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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA UNIDAD IZTAPALAPA Nombre: QUIROZ VALENCIA ROSALBA ADRIANA Matrícula: 97330857 Teléfono: 56935349 Licenciatura: Biología División: Ciencias Biológicas y de la Salud Unidad: Iztapalapa Trimestre: 03-P Titulo del Proyecto de Investigación: Biología y Ecología de pequeños mamíferos. Título del Trabajo de Servicio Social: Cariotipo de Peromyscus difficilis felipensis ( RODENTIA: MURIDAE ) de una población del Estado de Oaxaca. Asesor: M en C. CAROLINA MÜDESPACHER ZIEHL. Lugar de Realización: Laboratorio de Citogenética Animal. Departamento de Biología. Universidad Autónoma Metropolitana. Unidad Iztapalapa. Clave de Registro: BO43.02

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANAUNIDAD IZTAPALAPA

Nombre: QUIROZ VALENCIA ROSALBA ADRIANA

Matrícula: 97330857

Teléfono: 56935349

Licenciatura: Biología

División: Ciencias Biológicas y de la Salud

Unidad: Iztapalapa

Trimestre: 03-P

Titulo del Proyecto de Investigación: Biología y Ecología de pequeños mamíferos.

Título del Trabajo de Servicio Social: Cariotipo de Peromyscus difficilisfelipensis ( RODENTIA: MURIDAE ) de una población del Estado de Oaxaca.

Asesor: M en C. CAROLINA MÜDESPACHER ZIEHL.

Lugar de Realización: Laboratorio de Citogenética Animal. Departamento deBiología. Universidad Autónoma Metropolitana. Unidad Iztapalapa.

Clave de Registro: BO43.02

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CARIOTIPO DE PEROMYSCUS DIFFICILIS FELIPENSIS ( RODENTIA:MURIDAE ) DE UNA POBLACIÓN DEL ESTADO DE OAXACA.

INTRODUCCIÓN.

El presente trabajo se realizó como complemento a los estudios decitogenética realizados anteriormente a las poblaciones de Peromyscus difficilisfelipensis de los estados de Morelos y Estado de México. Considerando que estasubespecie presenta una distribución disyunta, el estudio del cariotipo de lapoblación de Oaxaca es importante para comparar con el patrón de bandasobtenido en los estados del centro.

En México se reportan 450 especies de mamíferos y es el país en Américacon mayor riqueza. En nuestro país están representados 10 órdenes demamíferos terrestres y los roedores cuentan con 222 especies, por lo queconstituyen el orden más diverso y mas abundante con el 50% de las especies demamíferos aproximadamente, debido a que han tenido una radiación adaptativamuy extensa. Ceballos, et al., (1984).

Peromyscus difficilis felipensis es una especie que parece estar restringidaa sitios rocosos; prefiere los hábitats áridos. Se ha colectado en matorrales de tiposemidesértico, en bosques de pino, de encinos y en pastizales. Son de hábitosnocturnos, son semiarborícolas. Sus grandes pabellones auditivos les permitencaptar ultrasonidos, como los que emiten los murciélagos y posiblemente tambiénlos puedan emitir. Peromyscus difficilis felipensis es herbívoro, su dieta consisteen materia vegetal, principalmente semillas, mientras que los cacomixtles,zorrillos, víboras y lechuzas son sus depredadores. Ceballos, et al., (1984).

Su reproducción parece presentar dos o tres partos entre los meses dejunio a noviembre, naciendo de 2 a 3 crías por parto. Su distribución ocupa el áreacentral del país desde el sur de Chihuahua y Coahuila hasta Oaxaca. Ceballos, etal., (1984).

Peromyscus difficilis felipensis es el más grande del género (longitud total212-260 mm, cola 115-145 mm, pata 24-28 mm, oreja 20-28 mm, peso 24-34 g).Aunque es muy semejante a P. truey en su coloración, cola larga y orejasgrandes, sin embargo en el vientre el color es ante y la cola siempre es mayor quela cabeza y el cuerpo, lo que también lo diferencia de P. maniculatus, P. melanotisy P. aztecus.

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Peromyscus difficilis felipensisi del Estado de Oaxaca.

En cuanto a genética se refiere, la descripción completa de todos los paresde cromátidas que posee un tipo celular dado constituye su cariotipo. El cariotipoes propio de cada especie y se identifica por el número de cromosomas y por eltamaño y forma de éstos.

Para su reconocimiento son importantes ciertas características, como laposición del centrómero y la presencia de satélites, entre otras. Los pares decromosomas iguales, denominados homólogos, se ordenan por tamañosdecrecientes. Si tienen el mismo tamaño se atiende a la posición del centrómero.

La técnica de bandeo en los últimos diez años ha desarrolladoprocedimientos de tinción que revelan bandas discretas a lo largo de lascromátidas hermanas. Estas bandas permiten el reconocimiento de cada par decromátidas y el apareamiento de pares homólogos que presenten modelos debandas semejantes.

Entre los muchos procedimientos de tinción que se han ideado en distintoslaboratorios para producir cromosomas con bandas, los dos más usados son latécnica del Giemsa salina ácida que revela bandas-G y la técnica de la mostazade Quinacrina, que produce las bandas-Q fluorescentes.

Los métodos más comúnmente usados son el bandeo G, R, C, T y Q. Loscuatro primeros utilizan el colorante Giemsa. El bandeo-G produce un patrónparticular de bandas claras y oscuras, y el bandeo-R da lugar a un patrón que esinverso al del bandeo-G. El bandeo-C hace que la heterocromatina constitutiva setiña de oscuro, mientras que en el bandeo-T tiñe las regiones teloméricas y loscentrómeros.

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En el bandeo-Q, el uso del colorante Quinacrina produce una alternancia debandas fluorescentes débiles y brillantes, que se pueden ver a través de unmicroscopio de fluorescencia ultravioleta, correspondiendo las bandas brillantesobtenidas con esta técnica a las bandas oscuras del bandeo-G.

Como la posición, anchura y número de bandas difieren entre los distintospares de cromosomas, es posible actualmente, ser mucho más certero en laidentificación de determinados cromosomas. Estudiando muchas células tratadasdel mismo modo, es posible dibujar un ideograma que es una representaciónidealizada de las bandas que aparecen recurrentemente sobre cada par decromosomas.

