilizar
antibióticos estos pueden ser cloranfenicol o gentamicina que impide el desarrollo de bacterias,
además se puede añadir cicloheximida para evitar el desarrollo de hongos saprófitos
ambientales. (Liébana, 1995)
2.5.1.5. Tratamiento
Al saber que la candidiasis oral es una infección oportunista debemos identificarla y
eliminarla, pero antes de esto debemos prevenirla y esto se da cuando recomendamos a los
pacientes a que tengan una adecuada higiene oral, enseñarles a que le den una correcta limpieza
a sus placas, prótesis o implantes dentales, si presenta xerostomía se recomendara la
administración de saliva artificial e inclusive disminuir la ingesta de carbohidratos, (Negroni,
2009)
El tratamiento recomendado es la utilización de antimicóticos polienos entre estos tenemos
a la nistatina y la anfotericina B que son fungicidas y tienen un espectro muy amplio, se los
puede administrar tópicamente, por vía oral en suspensiones, pastilla o intravenosa, otro tipo de
antimicóticos son los azoles que son fungistáticos estos son fluconazol e itraconazol. (Marsh,
2011)
29
Además, como un tratamiento alternativo tenemos las infusiones, la de té verde al presentar
las catequinas va a provocar que haya una desorganización de los componentes de su pared
celular, además las catequinas ECG y EGCG van a inhiben la enzima glucosiltransferasa
bacteriana, responsable de la síntesis de glucanos, y estos a la vez son los responsables de la
adherencia bacteriana a la superficie dental, ayudando de esta manera a que no haya adherencia
de Cándida albicans a la placas Hawley. (García, 2013)
La manzanilla al presentar dentro de sus componentes a los flavonoides, los cuales van a
actuar sobre la membrana celular bacteriana rompiéndola y produciendo de esta manera la lisis
de los microorganismos, a través del aumentando de la permeabilidad de la membrana y
desestabilizando la bicapa lipídica. (Martínez, 2010)
30
CAPÍTULO III
3. Metodología
3.1. Tipo de investigación
El presente trabajo de investigación es un estudio transversal porque se realizó en un
corto periodo de tiempo; es analítico porque se realizó el análisis de las muestras de la
infusión de té verde y de manzanilla para identificar cuál de las dos tienen mejores
propiedades; es comparativo porque se comparó los resultados de la actividad antifúngica
de las infusiones; es observacional porque mediante la observación pudimos identificar la
disminución en el número de colonias; y es experimental in vitro porque está orientado a
trabajar con las variables en un laboratorio clínico donde se procedió a realizar medios de
cultivo que sirvieron para el desarrollo de Cándida albicans.
3.2. Universo y muestra
3.2.1. Universo
Estará constituida por 30 placas Hawley, dividas en 2 grupos, el primer grupo será para
la infusión de té verde y el segundo grupo para la infusión de manzanilla.
Contaremos con cepas de Cándida albicans para la contaminación de las placas Hawley.
3.2.2. Muestra
Para obtener el tamaño de muestra se utilizó la siguiente fórmula:
qpZeN
NqpZn
***
***22
2
31
q = 1 - p
Población Finita
Cuando se conoce cuántos elementos
tiene la población
Parámetros Valores
N = Universo 30
Z = nivel de confianza 1,96
e = error de estimación 0,01
p = probabilidad a favor 0,5
q = probabilidad en
contra 0,5
n = tamaño de la muestra 30
3,8416 x 0,5 x 0,5 x 30
30 x 0,0001
+ 3,842 x 0,5 x 0,5
3,8416 x 0,25 x 30
0,003
+ 0,9604
28,812
0,9634
n = 29,91
n = 30
Fuente: Ing. Oswaldo Basurto G.
Mg.
TABLA DE APOYO AL CALCULO DEL TAMAÑO DE UNA MUESTRA
POR NIVELES DE CONFIANZA
Certeza 95% 94% 93% 92% 91% 90% 80% 62,27% 50%
Z 1,96 1,88 1,81 1,75 1,69 1,65 1,28 1 0,6745
Z2 3,84 3,53 3,28 3,06 2,86 2,72 1,64 1 0,45
e 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,1 0,2 0,37 0,5
e2 0,0025 0,0036 0,0049 0,0064 0,0081 0,01 0,04 0,1369 0,25
32
3.2.3. Criterio de inclusión
Placas Hawley esterilizadas a 121 °C durante 20 minutos a una atmósfera de presión.
