universidad catÓlica de cuenca unidad acadÉmica...
TRANSCRIPT
UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA
UNIDAD ACADÉMICA DE INGENIERÍA QUÍMICA, BIOFARMACIA, INDUSTRIAS
Y PRODUCCIÓN
FACULTAD DE BIOFARMACIA
TEMA: ESTUDIO DE STREPTOCOCCUS PYOGENES EN INFECCIONES RESPIRATORIAS.
DIRECTOR:
Dra. PAOLA ORELLANA BRAVO.
INVESTIGADOR:
MÓNICA SUSANA FLORES GARCÍA.
CUENCA - ECUADOR
2014
Monografía previa a la obtención del título de Químico Farmaceuta.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
2
DECLARACIÓN
Yo, Mónica Susana Flores García declaro bajo juramento que el trabajo aquí descrito es
de mí autoría; que no ha sido presentado para ningún grado o calificación profesional; y,
que he consultado las referencias bibliográficas que se incluyen en este documento.
---------------------------------
Mónica Susana Flores García
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
3
CERTIFICACIÓN
Certifico que el presente trabajo fue desarrollado por Mónica Susana Flores García, bajo
mi supervisión.
---------------------------------
Dra. Paola Orellana Bravo
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
4
DEDICATORIA
La culminación de este trabajo está dedicada a Dios porque ha estado conmigo en todo
momento, a mis padres quienes a lo largo de mi vida han velado por mi bienestar y
educación siendo mi apoyo en todo momento, y es por ellos que he podido realizar mis
sueños y llegar a la meta. A mis amigas quienes a lo largo de mi carrera han sido como
mis hermanas y ti mi Alex que desde el cielo nos cuidas siempre.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
5
AGRADECIMIENTO
Agradezco a Dios por haberme dado la vida, porque ha estado conmigo en todo
momento guiándome, cuidándome y dándome fortaleza para seguir adelante.
A mi padre Luis por ser mi ejemplo a seguir, que con sus consejos y gran cariño
siempre ha estado a mi lado apoyándome a cumplir una meta más en mi vida.
A mi madre Norma por ser mí mejor amiga, que con su gran amor y ternura siempre ha
estado a mi lado cuidándome.
A mis hermanos que han estado conmigo en todo momento apoyándome siempre, a mi
pequeña hermanita que con su sonrisa alegra nuestras vidas.
A mis profesores que a lo largo de mi carrera siempre me han brindado sus
conocimientos, a mi directora, la Dra. Paola Orellana que con su gran apoyo y
motivación me ha guiado para la culminación de este trabajo.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
6
INDICE
INDICE ............................................................................................................................. 6
INTRODUCCIÓN ............................................................................................................ 8
OBJETIVO GENERAL ................................................................................................... 9
OBJETIVOS ESPECÍFICOS ........................................................................................... 9
CAPÍTULO I .................................................................................................................. 10
STREPTOCOCCUS ....................................................................................................... 11
1.1 GENERALIDADES ............................................................................................. 11
1.2 CLASIFICACIÓN CIENTÍFICA. ........................................................................ 12
1.3 CLASIFICACIÓN DE LANCEFIELD. ............................................................... 12
1.4 CLASIFICACIÓN DE PATRONES HEMOLÍTICOS. ....................................... 14
1.5 CLASIFICACIÓN POR SUS PROPIEDADES BIOQUÍMICAS. ...................... 15
CAPÍTULO II ................................................................................................................. 20
STREPTOCOCCUS PYOGENES ................................................................................. 21
2.1 CONCEPTO. ........................................................................................................ 21
2.2 FISIOLOGÍA ........................................................................................................ 21
2.3 ESTRUCTURA .................................................................................................... 22
2.4 FACTORES DE VIRULENCIA .......................................................................... 24
2.5 PATOGÉNESIS .................................................................................................... 27
2.5.1 Faringitis Estreptocócica ................................................................................ 27
2.5.2 Inmunidad....................................................................................................... 29
2.6 EPIDEMIOLOGIA ............................................................................................... 30
2.7 CUADRO CLÍNICO. ........................................................................................... 31
2.8 ESTUDIOS BIOMOLECULARES ...................................................................... 35
2.8.1 Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) .................................................. 35
2.8.2 Sonda de ADN ............................................................................................... 36
CAPÍTULO III ............................................................................................................... 37
3.1 PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN ..................................................................... 38
3.2 DETECCIÓN DIRECTA. .................................................................................... 39
3.3 CULTIVO ............................................................................................................. 40
3.4 PRUEBAS BIOQUÍMICAS ................................................................................. 43
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
7
3.4.1 Sensibilidad a la Bacitracina. ......................................................................... 43
3.4.2 Hidrólisis de L-pirrolidonil β-naftilamida (PYR) .......................................... 44
3.5 PRUEBAS SEROLÓGICAS ................................................................................ 46
3.5.1 Antiestreptolisina O (ASTO) ......................................................................... 46
3.5.2 Prueba Streptococcus Latex Group. ............................................................... 47
3.6 BIOLOGÍA MOLECULAR ................................................................................. 50
CAPÍTULO IV ............................................................................................................... 51
4.1 TRATAMIENTO. ................................................................................................. 52
4.2 PREVENCIÓN ..................................................................................................... 54
4.3 CONTROL ............................................................................................................ 55
4.4 RECOMENDACIONES ....................................................................................... 55
CONCLUSIONES .......................................................................................................... 56
BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................................ 57
GLOSARIO .................................................................................................................... 59
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
8
INTRODUCCIÓN
Los Streptococcus son bacterias esféricas Gram positivas que se distribuyen
ampliamente en la naturaleza; algunos son miembros de la flora humana normal y otros
se asocian con enfermedades humanas importantes.
Streptococcus pyogenes o Streptococcus beta-hemolítico del grupo A es la causa
bacteriana de una gran variedad de infecciones cutáneas y sistémicas que por su
estructura es muy virulenta originando diversas enfermedades supurativas y no
supurativas, constituyendo la causa más frecuente de faringitis bacteriana y de
enfermedades potencialmente mortales.
Las personas pueden contagiarse de esta infección por gotitas en el aire y por contacto
de persona a persona con las secreciones nasales o la saliva, se propaga con frecuencia
entre miembros de la familia o personas que habitan en la misma casa y presenta con
síntomas de fiebre, exudado faríngeo, glándulas inflamadas y malestar general.
Para el diagnóstico de esta bacteria existen varios pruebas de diagnóstico como son:
técnicas microscópicas a partir de tinciones de tejidos para la observación de las células
infectadas, también el cultivo para el aislamiento del mismo, pruebas de detección de
antígenos, pruebas serológicas las cuales son de mucha importancia para lograr una
identificación en estadios tempranos de la infección evitando cuadros clínicos graves y
la muerte del paciente.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
9
OBJETIVO GENERAL:
Estudiar a Streptococcus pyogenes mediante el análisis bibliográfico para poder dar una
alternativa de tratamiento, prevención y control que mejoren la calidad de vida del
paciente.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
• Estudiar las características generales y clasificación de los Streptococcus.
• Identificar las características morfológicas, fisiológicas, factores de virulencia,
para así poder analizar el grado de patogenicidad y gravedad de las
enfermedades causadas en el tracto respiratorio por Streptococcus pyogenes.
• Profundizar acerca de las técnicas de laboratorio para la identificación de la
bacteria.
• Conocer el tratamiento, medidas de prevención y control, evitando la
propagación de la bacteria.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
10
CAPÍTULO I
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
11
STREPTOCOCCUS
1.1 GENERALIDADES.
Los Streptococcus son bacterias Gram positivas de forma esférica, agrupadas en pares o
cadenas de longitudes variadas condicionada por factores ambientales durante su
multiplicación. Los miembros de esta cadena con frecuencia presentan un aspecto
diplococico y en ocasiones se observan formas parecidas a bacilos.
Estas bacterias son Oxidasa y Catalasa negativos, no forman esporas, generalmente son
inmóviles. Algunas especies producen hemólisis en agar sangre, otras producen
hemolisinas y algunas especies son no hemolíticas.
Muchas especies son aerobias o anaerobias facultativas y las de un pequeño grupo son
obligadamente anaerobias. La mayor parte de los Streptococcus elaboran una sustancia
llamada hidrato de carbono C que cuando es lisado por enzimas forma un antígeno
empleado para su agrupación serológica.
Los Streptococcus tienen una amplia distribución en la naturaleza, algunos son
miembros de la flora humana normal y existen más de 25 especies identificadas que
incluyen Streptococcus pyogenes (grupo A), Streptococcus agalactiae (grupo B) y
Enterococcus (grupo D); algunas de estas especies son patógenas para los seres
humanos, principalmente el Streptococcus pyogenes y el Streptococcus pneumoniae.
Gráfico 1: Streptococcus
Fuente: http://www.deimagenesyfotos.com/streptococcus-pyogenes/
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
12
Las especies de Streptococcus que producen enfermedades importantes en el humano:
Streptococcus del grupo A: Streptococcus pyogenes producen amigdalitis e
impétigo.
Streptococcus del grupo B: Streptococcus agalactiae producen meningitis en
neonatos y trastornos del embarazo en la mujer.
Streptococcus pneumoniae: es la principal causa de neumonía adquirida en la
comunidad.
Streptococcus viridans: es una causa importante de endocarditis y de
abscesos dentales.