Cada cromosoma consiste de una serie continua de bandas. Una banda esuna parte de un cromosoma claramente distinguible de sus partes adyacentes porsu intensidad de color más clara o más oscura. Las bandas están ubicadas envarias regiones a lo largo de los brazos del cromosoma y estas regiones estándelimitadas por marcadores específicos. Estos marcadores están definidos porcaracterísticas morfológicas distintas y consistentes importantes para laidentificación de cromosomas.

ANTECEDENTES

El desarrollo de las técnicas citogenéticas permiten abordar diferentesaspectos evolutivos de las especies y subespecies (Hsu y Arrighi, 1968). Elcariotipo ha sido una herramienta de gran utilidad en la resolución de múltiplesproblemas sistemáticos.

Por ejemplo, Bowers (1974) y Bowers et al.,(1973) utilizando básicamenteel cariotipo encuentran evidencia de que las poblaciones de Peromyscusmaniculatus rufinus que se distribuye en las montañas de Arizona correspondenrealmente a Peromyscus melanotis y no a Peromyscus maniculatus comotradicionalmente se creía. Así mismo, utilizando el cariotipo Gunn y Greenbaum(1986) corroboran que Peromyscus oreas es una especie distinta de Peromyscusmaniculatus y no una subespecie de esta última.

OBJETIVO GENERAL.

Determinar el cariotipo de Peromyscus difficilis felipensis de la población delestado de Oaxaca para contribuir al conocimiento de la subespecie.

OBJETIVO PARTICULARES.

Obtener el cariotipo, bandas G y C de Peromyscus difficilis felipensis de lapoblación del Cerro San Felipe, Oaxaca.

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MATERIAL

Material de Campo

Trampas ShermanBrúju laAltímetroCámara fotográfica

GeoposicionadorGuantesJaulasBebederos

Material del Laboratorio

Microscópio Optico LeiccaAxiofotZEIZBalanza analít icaCentrífuga J-500VortexParr illaCristal izadoresAgitadoresJeringasCajaspetrí

Porta y cubreobjetosPipetas Pas teur.Bolsas de plásticoEspátulasTubos de ensayeCronómetroVasos Coplin

Estuche de disección

REACTIVOS.

Fosfato de sodio dibásico Na2HPO4 Fosfato de potasio KH2PO4Cloruro de potasio KCl Cloruro de sodio NaClTripsina 0.05% Colchicina 0.01%Acido acético Metanol 70 y 90%Giemsa (MERCK) Hidróxido de barioAcido Clorhídrico HCl 0.2NSolución Salina 2XSSC

METODOLOGIA.

Determinación del área de trabajo.

El lugar de colecta se encuentra ubicado en la Sierra Norte de Estado deOaxaca, en el municipio de Santa Catarina Ixtepeji 17° 11” N y 96° 38” W, a unaaltura de 2901msnm. Se encuentra dentro del área natural protegida conocidacomo La Cumbre, rodeado por un extenso bosque de pino encino.

Captura: Se capturaron 8 ejemplares vivos: (2 machos y 6 hembras) mediante lautilización de trampas Sherman, utilizando como sebo avena.

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Transporte: Los ejemplares fueron transportados en jaulas después de haber sidocapturados.

Procesamiento del material:

Se procesaron 8 ejemplares de Peromyscus difficilis felipensis, 6 hembrasy 2 machos. Correspondientes a los números de catalogo ( 1AQV a 8AQV ) .Elproceso de taxidermia de los ejemplares se inició con la obtención de las medidascorporales y del peso, así como la identificación de sexo, todos los datos antesmencionados se anotaron en la etiqueta correspondiente para piel y cráneo.Obteniendo de esta forma los siguientes datos:

1 AQV 170 – 94 –22 – 21 162 AQV 147 – 32 – 21 - 21 163 AQV 280 –11 –24 – 23 254 AQV 230 –125 –25- 25 385 AQV 235 –120 –25 –25 396 AQV 234 – 124 –24 -24 377 AQV 245 – 135–26 –25 468 AQV 240 – 125 –24 -25 16

La obtención de las medidas se realizo de la siguiente forma:

a) Longitud total del cuerpo: Se obtuvo de la distancia que va desde la punta de lanariz hasta la punta de la cola.

b) Longitud de la cola vertebral: Se obtuvo midiendo la distancia que va desde elnacimiento de la cola vertebral hasta su extremo distal.

c) Longitud de la pata posterior derecha: Se midió la distancia que va desde eltalón hasta el extremo del dedo mas largo o hasta el extremo de la uña de taldedo.

d) Longitud de la oreja derecha: Se midió la distancia media entre la base inferiordel trago hasta el extremo distal de la pina.

Identificación:

Se sexarón los ejemplares anotando el sexo al que pertenecían con lossímbolos convencionales: ( ) para machos y ( ) para hembras.

Se identificaron los ejemplares mediante caracteres propios de la especie,( Peromyscus difficilis felipensis es el más grande del género presenta unalongitud total 212-260 mm, cola 115-145 mm, pata 24-28 mm, oreja 20-28 mm,peso 24-34 ) siguiendo para ello claves dicotómicas de identificación.

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Técnica Citogenética:

Considerando el peso del animal y 45 minutos antes de ser sacrificado sele inyectó de manera intraperitoneal 0.01 ml de colchicina por gramo de pesocorporal. Después de transcurrido el tiempo antes mencionado se prosiguió asacrificar al animal con cloroformo, posteriormente se tomaron las medidas de lalongitud total, longitud de la cola, longitud de la pata, longitud de la oreja y peso.

Una vez sacrificados los ejemplares, se realizó una incisión abdominal dela que solamente se extrajeron los huesos largos (fémur y tibia), los cuales fueronlimpiados totalmente de músculo, a los huesos extraídos se les retiro la médulaósea mediante la técnica propuesta por Baker y Qumsiyeh (1988) con algunasmodificaciones.

Se cortó la epífisis del fémur y la tibia y por medio de una soluciónhipotónica de cloruro de potasio al 1% a 37°C se lavó el interior de los huesos conayuda de una jeringa, la cual fue introducida por uno de los extremos del huesoobteniendo así la médula ósea para contenerla en un tubo de centrifuga hastaobtener un volumen de 5 ml, el cual se resuspendió con una pipeta Pasteur y seincubó de 20 a 25 minutos a 37°C, antes de iniciar el centrifugado se le agregófijador a la suspención la cual fue centrifugada a 3000 rpm durante 5 minutos.

Una vez que se obtuvo el centrifugado se retiró el sobrenadante con unapipeta Pasteur hasta dejar el botón celular, el cual presentó una coloración rojoopaco, posteriormente fue resuspendido en un vortex adicionando al mismotiempo fijador de Carnoy (metanol acetico 3:1) gota a gota por las paredes hastallegar a un volumen de 5 ml. Finalmente se dejó el fijador durante 20 minutos.