Placas contaminadas con Cándida albicans
3.2.4. Criterio de exclusión
Placas Hawley no esterilizadas
Placas no contaminadas con Cándida albicans
33
3.3. Variables
3.3.1. Operacionalización de las variables
VARIABLES INDEPENDIENTES
VARIABLE DEFINICIÓN CONCEPTUAL DIMENSIONES NATURALEZA
DE LAS
VARIABLES
ESCALA INDICADOR
Infusión de té verde
Es una bebida a base de té verde
que presenta propiedades
antifúngicas
Una concentración
20%
Cuantitativa
Discreta
Concentración
porcentual
Infusión de
manzanilla
Es una bebida que se la obtiene
de la Matricaria chamomilla, la
cual ayuda en procesos
metabólicos y antifúngico.
Una concentración
20%
Cuantitativa
Discreta
Concentración
porcentual
VARIABLE INTERVINIENTE
34
VARIABLE DEFINICIÓN CONCEPTUAL DIMENSIONES NATURALEZA DE
LA VARIABLE
ESCALA INDICADOR
Cándida albicans
Es un tipo de hongo, patógeno que
puede encontrarse en el ser humano
y causar infecciones
Cepas de Cándida
albicans
cualitativa Nominal Presencia del
microorganismo
aislado
VARIABLE DEPENDIENTE
VARIABLE DEFINICIÓN CONCEPTUAL DIMENSIONES NATURALEZA DE
LA VARIABLE
ESCALA INDICADOR
Efecto antifúngico
Cepas de Cándida
albicans
cualitativa Nominal Presencia del
microorganismo
aislado
35
3.4. Materiales y Recursos
3.4.1. Recursos materiales
Recursos materiales
Caja con guantes, agua destilada, cepa de C. albican, agar Sabouraud, cajas Petri, papel filtro,
té verde, manzanilla, aplicadores, blanco de España, ruedas para pulir, fundas para esterilizar,
bandeja, recipientes, acrílico líquido, acrílico polvo, espátula, modelo de yeso, vaso de vidrio,
aislante, piedra pómez, pinza universal, alambre 0.07.
3.4.2. Recursos humanos
Investigador principal
Tutor de tesis
Estadístico
Traductor
Laboratorista
3.5. Procedimiento y Técnicas
3.5.1. Sitio de investigación
Todo el procedimiento experimental de este trabajo de investigación se realizó en el
Laboratorio de Microbiología de la Facultad de Odontología de la Universidad Central del
Ecuador, con la ayuda de la licenciada encargada de esta área.
36
3.5.2. Fase de elaboración de las placas Hawley
Las placas Hawley fueron elaboradas por la autora de este trabajo de investigación, a
partir de un modelo de yeso piedra prediseñado, además se utilizó acrílico de
autopolimerización trasparente: líquido y polvo, luego se añadió el arco vestibular y los
ganchos Adams, los cuales fueron elaborados con alambre de calibre 0,07 mm.
Figura 1. Modelo de yeso prediseñado
Fuente: Autor
Figura 2. Acrílico de autopolimerización: liquido y polvo
Fuente: Autor
37
Figura 3. Alambre calibre 0,07 mm, pinza universal
Fuente Autor
3.5.3. Fase de pulido
Las placas fueron sometidas a un proceso de pulido, donde se recortó los excesos de
acrílico con una piedra cilíndrica , además se utilizó una mezcla de polvo de piedra
pómez con agua para eliminar las superficies rugosas y para darle un brillo se utilizó
blanco de España, con esto se logró un mejor acabado.
Figura 4. Retiro de excesos de acrílico de las placas Hawley
Fuente: Autor
38
Figura 5. Retiro de excesos de acrílico de las placas Hawley
Fuente: Autor
3.5.4. Fase de esterilización
Las placas fueron introducidas en paquetes quirúrgicos y sometidas a un proceso de
esterilización en autoclave a 121° C a una atmósfera de presión durante 20 min, a los
paquetes se los extrajo del autoclave una vez enfriados para evitar que se humedezcan,
además estuvieron completamente secos, ya que de esta manera los poros del papel
especial se cerrarán dejando a los microorganismos fuera del empaque, conservando así
la esterilidad.