Streptococcus mutans: causa importante de caries dental.
1.2 CLASIFICACIÓN CIENTÍFICA.
Cuadro: 1 Clasificación científica de los Streptococcus. Fuente: http://es.wikipedia.org/wiki/Streptococcus
Jerarquía taxonómica Filo: Firmicutes Clase: Bacilli Orden: Lactobacillales Familia: Streptococcaceae Género: Streptococcus Especies Streptococcus Pyogenes Streptococcus Agalactiae Streptococcus Pneumoniae Streptococcus Viridans Streptococcus Bovis Streptococcus Mutans Streptococcus Salivarius Streptococcus Thermophilus
1.3 CLASIFICACIÓN DE LANCEFIELD.
En el año 1933 Rebecca Craighill Lancefield logro el sistema de clasificación serológica
de bacterias del género Streptococcus por medio de las diferencias antigénicas en los
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
13
hidratos de carbono en la pared celular en las especies; esta especificidad serológica del
carbohidrato específico de grupo está determinada por un amino-azúcar.
Mediante este sistema se designó serogrupos de la A – H y de la K – V, siendo son los
más frecuentes los grupos A, B, C, D encontrados en los seres humanos.
Las Streptococcus que carecen de un antígeno de grupo reconocible se identifican por
pruebas fisiológicas que incluyen reacciones de fermentación, crecimiento a 10°C y
45°C, crecimiento en caldo con elevado contenido de sal, los requerimientos
nutricionales de estas bacterias son complejos de manera que los medios de cultivo
deben ser los adecuados para su desarrollo.
Cuadro 2: Serogrupos estreptocócicos más frecuentemente aislados en seres
humanos.
Fuente: Jawetz, Melnick y Adelberg, Microbiología médica pág. 241
Serogrupo Lancefield
Antígeno de la pared celular especifico al grupo.
Características clínicas
A Polisacárido ramnosa- N-acetilglucosamina
Faringitis, amigdalitis, otitis media, sinusitis, escarlatina, erisipela, celulitis, impétigo, neumonía, septicemia, secuelas no supuradas tardías, fiebre reumática aguda.
B Polisacárido ramnosa-glucosamina
Corioamnionitis. Sepsis puerperal, Sepsis. Meningitis neonatales.
C Polisacárido ramnosa- N-acetilgalactosamina
Infecciones respiratorias altas.
D Glicerol ácido teicoico Infecciones del tracto genitourinario. Infecciones de heridas, endocarditis.
G Polisacárido ramnosa- galactosamina
Infecciones respiratorias altas. Celulitis, Septicemia. Infecciones de tejidos profundos.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
14
1.4 CLASIFICACIÓN DE PATRONES HEMOLÍTICOS.
β -Hemolisis.
α –hemolisis.
ال -hemolisis o Streptococcus no hemolíticos.
Las características de hemólisis observadas al cultivar Streptococcus en placas de agar
sangre se observan diferencias en las características morfológicas de superficie entre las
cepas.
La mayoría de estas bacterias tiene la capacidad de causar hemólisis en las placas de
agar-sangre dentro de las cuales los eritrocitos han sido lisados en forma completa este
patrón se designa β hemolisis.
Gráfico 2: B-hemolisis de Streptococcus pyogenes en cultivo de agar sangre.
Fuente: Laboratorio clínico Santa Sofía
Otro grupo de microorganismos producen la lisis incompleta de eritrocitos con
reducción de la hemoglobina y la formación de pigmento verde a este patrón se designa
α hemólisis.
Las cepas que no producen hemólisis se designa ال hemólisis o Streptococcus no
hemolíticos.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
15
Cuadro 3: Características de Streptococcus de importancia médica. Fuente: Jawetz, Melnick y Adelberg, Microbiología médica pág. 196
Nombre Sustancia especifica de grupo.
Hemolisis Hábitat
Streptococcus pyogenes
A Β Faringe, piel.
Streptococcus agalactiae
B Β Aparato genital femenino, tubo digestivo bajo.
Streptococcus dysgalactiae
C,G Β (infecciones humanas), α, ninguno.
Faringe.
Enterococcus faecalis.
D Ninguna, α. Colon.
Grupo de Streptococcus bovis
D Ninguna Colon, árbol biliar.
Grupo de Streptococcus anginosus, S. intermedius, S. constellatus, grupo S. milleri
F (A, C, G) y no tipificable.
α, Β, ninguna. Faringe, colon, aparato genital femenino.
Streptococcus viridans (muchas especies)
Por lo general no tipificado.
α, ninguna. Boca, faringe, colon, aparato genital femenino.
Streptococcus Pneumoniae.
Ninguna α, Nasofaringe.
1.5 CLASIFICACIÓN POR SUS PROPIEDADES BIOQUÍMICAS.
Las pruebas bioquímicas incluyen reacciones de fermentación de azúcar, pruebas para
determinar la presencia de enzimas y pruebas de susceptibilidad o resistencia a ciertos
agentes químicos, utilizadas para clasificar los streptococcus después de observar el
crecimiento de la colonia y las características hemolíticas de las especies que no
reaccionan con las preparaciones de anticuerpos utilizadas para las sustancias
específicas de grupo, de los grupos A, B, C, F y G.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
16
Sensibilidad a la Bacitracina.
La bacitracina es un antibiótico que inhibe la síntesis de pared celular bacteriana, y a la
concentración que se encuentra en los discos (0.04 U), inhibe el crecimiento de los
estreptococos beta hemolíticos del grupo A de Lancefield pero no inhibe el desarrollo
de otros estreptococos beta hemolíticos.
- El objetivo de esta prueba es separar el Streptococcus pyogenes de los demás
estreptococos beta hemolíticos.
- Esta prueba se realiza utilizando un hisopo estéril e hisopar un cultivo puro en
una placa de agar sangre; luego se coloca el disco de Bacitracina de 0.04 U sobre
la superficie de la placa y se incuba durante 24 horas, a 35-37 º C.
- En la interpretación de resultados examinar la placa y observar la presencia del
halo de inhibición del desarrollo alrededor del disco de bacitracina y se
considera la prueba sensible con la aparición de cualquier diámetro de halo de
inhibición de crecimiento alrededor del disco.
Prueba de CAMP (Christie, Atkins, Munch-Petersen).
La prueba de CAMP se utiliza para la identificación presuntiva de S. agalactiae (grupo
B de Lancefield). En esta prueba se observa un efecto sinérgico que se produce al
interactuar el factor CAMP producido por cepas de S. agalactiae.
- Esta prueba se basa en que los estreptococos del grupo B producen un factor
llamado CAMP (factor de monofosfato de adenina cíclica) que aumenta la zona
de hemólisis producida por un estafilococo productor de ß- lisina.
- Se realiza estriando un cultivo de estreptococo ß-hemolítico en forma
perpendicular a una estría de un estafilococo productor de ß-lisina en agar
sangre. Se incuba 18-24 horas a 37ºC.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
17
- La prueba positiva se evidencia por la presencia de una zona de potenciación de
la hemólisis en forma de puntas de flecha en el lugar donde se contactan las dos
estrías.
Sensibilidad a la Optoquina.
El objetivo de esta prueba es identificar y diferenciar Streptococcus pneumoniae ya que
los discos embebidos en clorhidrato de etilhidrocupreína (Optoquina).
- Esta prueba se basa en que las colonias de Streptococcus pneumoniae son
inhibidas por 5 µg de Optoquina contenida en un disco de papel de filtro
aplicado sobre la superficie de una placa de agar sangre. Las colonias de S.
pneumoniae son mucoides o crateriformes.
- El procedimiento de esta prueba es estriar un cuadrante de una placa de agar
sangre en varias direcciones con una suspensión Mc Farland 0,5. Colocar luego
un disco de Optoquina en el centro del área estriada. Incubar 18-24 horas a 37ºC.
- Esta prueba es positiva cuando presenta halos de inhibición mayores de 15mm
que son característicos de Streptococcus pneumoniae.
Gráfico 3: Prueba de Camp, Prueba de Optoquina, Prueba de Bacitracina.
Fuente: http://www.djibnet.com/photo/agar/test-de-camp-prueba-de-optoquina-y-prueba-de-bacitracina-2043677857.html
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
18
Prueba de Hidrólisis de Esculina o Bilis Esculina.
El objetivo de esta prueba es separar los estreptococos del grupo D de los demás grupos
de estreptococos.
Es un medio de cultivo nutritivo por la presencia de extracto de carne y peptona de
carne que aportan nutrientes para el desarrollo microbiano, los streptococcus del grupo
D crecen rápidamente en el agar bilis esculina e hidrolizan la esculina, que en presencia
de iones hierro forman un compuesto de color verde oliva hasta negro.
- El tiempo de incubación es de 18-24 horas a 35-37 °C.
- La concentración de bilis es fundamental, ya que existen estreptococos del grupo
Viridans que son capaces de crecer a concentraciones menores de bilis.
- Se realiza sembrando en superficie tubos de agar bilis esculina inclinado. Una
reacción positiva se evidencia como ennegrecimiento del medio.
Grafico 4: Prueba de Hidrólisis de Esculina.