Los pasos anteriormente mencionados fueron repetidos por tres ocasionesmás para así obtener un botón celular completamente blanco.

Elaboración de preparaciones:

Una vez que se obtuvo la suspención del fémur y la tibia se prosiguió a laobtención de las preparaciones por medio de goteo desde una altura aproximadade 2.5 a 3 metros, dejando caer de 4 a 5 gotas, gota a gota sobre los portaobjetos,los cuales fueron previamente lavados y desengrasados.

Dichos portaobjetos fueron refrigerados horas antes de realizar el goteo.Una vez terminado el goteo se pasaron las preparaciones por la flama de unmechero Bunsen y se dejaran secar al aire libre.

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Tinción:

Se realizaron 200 preparación con el material óseo obtenido, 25preparaciones por ejemplar, en cada laminilla o preparación se revisaron 50metafases.

La tinción de las preparaciones en las que se encontraron células concromosomas mitóticos; se tiñeron con Giemsa al 5% en solución de Buffer deSorensen.

Análisis de las preparaciones:

Las preparaciones ya teñidas fueron revisadas en el microscópio de campoclaro con objetivos de 10X, 40X y 100X, se seleccionarón de estas un númerorepresentativo de las mejores metafases de cada ejemplar, el número deejemplares fue de 5 machos y 5 hembras para poder obtener así el númerocromosómico.Obtención de fotografías:

Se seleccionaron las mejores metafases a las que se les tomaronfotografías en el Axiofoto marca Zeiss con el objetivo de 100X.

Elaboración del Cariotipo:

Una vez obtenidas las fotografías 3x fuerón amplificadas 5 veces sutamaño, para elaborar el cariotipo correspondiente e identificar los cromosomascon los parámetros propuestos por Levan, et al (1964).

OBTENCIÓN DE BANDAS G:

La obtención de bandas G se realizó mediante la utilización de la técnica(de Grouchy y Turleau, 1987), con algunas modificaciones.

Preparación de reactivos

3.752 gr de Fosfato de sodio dibásico Na2HPO4 diluido en 100 ml de aguadestilada (solución 1)

0.4gr de Cloruro de sodio NaCl,. 0.1gr de Cloruro de potasio KCl. 0.575 deFosfato de sodio dibásico Na2HPO4. 0.1gr de Fosfato de potasio KH2PO4.Los cuatro reactivos se disuelven en 500 ml de agua destilada. (solución 2)

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Tomar 50 ml de la solución 2 y se agregan 5 ml de Tripsina 0.05%

Reactivo para Tinción de Bandeo .

1 ml de Giemsa, 1 ml de la solución 1, y 48 ml de agua destilada, (Agitar hastahacer espuma)

Procedimiento:

Se sumergieron la preparación en PBS (buffer fosfato salino) con tripsina,durante (5.20 min.).

Se lavaron las preparaciones en PBS sin tripsina

Tinción en Giemsa durante (6 min).

* NOTA: Los tiempos se vieron modificados por el tiempo de maduración quepresentaron los cromosomas.

Se seleccionaron las mejores metafases en las cuales se observaronclaramente las bandas, que posteriormente fueron fotografiadas y medidas.

El patrón de bandas G, se realizó con el fin de confirmar que loscromosómas están con su par correspondiente de acuerdo al número de bandaspresentes.

OBTENCIÓN DE BANDAS C:

Se utilizo la técnica de Summer et al.,(1971) y Arrighi y Hsu (1971), laspreparaciones sin teñir se dejaron reposar de 5 a 6 días. Se colocaron laspreparaciones en un vaso de Coplin con HCl 0.2N durante 15 min. para removerlas proteínas. El HCl se preparó cada vez que se iba a utilizar con duración de undía para su uso. Se lavó tres veces en agua destilada y se dejó secar atemperatura ambiente.

Se colocaron las laminillas en un vaso de Coplin el cuál contenía unasolución saturada de Hidróxido de Bario a 45ºC durante 90 o 120 segundos. Elhidróxido de Bario actuó en la disociación de la eucromatina. Se pasaron laspreparaciones a HCl a 0.2N para detener la acción del hidróxido de Bario

Inmediatamente después se lavó tres veces con agua destilada y se dejósecar a temperatura ambiente. Posteriormente se colocaron las laminillas en unacámara húmeda. Se colocaron 4 gotas de 2XSSC con pipeta Pasteur a lo largo delas laminillas y se les dejó caer encima un cubreobjetos. Se incubo a 60ºC durantetoda la noche.

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Se lavaron las laminillas en 2 vasos de Coplin durante 5 min cada uno conetanol al 70 y 95% respectivamente después de enjuagaron con agua destilada yse dejaron secar a temperatura ambiente, esto evito la formación de cristales.

Las preparaciones se tiñeron con Buffer de Giemnsa al 4% durante 8minutos, se enjuagaron levemente con agua destilada para quitar el exceso decolorante.

RESULTADOS

Foto metaface bandas G

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Cariotipo de bandas G de Peromyscaus difficilis felipensis

Idiograma de bandas G de Peromyscaus difficilis felipensis

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De acuerdo a la clasificación de Levan se obtienen los siguientes pares de autosomas 2n=48 NF=76 Sexuales Metacéntricos 2

Subtelocéntricos 13Telocéntricos 8

X Subtelocéntrico YMetacéntrico

P a r

# d ec r o m o s om a P ´ 1 P ´ 2

P r o m P ´ 1y P ´ 2

P r o m e d i ot o t a l d e ( P ) q ´ 1 q ´ 2

P r o m .Q ´ 1 y Q ´ 2

P r o m e d i ot o t a l d e ( Q ) P B I c D

% d e l b r a z op

% d e l b r a z oq

T i p o d ec r o m o s o m a

1 9 1 . 0 9 1 . 1 8 1 . 1 3 5 1 . 0 8 7 5 1 . 6 1 . 5 6 1 . 5 8 1 . 3 4 7 5 1 . 3 9 2 1 4 1 . 8 0 4 8 1 . 6 3 9 0 0 . 0 8 6 2 0 . 1 2 0 0 M e t a c é n t r i c o1 0 1 . 0 7 1 . 0 1 1 . 0 4 1 . 0 6 1 . 1 7 1 . 1 1 5 1 . 0 7 2 1 4 8 . 2 5 9 9 0 . 3 4 8 0 0 . 0 7 9 0 0 . 0 8 4 7 M e t a c é n t r i c o

2 2 3 1 . 4 1 . 4 6 1 . 4 3 1 . 3 0 7 5 2 . 1 3 1 . 4 6 1 . 7 9 5 1 . 8 6 5 1 . 2 5 5 2 4 4 . 3 4 1 1 1 . 1 3 1 8 0 . 1 0 8 6 0 . 1 3 6 3 M e t a c é n t r i c o3 1 . 0 6 1 . 3 1 1 . 1 8 5 1 . 9 6 1 . 9 1 1 . 9 3 5 1 . 6 3 2 9 3 7 . 9 8 0 8 2 . 4 0 3 8 0 . 0 9 0 0 0 . 1 4 6 9 M e t a c é n t r i c o

3 4 6 9 . 3 6 9 . 0 2 9 . 1 9 8 . 5 8 7 5 3 9 . 5 8 3 9 . 8 9 3 9 . 7 3 5 3 3 . 9 6 4 . 3 2 3 7 1 8 . 7 8 3 9 6 . 2 4 3 2 0 . 6 9 7 7 3 . 0 1 6 7 S u b t e l o c é n t .4 8 7 . 4 8 8 . 4 9 7 . 9 8 5 2 8 . 7 5 2 7 . 6 2 2 8 . 1 8 5 3 . 5 2 9 7 2 2 . 0 7 6 3 5 . 5 8 4 7 0 . 6 0 6 2 2 . 1 3 9 8 S u b t e l o c é n t .

4 8 6 . 3 1 7 . 5 6 6 . 9 3 5 9 . 6 7 5 4 0 . 2 2 4 1 . 3 8 4 0 . 8 4 5 . 4 0 7 5 5 . 8 8 3 2 1 4 . 5 2 8 1 7 . 0 9 4 4 0 . 5 2 6 5 3 . 0 9 7 6 S u b t e l o c é n t .2 5 1 2 . 3 8 1 2 . 4 5 1 2 . 4 1 5 5 0 . 1 8 4 9 . 8 5 5 0 . 0 1 5 4 . 0 2 8 6 1 9 . 8 8 6 3 6 . 0 2 2 7 0 . 9 4 2 6 3 . 7 9 7 2 S u b t e l o c é n t .

5 4 1 8 . 9 1 8 . 9 1 8 . 9 1 7 . 6 1 5 3 7 . 5 3 4 0 . 1 2 3 8 . 8 2 5 3 9 . 1 4 7 5 4 . 3 5 7 5 1 8 . 6 6 5 5 6 . 2 6 6 9 0 . 6 7 6 5 2 . 9 4 7 7 S u b t e l o c é n t .4 4 6 . 3 2 6 . 3 2 6 . 3 2 3 9 . 8 1 3 9 . 1 3 3 9 . 4 7 6 . 2 4 5 3 1 3 . 8 0 2 1 7 . 2 3 9 6 0 . 4 7 9 8 2 . 9 9 6 6 S u b t e l o c é n t .

6 1 9 . 1 6 9 . 1 6 9 . 1 6 8 . 3 9 4 0 . 0 2 3 7 . 4 1 3 8 . 7 1 5 3 5 . 4 4 2 5 4 . 2 2 6 5 1 9 . 1 3 3 2 6 . 1 7 3 4 0 . 6 9 5 4 2 . 9 3 9 3 S u b t e l o c é n t .4 5 7 . 6 2 7 . 6 2 7 . 6 2 3 2 . 2 5 3 2 . 0 9 3 2 . 1 7 4 . 2 2 1 8 1 9 . 1 5 0 5 6 . 1 6 9 9 0 . 5 7 8 5 2 . 4 4 2 4 S u b t e l o c é n t .

7 4 7 . 0 7 7 . 0 7 7 . 0 7 8 . 2 6 5 3 5 . 1 9 3 6 . 6 7 3 5 . 9 3 3 5 . 5 3 7 5 5 . 0 8 2 0 1 6 . 4 4 1 9 6 . 7 1 1 6 0 . 5 3 6 8 2 . 7 2 7 9 S u b t e l o c é n t .1 5 9 . 4 6 9 . 4 6 9 . 4 6 3 6 . 6 7 3 3 . 6 2 3 5 . 1 4 5 3 . 7 1 5 1 2 1 . 2 0 8 4 5 . 7 5 8 3 0 . 7 1 8 2 2 . 6 6 8 3 S u b t e l o c é n t .

8 1 6 6 . 5 4 6 . 5 4 6 . 5 4 6 . 0 5 5 2 2 . 0 9 2 2 . 8 2 2 . 4 4 5 2 1 . 4 6 5 3 . 4 3 2 0 2 2 . 5 6 3 4 5 . 4 8 7 3 0 . 4 9 6 5 1 . 7 0 4 1 S u b t e l o c é n t .2 9 5 . 5 7 5 . 5 7 5 . 5 7 2 2 . 3 3 1 8 . 6 4 2 0 . 4 8 5 3 . 6 7 7 7 2 1 . 3 7 7 9 5 . 7 2 4 4 0 . 4 2 2 9 1 . 5 5 5 3 S u b t e l o c é n t .

9 3 5 6 . 6 5 6 . 6 5 6 . 6 5 5 . 5 7 5 2 1 . 3 8 2 0 . 1 2 0 . 7 4 1 8 . 9 1 5 3 . 1 1 8 8 2 4 . 2 7 8 9 5 . 1 4 4 2 0 . 5 0 4 9 1 . 5 7 4 6 S u b t e l o c é n t .1 1 4 . 5 4 . 5 4 . 5 1 5 . 0 2 1 9 . 1 6 1 7 . 0 9 3 . 7 9 7 8 2 0 . 8 4 3 0 5 . 8 3 1 4 0 . 3 4 1 6 1 . 2 9 7 5 S u b t e l o c é n t .

1 0 2 6 . 1 4 6 . 1 4 6 . 1 4 5 . 1 3 5 1 9 . 0 9 1 9 . 2 4 1 9 . 1 6 5 1 7 . 4 0 2 5 3 . 1 2 1 3 2 4 . 2 6 4 0 5 . 1 4 7 2 0 . 4 6 6 2 1 . 4 5 5 0 S u b t e l o c é n t .5 4 . 1 3 4 . 1 3 4 . 1 3 1 5 . 1 4 1 6 . 1 4 1 5 . 6 4 3 . 7 8 6 9 2 0 . 8 9 0 2 5 . 8 2 2 0 0 . 3 1 3 6 1 . 1 8 7 4 S u b t e l o c é n t .

1 1 3 1 4 . 9 2 4 . 9 2 4 . 9 2 5 . 2 0 5 1 5 . 7 1 5 . 3 9 1 5 . 5 4 5 1 5 . 6 6 2 5 3 . 1 5 9 6 2 4 . 0 4 1 0 5 . 1 9 1 8 0 . 3 7 3 5 1 . 1 8 0 2 S u b t e l o c é n t .2 0 6 . 4 9 4 . 4 9 4 . 4 9 1 6 . 1 7 1 5 . 3 9 1 5 . 7 8 3 . 5 1 4 5 2 2 . 1 5 1 0 5 . 5 6 9 8 0 . 3 4 0 9 1 . 1 9 8 0 S u b t e l o c é n t .

1 2 4 2 4 . 2 4 . 2 4 . 2 4 . 8 0 5 1 8 . 2 5 1 8 . 7 2 1 8 . 4 8 5 1 8 . 5 2 7 5 4 . 4 0 1 2 1 8 . 5 1 4 4 6 . 2 9 7 1 0 . 3 1 8 9 1 . 4 0 3 4 S u b t e l o c é n t .3 7 5 . 6 9 5 . 1 3 5 . 4 1 1 8 . 5 6 1 8 . 5 8 1 8 . 5 7 3 . 4 3 2 5 2 2 . 5 6 0 5 5 . 4 8 7 9 0 . 4 1 0 7 1 . 4 0 9 9 S u b t e l o c é n t .

1 3 4 3 4 . 8 9 4 . 8 7 4 . 8 8 5 . 0 0 5 1 6 . 7 7 1 7 . 6 8 1 7 . 2 2 5 1 8 . 6 5 7 5 3 . 5 2 9 7 2 2 . 0 7 6 5 5 . 5 8 4 7 0 . 3 7 0 5 1 . 3 0 7 7 S u b t e l o c é n t .2 6 5 . 1 6 5 . 1 5 . 1 3 2 0 . 8 6 1 9 . 3 2 2 0 . 0 9 3 . 9 1 6 2 2 0 . 3 4 1 0 5 . 9 3 1 8 0 . 3 8 9 5 1 . 5 2 5 3 S u b t e l o c é n t .

1 4 4 7 3 . 6 3 3 . 6 3 3 . 6 3 1 . 0 6 1 8 . 2 3 1 7 . 9 8 1 8 . 1 0 5 1 6 . 9 8 7 5 4 . 9 8 7 6 1 6 . 7 0 1 2 6 . 6 5 9 8 0 . 2 7 5 6 1 . 3 7 4 6 S u b t e l o c é n t .1 8 3 . 1 3 3 . 9 6 3 . 5 4 5 1 5 . 1 1 6 . 6 4 1 5 . 8 7 4 . 4 7 6 7 1 8 . 2 5 9 1 6 . 3 4 8 2 0 . 2 6 9 1 1 . 2 0 4 9 S u b t e l o c é n t .

1 5 1 7 3 . 9 6 3 . 4 5 3 . 7 0 5 3 . 5 3 2 5 1 6 . 3 1 1 6 . 2 2 1 6 . 2 6 5 1 4 . 5 8 7 5 4 . 3 9 0 0 1 8 . 5 5 2 8 6 . 2 8 9 4 0 . 2 8 1 3 1 . 2 3 4 9 S u b t e l o c é n t .1 9 3 . 3 7 3 . 3 5 3 . 3 6 1 2 . 3 2 1 3 . 5 1 2 . 9 1 3 . 8 4 2 3 2 0 . 6 5 1 5 5 . 8 6 9 7 0 . 2 5 5 1 0 . 9 8 0 1 S u b t e l o c é n t .

1 6 3 2 1 1 1 1 4 0 . 8 9 4 3 . 7 1 4 2 . 3 4 3 . 5 9 7 5 4 2 . 3 0 0 0 2 . 3 0 9 5 9 . 5 3 8 1 0 . 0 7 5 9 3 . 2 1 1 5 T e l o c é n t r i c o3 3 1 1 1 4 5 . 4 4 4 4 . 3 5 8 . 3 8 . 3 0 0 0 1 0 . 7 5 2 7 7 . 8 4 9 5 0 . 0 7 5 9 0 . 6 3 0 1 T e l o c é n t r i c o

1 7 2 4 1 1 1 1 3 0 . 5 5 3 5 . 4 4 3 2 . 9 9 5 3 2 . 0 8 3 2 . 9 9 5 0 2 . 9 4 1 6 9 . 4 1 1 7 0 . 0 7 5 9 2 . 5 0 5 0 T e l o c é n t r i c o6 1 1 1 3 1 . 2 6 3 1 . 0 7 3 1 . 1 6 5 3 1 . 1 6 5 0 3 . 1 0 9 0 9 . 3 7 8 2 0 . 0 7 5 9 2 . 3 6 6 1 T e l o c é n t r i c o

1 8 3 9 1 1 1 1 2 7 . 4 5 2 5 . 3 2 2 6 . 3 8 5 3 1 . 2 8 5 2 6 . 3 8 5 0 3 . 6 5 1 6 9 . 2 6 9 7 0 . 0 7 5 9 2 . 0 0 3 2 T e l o c é n t r i c o7 1 1 1 3 4 . 7 9 3 7 . 5 8 3 6 . 1 8 5 3 6 . 1 8 5 0 2 . 6 8 9 3 9 . 4 6 2 1 0 . 0 7 5 9 2 . 7 4 7 2 T e l o c é n t r i c o

1 9 2 8 1 1 1 1 3 1 . 2 4 3 0 . 1 9 3 0 . 7 1 5 3 1 . 0 1 2 5 3 0 . 7 1 5 0 3 . 1 5 3 1 9 . 3 6 9 4 0 . 0 7 5 9 2 . 3 3 1 9 T e l o c é n t r i c o3 4 1 1 1 3 1 . 6 7 3 0 . 9 5 3 1 . 3 1 3 1 . 3 1 0 0 3 . 0 9 5 0 9 . 3 8 1 0 0 . 0 7 5 9 2 . 3 7 7 1 T e l o c é n t r i c o

2 0 3 8 1 1 1 1 1 9 . 7 4 2 0 . 1 6 1 9 . 9 5 1 9 . 8 6 5 1 9 . 9 5 0 0 4 . 7 7 3 3 9 . 0 4 5 3 0 . 0 7 5 9 1 . 5 1 4 6 T e l o c é n t r i c o1 4 1 1 1 1 9 . 5 8 1 9 . 9 8 1 9 . 7 8 1 9 . 7 8 0 0 4 . 8 1 2 3 9 . 0 3 7 5 0 . 0 7 5 9 1 . 5 0 1 7 T e l o c é n t r i c o

2 1 2 1 1 1 1 1 2 0 . 8 9 2 3 . 1 9 2 2 . 0 4 1 9 . 4 9 2 2 . 0 4 0 0 4 . 3 4 0 3 9 . 1 3 1 9 0 . 0 7 5 9 1 . 6 7 3 3 T e l o c é n t r i c o2 2 1 1 1 1 5 . 4 4 1 8 . 4 4 1 6 . 9 4 1 6 . 9 4 0 0 5 . 5 7 4 1 8 . 8 8 5 2 0 . 0 7 5 9 1 . 2 8 6 1 T e l o c é n t r i c o

2 2 4 0 1 1 1 1 2 1 . 7 7 2 1 . 0 4 2 1 . 4 0 5 2 0 . 7 5 2 5 2 1 . 4 0 5 0 4 . 4 6 3 3 9 . 1 0 7 3 0 . 0 7 5 9 1 . 6 2 5 1 T e l o c é n t r i c o3 6 1 1 1 1 9 . 9 1 2 0 . 2 9 8 . 3 2 8 . 3 2 0 0 1 0 . 7 2 9 6 7 . 8 5 4 1 0 . 0 7 5 9 0 . 6 3 1 7 T e l o c é n t r i c o

2 3 1 2 1 1 1 1 1 8 . 3 2 1 7 . 3 9 1 7 . 8 5 5 1 8 . 6 1 5 1 7 . 8 5 5 0 5 . 3 0 3 6 8 . 9 3 9 3 0 . 0 7 5 9 1 . 3 5 5 6 T e l o c é n t r i c o1 3 1 1 1 1 8 . 9 9 1 9 . 7 6 1 9 . 3 7 5 1 9 . 3 7 5 0 4 . 9 0 8 0 9 . 0 1 8 4 0 . 0 7 5 9 1 . 4 7 1 0 T e l o c é n t r i c o

2 4 2 7 1 0 . 7 1 1 . 4 3 1 1 . 0 6 5 7 . 5 3 7 5 5 9 . 1 9 5 7 . 1 4 5 8 . 1 6 5 3 2 . 2 8 7 5 5 . 2 5 6 7 1 5 . 9 8 3 0 6 . 8 0 3 4 0 . 8 4 0 1 4 . 4 1 6 0 S u b t e l o c é n t .3 0 4 . 0 1 4 . 0 1 4 . 0 1 6 . 4 2 6 . 4 6 . 4 1 1 . 5 9 8 5 3 8 . 4 8 3 7 2 . 3 0 3 3 0 . 3 0 4 4 0 . 4 8 6 7 M e t a c é n t r i c o

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13

Tabla de obtención de bandas G

PARCROMOSOMICO

CROMOSOMAS NO.BANDASNEGRAS x

CROMOSOMA

NO. BANDASBLANCAS x

CROMOSOMA1 9 10 3 12 23 3 3 13 46 48 7 64 8 25 5 55 41 44 5 56 1 45 5 47 4 15 5 48 16 29 5 59 35 11 4 210 2 5 3 111 31 20 4 212 42 37 3 213 43 26 3 214 47 18 4 315 17 19 3 216 32 33 5 517 24 6 3 218 39 7 3 219 28 34 2 120 38 14 2 121 21 22 3 222 40 36 3 223 12 13 4 424 27 - 7 7

- 30 2 2

Bandas negras 183Bandas blancas 137Total 320

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14

DESCRIPCIÓN DE BANDAS G

PAR 1 (9, 10)

Este par es tres veces más pequeñoque el par tres y es un parmetacéntrico.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 3 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca ancha1.3 banda negra delgada

PAR 2 (23,3)

Este par es del mismo tamaño que elpar uno y es también un parmetacéntrico .

p-1 región1.1 banda negra

q- 3 regiones1.1 banda negra ancha1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra moderada

PAR 3 (46,48 )

Los cromosomas que forman este parson subtelocéntricos y son los másgrandes que conforman el cariotipo.En este par el cromosoma 48presenta una ligera condensaciónrespecto al cromosoma 46.

p-3 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra ancha

q- 10 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra delgada1.6 banda blanca moderada1.7 banda negra ancha1.8 banda blanca moderada1.9 banda negra delgada1.10 banda blanca moderada

PAR 4 (8,25)

Este par presenta casi el mismotamaño que el par tres y estaconformado por cromosomassubtelocéntricos, en donde elcromosoma ocho presenta una ligeracondensación en los brazos q .

p-3 regiones1.1 banda blanca ancha1.2 banda negra delgada1.3 banda blanca ancha

q-7 regiones1.1 banda negra ancha1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra moderada1.6 banda blanca moderada1.7 banda negra moderada

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15

PAR 5 (41,44)

Este par es 1/5 más pequeño que elpar tres y esta formado porcromosomas subtelocéntricos.

p- 2 regiones1.1 banda negra ancha1.2 banda blanca moderada

q- 8 regiones1.1 banda blanca moderada1.2 banda negra ancha1.3 banda blanca delgada1.4 banda negra ancha1.5 banda blanca delgada1.6 banda negra delgada1.7 banda blanca delgada1.8 banda negra moderada

PAR 6 (1,45)

Este par esta formado porcromosomas subtelocéntricos.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 8 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra delgada1.6 banda blanca moderada1.7 banda negra delgada1.8 banda blanca moderada

PAR 7 (4,15 )

Este par esta formado porcromosomas subtelocéntricos.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 8 regiones1.1 banda negra delgada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra delgada1.6 banda blanca moderada1.7 banda negra delgada1.8 banda blanca moderada

PAR 8 (16,29)

Este par es 1/4 más pequeño que elpar tres y esta formado porcromosomas subtelocéntricos.

p- 2 regiones1.1 banda negra ancha1.2 banda blanca delgada

q- 8 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra moderada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra delgada1.6 banda blanca delgada1.7 banda negra muy delgada1.8 banda blanca muy delgada

PAR 9 (35,11)

Este par en tamaño es similar al par 8y esta formado por cromosomassubtelocéntricos

p- 1 región1.1 banda negra

q- 5 regiones1.1 banda negra delgada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra moderada1.4 banda blanca delgada1.5 banda negra ancha

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PAR 10 (2,5)

Este par es del mismo tamaño que elpar 9, esta formado por cromosomassubtelocéntricos.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 3 regiones

1.1 banda negra delgada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra ancha

PAR 11 (31,20)

Este par esta formado porcromosomas subtelocéntricos.

p- 1 región

1.1 banda negra

q- 5 regiones

1.1 banda negra delgada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra moderada

PAR 12 (42,37)

Este par es dos veces más pequeñoel par tres y que esta formado porcromosomas subtelocéntricos.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 4 regiones1.1 banda blanca moderada1.2 banda negra delgada1.3 banda blanca moderada1.4 banda negra moderada

PAR 13 (43,26)

Este par es similar al par doce yesta formado por cromosomassubtelocéntricos.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 3 regiones1.1 banda blanca moderada1.2 banda negra moderada1.3 banda blanca moderada

PAR 14 (47, 18)

Este par es tres veces más pequeñoque el par tres y esta formado porcromosomas subtelocéntricos y essimilar a los pares 12 y 13.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 6 regiones1.1 banda negra delgada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra muy delgada1.4 banda blanca delgada1.5 banda negra delgada1.6 banda blanca moderada

PAR 15 (17, 19)

Este par esta conformado porcromosomas subtelocéntricos.

p-1 región1.1 banda negra

q- 4 regiones1.1 banda negra delgada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra moderada1.4 banda blanca delgada

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PAR 16 (6, 24)

Este par esta conformado porcromosomas telocéntricos y es elmas grande de este tipo .

q-10 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra delgada1.6 banda blanca moderada1.7 banda negra delgada1.8 banda blanca moderada1.9 banda negra delgada1.10 banda blanca moderada

PAR 17 (24, 6)

Este par es 1/3 más pequeño que elpar tres y esta conformado porcromosomas telocéntricos.

q- 5 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra muy ancha1.4 banda blanca delgada1.5 banda negra moderada

PAR 18 (39,7 )

Este par es un poco más pequeñoque el par 17 y esta conformado porcromosomas telocéntricos.

q- 5 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra moderada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra moderada

PAR 19 (28,34)

Este par esta conformado porcromosomas telocéntricos.

q- 3 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca ancha1.3 banda negra ancha

PAR 20 (38,14)

Este par es 2 veces más pequeñoque el par tres y esta constituido porcromosomas telocéntricos.

q- 3 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra ancha

PAR 21 (21,22)

Este par esta conformado porcromosomas telocéntricos y esparecido al par 20 en tamaño.

q- 5 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca delgada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca delgada1.5 banda negra delgada

PAR 22 (40,36)

Este par es tres veces más pequeñoque el par tres y esta conformado porcromosomas telocéntricos.

q- 5 regiones1.1 banda negra delgada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra moderada

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18

PAR 23 (12,13)

Este par es similar en tamaño al par22 y esta formado por cromosomastelocéntricos.

q- 8 regiones1.1 banda negra moderada1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra muy delgada1.4 banda blanca delgada1.5 banda negra muy delgada1.6 banda blanca delgada1.7 banda negra muy delgada1.8 banda blanca delgada

SEXUALES (27) X

Este cromosoma es uno de los masgrande del cariotipo, es uncromosoma subtelocéntrico.

p- 3 regiones1.1 .1 banda blanca moderada1.2 banda negra delgada1.3 banda blanca ancha

q- 11 regiones1.1 banda negra moderada

1.2 banda blanca moderada1.3 banda negra muy delgada1.4 banda blanca moderada1.5 banda negra delgada1.6 banda blanca delgada1.7 banda negra moderada1.8 banda blanca moderada1.9 banda negra delgada1.10 banda blanca moderada1.11 banda negra moderada

30 (Y)

Este cromosoma es 5 veces máspequeño que el cromosoma 27 esun cromosoma metacéntrico.

p- 1 región1.1 banda negra

q- 3 regiones1.1 banda blanca ancha1.2 banda negra moderada1.3 banda blanca ancha

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Foto bandas C

Cariotipo bandas C

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20

Ideograma bandas C

DESCRIPCIÓN DE BANDAS C

Utilizando la técnica de bandeo C seaprecia que la mayoría de los parescromosómicos de Peromyscusdifficilis felipensis poseen regionesde heterocromatina constitutivacentromérica ecepto el par ocho quepresenta una condensación deheterocromatina en la parteintersticial y distal del brazo q.

PAR 1 (38,39)

Este par cromosómico metacéntricopresenta una condensación deheterocromatrina constitutiva en laregión centromérica y una banda masclara en la parte distal del brazo q.

PAR 2 (37,45)

Este par también metacéntricopresenta una condensación clara deheterocromatina centromérica y unacondensación distal deheterocromatina más obscura en elbrazo q.

PAR 3 ( 8,9 )

Los cromosomas que forman este parson subtelocéntricos y presenta unacondensación de heterocromatinacentromérica, en el brazo p seobserva una pequeña banda clara enla porción distal, mientras que en elbrazo q se presentan dos bandasintersticiales y una distal.

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PAR 4 (46,20)

Este par formado por cromosomassubtelocéntricos presenta unacondensación centromérica y unacondensación en la parte distal delbrazo q.

PAR 5 (34,30 )

Este par esta formado porcromosomas subtelocéntricospresenta condensación deheterocromatina centromérica, elbrazo q presenta dos regiones decondensación una intersticial clara yuna terminal más obscura.

PAR 6 ( 6,12 )

Este par formado por cromosomassubtelocéntricos presentancondensación centromérica en mayorproporción y tres bandas decondensación en el brazo q dosintersticiales de las cuales una esmas clara y una distal también clara.

PAR 7 (13,14 )

Este par esta formado porcromosomas subtelocéntricos quepresentan una condensación deheterocromatina centromérica y tresbandas intersticiales en el brazo q.

PAR 8 (26,27)

Este par también subtelocéntricopresenta una condensación deheterocromatima en dos regiones delbrazo q una intersticial mas obscura y

una mas clara en la parte distal delbrazo.

PAR 9 (22,48 )

Este par formado por cromosomassubtelocéntricos presenta unacondensación de heterocromatinaconstitutiva en dos regiones una en laparte centromérica y otra en la partedistal del brazo q, ambas bandaspresentan una coloración muyobscura.

PAR 10 (16,24)

Este par es similar al par 6 estaformado por cromosomassubtelocéntricos y presenta unacondensación similar deheterocromatica ya que presentacuatro regiones una centromérica ytres intersticiales en el brazo q.

PAR 11 (32,47)

Este par esta formado porcromosomas subtelocéntricos condos zonas de condensación unacentromérica de mayor tamaño y unaintersticial en el brazo q.

PAR 12 (36,42)

Este par también formado porcromosomas subtelocéntricospresenta una condensación deheterocromatina centromérica queabarca todo el brazo p y dos zonasmas delgadas de condensación en laparte casi distal del brazo q .

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PAR 13 (43,23)

Este par constituido por cromosomassubtelocéntricos presenta dos zonasde condensación de laheterocromatina constitutiva una en laregión centromérica y otra en la partedistal del brazo q .

PAR 14 ( 2,44 )

Este par formado por cromosomassubtelocéntricos y es similar al par13 ya que presenta dos regiones decondensación de la heterocromatinauna centromérica y una distal..

PAR 15 (17, 19)

Este par esta conformado porcromosomas subtelocéntricos essimilar al par 11 con dos zonas decondensación una centromérica demayor tamaño y una intersticial en elbrazo q.

PAR 16 (4,11)

Este par formado por cromosomastelocéntricos presenta tres zonas decondensacion de la heterocromatinauna centromérica de mayor amplitudy dos intersticiales.

PAR 17 (3, 5)

Este par formado por cromosomastelocentricos presenta dos seccionesde condensación una centromérica yuna intersticial.

PAR 18 (7,1 )

Este par es similar el par 17 presentados secciones de condensación unacentromérica y una intersticial.

PAR 19 (18,41)

Este par esta formado porcromosomas telocéntricos presentatres zonas de condensación de laheterocromatica constitutiva unaregión centromérica, una intersticial yuna distal.

PAR 20 (35,15)

Este constituido por cromosomastelocéntricos presenta unacondensación de heterocromatina enla región centromérica delcromosoma.

PAR 21 (19,10)

Este par similar al par 17 y18 estaconformado por cromosomastelocéntricos, presenta dos seccionesde condensación de laheterocromatina una centromérica yuna intersticial.

PAR 22 (40,36)

Este par esta conformado porcromosomas telocéntricos, los cualespresentan dos secciones decondensación de la heterocromatinauna sección centromérica y unaterminal.

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PAR 23 (29,31)

Este par es similar al par 21 estaformado por cromosomastelocéntricos y presenta dossecciones de condensación unacentromérica y una intersticial.

SEXUALES (25) X

Este cromosoma es el mas grande yes un cromosoma subtelocéntrico elcual presenta varios puntos decondensación de la heterocromatina,uno en la parte terminal del brazo p,otro en la región centromérica, tres enla zona intersticial del brazo q y unomas en la zona distal de este mismobrazo.

28 (Y)

Este cromosoma es metacéntrico ypresenta dos zonas de condensaciónde la heterocromatina unacentromérica y otro intersticial en elbrazo q.

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TABLA DE OBTENCIÓN DE BANDAS C

PARCROMOSOMICO CROMOSOMAS

SITIO DE CONDENSACION DE LAHETEROCROMATINA

1 38 39 centromérica y distal2 37 45 Centromérica y distal3 8 9 Centromérica, distal e intersticial4 46 20 Centromérica y distal5 34 30 Centromérica, intersticial y distal6 6 12 centromérica , intersticial y distal7 13 14 centromérica e intersticial8 26 27 intersticial y distal9 22 48 centromérica y distal

10 16 24 centromérica e intersticial11 32 47 centromérica e intersticial12 36 42 centromérica e intersticial13 43 23 Centromérica y distal14 2 44 centromérica e intersticial15 17 21 centromérica e intersticial16 4 11 centromérica e intersticial17 3 5 centromérica e intersticial18 7 1 centromérica e intersticial19 18 41 centromérica ,intersticial y distal20 35 15 centromérica21 19 10 centromérica e intersticial22 40 33 centromérica y distal23 29 31 centromérica e intersticial24 25 - centromérica, distal e intersticial

- 28 centromérica e intersticial

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TABLA QUE PRESENTA EN NÚMERO DE BANDAS C POR CROMOSOMA.

# PAR CROMOSOMICO # BANDAS DE CONDENSACION x CROMOSOMA

1 22 23 44 25 46 47 48 29 210 711 212 313 214 215 216 317 218 219 320 121 222 223 2

Cromosoma X 6Cromosoma Y 2

69

No. de bandas obtenidas en el complemento haploide

# Bandas x cromosoma 61 x 2 = 122

# Bandas en cromosomas sexuales = 8 130

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DISCUSIÓN

El análisis de datos obtenidos 2n=48 y FN= 56-98 para Peromyscusdifficilis felipensis de Oaxaca muestra que esta población cae dentro del patróncariotípico propuesto por Hsu y Arrighi (1968).

Las bandas obtenidas con la técnica de bandeo G caen dentro del patrónde bandas descrita por Greenbaum, et al (1994) para este género.

Al realizar dicha técnica se pudo observar que los tiempos de tripsina semodifican de acuerdo al tiempo de maduración que presentan los cromosomas.También se pudo observar que la longitud de algunos cromosomas pares presentavariacion longitudinal, por la posible condensación de la cromatina constitutiva(eucromatina).

Los resultados en la técnica de bandeado C, muestran una condensaciónde heterocromatina constitutiva hacia la región centroamérica en la mayoría de losautosomas, similar a la que presentan las subespecies de heteromidosChaetodipus spinatus lambi, C.s. bryanti, C.s. brocus y C.s. peninsulae descritospor González (2002).

CONCLUSIÓN

El análisis de resultados muestra que el cariotipo de Peromyscus difificilisfelipensis del estado de Oaxaca consta de 2n= 48 FN=76 además presenta unpatrón de bandas característico de la especie ya que el número de bandas Gconsta de 183 bandas obscuras y 137 bandas blancas, obteniendo así un total de320 bandas según los resultados obtenidos. Los cuales caen dentro del rangodescrito por Greenbaum (1994). Lo anterior nos permite suponer que dichasubespecie no ha sufrido variación genética a pesar de la alteración de su hábitatnatural.

En cuanto a la técnica de bandeo C se observo una condensación deheterocromatina en la región centromérica de la mayoría de los pares, y elnumero total de bandas C es de 130 para el complemento haploide. Derivado deestos resultados se determina que el cariotipo de bandas C es de caráctercentromérico.

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