Figura 6. Placas Hawley sin esterilizar Fuente: Autor
39
Figura 7. Placas Hawley esterilizadas
Fuente: Autor
3.5.5. Fase experimental
Se colocó sobre las placas Hawley agar Sabouraud, este es un medio de cultivo
convencional utilizado en micología, constituido por glucosa y peptona, con un pH ácido
que favorece el desarrollo de los hongos, el cual fue preparado en el laboratorio de
Microbiología de la Facultad de Odontología de la UCE, de acuerdo a las indicaciones
del fabricante, las mismas fueron inoculadas con Cándida albicans, la cepa de C. albicans
para su activación fue necesario recoger una asada bacteriana y sumergirla en 10ml de
agua destilada en un tubo de ensayo y agitada fuertemente hasta que se disuelva, toda la
fase experimental fue realizada con la ayuda de la licenciada experta en el área;
posteriormente con la ayuda de una pipeta se procedió a inocular las placas,
seguidamente se incubó de 24- 48 horas a 37°C.
40
Figura 8. Activación de la cepa de Cándida albicans
Fuente: Autor
Figura 9. Contaminación de las placas Hawley
Fuente: Autor
Figura 10. Incubación de las placas Hawley Fuente: Autor
41
A las placas ya contaminadas se procedió a tomarles una muestra para sembrar en cajas
Petri e incubarlas a 37°C por 24-48 horas y posterior a dicho procedimiento se realizó el
conteo de las colonias iniciales de C. albicans de cada caja Petri.
Figura 11. Toma de muestra con un isopo estéril
Fuente: Autor
Figura 12. Siembra de la muestra en una caja Petri
Fuente: Autor
42
Figura 13. Caja Petri lista para ser llevada a la incubadora Fuente: Autor
Figura 14. Cajas Petri en la incubadora
Fuente: Autor
Figura 15. Cajas Petri con colonias de Cándida albicans Fuente: Autor
43
Luego a las placas se las dividió en 2 grupos, las cuales fueron sumergidas en las
infusiones correspondientes, el primer grupo constó de 15 placas para la infusión de té
verde y el otro grupo de 15 placas para la infusión de manzanilla, las cuales
permanecieron sumergidas en las infusiones por10 minutos.
Figura 16. Placas Hawley sumergidas en infusión de té verde
Fuente: Autor
Figura 17. Placas Hawley sumergidas en infusión de manzanilla
Fuente: Autor
44
Luego de este tiempo, las placas se retiraron, se enjuagaron con agua destilada, fueron
secadas, colocadas en recipientes estériles y conservadas a temperatura ambiente.
Figura 18. Placas Hawley guardadas en un recipiente estéril
Fuente: Autor
Este procedimiento se realizó una vez al día por una semana.
Transcurrida la semana, se procedió a la toma de muestras de cada placa Hawley con un
isopo estéril.
Se realizó la siembra de cada muestra en una caja Petri, las cuales contenían agar
Sabouraud, como mencionamos anteriormente este es un medio de cultivo convencional
utilizado en micología, constituido por glucosa y peptona, con un pH ácido que favorece
el desarrollo de los hongos, el cual fue preparado en el laboratorio de Microbiología de
la Facultad de Odontología de la UCE, de acuerdo a las indicaciones del fabricante.
Finalmente se incubó las muestras de 24 – 48 horas a 37° C
45
Figura 19. Toma de muestra final
Fuente: Autor
Figura 20. Siembra de muestra final
Fuente: Autor
Figura 21. Siembra lista para llevar a la incubadora
Fuente: Autor
46
Figura 22. Incubación de las últimas muestras
Fuente: Autor
3.5.5.1. Lectura de cajas Petri
Luego de la incubación se evaluó y se realizó el conteo de las colonias de Cándida
albicans de acuerdo a las infusiones empleadas.