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=hidrolisis+de+esculina&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=wI75UuHsFYfLkQecu
oDYDA&sqi=2&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#q=BILIS+esculina&tbm=isch&facrc=_&imgdii=jNxeBX6HqBsFR
M%3A%3BYfLxHTSOjl4rPM%3BjNxeBX6HqBsFRM%3A&imgrc=jNxeBX6HqBsFRM%253A%3BuzAvJB4po7oohM%3Bhttp%25
3A%252F%252Fupload.wikimedia.org%252Fwikipedia%252Fcommons%252Fthumb%252F3%252F30%252FListeria_monocytog
enes_-_Oxford_Listeria_Agar.jpg%252F120px-Listeria_monocytogenes_
_Oxford_Listeria_Agar.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fes.wikipedia.org%252Fwiki%252FListeria_monocytogenes%3B120%3B9
0
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
19
Hidrólisis del PYR (pirridonil ß-naftilamida).
El objetivo de esta prueba es separar Streptococcus pyogenes y Enterococcus de los
demás estreptococos β-Hemolíticos. Estas bacterias poseen la capacidad de hidrolizar el
substrato PYR (pirridonil ß-naftilamida) debido a que poseen la enzima l-piroglutamil
aminopeptidasa. Esta prueba se revela por un cambio de color.
- Esta prueba se realiza a partir de un cultivo puro, hacer una suspensión densa en
50 µl de solución fisiológica estéril, y agregar un disco de PYR. La incubación
se debe realizar durante 2 horas a 35–37 ºC, agregar una gota de reactivo
revelador y dejar a temperatura ambiente, hasta 5 minutos.
- En la interpretación de resultados se considera positivo si se observa de color
rosa-rojo en el disco, y la prueba es negativa si la suspensión o el disco
permanecen incoloros o de color amarillo.
Cuadro 4: Especies y pruebas de laboratorio para Streptococcus.
Fuente: Bailey&Scott, Diagnóstico médico pág. 320
Especie Especie Tamaño de la colonia PYR VP CAMP A S. pyogenes Grande + - - A S. grupo anginosus Pequeña - + - B S. agalactiae Grande - - C S. dysgalactiae Grande - - - C S. grupo anginosus Pequeña - + - F S. grupo anginosus Pequeña - + - G S. dysgalactiae Grande - - - G S. anginosus Pequeña - + -
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
20
CAPÍTULO
II
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
21
STREPTOCOCCUS PYOGENES
2.1 CONCEPTO.
El Streptococcus pyogenes es la causa bacteriana más frecuente de faringitis aguda y de
una gran variedad de infecciones cutáneas y sistémicas debido a que produce varios
factores como las estreptolisinas O y S que contribuyen a su virulencia y además dan
origen al patrón beta hemolítico en las placas de agar sangre.
Es conocido también como Streptococcus beta hemolítico del grupo A y ocupa un lugar
importante en el estudio de la microbiología médica por ocasionar dos secuelas no
supurativas: fiebre reumática (FR) y glomerulonefritis difusa aguda postestreptocócica
(GNDA).
2.2 FISIOLOGÍA.
Las infecciones causadas por Streptococcus pyogenes pueden ser localizadas y
sistémicas con trastornos inmunitarios después de la infección, la más frecuente es la
faringitis aguda. Cuando las infecciones permanecen localizadas pueden liberarse
exotoxinas pirógenas estreptocócicas (SPE) y causar escarlatina que cursa asociada con
faringitis estreptocócica y se manifiesta por una erupción cutánea en el rostro y la parte
superior del tronco.
Las enfermedades posestreptocócicas como la fiebre reumática y la glomerulonefritis
son otras complicaciones causadas por esta bacteria.
- Son bacterias Gram positivas, inmóviles, no formadores de esporas, son catalasa
negativa y facultativamente anaerobias.
- Microscópicamente son células esféricas u ovoides de 0.6-1.0 um de diámetro y
se agrupan en pares o cadenas de longitud variable en muestras clínicas o
cuando crecen en medios líquidos enriquecidos con suero o sangre.
- Requieren de medios complejos enriquecidos con sangre para su desarrollo
óptimo.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
22
Estas bacterias cuando crecen en medios sólidos con sangre se observan alrededor de las
colonias grises un halo de β-hemólisis de 1-2 mm de diámetro a las 24 horas de
incubación, pero cuando contienen una concentración elevada de glucosa se ve inhibido.
La mayor parte de las cepas del grupo A producen cápsulas compuestas de ácido
hialurónico que impiden la fagocitosis y son más notables en los cultivos jóvenes. En
pared está constituida por carbohidratos que son específicos de cada grupo, proteínas
(antígenos M, T, R), y peptidoglucanos. Poseen pilis que son semejantes a vellosidades
que se prolongan a través de la cápsula de los streptococcus del grupo A que contienen
en parte proteína M y están cubiertos de ácido lipoteicoico importante para la adhesión
de los Streptococcus a las células epiteliales.
En su morfología se pueden observar colonias distintas que pueden ser de color mate
por lo que producen mucha proteína M y son virulentos. Los Streptococcus de colonias
brillantes producen poca cantidad de proteína M y no suelen ser virulentos.
Estas bacterias son positivas a la prueba de PYR (Hidrolisis de L-pirrolidonil-
naftilamida) y son susceptibles a la prueba de la Bacitracina.
2.3 ESTRUCTURA.
En la estructura del Streptococcus pyogenes se ha identificado un gran número de
componentes estructurales que determinan su virulencia.
2.3.1 Pared Celular.
La pared celular está constituida por una capa de péptidoglicanos gruesa, polisacáridos,
proteínas y ácido teicoico, los polisacáridos y proteínas antigénicas se encuentran en la
superficie de las células y que es fundamental para mantener su integridad; son
permeables a los compuestos nutritivos necesarios para su desarrollo y a la capacidad
del organismo para infectar e inducir estados patológicos.
- En la pared celular de esta bacteria se encuentran los antígenos específicos que
constituye la base de los grupos serológicos.
- La especificidad serológica de los carbohidratos específicos de grupo se
determina mediante el azúcar ramnosa-N- acetilgalactosamina, el cual representa
el 10% del peso en seco de la célula.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
23
Las superficies de las células están cubiertas por proyecciones vellosas denominadas
fimbrias que se extienden dentro de la cubierta de ácido hialurónico y son las
responsables de la unión de la célula estreptocócica a las células epiteliales, un paso
inicial esencial para la colonización y el establecimiento de la infección.
2.3.2 Proteína M.
Esta sustancia tiene la apariencia de prolongaciones semejantes a pelos de la pared
celular, es un factor importante de virulencia para el Streptococcus pyogenes cuando la
proteína M está presente los streptococcus son virulentos y cuando está ausente no
presentan virulencia.
- En ausencia de anticuerpos específicos tipo M pueden resistir a la fagocitosis
efectuada por los leucocitos polimorfonucleares.
- La inmunidad a la infección con Streptococcus del grupo A se relaciona con
anticuerpos de tipo específico a la proteína M, dado que existen más de 80 tipos
de proteína M una persona puede sufrir infecciones repetidas de streptococcus
pyogenes del grupo A de diferentes tipos M.
- La molécula de la proteína M tiene una estructura de espiral enrollada parecida a
un bastoncillo que separa los dominios funcionales y permite una serie de
cambios en las secuencias y mantienen la función, por lo que los
inmunodeterminates de la proteína M pueden cambiar con facilidad.
2.3.3 Sustancia T.
Este antígeno es ácido lábil y termolábil. No tiene relación con la virulencia de los
Streptococcus del grupo A, se obtiene mediante la digestión proteolítica que destruye
con rapidez a la proteína M. Son de utilidad para completar la tipificación de los
Streptococcus especialmente en las cepas no identificables de la proteína M,
2.3.4 Nucleoproteínas.
La extracción de los Streptococcus con un álcali débil produce mezclas de proteínas y
otras sustancias con escasa especificidad serológica denominada sustancia P que talvez
puede estar constituida por la mayor parte del cuerpo de las células estreptocócicas.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
24
2.3.5 Proteína F.
La proteína F cumple un papel importante en el primer paso de la colonización, que es
la adherencia del Streptococcus pyogenes a la molécula de fibronectina, glucoproteina
situada en la superficie de las células epiteliales humanas. El ácido lipoteicoico formado
por unidades de poliglicerol fosfato unidas a lípidos cumple también un papel
importante en la adherencia en asociación con las proteínas de la superficie.
2.4 FACTORES DE VIRULENCIA.
2.4.1 Estreptocinasa.
La mayor parte de cepas del estreptococo hemolítico β del grupo A producen
estreptocinasa, esta sustancia transforma el plasminógeno del plasma humano en
plasmina, una enzima proteolítica que digiere la fibrina y otras proteínas. Este proceso
de digestión puede interferirse mediante inhibidores inespecíficos del suero y con un
anticuerpo específico, la antiestreptocinasa.
La estreptoquinasa puede administrarse por vía intravenosa para el tratamiento de
embolia pulmonar y de trombosis de la arteria coronaria y de trombos venosos.
2.4.2 Estreptodornasa.
La estreptodornasa o desoxirribonucleasa estreptocócica, despolimeriza el DNA. La
actividad se puede cuantificar por la disminución de la viscosidad de las soluciones de
DNA con viscosidad conocida.
- Los exudados purulentos deben su viscosidad principalmente a la
desoxirribonucleoproteína, en el desbridamiento enzimático se emplean mezclas
de estreptodornasa y estreptoquinasa que son útiles para licuar exudados y retirar
con mayor facilidad pus y tejido necrosado; así los antimicrobianos tienen mejor
acceso y las superficies infectadas se recuperan con mayor rapidez.