Figura 23. Cajas Petri con colonias de Cándida albicans al inicio y al final del estudio
Fuente: Autor
47
Figura 24. Todas las Cajas Petri con colonias de Cándida albicans al inicio y al final del
estudio
Fuente: Autor
3.5.5.2. Preparación de las infusiones
Se preparó la infusión de té verde a una concentración del 20%, es decir 20g de té verde
en 100ml de agua destilada, el agua destilada al hervir se la retiró del fuego y se colocó
los 20g de té verde y se dejar reposar por 10 minutos, transcurrido dicho tiempo fue
necesario filtrar, se realizó el mismo procedimiento para la infusión de manzanilla, la
preparación de las infusiones se basa en el estudio realizado por Moromi H. & Col. sobre
el efecto antimicrobiano in vivo de la infusión de Camellia sinensis sobre bacterias
orales.
48
Figura 25. Té verde Fuente: Autor
Figura 26. Manzanilla Fuente: Autor
Figura 27. Embudo con papel filtro, para filtrar las infusiones Fuente: Autor
49
3.6. Eliminación de material contaminado
Los materiales contaminados que se produjeron en este trabajo de investigación fueron líquidos
y sólidos, por lo que es imprescindible conocer las normas de bioseguridad que nos permiten
dar un mejor tratamiento en la eliminación de estos y de esta manera evitar infecciones.
Las infusiones de té verde y de manzanilla contaminadas con Cándida albicans fueron
descontaminadas con hipoclorito de sodio al 5% por veinte minutos y vertidas en el
drenaje respectivo dentro del laboratorio.
Las placas Hawley contaminadas entraron en el grupo de material contaminado
destinado al tratamiento en autoclave y a la eliminación, para ello las placas se
introdujeron en recipientes o fundas plásticas resistentes al tratamiento en autoclave y
luego colocadas en una funda de color rojo para su eliminación.
50
CAPÍTULO IV
4. Recolección de datos
Los resultados obtenidos en la fase experimental microbiológica del laboratorio de cada una
de las infusiones fueron recolectados por la autora de este trabajo de investigación en una hoja
de cálculo de Microsoft Excel y posteriormente para el análisis de los resultados se utilizó el
paquete estadístico SPSS versión 20, mediante la prueba paramétrica: T de Student.
4.1. Análisis de resultados
El análisis de los resultados fue realizado por la autora de este estudio con la supervisión del
estadístico de la Facultad de Odontología de la UCE, de acuerdo al tipo de investigación y a los
objetivos planteados se empleó un análisis estadístico descriptivo de cada variable,
representándose mediante tablas de normalidad y porcentaje, además de gráficos de barras
donde se compararon ambas variables.
Para determinar si hay una diferencia significativa en la actividad antifúngica de la infusión
de té verde y de manzanilla sobre cepas de Cándida albicans encontradas en placas Hawley,
determinado por la disminución de las unidades formadoras de colonias (UFC), luego de una
semana a una concentración del 20% de las dos plantas, se realizó el análisis “t de student” con
un nivel de significancia del 5%.
Los datos obtenidos del conteo de las UFC antes y después de sumergirlas en la infusión de
té verde y de manzanilla son las siguientes:
51
Tabla 1. Resultado del conteo de las UFC de Cándida albicans después de exponerlos
a las infusiones de té verde y de manzanilla al 20 %
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
4.2. Procesamiento de la información
Resumen del procesamiento de los casos
infusión
Casos
Válidos Perdidos Total
N Porcentaje N Porcentaje N Porcentaje
colonias té verde 15 100,0% 0 0,0% 15 100,0%
manzanilla 15 100,0% 0 0,0% 15 100,0%
PLACA
S
Manzanilla
Colonias
Inicial
Contaminad
as Cándida
Albicans
Manzanill
a Colonias
Después
de
Sumergida
s
Númer
o de
Colonia
s que se
reducen
Té verde
Colonias
Inicial
Contaminad
as Cándida
Albicans
Té verde
Colonias
Después de
Sumergida
s
Númer
o de
Colonia
s que se
reducen
placa 1 225 17 208 600 2 598
placa 2 215 2 213 644 2 642
placa 3 110 10 100 660 3 657
placa 4 30 3 27 292 8 284
placa 5 320 8 312 321 5 316
placa 6 380 10 370 480 1 479
placa 7 285 24 261 588 0 588
placa 8 107 10 97 360 0 360
placa 9 250 3 247 350 3 347
placa 10 210 5 205 380 3 377
placa 11 195 3 192 205 0 205
placa 12 364 7 357 380 1 379
placa 13 320 5 315 372 1 371
placa 14 406 14 392 660 1 659
placa 15 380 11 369 380 5 375
52
DESCRIPTIVOS
infusion Estadístico Error típ.
colonias tè
verde
Media 442,47 38,472
Intervalo de
confianza para la
media al 95%
Límite
inferior
359,95
Límite
superior
524,98
Media recortada al 5% 443,63
Mediana 377,00
Varianza 22200,981
Desv. típ. 149,000
Mínimo 205
Máximo 659
Rango 454
Amplitud intercuartil 251
Asimetría ,320 ,580
Curtosis -1,269 1,121
manza
nilla
Media 244,33 28,623
Intervalo de
confianza para la
media al 95%
Límite
inferior
182,94
Límite
superior
305,72
Media recortada al 5% 248,20
Mediana 247,00
Varianza 12289,381
Desv. típ. 110,857
Mínimo 27
Máximo 392
Rango 365
Amplitud intercuartil 165
Asimetría -,455 ,580
Curtosis -,624 1,121
Tabla 2. Resultados descriptivos de la Media, Varianza, Desvío estandar
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
53
Gráfico 1. Media de las colonias eliminadas por té verde y manzanilla
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
Gráfico 2. Varianza de té verde y manzanilla
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
0,00 100,00 200,00 300,00 400,00 500,00
manzanilla
té verde
244,33
442,47
Media de colonias
0,0 5000,0 10000,0 15000,0 20000,0 25000,0
Varianza manzanilla
Varianza té verde
12289,4
22201,0
Varianza
54
Gráfico 3. Mínimo y máximo de colonias eliminadas con infusión de manzanilla
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
Gráfico 4. Mínimo y máximo de colonias eliminadas con infusión de té verde
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
0
50
100
150
200
250
300
350
400
Mínimo Máximo
27
392
Mínimo - Máximo manzanilla
0
100
200
300
400
500
600
700
mínimo máximo
205
659
Mínimo - Máximoté verde
55
Gráfico 5. Comparación entre el mínimo y máximo de colonias eliminadas con infusión de té
verde y manzanilla
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
Para aplicar el test de la “t de Student”, se debe comprobar si se cumple las condiciones de
aplicación que son:
Normalidad
Homogeneidad de las varianzas
4.3. Pruebas de Normalidad
Se realizó la prueba de Kolmogorov – Smirnov y la prueba de Shapiro – Wilk en el paquete
estadístico SPSS versión 20, donde la última prueba es útil para nosotros porque nuestro tamaño
de muestra es < 30, y esto nos ayuda a verificar que las muestras tomadas provienen de una
población con distribución normal, probando lo siguiente:
0
100
200
300
400
500
600
700
manzanilla té verde
Mínimo 27 205
Máximo 392 659
392
659
Comparación Máximo - Minimo
Mínimo Máximo
56
Ho (Hipótesis nula): La muestra proviene de una población con distribución Normal
p > 0.05
Ha (Hipótesis alterna): La muestra NO proviene de una población con distribución
Normal
p ≤ 0.05
Pruebas de Normalidad
infusión Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Estadístic
o
gl Sig. Estadístico gl Sig.
colonias
té verde ,265 15 ,006 ,891 15 ,069
manzanill
a ,129 15 ,200* ,941 15 ,399
*. Este es un límite inferior de la significación verdadera.
a. Corrección de la significación de Lilliefors
Tabla 3. Resultado de la Prueba de Normalidad
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
De la Prueba de Shapiro-Wilk tenemos:
El valor de Sig = 0,069 de la infusión de té verde al 20 % es mayor que 0,05 (95% de
confiabilidad) por lo tanto no hay evidencia para rechaza la Ho, determinando que la muestra
proviene de una población con distribución normal.
El valor de Sig = 0,339 de la infusión de manzanilla al 20 % es mayor que 0,05 (95% de
confiabilidad) por lo tanto no hay evidencia para rechaza la Ho, determinando que la muestra
proviene de una población con distribución normal.
57
4.4. Homogeneidad de las varianzas
La homogeneidad de las varianzas se corrobora con la prueba de Levene para la igualdad de
varianza y de esto tenemos:
Ho (Hipótesis nula): La muestra proviene de una población con distribución Normal
p > 0.05
Ha (Hipótesis alterna): La muestra NO proviene de una población con distribución
Normal p ≤ 0.05
Tabla 4. Resultado de la Prueba de Levene
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
El valor de Sig = 0,97 es mayor que 0,05 por lo tanto no hay evidencia para rechaza la Ho,
determinando que la muestra proviene de una población con distribución normal.