- Después de las infecciones por estreptococo se desarrolla un anticuerpo ADNasa
(límite normal=100 unidades), en especial después de las infecciones de la piel.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
25
2.4.3 Hialuronidasa.
La hialuronidasa desdobla el ácido hialurónico, un componente importante de la
sustancia fundamental del tejido conectivo y ayuda a la propagación de los
microorganismos infectantes (factor de propagación).
Las hialuronidasas son antigénicas y específicas de cada bacteria o fuente tisular,
después de la infección con microorganismos productores de hialuronidasa aparecen en
el suero anticuerpos específicos.
2.4.4 Exotoxinas pirógenas.
Los estreptococos del grupo A elaboran exotoxinas pirógenas, existen tres exotoxinas
pirógenas estreptocócicas: A, B y C antigénicamente distintas.
La exotoxina A es la más estudiada y la producen los estreptococos del grupo A que
portan un fago lisogénico y es un superantígeno.
Las exotoxinas pirógenas estreptocócicas se han vinculado con el síndrome de shock
tóxico estreptocócico y con la fiebre escarlatina, la mayoría de las cepas de
estreptococos del grupo A aisladas de los pacientes con síndrome de shock tóxico
estreptocócico producen exotoxina A pirógena estreptocócica o poseen el gen que la
codifica; por el contrario aproximadamente el 15% de los estreptococos del grupo A
aislados de otros pacientes poseen dicho gen.
2.4.5 Difosfopiridina nucleotidasa.
Esta sustancia puede vincularse con la capacidad de los organismos para matar los
leucocitos y algunos estreptococos producen esta enzima en el ambiente.
Ciertas cepas producen proteinasa y amilasa.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
26
2.4.6 Hemolisinas.
El Streptococcus pyogenes β-hemolítico del grupo A elabora dos hemolisinas
(estreptolisinas).
A) Estreptolisina O.
La estreptolisina O (SLO streptolysin O) es una proteína hemolíticamente activa en
estado reducido, pero en presencia de oxígeno se inactiva rápidamente.
La estreptolisina O es causa de parte de la hemólisis observada cuando el crecimiento
ocurre en cortes profundos dentro del medio en placas de agar sangre.
B) Antiestreptolisina O.
Se combina cuantitativamente con la antiestreptolisina O, un anticuerpo que aparece en
humanos luego de la infección con cualquier estreptococo que produzca estreptolisina
O, este anticuerpo impide la hemólisis por la estreptolisina O que constituye la base de
una prueba cuantitativa para el anticuerpo.
Un título de antiestreptolisina O en suero (ASO) mayor de 160 a 200 unidades se
considera anormalmente elevado y sugiere infección reciente por estreptococos o
concentraciones persistentemente grandes del anticuerpo a causa de la respuesta
inmunitaria excesiva a una exposición temprana por parte de la persona hipersensible.
C) Estreptolisina S.
La estreptolisina S (SLS streptolysin S) es el agente causante de las zonas hemolíticas
alrededor de las colonias de estreptococos que crecen sobre la superficie de placas agar
sangre.
Se elabora en presencia de suero y no es antigénica, pero puede inhibirse mediante un
inhibidor específico casi siempre presente en el suero de los humanos y animales y es
independiente de experiencias anteriores con estreptococos.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
27
Gráfico 5: Estructura Antigénica.
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=estructura+antigenica+de+streptococcus+pyogenes&source=lnms&tbm=isch&sa=
X&ei=gxrxUuysAo-
qkQfGwYCABg&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#facrc=_&imgrc=I3afy7AmQkRP3M%253A%3ByZl-
Kh88da7cIM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.losmicrobios.com.ar%252Fmicrobios%252Fimagenes%252Fstreptobetahemolitic
o.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.losmicrobios.com.ar%252Fmicrobios%252F%253Fpage_id%253D1262%3B597%3B414
2.5 PATOGÉNESIS.
El Streptococcus pyogenes está asociado a diferentes procesos patológicos en las cuales
intervienen las propiedades biológicas de los microorganismos infectantes, la naturaleza
de la respuesta del huésped y la puerta de ingreso de la infección.
Las infecciones se pueden dividir en categorías:
A) Enfermedad atribuible a infección local con Streptococcus pyogenes β-
hemolítico del grupo A.
2.5.1 Faringitis Estreptocócica.
La faringitis o amigdalitis estreptocócica es la infección más frecuente causada por el
Streptococcus pyogenes β-hemolítico del grupo A y puede causar daño por acción
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
28
superficial, diseminación por contigüidad a través del torrente sanguíneo o por
producción de toxinas, y para su infección tiene que adherirse a la mucosa faríngea en el
cual hay interacción entre el ácido lipoteicoico de su pared y la fibronectina de la célula
epitelial humana.
Su capsula de ácido hialurónico tiene propiedades antifagociticas por su similitud con el
ácido hialurónico humano, entre las propiedades de mayor importancia es que tiene la
proteína M que le confiere resistencia a la fagocitosis.
Esta es una infección que causa el 37% de los dolores de garganta en niños y el 5% -
15% en adulto; afecta a la faringe incluyendo las amígdalas y en ocasiones a la laringe.
Los estreptococos virulentos de esta bacteria se adhieren al epitelio faríngeo por medio
de pili de ácido lipoteicoico que cubren su superficie, la glucoproteina fibronectina que
se encuentra sobre las células epiteliales probablemente sirve como ligando para el
ácido lipoteicoico.
Las causas de esta infección:
Se disemina por gotitas en el aire y por contacto de persona a persona con las
secreciones nasales o la saliva.
La tos y los estornudos de personas que padecen de faringitis estreptocócica.
Tocar una superficie que esté contaminada y después tocarse los ojos, la nariz o
la boca
Se propaga con frecuencia entre miembros de la familia o personas que habitan
en la misma casa.
El periodo de incubación y el el inicio de los síntomas de esta enfermedad ocurre de 24
a 72 horas después del contagio.
Los síntomas más comunes:
Dolor de garganta
Dolor al tragar
Fiebre
Exudado amigdalar
Ganglios inflamados, sensibles o
dolorosos al tacto.
Dolor de cabeza
Dolor muscular
Malestar general
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
29
Gráfico 6: Faringitis Estreptocócica.
Fuente: http://www.childrensdayton.org/cms/kidshealth/97cb822b3c15db45/index.html
En los lactantes y niños de corta edad la faringitis se presenta:
Nasofaringitis subaguda con secreción serosa liquida.
Poca fiebre pero la infección puede extenderse al oído medio, mastoides,
meninges y los ganglios linfáticos cervicales están hipertrofiados.
La enfermedad puede persistir durante semanas y un 20% de las infecciones son
asintomáticas, puede aparecer un cuadro clínico similar en la mononucleosis infecciosa,
difteria, infección gonocócica y en la infección por adenovirus.
Sin tratamiento, el estreptococo puede llevar a complicaciones graves como:
Infección del oído
Glomerulonefritis
Psoriasis en gotas
Mastoiditis
Absceso periamigdalino
Fiebre reumática
Escarlatina
Sinusitis
Los síntomas mejoran en un período de tres a cinco días del tratamiento y los
antibióticos reducen el riesgo de complicaciones.
2.5.2 Inmunidad.
Un huésped restablecido de una infección por algún estreptocócico tipo M del grupo A
es relativamente poco susceptible a una nueva infección por el mismo tipo M.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
30
En los anticuerpos específicos anti tipo M los estreptococos mueren rápidamente
después de ser fagocitados y la proteína M interfiere con la fagocitosis, pero en
presencia de anticuerpo especifico a proteína M, los leucocitos humanos matan a los
estreptococos.
Después de la infección se desarrollan anticuerpos a estreptolisina O; estos anticuerpos
impiden la hemolisis por estreptolisina O pero no indican inmunidad, los títulos altos
señalan infecciones recientes o repetidas se observan con mayor frecuencia en pacientes
reumáticos en comparación con infecciones estreptocócicas no complicadas.
2.6 EPIDEMIOLOGÍA.
Streptococcus pyogenes tiene como único huésped conocido el hombre, puede
encontrarse en las vías respiratorias altas y es raro que integren la flora normal. Esta
bacteria coloniza con frecuencia la orofaringe de los adultos jóvenes pero es más
frecuente en niños.
Su transmisión es por secreciones nasales que son la fuente más peligrosa de
diseminación de estos microrganismos o por la saliva, el contagio es mayor en la etapa
aguda es decir en las dos primeras semanas y su periodo de incubación es de 2 a 5 días.
La colonización con Streptococcus pyogenes es transitoria, regulada tanto por la
capacidad de la persona para desarrollar una inmunidad específica frente a la proteína M
de la cepa colonizadora, como a la presencia de microorganismos competitivos en la
orofaringe. Los pacientes no tratados producen anticuerpos frente a la proteína M
bacteriana específica, lo que puede dar como resultado una inmunidad que dure toda la
vida; sin embargo, en los pacientes tratados, esta respuesta de anticuerpos está
disminuida.
La portación faríngea en la población general es del 15 al 30 % y no se asocia a riesgo
apreciable de fiebre reumática y aunque los seres humanos pueden ser portadores
asintomáticos de streptococcus pyogenes en la nasofaringe o perineo, el
microorganismo se debe considerar importante si se detecta mediante cultivo u otros
medios.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
31
2.7 CUADRO CLÍNICO.
Infecciones Supurativas
- Faringitis Estreptocócica
Es una infección en la cual los estreptococos virulentos del grupo A se adhieren al epitelio faríngeo y se manifiesta con fiebre, ganglios inflamados, exudado amigdalar y malestar general.
- Escarlatina Es un exantema eritematoso difuso que comienza en el tórax y se extiende posteriormente a las extremidades, suele ser una complicación de la faringitis estreptocócica.
- Pioderma Es una infección cutánea localizada con vesículas que avanzan a pústulas sin indicios de enfermedad sistémica.
- Erisipela Si la puerta de entrada es la piel se produce erisipela con edema masivo indurado y la infección avanza con rapidez.
- Celulitis Es una infección aguda de la piel y tejidos subcutáneos con rápida diseminación, se presenta con dolor, hipersensibilidad, tumefacción y eritema.
- Fascitis Necrosante Es una infección de los tejidos subcutáneos y de la facia, se presenta una necrosis extensa de la piel que se disemina muy rápidamente.
- Síndrome del shock tóxico estreptocócico
Es una infección sistémica, semejante al síndrome del shock tóxico estafilocócico provocado por Staphylococcus Aureus. Los pacientes suelen presentar bacteremia e indicios de fascitis.
Infecciones no Supurativas
- Fiebre Reumática Es la secuela más grave de la infección por el estreptococo hemolítico puesto que daña el miocardio y las válvulas cardiacas, el inicio de la fiebre reumática va precedido por infección con estreptococo del grupo A por semanas aunque la infección puede ser leve y a veces indetectable.
- Glomerulonefritis Aguda
Esta infección se desarrolla a veces tres semanas después de la infección por estreptococos y algunas cepas son particularmente nefritógenas, se caracteriza por la súbita aparición de proteinuria, hematuria, edema de cara y piernas, hipertensión y disfunción renal.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
32
Gráfico 7: Faringitis Estreptocócica.
Fuente: http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Pos_strep.JPG
Gráfico 8: Escarlatina.
Fuente: http://cuidatusaludcondiane.com/wordpress/wp-content/uploads/2011/06/escarlatina.jpg
Gráfico 9: Pioderma.
Fuente: http://photos1.blogger.com/blogger/5041/3181/1600/ScreenHunter_043.jpg
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
33
Gráfico 10: Erisipela.
Fuente: http://photos1.blogger.com/blogger/5041/3181/1600/ScreenHunter_044.jpg
Gráfico 11: Celulitis.
Fuente: http://www.dermapixel.com/2012_11_01_archive.html
Gráfico 12: Fascitis Necrosante.
Fuente: http://cuidatusaludcondiane.com/wordpress/wp-content/uploads/2012/01/fascitis.jpg
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
34
Gráfico 13: Síndrome del Shock Toxico Estreptocócico.
Fuente: http://yasalud.com/sindrome-de-shock-toxico/sindrome-del-shock-toxico/
Gráfico 14: Fiebre Reumática.
Fuente: http://www.lookfordiagnosis.com/mesh_info.php?term=Cardiopat%C3%ADa+Reum%C3%A1tica&lang=2
Gráfico 15: Glomerulonefritis Aguda.
Fuente: http://www.sanar.org/enfermedades-renales/glomerulonefritis
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
35
2.8 ESTUDIOS BIOMOLECULARES
Los ácidos nucleicos son las moléculas de la clave de la vida, de la estabilidad del ADN
y de la duplicación exacta del ADN, de su traducción a una proteína depende es estado
de salud normal.
El estudio biomolecular busca determinar los mecanismos básicos de la función y
estructura de cada una de las células ya que muchas de las enzimas asociadas con la
reparación, degradación y la síntesis de ácidos nucleicos in vivo se han convertido en
herramientas básicas del laboratorio.
2.8.1 Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
La reacción de la cadena de polimerasa (PCR) es una reacción química in vitro que
permite generar una gran cantidad de copias de un fragmento de DNA (ácido
desoxirribonucleico) partiendo de una única copia de ese fragmento original.
El desarrollo de esta técnica sirve para amplificar un fragmento de ADN y su utilidad es
que tras la amplificación resulta mucho más fácil identificar con una muy alta
probabilidad el virus o bacterias causantes de una enfermedad.
A) Fundamento.
La técnica se basa en la propiedad natural de los ADN polimerasas para replicar hebras
de ADN, para lo cual se emplean ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas para
separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación y, a
continuación, dejar que las hebras de ADN vuelvan a unirse para poder duplicarlas
nuevamente, este proceso de la PCR está automatizado mediante un aparato
llamado termociclador, que permite calentar y enfriar los tubos de reacción para
controlar la temperatura necesaria para cada etapa de la reacción.
La PCR es una técnica común e indispensable por su gran variedad de aplicaciones:
Clonación de ADN para la secuenciación.
Análisis funcional de genes.
Diagnóstico de trastornos hereditarios.
Identificación de huellas genéticas.
Detección y diagnóstico de enfermedades infecciosas.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
36
Existen muchas variantes de la PCR convencional:
PCR en tiempo real o PCR cuantitativa que permite cuantificar la cantidad de
producto amplificado.
PCR por transcripción inversa mediante la cual se obtiene una copia de DNA
complementario.
2.8.2 Sonda de ADN.
Esta técnica es un fragmento de ADN o raramente ARN de pequeño tamaño
normalmente entre 100 y 1000 bases usado en biología molecular como herramienta
para detectar la presencia de ADN o ARN de secuencia complementaria parecida o
igual.
- Es un método molecular que consta de una secuencia de ADN de un
microorganismo de interés, que puede ser utilizada para detectar un ADN
homólogo o secuencias de ARN.
- El ADN de la sonda se hibrida con el ADN del organismo que se quiere
detectar, esta unión se establece porque ambas moléculas tienen secuencias
complementarias, formándose así pares de bases complementarias y que
determinan la predisposición a padecer enfermedades.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
37
CAPÍTULO
III
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
38
3.1 PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN
3.1.1 Muestras.
El hisopado faríngeo de cualquier aérea de inflación, ulceración o exudado con
abscesos, para el diagnóstico de la faringitis bacteriana cultivado en agar sangre de
carnero es el método de referencia que realizado en forma correcta tiene una
sensibilidad del 90% al 95%.
A) Obtención de la muestra.
- Se utiliza un baja lenguas par deprimir la lengua con el fin de tener una buena
visualización de la faringe y amígdalas
- Con un hisopo se frota con firmeza ambas amígdalas, la faringe posterior y se
toma la muestra de todo el exudado purulento si existe.
- Al introducir y retirar el hisopo se debe realizar con cuidado de no tocar las
paredes laterales de la cavidad bucal o la lengua para reducir al mínimo la
contaminación con bacterias de la flora comensal. Luego de la recolección de la
muestra se introduce el hisopo en un tubo estéril con solución fisiológica.
Gráfico 16: Hisopado Faríngeo.
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=faringitis+estreptoc%C3%B3cica&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=79_xUpjBMMjbkQfpp4DIAw&sqi=2&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#q=faringitis+estreptoc%C3%B3cica&tbm=isch&facrc=_&imgdii=_&imgrc=FAWIi9FDpBro1M%253A%3BmzUjsDvtb4zt5M%3Bhttp%253A%252F%252Frafabravo.files.wordpress.com%252F2011%252F06%252F9950.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Frafabravo.wordpress.com%252Ftag%252Festreptococo%252F%3B400%3B320
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
39
3.2 DETECCIÓN DIRECTA.
3.2.1 Examen microscópico.
En esta técnica permite la observación de la morfología de la célula para la cual las
muestras pueden ser teñidas con la coloración de Gram, con esta técnica se observa
cocos Gram positivos agrupados en cadenas. Hay que tener en consideración que el
Streptococcus pyogenes es parte de la flora microbiana normal de la orofaringe y si la
muestra es aislada de la orofaringe para un pronóstico.
3.2.2 Coloración de Gram.
En esta técnica se realiza un frotis del exudado faríngeo, se fija a la porta objetos
mediante el calor y luego se realiza la coloración en el siguiente orden:
1. Violeta de cristal o violeta de genciana: Este colorante es captado en forma
similar por todas las bacterias se deja actuar por un minuto. Enjuagar con agua.
2. Lugol: Actúa como reactivo de fijación del violeta de cristal, dejar actuar por un
minuto y enjaguar con agua.
3. Alcohol-acetona: Este reactivo decolora únicamente a las bacterias Gram
negativas. Las bacterias Gram positivas no se decoloran por lo que quedan del
color del violeta de cristal.
4. Fucsina o safranina: Este reactivo colorea solo a las células que se decoloraron
con el alcohol-acetona es decir a las bacterias Gram negativas.
Resultado:
- Streptococcus pyogenes se observa como cocos Gram positivos de 0.6 a1.0 um
de diámetro que se agrupan en forma de cadenas de longitud variable.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
40
Gráfico 17: Coloración de Gram de Streptococcus pyogenes.