Cumpliendo por lo tanto las dos condiciones para aplacar la t de Student.
58
4.5. Prueba T
Estadísticos de grupo
infusión N Media Desviación
típ.
Error típ.
de la media
colonias té verde 15 442,47 149,000 38,472
manzanilla 15 244,33 110,857 28,623
Prueba de Muestras Independientes
Prueba de Levene para
la igualdad de varianzas
Prueba T para la igualdad de medias
F Sig. t gl Sig.
(bilateral)
Diferencia
de medias
Error típ.
de la
diferencia
95% Intervalo de
confianza para la
diferencia
Inferior Superior
colonias
Se han asumido
varianzas iguales 2,951 ,097 4,132 28 ,000 198,133 47,952 99,909 296,358
No se han
asumido varianzas
iguales
4,132 25,864 ,000 198,133 47,952 99,542 296,725
Tabla 5. Resultado de la Prueba de T
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
59
Figura 28. Distribución lineal de datos normal
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
Figura 29. Distribución lineal de datos normal
Fuente: Investigador
Elaboración: Autora
60
Una vez obtenido el valor de “t” tenemos que compararlo con el que aparece en la tabla para
grados de libertad, cuyos grados de libertad se calcula:
g.l.= (n1 + n2) – 2
g.l. = (15 + 15) – 2
g.l. = 28
En nuestro caso los grados de libertad son 28, al buscar en la tabla observamos que una “t28”
equivale a 2,048 para ser significativa al 5% (2 colas).
Por lo tanto si el valor de t (4,132) encontrado es superior al tabulado se rechaza la hipótesis
nula.
Tabla “t de Student
61
Figura 30. Tabla T de student
Fuente: http://es.slideshare.net/GOPPASUDD/t-studentdoscolas-13420801
62
Como el valor obtenido para “t” es de 4,132 tenemos evidencia para rechazar la Hipótesis
nula (Ho), de que no existe una diferencia significativa de la actividad antifúngica entre la
infusión de té verde y de manzanilla sobre cepas de Cándida albicans encontradas en placas
Hawley.
Por lo tanto hay evidencia suficiente para afirmar que existe una diferencia significativa entre
la media de la infusión de té verde y la media de la infusión de manzanilla sobre cepas de
Cándida albicans encontradas en placas Hawley.
63
4.6. Discusión
Los hongos viven en un hábitat aerobio o microaerobio, se desarrollan en temperaturas que
van entre 5 - 45 °C y en un pH de 2 a 8, por lo que se les encuentra como un integrante normal
de la microflora oral, además presenta una estructura celular similar a la célula eucariota,
(Negroni, 2009) de igual forma presenta varios factores de virulencia uno de estos es la
adherencia a los tejidos orales o los biomateriales, como es en nuestro caso a las placas Hawley,
por medio de moléculas que se encuentra en la superficie de la célula del hongo llamadas
adhesinas.(Marsh, 2011)
La finalidad de este proyecto de investigación fue determinar in vitro que la infusión de té
verde y de manzanilla poseen actividad antifúngica sobre cepa de Cándida albicans en placas
Hawley, las mismas que fueron elaboradas por mi persona, con la utilización de acrílico de
autopolimerización transparente líquido y polvo, con alambre 0,07 mm y un modelo
prediseñado, no se utilizó placas de pacientes de la clínica de la Facultad de Odontología de la
UCE porque se deseaba tener un estudio controlado en el laboratorio, además la frecuencia con
que los pacientes hacen la limpieza de sus placas, no es tan confiable, lo cual provocaría
alteraciones en los resultados.
Este estudio no se ha realizado anteriormente, el cual consistió en contaminar a las placas
Hawley con cepas de Cándida albicans, pero antes de este procedimiento se esterilizaron dichas
placas en autoclave a una temperatura de 121°C, a una atmósfera de presión durante 20 min,
esto se realizó con el fin de mantenerlas estériles, es decir inhibir el desarrollo de
microorganismos en las placas, de igual forma esto lo realizó Cervantes y col (2009) en placas
de resina para evaluar el efecto del bicarbonato de sodio al 5 % en la adhesión de Cándida
albicans, teniendo un buen resultado.
64
La activación de dicha cepa se realizó bajo la supervisión de la licenciada experta en el área,
el cual consistió en recoger una asada de la cepa y sumergirla en 10 ml de agua destilada, se la
agitó fuertemente hasta que se disuelva, luego con la ayuda de una pipeta se procedió a
contaminar a las placas, después estas fueron llevadas a la incubadora por 48 horas a una
temperatura de 37°C, transcurrido dicho tiempo se tomó una muestra de las placas para sembrar
en agar Sabouraud e incubarlas por 48 horas, esto fue necesario de realizar para conocer el
número exacto de colonias formadas en cada placa, es decir saber el número inicial de colonias.
Para la preparación de las infusiones a una concentración del 20%, nos basamos en el estudio
realizado por García (2013), donde se utilizó, 20g de té verde y 100ml de agua destilada, la
misma que no tiene impureza, evitando de esta manera cualquier tipo de contaminación en las
infusiones, de esta manera nos aseguramos de no alterar los resultados del estudio.
Una vez que ya sabemos el número inicial de colonias y ya tenemos preparada las infusiones
procedemos a sumergir las placas Hawley en sus respectivas infusiones, 15 placas para la
infusión de té verde y 15 placas para la infusión de manzanilla y las dejamos reposar por 5
minutos, de este modo nos aseguramos que los compuestos químicos de las pantas actúen sobre
el hongo, algo similar hizo Calderón (2014) al sumergir placas de resina contaminadas con C.
albicans en tres tipo de desinfectantes como son: clorhexidina al 0,12%, hipoclorito de sodio al
0,5% y peróxido alcalino (Corega Tabs), donde no se observó crecimiento de colonias en las
placas desinfectadas con clorhexidina al 0,12% y el hipoclorito de sodio al 0,5% .
Al terminar este procedimiento se lavaron las placas con agua destilada, se secaron y se
almacenaron en recipientes estériles, esta parte experimental se la realizó una vez al día por una
semana, con el fin de identificar si existe mayor disminución de colonias de C. albicans al
65
prolongar la frecuencia de exposición de las placas en las infusiones, un estudio in vivo de
Moromi H. y col. (2007) demostró que la infusión de té verde tiene con efecto activo después
de los 30 minutos de su utilización, de lo cual podemos decir que si aumentamos las veces en
que se sumergimos las placas en las infusiones mejores resultado obtendremos en la disminución
de colonias de Cándida albicans.
Finalmente realizamos la última toma de muestra de las placas Hawley, las mismas fueron
sembradas en cajas Petri, las cuales contenían agar Sabouraud que es medio de cultivo idóneo
para este tipo de hongo, luego se las llevó a la incubadora por 48 horas a una temperatura de
37°C, después de este tiempo se procedió a contar las colonias de cada caja Petri, observando
una gran diferencia, es decir una gran disminución de colonias en las cajas Petri con la muestra
de las placas que fueron sumergidas en la infusión de té verde.
Existen otras investigaciones donde han utilizado diferentes plantas medicinales para inhibir
el desarrollo de Cándida albicans, entre esta tenemos al extracto del tomillo y romero, el cual
fue realizado por Estrada, (2010) donde identificó que el extracto de tomillo a una concentración
de 1000 y 10000 µg/ml tiene mayor actividad antimicrobiana frente a Cándida albicans.
El extracto por maceración en etanol de matico, y paico demostraron una inhibición de
crecimiento de Cándida albicans de un 50 a 100%, mientras que los extractos de ambo, hierba
luisa y albahaca inhiben el crecimiento de C. albicans en un 25%, este estudio fue realizado por
Yánez, (2014) de lo cual se puede decir que las plantas medicinales presentan buenas
propiedades antibacterianas, convirtiéndose en una nueva alternativa para inhibir el crecimiento
de este hongo.
66
Moromi y Martínez (2007) estudiaron sobre el Efecto del té verde en la formación de la
placa bacteriana por Streptococcus mutans, de donde se obtuvieron resultados satisfactorios, al
utilizar infusión de té verde al 10%, evitando de esta manera la adherencia de placa bacteriana
a alambre nichrone, debido a la presencia de polifenoles que inhiben la adherencia bacteriana,
como también García (2013) identificó que una infusión de Camellia sinensis (té verde) usada
como colutorio sobre placa bacteriana y saliva tiene efecto antibacteriano, a una concentración
del 20%.