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=tincion+de+gram+exudado+faringeo&tbm=isch&tbo=u&source=univ&sa=X&ei=VWPyUrGFMI_IkAeC44HQAw&ved=0CDsQsAQ&biw=1366&bih=643#q=tincion+de+gram+streptococcus+pyogenes&tbm=isch&facrc=_&imgdii=_&imgrc=zK6zvBrlODtczM%253A%3Bl76HvV3lqlnmvM%3Bhttp%253A%252F%252Ffundacionio.org%252Fimg%252Fbacteriology%252Fimg%252FStreptococcus_pyogenes_04.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Ffundacionio.org%252Fimg%252Fbacteriology%252Fcont%252FStreptococcus_pyogenes.html%3B491%3B445
3.3 CULTIVO
3.3.1 Agar Sangre
El agar sangre es una combinación de un agar base o agar nutritivo con el agregado de
5% de sangre ovina o también puede usarse sangre humana, aporta muchos factores de
enriquecimiento. Es un medio utilizado para el aislamiento y cultivo de numerosos
microorganismos aerobios y anaerobios nutricionalmente exigentes a partir de una gran
variedad de muestras y permite ver la capacidad hemolítica de los microorganismos
patógenos que es un factor de virulencia.
Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el tipo de
hemólisis que posee:
- Alfa: halos verdosos por la reducción de la hemoglobina de los glóbulos rojos a
metahemoglobina en el medio.
- Beta: halos incoloros por la hemólisis total.
- Gamma: inexistencia de halos o sin hemólisis
Este medio de cultivo también, puede utilizarse como base para preparar el medio agar
chocolate.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
41
• Fundamento
La infusión de músculo de corazón y la peptona, otorgan al medio un alto valor
nutritivo, que permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, aún de
aquellos nutricionalmente exigentes, el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico,
el agregado de sangre al medio de cultivo, en concentración final de 5-10 %, aporta
nutrientes para el crecimiento bacteriano, y permite detectar hemólisis.
Formula en gramos por litro:
- Infusión de musculo de corazón.
- Peptona: 10.0
- Cloruro de sodio: 5.0
- Agar: 15.0
• Preparación
- Suspender 40 g de polvo en un litro de agua destilada.
- Dejar reposar 5 minutos y mezclar hasta obtener una suspensión
homogénea.
- Calentar con agitación frecuente y hervir 1 minuto.
- Esterilizar 20 minutos a 121°C.
- Enfriar a 45-50°C agregar sangre desfibrinada al 5%.
- Homogeneizar y distribuir en placas.
• Siembra
- Se realiza por inoculación directa en estudio, sobre la superficie del medio
de cultivo.
- El aislamiento de Streptococcus pyogenes se realiza mediante cultivo en
una placa de agar sangre, una vez tomada la muestra de la faringe se realiza por
inoculación directa estriando por toda la placa de agar sangre.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
42
Gráfico 18: Placa de Agar Sangre.
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=agar+sangre+fundamento&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=yeD6UtubOdKFkQeShIGgBA&sqi=2&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#facrc=_&imgdii=_&imgrc=fWAFKkP_GswgeM%253A%3BeEtrDi5MMFAMWM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.trensa.com%252Fcedivet%252Fimages%252Fagar_sangre_ss.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.trensa.com%252Fcedivet%252F%3B427%3B336
• Incubación
- El tiempo, temperatura y atmósfera de incubación, dependerán del
microorganismo que se quiera aislar.
- Streptococcus de se incuba a 37 °C durante 48 horas.
• Resultado
- Streptococcus pyogenes produce una lisis completa de los glóbulos rojos
y se observa como un halo transparente variable de 0.3 a 05 mm de diámetro
alrededor de las colonias.
- El aspecto de las colonias en al agar son blancas grisáceas, transparentes a
translucidas, mate o brillantes.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
43
Gráfico 19: Streptococcus pyogenes en una placa de agar sangre.
Fuente: Laboratorio Clínico Santa Sofía.
3.4 PRUEBAS BIOQUÍMICAS
3.4.1 Sensibilidad a la Bacitracina.
Esta prueba permite la diferenciación de estreptococos beta-hemolíticos del grupo A de
otros estreptococos beta hemolíticos.
Fundamento.
La bacitracina es un antibiótico que inhibe la síntesis de pared celular bacteriana, y a la
concentración que se encuentra en los discos de 0.04 U, inhibe el crecimiento de los
estreptococos beta-hemolíticos del grupo A de Lancefield. Un resultado sensible, es
presuntivo de la presencia de estreptococo grupo A, y se puede incrementar además el
valor diagnóstico mediante la realización de la prueba del PYR.
Siembra.
- Realizar una suspensión densa del microorganismo en estudio de turbidez igual
a la del estándar 0.5 de la escala de Mac Farland. Utilizando un hisopo estéril,
hisopar una placa de agar sangre.
- Aplicar un disco de Bacitracina de 0.04 U sobre la superficie de la placa y se
incuba a 35-37 ºC durante 24 horas.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
44
Interpretación de resultado.
- Examinar la placa para observar cualquier zona de inhibición del desarrollo
alrededor del disco de bacitracina.
- Sensible: presencia de halo de inhibición del desarrollo alrededor del disco,
informar: estreptococos beta hemolíticos presuntivamente del grupo A por la
prueba de bacitracina.
Gráfico 20: Sensibilidad a la Bacitracina
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=bacitracina+fundamento&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=G_H0Up6pB_TTsASz8YHgBA&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#q=orueba+de+la+bacitracina&tbm=isch&facrc=_&imgdii=_&imgrc=5JZLf7pMXvhKXM%253A%3BoVn2cEkr94voiM%3Bhttp%253A%252F%252Fdata5.blog.de%252Fmedia%252F316%252F3353316_52b9b25fa8_m.jpeg%3Bhttp%253A%252F%252Fmicromarravilla.blog.com.es%252F2009%252F03%252F25%252Ftrabajo-de-campo-parte-iii-5832077%252F%3B500%3B375
3.4.2 Hidrólisis de L-pirrolidonil β-naftilamida (PYR).
Es una prueba rápida, utilizada fundamentalmente para la identificación de
Streptococcus pyogenes.
Fundamento.
Los discos contienen el sustrato pirrolidonil-beta-naftilamida, y la prueba consiste en
determinar la presencia de la enzima l-pirrolidonil arilamidasa, los microorganismos
que contienen dicha enzima, pueden hidrolizar el sustrato presente en los discos en
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
45
forma rápida, con liberación del grupo pirrólico, el cual, reacciona con el reactivo
revelador: N-N dimetilamino cinamaldehído. Esta es una prueba presuntiva, altamente
sensible y permite diferenciar los estreptococos del grupo A de otras especies de
Streptococcus.
Siembra.
- Hacer una suspensión densa en 50 µl de solución fisiológica estéril a partir de un
cultivo puro y agregar un disco de PYR.
- Se incubación durante 30 minutos a 35-37 °C, en aerobiosis, luego agregar una
gota de reactivo revelador y dejar a temperatura ambiente, hasta 5 minutos.
Interpretación de resultados.
- Positivo observación de color rosa-rojo en el disco.
- Negativo la suspensión o el disco permanecen incoloros o de color amarillo.
Gráfico 21: Hidrólisis de L-pirrolidonil β-naftilamida (PYR).
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=HIDROLISIS+DE+PYR+FUNDAMENTO&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=n_f0UsusEZbUsATGv4DgDA&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#q=HIDROLISIS+DE+PYR&tbm=isch&facrc=_&imgdii=_&imgrc=afy3Gt-wSppKzM%253A%3B42ThyGACC8NobM%3Bhttp%253A%252F%252Fcdn.slidesharecdn.com%252Fss_thumbnails%252Fcocos3-110617195701-phpapp02-thumbnail-4.jpg%25253Fcb%25253D1308358865%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.slideshare.net%252Fmaitrompiz%252Fcocos-gram-positivos%3B768%3B576
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
46
3.5 PRUEBAS SEROLÓGICAS.
3.5.1 Antiestreptolisina O (ASTO).
Esta es una prueba de sangre para medir los anticuerpos contra estreptolisina O, una
sustancia producida por las bacterias estreptococos del grupo A.
Los estreptococos tipo A producen una enzima denominada Estreptolisina O que tiene
la capacidad de lisar los hematíes comportándose como antígenos. El organismo
reacciona produciendo un anticuerpo neutralizante (ASO), el que aparece entre 8-30
días después del comienzo de la infección por Streptococcus.
- ASO Látex: Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por su
reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre soporte inerte de látex, los
anticuerpos antiestreptolisina reaccionan con la estreptolisina produciendo una
aglutinación visible macroscópicamente.
Técnica cualitativa.
- Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente.
- Agitar el Reactivo A antes de usar, vaciando previamente la pipeta del gotero.
- En la carta de látex colocar 1 gota o 025 ul del Reactivo y 25 ul de la muestra
(suero).
- Mezclar con un palillo descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una
suspensión uniforme, disparar un cronómetro, y balancear suavemente carta y
observar macroscópicamente el resultado dentro de los 2 minutos.
Interpretación de los resultados.
- Negativo: suspensión homogénea.
- Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
47
Gráfico 22: Aglutinación de ASTO.
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=antiestreptolisina+o&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=rI37UobVAZGEkQfT_IDwBA&ved=0CAkQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#facrc=_&imgdii=JKQM-3CRaz8y8M%3A%3BeodPB4AWdUzB2M%3BJKQM-3CRaz8y8M%3A&imgrc=JKQM-3CRaz8y8M%253A%3ByyWzvwJYz3W0tM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.centerlabsp.com.br%252Ffotos%252Ffa6c0ceff08666660552cf08dab3cfcc.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.centerlabsp.com.br%252F%253Fa%253DdetalheProduto%2526id%253D26%3B250%3B164
3.5.2 Prueba Streptococcus Latex Group.
La prueba Streptococcus Latex Group es una prueba rápida para el serotipado
estreptocócico de los grupos A, B, C, D, F y G.
Partículas de látex revestidas con antisuero estreptocócico de conejo.
Fundamento
La prueba Streptococcus Latex Group es una prueba rápida de aglutinación por látex
para el serotipado estreptocócico mediante la extracción química de los antígenos
específicos del grupo con reactivos de extracción de ácido nitroso. La extracción y
el serotipado se realizan a temperatura ambiente.
Reactivos
La prueba Streptococcus Latex Group consiste en:
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
48
1. Suspensiones de látex:
Seis viales (A, B, C, D, F y G) que contienen partículas de látex revestidas con
antisuero del grupo estreptocócico de conejo al 0,0975 % de azida de sodio como
conservante.
2. Reactivo de extracción 1:
Dos viales que contienen 2 ml cada uno de una solución de nitrito de sodio al 0,0975
% de azida de sodio como conservante. El reactivo está clasificado como peligroso y
se ha etiquetado como nocivo en caso de ingestión.
3. Reactivo de extracción 2:
Dos viales que contienen 2 ml cada uno de una solución ácida al 0,0975 % de azida
de sodio como conservante.
4. Reactivo de neutralización 3:
Dos viales que contienen 2 ml cada uno de una solución neutralizante al 0,0975 %
de azida de sodio como conservante.
Contenido del kit
Cada vial contiene partículas de látex revestidas con antisuero: A, B, C, D, F y G.
- 2 viales de reactivo 1 (tapón rojo).
- 2 viales de reactivo 2 (tapón amarillo).
- 2 viales de reactivo 3 (tapón azul).
- 25 tarjetas reactivas desechables.
- Varillas de mezcla.
El kit contiene reactivo para aproximadamente 75 pruebas.
Procedimiento
No realice más de tres reacciones simultáneamente antes de leer el resultado.
1. El reactivo de látex antes de utilizar es muy importante que las botellas estén a
temperatura ambiente y agitar antes de usar.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
49
2. Añadir una gota de reactivo 1 (tapón rojo) en un tubo.
3. Suspender 1 μl de cultivo de bacterias en un asa bacteriológica de una placa de
agar sangre de 5 - 10 % en reactivo 1 en un tubo.
4. Añadir una gota de reactivo 2 (tapón amarillo) en el tubo, mezclar y esperar 10
minutos como mínimo y 60 minutos como máximo.
5. Añadir una gota de reactivo 3 (tapón azul) en el tubo y mezclar.
6. Añadir una gota de reactivo de látex por cada reacción en la tarjeta de prueba,
aproximadamente 10 μl.
7. Por cada reacción, añadir 10 μl de extracto bacteriológico en la tarjeta de prueba.
Para un control negativo utilice una mezcla de una gota de reactivo 1, 2 y 3
respectivamente.
8. Mezclar la gota de látex y la gota de extracto bacteriológico con la varilla de
mezcla. Utilizar varillas diferentes para cada una de las reacciones.
9. Extienda hasta abarcar el área del círculo.
10. Mover la tarjeta lentamente y observar si se produce aglutinación en 30
segundos. Cualquier aglutinación que se produzca una vez transcurridos más de
30 segundos, no será una reacción positiva.
Interpretación de resultados
Un resultado positivo en uno de los reactivos de látex identifica el grupo.
- Si sólo se da una reacción positiva con el reactivo de látex del grupo B, se trata
de una cepa de estreptococos del grupo B.
- El grupo D de antígeno es conocido por su reacción cruzada y por ello puede
darse más de una reacción positiva, pero si hay una reacción positiva en el
producto de látex del grupo D, la cepa es un estreptococo del grupo D o una
especie de Enterococcus (la cual tiene un antígeno del grupo D).
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
50
Gráfico 23: Prueba Streptococcus Latex Group.
Fuente:https://www.google.com.ec/search?q=PRUEBA+DE+STREP+GROUPING&source=lnms&tbm=isch&sa=X&ei=JIf8UqqPI4ma0QHIj4GYAQ&ved=0CAcQ_AUoAQ&biw=1366&bih=643#facrc=_&imgdii=xqV-KLnD9Sf1aM%3A%3BZqz4FE12QXKTvM%3BxqV-KLnD9Sf1aM%3A&imgrc=xqV-KLnD9Sf1aM%253A%3BD4sNa2efOkNePM%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.bio-rad.com%252Fwebroot%252Fweb%252Fimages%252Fcdg%252Fproducts%252Fmicrobiology%252Fproduct_detail%252Fglobal%252Fcmd_latex_agglutination_pdp.jpg%3Bhttp%253A%252F%252Fwww.bio-rad.com%252Fen-ca%252Fproduct%252Fpastorex-strep%3B470%3B302
3.6 BIOLOGÍA MOLECULAR.
En las últimas décadas se ha utilizado varias pruebas de Biología molecular para
detectar Streptococcus pyogenes y se caracterizan por su mayor sensibilidad,
especificidad y rapidez que las técnicas clásicas de cultivo celular.
Reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
Real time PCR.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
51
CAPÍTULO
IV
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
52
4.1 TRATAMIENTO.
Streptococcus pyogenes es altamente sensible a la penicilina que es un antibióticos del
grupo de los betalactámicos.
El mecanismo de acción es la inhibición de la síntesis de la pared bacteriana
especialmente en la región peptidoglucano produciendo substancias que dañan su
misma pared dando como resultado la autolisis de la bacteria.
Existe una gran diversidad de penicilinas y difieren entre sí según su espectro de acción
es así que la Bencilpenicilina es eficaz contra bacterias Gram positivas como
estreptococos y su vía de administración es por vía parenteral debido a su sensibilidad al
pH ácido del estómago.
Las penicilinas son los antibióticos menos tóxicos pero pueden causar alergias, en
ocasiones severas que pueden desarrollar un shock anafiláctico y provocar la muerte del
paciente. Antes de iniciar el tratamiento es necesario preguntar el paciente si existe
algún tipo de alergia.
En los pacientes alérgicos a la penicilina se puede utilizar otros tipos de antimicrobianos
como:
Eritromicina.
Azitromicina.
Claritromicina
El tratamiento antibiótico de los pacientes con faringitis acelera la recuperación de los
síntomas y previene la fiebre reumática cuando se instaura durante los primeros 10 días
del inicio de la enfermedad.
4.4.1 Fármacos Antibacterianos.
Afectan la síntesis de la pared celular.
Inhiben la síntesis de proteínas.
Bloquean la replicación y transcripción de la bacteria.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
53
Se clasifican en:
A.- Fármacos Bactericidas.
• Su mecanismo de acción se centra en la pared de la bacteria, haciendo
que se liberen los metabolitos celulares de la bacteria al exterior y esta
muera.
B.- Farmacos Bacteriostáticos.
• Fármacos que actúan sobre la síntesis proteica.
• Bloquean el crecimiento y multiplicación de la bacteria.
CLASIFICACIÓN SEGÚN SU MECANISMOS DE ACCIÓN PENICILINAS
1.- PENICILINAS DE ESPECTRO REDUCIDO
DESCRIPCIÓN
Penicilina G-Sódica Penicilina G-Procaínica Penicilina Benzatina
Acción bactericida. Actúa debilitando la pared bacteriana y favoreciendo la lisis osmótica de la bacteria durante el proceso de multiplicación.
2.- PENICILINAS PENICILINASA RESISTENTES
Dicloxacilina
Inhiben la síntesis de la pared celular bacteriana y su multiplicación.
3.- PENICILINAS DE AMPLIO ESPECTRO.
Ampicilina Amoxicilina
Inhiben la síntesis de la pared celular. Interfiere con la síntesis de la pared celular durante la replicación celular.
BETALACTÁMICOS
Amoxicilina/Ac. Clavulánico Ampicilina/sulbactam
Inhiben la síntesis de la barrera de peptidoglicanos de la pared celular bacteriana. Inhibidor de la enzima bacteriana betalactamasa.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
54
TETRACICLINAS Cloranfenicol Doxiciclina Minociclina Tetraciclina
Acción bacteriostática. Inhiben la síntesis proteica de la bacteria.
MACRÓLIDOS
Eritromicina Claritromicina Azitromicina
Acción bacteriostática. Inhiben la síntesis proteica de la bacteria.
4.2 PREVENCIÓN
Los seres humanos pueden ser portadores asintomáticos de Streptococcus pyogenes en
la nasofaringe, una persona que alberga este microorganismo puede ser un portador que
distribuya los estreptococos directamente a las demás personas a través de goticulas del
sistema respiratorio.
- Las secreciones nasales de una persona que alberga Streptococcus pyogenes son
la fuente más peligrosa de diseminación de estos microoganismos por lo que
debe evitar el contacto con personas que presenten estos síntomas.
- Lavarse las manos con frecuencia evitara que al tocar una superficie que esté
contaminada y después tocarse los ojos, la nariz o la boca se de una infección.
- Evitar compartir alimentos y utensilios ya que esta infección se propaga con
frecuencia entre miembros de la familia o personas que habitan en la misma.
La clasificación, la tipificación inmunitaria de los estreptococos son herramientas
valiosas para un seguimiento y prevención eficaz de la cadena de transmisión.
Con la administración de penicilina o eritromicina que son fármacos que producen
concentraciones tisulares eficaces durante diez días previniendo de esta manera
enfermedades posestreptocócicas y una reinfección con streptococcus β-hemolítico del
grupo A en pacientes con fiebre reumática.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
55
4.3 CONTROL
Los Streptococcus pyogenes son susceptibles a la Penicilina, Eritromicina y algunos son
resistentes a las Tetraciclinas con la administración de estos fármacos en la infección
estreptocócica aguda se debe tratar de erradicar con rapidez la bacteria.
Al erradicar con prontitud los estreptococos de las infecciones iniciales puede prevenir
de modo eficaz el desarrollo de la enfermedad postestreptocócica
Los procedimientos de control se dirigen principalmente a la fuente humana sobre todo
si los portadores se encuentran en áreas como salas de parto, quirófanos, aulas o
guarderías, es difícil erradicar el estreptococo β-hemolítico de los portadores
permanentes y en ocasiones estos pacientes deben abandonar por algún tiempo las áreas
sensibles de propagación de la infección.
4.4 RECOMENDACIONES
Es posible determinar una infección por Streptococcus pyogenes con la realización del
cultivo de hisopado faríngeo ante un diagnóstico clínico de faringoamigdalitis evitando:
Tratamiento antimicrobiano inadecuado o innecesario y de esta forma minimizar
los afectos adverso de los antibacterianos administrados y de esta manera evitar
la posible resistencia que pueden desarrollar y prevenir complicaciones
posteriores de la infección por Streptococcus pyogenes.
Adoptar medidas de precaución con la manipulación de secreciones; en las áreas
médicas realizar una desinfección concurrente de la misma.
Todo paciente mayar de 3 años de edad que tenga los criterios clínicos de
faringitis estreptocócica aguda se realicen pruebas de detección rápida y cultivo
de exudado faríngeo para descartar la enfermedad.
Priorizar acciones en la comunidad e informar sobre las medidas de higiene que
se debe adoptar y evitar la automedicación.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
56
CONCLUSIONES:
• Se conoció que los Streptococcus tienen una amplia distribución en la naturaleza,
algunos son miembros de la flora humana normal son bacterias Gram positivas de
forma esférica, agrupadas en pares o cadenas de longitudes variadas condicionada
por factores ambientales durante su multiplicación, algunas especies producen
hemolisis en agar sangre, otras producen hemolisinas y otras especies son no
hemolíticas.
• Se describió que el Streptococcus pyogenes es la causa bacteriana más frecuente de
faringitis aguda y de una gran variedad de infecciones cutáneas como erisipela,
celulitis, fascitis necrosante y sistémicas como fiebre reumática y glomerulonefritis
aguda, debido a que produce varios factores como las estreptolisinas O y S que
contribuyen a su virulencia y además dan origen al patrón beta hemolítico en las
placas de agar sangre.
• Se analizó que para el diagnóstico de laboratorio de Streptococcus pyogenes se
utilizan técnicas de cultivo, técnicas de identificación de GAS, diagnóstico
serológico y existen nuevas técnicas de Reacción de la cadena de polimerasa (PCR),
Real time PCR, que son las pruebas más utilizadas para un diagnóstico temprano de
la infección.
• Se describió que los fármacos como la Penicilina, Azitromicina y Eritromicina son
los antibióticos más utilizados para contrarrestar la infección por Streptococcus
pyogenes, ya que con un tratamiento, control y prevención adecuado se puede
evitar que la infección se propague en la población sobre todo con frecuencia entre
miembros de la familia o personas que habitan en la misma casa.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
57
BIBLIOGRAFÍA
1. Bailey, Scott. (Ed), (2009).Diagnóstico Microbiológico. Bogotá: Panamericana
2. Bennington, James L. (Ed), (1991). Diccionario Enciclopédico del Laboratorio
Clínico.
3. Bernard, J. Kwnos, J. Tlenda, M. (Ed), (2010) Laboratorio en el Diagnóstico
Clínico. España: Marban.
4. Domínguez, G. Muñoz, N. Bosch FX. Herrero, R, C. (Ed), (2011) Tecnología
Farmacéutica. México: Interamericana.
5. Fatto, V. Russo F. Ritter O. (Ed), (2010). Vademécum Clínico. Buenos aires: El
Ateneo.
6. James L. Bennigton, M.D.2011. Diccionario Enciclopédico del Laboratorio
Clinico.
7. Jawetz, Melnick y Adelberg. (Ed), (2011).Microbiología Médica.
8. Jawetz, Ernest. Melnick, Joseph. Abelberg, Edward. (Ed), (2010). Microbiología
Médica.
9. Jawetz, Melnick y Adelberg. (Ed), (2008). Microbiología Médica.
10. Koneman, I. Elmer W. Giovannielo, Octavio. Sommers H. Dowell V. (Ed),
(2009). Diagnóstico Microbiológico. España: Panamericana.
11. Murray, Patrick. Rosenthal, Ken. Pfaller, Michael. (Ed), (2009) Microbiología
Médica.
12. Winn, Washington. Allen, Stephen. Janda, William. Koneman, Elmer. Procop,
Gary. Schrenckenberger, Paul. Woods, Gail. Koneman, (Ed), (2009).
Diagnóstico Microbiológico.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
58
FUENTES DE INTERNET.
Faringitis por Streptococcus pyogenes. Disponible en:
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-
75412005000200005
Caracterización molecular de cepas de Streptococcus pyogenes aisladas de cuadros
invasores basada en el polimorfismo del regulón vir. Disponible en:
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716-
10182001000300006#tabla1
Resistencia de Streptococcus pyogenes. Disponible en:
http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=s0716-10182002019200008&script=sci_arttext
Medios de Cultivo para el Aislamiento de Streptococcus pyogenes. Disponible en:
http://bibliotecadigital.umsa.bo:8080/rddu/bitstream/123456789/437/1/TE654.pdf
Caracterización molecular de Streptococcus pyogenes causantes de enfermedad
invasora y síndrome de shock tóxico estreptocócico. Disponible en:
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?pid=S0325-
75412010000100009&script=sci_arttext
Resistencia de Streptococcus pyogenes a los antibióticos. Disponible en:
http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-
29572004000200002.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
59
GLOSARIO
A
ADN: El ácido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN, es un ácido
nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento
de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus, y es responsable de su
transmisión hereditaria.
Antibiótico: Es una sustancia química producida por un ser vivo o derivado sintético,
que mata o impide el crecimiento de ciertas clases de microorganismos sensibles,
generalmente bacterias.
Antígeno: Un antígeno es una sustancia que desencadena la formación de anticuerpos y
puede causar una respuesta inmunitaria.
ASTO: Antiestreptolisina O.
Azida de sodio: NaN3, es una sal que generalmente se emplea como generador de gas
nitrógeno.
B
Bacitracina: Es el nombre de un antibiótico producido por una mezcla de polipéptidos
cíclicos relacionados unos con los otros y producidos por cepas de la variedad Tracy de
la bacteria Bacillus subtilis aislado en 1945 en contra de bacterias Gram positivas,
especialmente en heridas y mucosas, porque inhibe la formación de la pared celular de
estos microorganismos.
C
CAMP: Christie, Atkins, Munch-Petersen.
Cepa: Es una variante fenotípica de una especies bacteriana que comparten, al menos,
una característica.
F
FR: Fiebre reumática.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
60
G
GNDA: Glomerulonefritis difusa aguda postestreptocócica.
H
Hemolisis: Es el fenómeno de la desintegración de los eritrocitos que carecen
de núcleo y orgánulos, por lo que no puede repararse y muere cuando se desgasta.
Hemoglobina: Es una proteína de estructura cuaternaria, que consta de cuatro
subunidades, de color rojo característico y su función principal es el transporte de
oxígeno.
I
Impétigo: El impétigo es una enfermedad infecciosa superficial de la piel producida por
bacterias, que se presenta con mayor frecuencia en los niños.
L
L-PCR: Long PCR.
M
MR-VP: Rojo de metilo y voges proskauer, es el medio utilizado para la clasificación
de enterobacterias.
O
Optoquina: Discos embebidos en clorhidrato de etilhidrocupreína utilizados para
diferenciar Streptococcus pneumoniae de Streptococcus viridans.
P
Pili: Son estructuras en forma de pelo, más cortas y finos que los flagelos que se
encuentran en la superficie de muchas bacterias.
UNIVERSIDAD CATOLICA DE CUENCA
61
Pfu: Pyrococcus furiosus es una especie extremófila de Archaea. Se destaca por tener
una temperatura de crecimiento óptimo de 100 °C y por ser uno de los pocos
organismos identificados como poseedores de enzimas que contienen tungsteno, un
elemento que rara vez se encuentra en las moléculas biológicas.
PCR: Reacción en cadena de la polimerasa.
PYR: Pirridonil ß-naftilamida
R
RFLP: Restricción Polimorfismo de Longitud.
S
SPE: Exotoxinas pirógenas estreptocócicas.
T
Taq: Thermus aquaticus es una bacteria termófila, Gram negativa, aerobia y heterótrofa
que vive en la proximidad de manantiales de agua caliente. La describió por primera
vez Thomas Brock en 1969.
V
Virulencia: Es el grado de patogenicidad de un serotipo, de una cepa o de una clona
microbiana en un huésped susceptible.