Linares (2012) encontró buenos resultados al utilizar el aceite esencial de manzanilla sobre
Enterococcus facalis ATCC 29212, cuyo estudio fue in vitro y demostró que dicho aceite tiene
efecto antibacteriano en concentraciones del 5%, 10%, 25% y 50% sobre el Enterococcus
fecalis, así mismo Farinango (2013) investigó sobre el efecto inhibidor del aceite esencial de
Matricaria chamomilla “manzanilla” en comparación al Paramonoclorofenol alcanforado y
Gluconato de clorhexidina al 2% sobre cepas de Enterococcus faecalis, el cual fue un estudio in
vitro y concluyó que el aceite esencial de manzanilla al 100% presenta mayor efecto
antimicrobiano, pero siendo mucho mejor el Gluconato de clorhexidina al 2%.
Según Calderón (2014) otro desinfectante que igual ayuda a inhibir el crecimiento de C.
albicans es el hipoclorito de sodio al 0,5%, de esto se puede concluir que, tanto una sustancia
química desinfectante como una infusión de té verde puede ayudar a limpiar adecuadamente
una placa dental, todo depende del conocimiento del paciente y en ocasiones del alcance
económico que este tenga.
67
CAPÍTULO V
5. Conclusiones y Recomendaciones
5.1. Conclusiones
Se determinó que las infusiones de té verde y de manzanilla presentan actividad
antifúngica sobre cepas de Cándida albicans, lo cual se comprobó mediante la sumersión
de las placas Hawley en dichas infusiones en concentraciones del 20 %.
Se estableció que existe actividad antifúngica en las infusiones de té verde y de
manzanilla sobre cepas de Cándida albicans, gracias a los componentes químicos que
presentan dichas plantas, siendo el té verde el que presenta mayor actividad antifúngica
en relación a la manzanilla.
los principales componentes químicos que le atribuyen a la manzanilla la propiedad
antifúngica son los flavonoides y las lactonas sesquiterpénicas que son compuestos
naturales propios de la planta y al té verde los componentes principales que le da la
propiedad antifúngica son: los polifenoles de tipo flavonoides.
Al comparar las infusiones, se identificó mediante la media de la infusión de té verde y
la media de la infusión de manzanilla, que el té verde tiene mayor eficacia sobre cepas
de Cándida albicans encontradas en placas Hawley
68
5.2. Recomendaciones
Realizar más estudios de plantas medicinales como la manzanilla y el té verde que
aporten a mejorar la salud bucodental y general del paciente, disminuyendo de esta
manera el consumo excesivo de sustancias químicas.
Recomendar a los pacientes el uso de infusiones naturales en la limpieza de la cavidad
bucal y de las placas dentales.
Utilizar con mayor frecuencia enjuagues bucales a base de infusiones naturales, ya que
estos no presentan efectos secundarios.
69
CAPÍTULO VI
6. Referencias bibliográficas
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ANEXOS
Anexo 1. AUTORIZACIÓN DEL USO DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
DE LA FACULTAD DE ODONTOLOGÍA DE LA U.C.E.
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
UNIDAD DE INVESTIGACIÓN, TITULACIÓN Y GRADUACIÓN
Oficio 0396-2016-CUITG
Quito, D.M. 21 de Abril del 2016
Señor Doctor
ROBERTO ROMERO
Responsable del Laboratorio de Microbiología
Presente
De mi consideración:
Solicito a usted de la manera más comedida permita acudir al Laboratorio de Microbiología a la
Srta. Viqky Duchicela Perugachi Maldonado, egresada de la Facultad de Odontología periodo 2015-
2015, para realizar el presente Proyecto de investigación cuyo tema es: “Actividad antifúngica de la
infusión de té verde y de manzanilla sobre cepas de Cándida albicans encontradas en placas
Hawley. Estudio comparativo in vitro”. Para la realización de su trabajo requiere utilizar la incubadora,
esterilizadora y otros para los análisis correspondientes. Requisito previo para la obtención del título de
Odontóloga
Atentamente: