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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

DEPARTAMENTO DE CLINICA VETERINARIA

MANUAL DE PRACTICAS DEL LABORATORIO CLINICO DE PAT OLOGÍA DIAGNOSTICA

Elaborado: M. V. Z. Marcela Morfín Mata Dr. Efraín Islas Ojeda

Autorizado: Departamento de Clínica Veterinaria

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DIRECTORIO:

M. C. Q. RAFAEL URZÚA MACÍAS

Rector De la Universidad Autónoma de Aguascalientes

M. en C. JOSÉ DE JESÚS GUTIÉRREZ GONZÁLEZ

Decano del Centro de Ciencias Agropecuarias

C. P. GEORGINA MACIAS MORA

Secretario del Centro de Ciencias Agropecuarias

ING. FRANCISCO JAVIER HERNÁNDEZ DUEÑAS

Secretario de Docencia de Pregrado del Centro de Ciencias Agropecuarias

M. V. Z. ENRIQUE GUILLERMO HERNÁNDEZ AYALA

Secretario de Vinculación y Difusión del Centro de Ciencias Agropecuarias

DR. ARTURO GERARDO VALDIVIA FLORES

Secretario de Investigación y Posgrado del Centro de Ciencias Agropecuarias

DR. EFRAÍN ISLAS OJEDA Jefe de Departamento de Clínica Veterinaria del Centro de Ciencias Agropecuarias

DR. EFRAÍN ISLAS OJEDA Profesor titular de la materia Patología Diagnóstica Veterinaria

M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMÍREZ

Profesoras adjuntas del laboratorio de la materia Patología Diagnóstica Veterinaria

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Índice

Portada 1 Directorio 2 Índice 3 Introducción 4 Competencia a las que contribuye, y su ubicación dentro del mapa

curricular vigente. 5

Objetivo general del sistema de prácticas 6 Habilidades y Actitudes 6 Nivel de desempeño 7 Programa del sistema de prácticas 8 Practicas generales de Seguridad 9 Práctica No. 1 REGLAMENTO DEL LABORATORIO 15 Práctica No. 2 EQUIPO BASICO DEL LABORATORIO 20 Práctica No. 3 TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS 26 Práctica No. 4 PRUEBAS DE DIAGNOSTICO 35 Sesión 1 COPROPARASITOLOGIA 44 Sesión 2 HEMATOLOGIA 49 Sesión 3 URIANALISIS 57 Sesión 4 SEROLOGIA 65 Sesión 5 TOXICOLOGIA 69 Sesión 6 QUIMICA SANGUÍNEA 74 Sesión 7 INMUNOENSAYO DE LA PRUEBA TIROXINA TOTAL 77 Práctica No. 5 INMUNOFLUORESCENCIA 84 Práctica No. 6. SEGUIMIENTO DE CASOS CLÍNICOS 89

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INTRODUCCIÓN El nombre de la materia que cursarás es Patología Diagnóstica Veterinaria, que en realidad quiere decir Diagnóstico Clínico, pues éste es el que tú vas a realizar diariamente a lo largo de tu vida. Éste manual ha sido diseñado principalmente para ti; que estudias la Medicina Veterinaria; pues debes dominar un gran número de tópicos. Aún hoy cuando la especialización está tan difusa, no hemos llegado a la etapa en que los MVZ, dedicados a la práctica clínica, se especialicen en ramas como los médicos humanos. En consecuencia tanto los que ejercen, como tú que estudias, serán llamados a menudo para considerar o emplear técnicas de diagnóstico de laboratorio con las que pretendemos que te familiarices, para que elabores un mejor diagnóstico de las enfermedades.

Este manual incluye información sobre la validez de las técnicas que emplearás, además de valores que te ayudarán a la interpretación de los resultados, así como a comprender el proceso patológico de las enfermedades. Estrictamente en la práctica clínica la conformación del diagnóstico de los problemas que aquejan a los pacientes es muy difícil de hacer y requiere además de la combinación de la historia clínica, el examen físico general y de las pruebas de laboratorio, en este curso y con la ayuda de éste manual te familiarizaras para llegar al diagnóstico clínico que te servirá para establecer un tratamiento y formular un pronostico.

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ANATOMÍA COMPARADA

DE LOS ANIMALES

DOMÉSTICOS I

INTRODUCCIÓN A LA

MEDICINA VETERINARIA Y

ZOOTECNIA

BIOQUÍMICA

METEOROLOGÍA

AGRÍCOLA Y

EDAFOLOGÍA

ANATOMÍA COMPARADA

DE LOS ANIMALES

DOMÉSTICOS II

INFORMÁTICA APLICADA

CITOLOGÍA E HISTOLOGÍA

ANATOMÍA TOPOGRÁFICA

DE LOS ANIMALES

DOMÉSTICOS

FISIOLOGÍA GENERAL BROMATOLOGÍA

GENÉTICA Y MEJORA-

MIENTO ANIMAL

MERCADOTECNIA

A4

ECONOMÍA PECUARIA

A1

FARMACOLOGÍA

GENERAL

ENDOCRINOLOGÍA

VETERINARIA

PATOLOGÍA GENERAL

VETERINARIA

FISIOLOGÍA VETERINARIA

EXTERIORES DE LOS

ANIMALES DOMÉSTICOS

FINANZAS

AGROPECUARIAS

A3

FARMACOLOGÍA

VETERINARIA

NUTRICIÓN DE LOS


PATOLOGÍA SISTÉMICA

VETERINARIA

PROPEDÉUTICA MÉDICO

VETERINARIA

ENF. BACTERIANAS DE

LOS ANIM. DOMÉSTICOS

TERAPÉUTICA MÉDICO

VETERINARIAPRODUCCIÓN APÍCOLA

INMUNOLOGÍA

VETERINARIA

ALIMENTACIÓN DE LOS


MEDICINA VETERINARIA

PREVENTIVA

ENF. VIRALES DE LOS

ANIM. DOMÉSTICOS

TÉCNICAS QUIRÚRGICAS

ZOOTECNIA DE

PORCINOS

TERAPÉUTICA

QUIRÚRGICA

ENF. PARASITARIAS DE

LOS ANIM. DOMÉSTICOS

ZOOTECNIA DE PERROS

Y GATOS

ELAB. Y EVAL. DE

PROYECTOS

AGROPECUARIOS

ZOOTECNIA DE BOVINOS

PRODUCTORES DE

LECHE

PATOLOGÍA

DIAGNÓSTICA

VETERINARIA

ZOOTECNIA DE BOVINOS

PRODUCTORES DE

CARNE

ZOOTECNIA DE EQUINOS

REPRODUCCIÓN

ASISTIDA

CLÍNICA DE AVES

CLÍNICA DE PORCINOS

ZOOTECNIA DE OVINOS Y

CAPRINOS

ASEGURAMIENTO DE LA

CALIDAD SANIT. DE LA

CARNE Y SUS DERIV.

ZOOTECNIA DE AVES

PRÁCTICAS CLÍNICO

ZOOTÉCNICAS EN AVES

PRÁCTICAS

PROFESIONALES DE

MVZ

CLÍNICA DE BOVINOS

CLÍNICA DE PERROS Y

GATOS

ASEGURAMIENTO DE LA

CALIDAD SANITARIA DE

LA LECHE Y P. L.

TALLER DE PROCESA-

MIENTO DE PRODUCTOS

CARNICOS

PERITAJE ZOOTÉCNICO

CLÍNICA DE EQUINOS

1 1098765432

MANEJO DE PASTIZALESPRODUCCIÓN INTENSIVA

DE FORRAJES

IRRIGACIÓN Y

FERTILIZACIÓN

AGRÍCOLA

PREPARACIÓN Y

JUZGAMIENTO DE

GANADO

TALLER DE PROCESA-

MIENTO DE PRODUCTOS

LÁCTEOS

CONSERVACIÓN DE

ALIMENTOS DE ORIGEN

C1 ANIMAL

MEDICINA INTERNA

VETERINARIA

CIRUGÍA ORTOPÉDICA Y

DE TEJIDOS BLANDOS

DIAGNÓSTICO

IMAGENOLÓGICO

VETERINARIO

URGENCIAS Y TERAPIA

INTENSIVA

AVES NO

CONVENCIONALES

D1

MAMÍFEROS NO

CONVENCIONALES FAUNA SILVESTREANIMALES DE

ZOOLÓGICO

ADMINISTRACIÓN

AGROPECUARIA

PREPARACIÓN Y

JUZGAMIENTO DE

MASCOTAS

MICROBIOLOGÍA

VETERINARIA

ANÁLISIS DE DATOS

PRODUCTIVOS Y

SANITARIOS

PRODUCCIÓN DE

FORRAJES

PRÁCTICAS CLÍNICO

ZOOTÉCNICAS EN

PERROS Y GATOS

PRÁCTICAS CLÍNICO

ZOOTÉCNICAS

EN BOVINOS

PRÁCTICAS CLÍNICO

ZOOTÉCNICAS EN

EQUINOS

PRÁCTICAS CLÍNICO

ZOOTÉCNICAS

EN PORCINOS

PRÁCTICAS CLÍNICO

ZOOTÉCNICAS EN

OVINOS Y CAPRINOS

BÀSICASDE APOYO FUNDAMENTALES APLICADAS

OPTATIVAS

PROFESIONALIZANTES

No.CLAVES :

2

1

5

4

3

7

6

10

9

8

12

11

14

13

16

18

17

20

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28

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26

30

29

33

32

31

35

34

38

37

36

40

39

42

41

44

43

47

46

45

49

48

51

50

52

B2

E1

D3

C2

F1

B3

E2

D4

C3

F2

B4

E2

F3

E3

F4

E4

No. No.No.

CONTADURÍA

A2

15

53

54

A5

B1

C4

D2

No.

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OBJETIVO GRAL: Al finalizar el proceso de aprendizaje, el alumno estará capacitado para conocer como aplicar e interpretar las técnicas del laboratorio con el fin de integrar un diagnóstico.

• HABILIDADES - Aplicará los recursos terapéuticos contra los padecimientos de los animales. - Aplicará técnicas de búsqueda, organización, análisis e integración de información relevante en la ciencia animal. - Detectará las situaciones problemáticas para la producción y la salud animal, generará soluciones alternativas y señalará la más conveniente. - Argumentará sus opiniones respecto a propuestas productivas o sanitarias, ofreciendo una crítica fundamentada. - Desarrollará habilidades básicas para el aprendizaje del idioma inglés (Escuchar, hablar, leer y escribir), así como para la comprensión de textos de su área de competencia.

• ACTITUDES

- Respetará la vida de los animales útiles al hombre y evitará el sufrimiento innecesario de los mismos. - Desarrollará hábitos de estudio orientados a la superación y actualización profesional.

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Niveles de Desempeño: Nivel de Desempeño: 3 Justificación del nivel propuesto: Se propone un nivel 3 porque el Médico Veterinario Zootecnista tiene una gran responsabilidad en el manejo de información que obtiene de los exámenes de laboratorio para llegar al diagnóstico preciso de las enfermedades que aquejan a los animales de compañía y de producción, teniendo como finalidad un diagnóstico preciso y la aplicación de un tratamiento adecuado Nivel 1.- Se realizan funciones rutinarias de baja complejidad. Se reciben instrucciones. Se requiere

baja autonomía.

Nivel 2.- Se realizan un conjunto significativo de actividades de trabajo, variadas y aplicadas en

diversos contextos. Algunas actividades son complejas y no rutinarias. Presenta un bajo grado

de responsabilidad y autonomía en las decisiones. A menudo requiere colaboración con otros

y trabajo en equipo.

Nivel 3.- Se requiere un importante nivel de toma de decisiones. Tiene bajo su responsabilidad

recurso materiales con los que opera su área. Así como control de recursos financieros para

adquisición de insumos.

Nivel 4.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que

mostrar creatividad y recursos para conciliar intereses. Se debe tener habilidad para motivar y

dirigir grupos de trabajo.

Nivel 5.- Se desarrollan un conjunto de actividades de naturaleza diversa, en las que se tiene que

mostrar un alto nivel de creatividad, así como buscar y lograr la cooperación entre grupos e

individuos que participan en la implantación de un problema de magnitud institucional.

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II. Programa del sistema de prácticas

Tema Sesiones Especie de aplicación Sema na

Tiempo estimado para la práctica

Reglamen to del laboratorio

Reglamento del laboratorio No aplica 1ª 2 hrs

Equipo básico del laboratorio

Equipo básico del laboratorio

No aplica 2ª 2 hrs

Toma y Envío de muestras

Toma y Envío de muestras Todas las especies 3ª 2 hrs

Pruebas de Diagnósti co

1.Coproparasitología 2.Hematología 3.Urianalisis 4.Serología 5.Toxicología 6.Química Sanguínea 7 .Inmunoensayo de la prueba tiroxina total.

1. Todas las especies 2. Todas las especies 3. Todas las especies 4. Bovinos y Ovinos 5. Alimentos de origen vegetal y órganos de animales postmortem 6. Todas las especies

7. Canideos

4ª 5ª 6ª 7ª 8ª 9ª 10ª

2 hrs 4 hrs 2 hrs 2 hrs 2 hrs 2 hrs 3 hrs

Inmuno-fluorescencia

Inmunofluorescencia Todas las especies 11ª 3 hrs

Segui-miento de casos clínicos

Seguimiento de casos clínicos

Todas las especies 12ª Dependiendo de la práctica a realizar.

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III. Prácticas Generales de Seguridad. Reglamentos y procedimientos generales.

Normas mínimas para los laboratorios que trabajan con materiales con actividad

biológica.

Medidas generales

- Toda persona que deba ingresar en laboratorios donde se desarrollen tareas que

impliquen el uso de material biológico debe estar capacitado y entrenado para las

tareas que deba realizar.

- Forma parte de la capacitación la lectura y comprensión de estas normas, como así

también su aceptación y compromiso de cumplimiento expresado por escrito.

- El Responsable de Laboratorio debe restringir el ingreso al lugar de trabajo a

aquellas personas cuyas tareas lo justifiquen y que hayan sido capacitadas e

informadas de los riesgos a los que está sometida con su ingreso.

- De acuerdo al equipamiento y al tipo de tareas que realice, cada laboratorio

elaborará un Plan de Contingencia que indique como proceder frente a

determinados accidentes: "Si se vuelca un tubo en la mesa, proceder....", "Si se

rompe un Erlenmeyer en el agitador, entonces...", etc. El conocimiento de este Plan

también debe ser parte de las actividades de capacitación del grupo.

Vestimenta

- Toda persona para ingresar al laboratorio, deberá utilizar bata o filipina, blanca,

limpia y deberá traerla cerrada.

- En aquellas situaciones en la que pueden producirse derrames, salpicaduras o

aerosoles, sobre todo cuando se trabaje con agentes que son zoonóticos, se deberá

utilizar guantes, anteojos y cubrebocas, según sea el caso.

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Prácticas generales

- Estará prohibido pipetear con la boca.

- Estará prohibido comer, beber, fumar y aplicarse cosméticos en el área de trabajo.

- Los guantes deberán descartarse al alejarse de la mesa de trabajo; no se tocarán con

ellos elementos como picaportes, tapas de recipientes, teléfonos, teclados, carpetas.

etc.

- Se dispondrá de recipiente de descarte en el lugar de trabajo a no más de 30 cm del

personal.

- Las manos deberán lavarse luego de trabajar con material viable, luego de sacarse

los guantes y antes de salir del laboratorio.

Prácticas específicas

- La superficie de trabajo se deberán descontaminar por lo menos una vez al día o

luego de cada derrame de material viable, utilizando agentes probadamente

efectivos contra los agentes con que se trabaja.

- El trabajo con jeringas deberá restringirse tanto como sea posible. Deberá usarse un

descartador rígido para agujas y otros elementos punzantes. No reencapuchar las

agujas, pues es una fuente importante de accidentes cortó punzantes.

- Todos los procedimientos deben ser realizados cuidadosamente para evitar

derrames, salpicaduras y la formación de aerosoles.

- Escurrir las pipetas apoyando la punta en la pared interna del recipiente,

produciendo una presión leve.

- No burbujear aire en recipientes abiertos, por ejemplo para lograr una descarga total

de los tips de pipetas automáticas.

- Al abrir frascos que contengan líquidos hacerlo volcando el tapón hacia el operador,

de tal manera que la apertura se produzca hacia adelante, para evitar que las

salpicaduras salten a la cara de la persona que está trabajando.

- Usar en lo posible tubos con tapa a rosca.

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Los tubos de centrífuga deben estar siempre tapados

- Si durante la centrifugación se destapa o rompe algún tubo se debe desinfectar la

centrífuga.

- Tener en cuenta el cambio de presión que se produce en los recipientes al sacarlos

de la congeladora y llevarlos a temperatura ambiente.

Normas de seguridad relacionadas con el trabajo

1. No manipular especies animales sin habilitación para esta tarea.

2. Usar uniformes y materiales de contención para los animales.

3. Informar inmediatamente las mordeduras, arañazos o cualquier trauma físico.

4. Mantener el orden en el área de trabajo.

5. No fumar, beber o comer en áreas de animales.

6. Separar los materiales defectuosos o en malas condiciones.

7. No colocar materiales en carros de transporte que impidan la visibilidad.

8. Mantener las manos limpias.

9. Los materiales rotos deberán ser recogidos con escobilla y para y colocados en

lugares apropiados.

Trabajos de campo

El personal que realiza tareas de campo está expuesto a adquirir infecciones zoonóticas.

Para reducir al mínimo los riesgos de contagio se debe conocer el peligro asociado a dichas

actividades y las vías de infección.

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Precauciones generales:

- No se debe beber, comer o fumar durante el trabajo.

- Debe estar vacunado (ej. Antitetánica, rabia, etc.).

- Mantener el material de trabajo en perfecto estado de conservación.

Todo el material punzante, como agujas o capilares, debe descartarse en recipientes especiales a tal fin. Después de procesar cada animal, todas las gasas, algodones sucios, toallas de papel y otros desperdicios se colocarán en bolsas específicas para tal fin. MEDIDAS PREVENTIVAS

LAVADO DE MANOS

Es la medida más importante y debe ser ejecutada de inmediato, antes y después del

contacto:

- entre diferentes procedimientos efectuados en el mismo paciente.

- luego de manipulaciones de instrumentales o equipos usados que hayan tenido

contacto con superficies del ambiente y/o pacientes.

- luego de retirarse los guantes

- desde el trabajador al paciente

Deben ser realizados:

- Luego de manipular sangre, fluidos corporales, secreciones, excreciones, materiales e

instrumentos contaminados, tanto se hayan usado o no guantes.

• Inmediatamente después de retirar los guantes del contacto con pacientes.

• Entre diferentes tareas y procedimientos.

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Se debe usar:

- Jabón común neutro para el lavado de manos de preferencia líquido.

- Jabón con detergente antimicrobiano o con agentes antisépticos en situaciones

específicas (brotes epidémicos, previo a procedimientos invasivos, unidades de alto

riesgo).

TECNICA DEL LAVADO DE MANOS

La técnica de lavarse las manos tiene la siguiente secuencia:

1. subirse las mangas hasta el codo

2. retirar alhajas y reloj

3. mojarse las manos con agua corriente

4. aplicar 3 a 5 ml de jabón líquido

5. friccionar las superficies de la palma de la manos y puño durante 10 o 15 segundos

6. enjuagar en agua corriente de arrastre

7. secar con toalla de papel

8. cerrar la canilla con la toalla

USO DE LOS GUANTES

Usar guantes limpios, no necesariamente estériles, previo al contacto con: sangre, fluidos corporales, secreciones, excreciones, mucosas y materiales contaminados. Para procedimientos invasivos se deben usar guantes de látex, estériles y luego descartarlos.

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USO DE LOS ZAPATOS O BOTAS

- Usar botas limpias, no estériles para proteger la piel y prevenir la suciedad de la

ropa durante procedimientos en actividades de cuidado que puedan generar

salpicaduras y aerosoles de sangre, fluidos corporales, secreciones y excreciones.

- Quitarse las botas o zapatones y colocarlas en un lugar adecuado para su posterior

procesamiento.

- Lavar las manos después de quitarse las botas o zapatones.

PROTECCION CORPORAL

La utilización de Batas es una exigencia multifactorial en la atención a pacientes o

animales.

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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE AGUASCALIENTES

CENTRO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS


LABORATORIO DE PATOLOGÍA DIAGNOSTICA

PRACTICA No. 1

“REGLAMENTO DEL LABORATORIO”

TITULAR DE LA MATERIA: DR. EFRAIN ISLAS OJEDA RESPONSABLES: M. V. Z. MARCELA MORFIN MATA

M. V. Z. VELIA JOSEFINA BERUMEN RAMÍREZ

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Esta práctica se realizará en el laboratorio multidisciplinario “A” del edificio 5; en las instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootécnica de la Universidad Autónoma de Aguascalientes. Número de alumnos por unidad de práctica Para ésta práctica se contará con un número no mayor a 20 alumnos por sesión, con la finalidad de que tengan una correcta asimilación, del reglamento vigente que rige al laboratorio. Propósito específico de cada práctica. La persona será competente para aplicar el reglamento que rige al laboratorio para el uso de éste, durante la realización de las prácticas, cuando conozca el programa de la materia, se relacione con el reglamento a seguir dentro del laboratorio, y asista cumpliendo las reglas establecidas. Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la práctica. Al terminar la práctica serán: un profesionista que acate las reglas establecidas del laboratorio durante su estancia en el mismo a lo largo del semestre. Normas de seguridad específicas de la práctica. Para ésta práctica se requieren las siguientes normas de seguridad:

Vestimenta






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Desarrollo de la práctica: En ésta práctica, nos apoyaremos con esquemas escritos ya establecidos, para el reglamento oficial de laboratorio, además de revisar, las normas oficiales que se presentan anteriormente en el manual de prácticas de patología diagnóstica. Además se hará mención de otras reglas como prerrequisito para la entrada al laboratorio como son:

- Se tomarán 10 minutos de tolerancia, después del horario establecido. - Es indispensable llevar la muestra con la cual se va a trabajar. - Utilizar la bata dentro del laboratorio. - Llevar manual de prácticas de patología diagnóstica.

Sistema de evaluación: Observación directa a través de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito. Evaluaciones intermedias con recomendaciones

Practica Observaciones sobre la práctica

Recomendaciones

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Método de asignación de calificaciones CRITERIOS DE EVALUACION. Lista de Cotejo 10% Presentación general. 5% (Portada, Técnica, Bibliografía, Anexos, Ortografía, Formato) Introducción y Descripción del Materia Biológico. 10 % Resultados. 10% Interpretación. 10% Discusión. 30% Resolución del problema. 25% NOTA.

Los reportes se entregaran 8 días después de haber realizado la práctica. Los reportes que no sean entregados en la fecha estipulada, tendrán máximo 3 días hábiles para entregarlos, descontando 1 punto por cada día de retraso.

Las faltas ortográficas se escribirán 100 veces, en caso de no entregarlas, no tendrá derecho a calificación aprobatoria.

ES NECESARIO APROBAR LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO P ARA ACREDITAR LA MATERIA . Para Saber Mas http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/087ecolssa.html http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/077ssa14.html

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ANEXO 1

HOJA DE COTEJO

Actividad Evaluación

alumno

Evaluación

instructor Final Observaciones

¿Asististe puntualmente a tu

práctica?

¿Utilizaste la bata de laboratorio

cerrada y limpia?

¿Faltaste a alguno de los

reglamentos del laboratorio?

¿Trajiste el Material completo?

¿Realizaste las técnicas conforme

a las instrucciones?

¿Entregaste el microscopio, en las

condiciones en las que te lo

entregaron?

¿Te manejaste con propiedad

dentro del laboratorio?

¿Cumpliste de manera completa

con el objetivo de la práctica?

¿Dispusiste de los desechos de

cómo indica el manual?

¿Los resultados que encontraste

fueron correctos?

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PRACTICA No. 2

“EQUIPO BASICO DEL LABORATORIO”



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Esta práctica se realizará en el laboratorio multidisciplinario “A” del edificio 5; en las instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootécnica de la Universidad Autónoma de Aguascalientes. Número de alumnos por unidad de práctica Para ésta práctica se contará con un número no mayor a 20 alumnos por sesión, con la finalidad de que tengan una correcta asimilación, del equipo básico utilizado en el laboratorio. Propósito específico de cada práctica. El alumno será competente para identificar el equipo básico empleado en un laboratorio para su correcta utilización en procesos posteriores en el diagnóstico clínico; cuando conozca el reglamento de laboratorio, tenga conocimiento de las funciones básicas de un laboratorio, acceso a manuales de uso y mantenimiento de equipo utilizando correctamente el equipo básico, indumentaria, así como mostrar una conducta apropiada dentro del laboratorio. Revisar, limpiar y organizar el equipo y el área de trabajo. Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la práctica. Al terminar la práctica serás un profesionista con la capacidad de conocer, utilizar, y mantener en buenas condiciones todo el equipo que se utiliza en un laboratorio, así como la aplicar correctamente el reglamento de éste, a lo largo del semestre. Normas de seguridad específicas de la práctica. Para ésta práctica se requieren las siguientes normas de seguridad:

Vestimenta






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Desarrollo de la práctica:

A continuación se harán algunas recomendaciones sobre las partes, enfoque y cuidado del microscopio binocular. Equipo usado con mayor frecuencia dentro del laboratorio. El uso y cuidado restante se verá en la práctica respectiva. EL MICROSCOPIO. COMPONENTES DEL MICROSCOPIO.- Los componentes del microscopio son clasificados como de soporte, mecánicos y ópticos.

Las partes del soporte sirven para sostener los sistemas óptico y de iluminación, las partes mecánicas sirven para proporcionar movimiento y la parte óptica incluye lo concerniente a la iluminación (lámparas y condensador) y las lentes que dan la amplificación (objetivos y oculares). OBSERVACIÓN AL MICROSCOPIO.

El esfuerzo excesivo y la fatiga deben evitarse en la observación microscópica. Esto se consigue atendiendo a los siguientes hábitos:

1) El observador deberá acostumbrarse a usar los dos ojos. 2) El banco y la mesa deben estar a una altura que le permitan al observador el uso del

microscopio de una manera confortable. PASOS PARA UN ENFOQUE CORRECTO. 1. Colocar la laminilla en la platina. 2. Encender la lámpara. 3. Subir la platina con el tornillo macrométrico hasta lograr un enfoque claro con el

objetivo de menor aumento (aro amarillo). 4. Pasar al siguiente objetivo (aro azul) afinar la imagen con el tornillo micrométrico. 5. Mover el revolver y colocar en la laminilla una pequeña gota de aceite de inmersión,

colocar el objetivo de inmersión (aro blanco). 6. Afinar la imagen con el tornillo micrométrico.

Los pasos 1 a 4 generalmente son usados para observación de parásitos, hongos y recuento de glóbulos. Los pasos 5 y 6 son utilizados para observación de bacterias y tejidos. EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO.

Quien use un microscopio debe tener en consideración que es un instrumento de precisión construido para realizar un trabajo preciso.

Los cuidados elementales son los siguientes: 1) Las lentes y el espejo deben estar limpios. El vidrio de las lentes es blando y se raya con

facilidad, por lo tanto, la limpieza de las mismas se hará usando solo papel manufacturado con este propósito.

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2) Cuando se emplee el objetivo de inmersión y laminilla con cubreobjetos, ambos deberán limpiarse con xilol inmediatamente después de usarlo para eliminar el aceite de cedro, humedeciendo ligeramente el papel en este solvente ya que el cemento que mantiene fijas las lentes es soluble en él y éstas pueden safarse de su sitio si se mojan con exceso.

3) La superficie de fricción de las partes mecánicas deben estar siempre ajustadas y lubricadas para manejarla con facilidad. Para lubricarlas se usa aceite muy fino o vaselina líquida, blanda o dura.

4) Las preparaciones deben estar siempre limpias, sobre todo, a nivel de cubreobjetos. Se pierde visibilidad cuando están sucias por huellas digitales, aceite de cedro seco o polvo.

5) Después de usar el microscopio se limpian las lentes y la platina, posteriormente se tapa con su funda.

6) En caso de alguna falla óptica o mecánica del microscopio, deberá darse aviso inmediato de ello al instructor.

USO DEL MICROSCOPIO. 1) Observación de cada una de las partes de los especimenes. 2) Efectuar mediciones de especimenes.

• El equipo que se menciona a continuación es el empleado para un diagnóstico: MICROSCOPIO BINOCULAR BALANZA GRANATARIA BALANZA SEMI-ANALITICA ESPECTOFOTÓMETRO ESTUFA BACTERIOLÓGICA HORNOS DE SECADO CENTRIFUGAS AUTOCLAVE CONTADOR DE COLONIAS DESTILADOR BAÑO MARÍA JARRA DE ANAEROBIOSIS POTENCIOMETRO MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA MICROSCOPIO ESTEREOSCÓPICO AGITADOR MAGNÉTICO AGITADOR DE PIPETAS HEMOGLOBINOMETRO LAMPARA DE LUZ ULTRAVIOLETA CAJA DE AGLUTINACIÓN HISTOQUINET MEDONIC (B. H.) REFRACTOMETRO LECTOR DE MICROELISA

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Recomendaciones

Método de asignación de calificaciones CRITERIOS DE EVALUACION. Presentación general. 10% (Portada, Técnica, Bibliografía, Anexos, Ortografía, Formato) Introducción y Descripción del Material 60% Lista de Cotejo 30% NOTA.



ES NECESARIO APROBAR LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO P ARA ACREDITAR LA MATERIA . Para Saber Mas MANUAL DE PATOLOGÍA CLINICA VETERINARIA. BENJAMÍN, M.N. 1984 LABORATORIO CLINICO EN MEDICINA VETERINARIA. COFFIN. 1977

25

ANEXO 1

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?


cerrada y limpia?








entregaron?








fueron correctos?

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PRACTICA No. 3

“TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS”



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Esta práctica se realizará en el área pecuaria, en las unidades de bovinos, ovinos y caprinos, así como en la cúnicula y de codornices de las instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootécnica de la Universidad Autónoma de Aguascalientes. Número de alumnos por unidad de práctica Para ésta práctica se contará con todo el grupo. Propósito específico de cada práctica.

• El alumno será competente para utilizar las técnicas básicas de la toma de muestras para el envío al laboratorio y su análisis en animales vivos; cuando maneje y sujete a los animales, poniendo en práctica los conocimientos necesarios de anatomía y propedéutica, evitando situaciones de stress y sufrimiento innecesario; utilizando como medio de apoyo el laboratorio para poder llegar a un diagnóstico y llevando un registro con el control de muestras.

Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la práctica. Al terminar la práctica será Un profesionista competente para tomar y enviar muestras al laboratorio, cuidando el bienestar animal, utilizando ésta técnica cada vez que requiera y durante el semestre de práctica Normas de seguridad específicas de la práctica. Para ésta práctica se requieren las siguientes normas de seguridad:

Vestimenta

- Toda persona para ingresar al área pecuaria, deberá utilizar bata o filipina, blanca,

limpia y deberá traerla cerrada. Así como botas limpias de hule.




Trabajos de campo

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El personal que realiza tareas de campo está expuesto a adquirir infecciones zoonóticas.

Para reducir al mínimo los riesgos de contagio se debe conocer el peligro asociado a dichas

actividades y las vías de infección.

Precauciones generales:

- No se debe beber, comer o fumar durante el trabajo.

- Debe estar vacunado (ej. Antitetánica, rabia, etc.).

- Mantener el material de trabajo en perfecto estado de conservación.

Todo el material punzante, como agujas o capilares, debe descartarse en recipientes especiales a tal fin. Después de procesar cada animal, todas las gasas, algodones sucios, toallas de papel y otros desperdicios se colocarán en bolsas específicas para tal fin. MEDIDAS PREVENTIVAS

LAVADO DE MANOS


contacto:






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Se debe usar:




riesgo).



� subirse las mangas hasta el codo

� retirar alhajas y reloj

� mojarse las manos con agua corriente

� aplicar 3 a 5 ml de jabón líquido

� friccionar las superficies de la palma de la manos y puño durante 10 o 15 segundos

� enjuagar en agua corriente de arrastre

� secar con toalla de papel

� cerrar la canilla con la toalla

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USO DE LOS GUANTES

Usar guantes limpios, no necesariamente estériles, previo al contacto con: sangre, fluidos corporales, secreciones, excreciones, mucosas y materiales contaminados. Para procedimientos invasivos se deben usar guantes de látex, estériles y luego descartarlos. Desarrollo de la práctica:

Los servicios del laboratorio de diagnóstico pueden ser una valiosa ayuda para el veterinario, porque podrá hacer diagnósticos más precisos y tendrá la información necesaria para establecer medidas terapéuticas o preventivas.

La muestra seleccionada deberá ser representativa del padecimiento. Se enviarán varias muestras del mismo lugar procurando muestrear también a un animal aparentemente sano.

La obtención de resultados significativos en cualquier procedimiento de laboratorio requiere por un lado, que la muestra sea extraída en forma correcta y por otro que ésta sea preservada de la mejor manera posible para evitar su deterioro antes de llegar al laboratorio. No es posible tener alguna confianza en resultados obtenidos por el examen de muestras inadecuadas o mal preservadas.

Para estudios bacteriológicos se deberán tomar las muestras con la mayor limpieza posible, en recipientes esterilizados o bolsas de plástico (nuevas) y por separado.

Para micología se hará un raspado de piel a profundidad procurando que sea en el borde de la lesión, con una hoja de bisturí estéril y un frasco que contenga glicerina al 50 %.

Las muestras de sangre para estudio hematológico deberán de ser recolectadas en frasco con anticoagulante. Para estudios serológicos o de química sanguínea se tomarán sin adicionar anticoagulante, procurando no agitar los frascos para evitar la hemólisis.

Orina . Para estudio físico, químico y de sedimento se recolectarán en frascos limpios, si se requiere urocultivo se utilizarán frascos estériles.

Coproparasitología. Estas muestras se toman directamente del recto del animal, en guantes o bolsas de plástico y deberá ser una por cada animal.

Inmunofluorescencia. Se remitirá el órgano afectado en un conservador adecuado (refrigeración o glicerina al 50 %).

31

IDENTIFICACIÓN DE LAS MUESTRAS.

En la identificación deberán incluirse los siguientes datos: a. Nombre del propietario. b. Dirección y teléfono. c. Datos del animal. d. Datos clínicos. e. Tratamiento y respuesta. f. Conservador utilizado. g. Diagnóstico presuntivo. h. Estudio solicitado. ENVIO DE MUESTRAS.

Para el envío de las muestras a un laboratorio de diagnóstico, siempre debe tenerse en cuenta que los materiales son potencialmente infecciosos, por lo que el medio más eficaz y seguro para el envío de muestras es el mensajero directo: pero en algunas ocasiones se requiere del servicio postal, cuando esto último se usa, las muestras deben de reunir los siguientes requisitos: - Deben de estar colocados en recipientes dobles (dos cajas o bien una caja y bolsas de

plástico) ya que se mejora el aislamiento y aumenta la resistencia del recipiente. - Como se mencionó anteriormente, las muestras deberán de ser enviadas en recipientes

individuales, entre cada bolsa o frascos que contengan las muestras se coloca un material que amortigüe los golpes y absorba la humedad (se prefiere el aserrín, pero puede utilizarse papel o viruta), la caja externa se cierra de tal forma que todas las esquinas y tapas queden selladas con cinta adhesiva; esto a su vez aumenta la resistencia del recipiente. Es muy importante que en la envoltura de los paquetes sean puestos con claridad los siguientes datos: MATERIAL DE FACIL DESCOMPOSICIÓN PARA ANALISIS, MENEJESE CON CUIDADO, FRAGIL.

Con el fin de que el material biológico llegue lo más pronto posible al laboratorio,

deberá considerarse la conveniencia de la forma de envío (aérea o por carretera, ya sean por flete en líneas comerciales o vehículos particulares, además al remitir la muestra, es conveniente comunicarse inmediatamente al laboratorio, indicando el medio de transporte, línea comercial empleada y hora probable de arribo a su destino, así como el número de guía sanitaria).

No es recomendable enviar muestras a los laboratorios de diagnóstico los fines de semana, período cercano a vacaciones, días festivos ya que se corre el peligro de que éstas no sean recibidas.

32



Recomendaciones

33

Método de asignación de calificaciones CRITERIOS DE EVALUACION. Presentación general. 10% (Portada, Técnica, Bibliografía, Anexos, Ortografía, Formato) Introducción y Descripción del Material 60% Lista de Cotejo 30% NOTA.



ES NECESARIO APROBAR LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO P ARA ACREDITAR LA MATERIA . Para Saber Mas MANUAL DE PATOLOGÍA CLINICA VETERINARIA. BENJAMÍN, M.N. 1984 LABORATORIO CLINICO EN MEDICINA VETERINARIA. COFFIN. 1977 DIAGNOSTICO Y PATOLOGIA EN VETERINARIA COLES. 1989 PATOLOGIA CLINICA Y PROCEDIMIENTOS DE DIAGNOSTICO EN VETERINARIA DOXEY, D.L. 1987 TOXICOLOGIA VETERINARIA HUMPREYS, D.J. 1990 MANUAL DE DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO Y MICOLOGICO JANG 1974

34

ANEXO 1

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?


cerrada y limpia?


reglamentos del área de trabajo?

¿Realizaste las técnicas

conforme a las instrucciones?



35





PRACTICA No. 4

“PRUEBAS DE DIAGNOSTICO”



36

Esta práctica se realizará en el laboratorio multidisciplinario “A” del edificio 5; en las instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootécnica de la Universidad Autónoma de Aguascalientes. Número de alumnos por unidad de práctica Para ésta práctica se contará con un número no mayor a 20 alumnos por sesión, con la finalidad de que tengan una correcta asimilación, de los diferentes métodos de diagnostico en un laboratorio. Propósito específico de cada práctica. El alumno será competente para aplicar diferentes técnicas para el análisis coproparasitologico, de sangre, orina, serología, toxicología, química seca, y micro ELISA para formar un criterio clínico de diagnóstico en la solución del problema mediante un tratamiento cuando aplique el reglamento del laboratorio, tenga conocimientos básicos de parasitología, inmunología, bacteriología, virología, fisiología, toxicología y patología así como conocimientos del manejo de la muestra y del paciente Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la práctica. Al terminar la práctica será un profesionista con la capacidad de realizar distintos exámenes de laboratorio así como su interpretación en los resultados, comprenderá el proceso patológico de las enfermedades, para en un lapso máximo de 72 hrs. llegar a un dx. final y así poder dar un pronóstico, un tratamiento (receta médica), y sus recomendaciones, por medio de un reporte escrito. Normas de seguridad específicas de la práctica. Para ésta práctica se requieren las siguientes normas de seguridad:

Vestimenta






37

Prácticas generales

- Estará prohibido pipetear con la boca.

- Estará prohibido comer, beber, fumar y aplicarse cosméticos en el área de trabajo.

- Los guantes deberán descartarse al alejarse de la mesa de trabajo; no se tocarán con

ellos elementos como picaportes, tapas de recipientes, teléfonos, teclados, carpetas.

etc.

- Se dispondrá de recipiente de descarte en el lugar de trabajo a no más de 30 cm del

personal.

- Las manos deberán lavarse luego de trabajar con material viable, luego de sacarse

los guantes y antes de salir del laboratorio.

Prácticas específicas

- La superficie de trabajo se deberán descontaminar por lo menos una vez al día o

luego de cada derrame de material viable, utilizando agentes probadamente

efectivos contra los agentes con que se trabaja.

- El trabajo con jeringas deberá restringirse tanto como sea posible. Deberá usarse un

descartador rígido para agujas y otros elementos punzantes. No reencapuchar las

agujas, pues es una fuente importante de accidentes cortó punzantes.

- Todos los procedimientos deben ser realizados cuidadosamente para evitar

derrames, salpicaduras y la formación de aerosoles.

- Escurrir las pipetas apoyando la punta en la pared interna del recipiente,

produciendo una presión leve.

- No burbujear aire en recipientes abiertos, por ejemplo para lograr una descarga total

de los tips de pipetas automáticas.

- Al abrir frascos que contengan líquidos hacerlo volcando el tapón hacia el operador,

de tal manera que la apertura se produzca hacia adelante, para evitar que las

salpicaduras salten a la cara de la persona que está trabajando.

- Usar en lo posible tubos con tapa a rosca.

38

Los tubos de centrífuga deben estar siempre tapados

- Si durante la centrifugación se destapa o rompe algún tubo se debe desinfectar la

centrífuga.

- Tener en cuenta el cambio de presión que se produce en los recipientes al sacarlos

de la congeladora y llevarlos a temperatura ambiente.

Normas de seguridad relacionadas con el trabajo

- Mantener las manos limpias.

- Los materiales rotos deberán ser recogidos con escobilla y para y colocados en

lugares apropiados.

Todo el material punzante, como agujas o capilares, debe descartarse en recipientes especiales a tal fin. MEDIDAS PREVENTIVAS

LAVADO DE MANOS


contacto:










39


Se debe usar:




riesgo).



• subirse las mangas hasta el codo

• retirar alhajas y reloj

• mojarse las manos con agua corriente

• aplicar 3 a 5 ml de jabón líquido

• friccionar las superficies de la palma de la manos y puño durante 10 o 15 segundos

• enjuagar en agua corriente de arrastre

• secar con toalla de papel

• cerrar la canilla con la toalla

40

Desarrollo de la práctica: El desarrollo de cada práctica se describe por el número de sesión, en el anexo No. 2. Sistema de evaluación: Observación directa a través de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito. Evaluaciones intermedias con recomendaciones


Recomendaciones

41

Método de asignación de calificaciones CRITERIOS DE EVALUACION. Presentación general. 5% (Portada, Técnica, Bibliografía, Anexos, Ortografía, Formato) Introducción y Descripción del Materia Biológico. 10 % Resultados. 10% Interpretación. 10% Discusión. 30% Resolución del problema. 25% Lista de Cotejo 10% CRITERIOS DE EVALUACION PARA LA PRÁCTICA DE INMUNOENSAYO DE LA PRUEBA TTIROXINA TOTAL(T4) Presentación general. 5% (Portada, Técnica, Bibliografía, Anexos, Ortografía, Formato) Introducción y Descripción del Materia Biológico. 10 % Resultados. 15% (Incluir la gráfica de calibración. Resultado obtenido después de la interpolación Interpretación. 10% Discusión. 15% Cuestionario 15% Resolución del problema. 20% Lista de Cotejo 10% NOTA. Es requisito indispensale entregar Hoja Clínica para derecho a calificación de práctica.



ES NECESARIO APROBAR LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO P ARA ACREDITAR LA MATERIA .

42

Para Saber Mas LABORATORIO CLINICO EN MEDICINA VETERINARIA. COFFIN. 1977 DIAGNOSTICO Y PATOLOGIA EN VETERINARIA COLES. 1989 PATOLOGIA CLINICA Y PROCEDIMIENTOS DE DIAGNOSTICO EN VETERINARIA DOXEY, D.L. 1987 TOXICOLOGIA VETERINARIA HUMPREYS, D.J. 1990 MANUAL DE DIAGNOSTICO BACTERIOLÓGICO Y MICOLOGICO JANG 1974 DIAGNOSTICO CLINICO VETERINARIO KELLY. 1988

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ANEXO 1

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?


cerrada y limpia?








entregaron?








fueron correctos?

44

ANEXO 2.

SESION 1.

“COPROPARASITOLOGÍA”

La Parasitología comprende a todos los organismos que viven a expensas de otros, sin que los individuos parasitados perciban ningún beneficio. El gran número que se conoce de parásitos y la frecuencia de estos como agentes causales de enfermedades los ponen a la cabeza como los principales enemigos de la Economía Nacional Pecuaria, no solamente por la muerte inmediata que pueden producir a los animales, también, por las graves pérdidas que ocasionan al actuar constantemente minando la salud de los animales, sea cual sea el tipo de explotación; ayudan como vectores a la difusión de otras enfermedades infecciosas, inhiben medicamentos costosos, exigen la organización de Campañas nacionales para combatirlas, disminuyendo la utilización de los alimentos.

45

A continuación se exponen las técnicas más comunes y que se pueden realizar en cualquier laboratorio con un mínimo de material. RECOLECCIÓN Y ENVIO DE HECES. a) Con el brazo cubierto por un guante, obtener la muestra directamente del animal (20-50

gr. De heces) y poner en recipiente de boca ancha o en bolsas de plástico limpias e individualmente para cada muestra.

b) Identificar clara e indeleblemente el recipiente. c) Llevar la muestra al Laboratorio el mismo día que se recolectó y si es posible

transportarla bajo refrigeración (2 ºC a 4 ºC).

Existen muchos tipos de soluciones para la elaboración de esta técnica como son solución de azúcar, solución salina saturada, solución de sulfato y lugol. PREPARACIÓN DE SOLUCIONES. a) Solución de azúcar

Azúcar – 1280 gr. Agua destilada – 1000 cc Formaldehído 10 % - 25 cc

b) Solución salina saturada.

Agua destilada- 1000 cc Agregar sal hasta que ya no se disuelva.

c) Solución de sulfato de zinc. ZnSO4 7H2O – 331 grs. Agua destilada – 1000 cc Densidad 1.18 – 1.22 d) Lugol. Agua destilada 100 ml. Yoduro de potasio 10 g Cristales de yodo 5 g MATERIAL. Microscopio estereoscópico / compuesto. Vasos de plástico de 100 ml. de capacidad. Asa de alambre o varilla de vidrio. Gotero. Coladera. Portaobjetos. Cubreobjetos.

46

Solución saturada de cloruro de sodio. Cámara de Mc Master. Tubo de ensaye. Embudo. Vasos de plástico de 250 ml. Cuchara Caja de petri Solución jabonosa 1% o Agua tibia Colorantes (azul de metileno, lugol o violeta de genciana) FLOTACIÓN DIRECTA. 1.- Colocar una porción de la muestra fecal (2 a 5 g) en el vaso. 2.- Agregar 30 ml. de solución saturada lentamente hasta alcanzar una completa homogenización. 3.- Colar y transferir a otro vaso, dejando reposar por 15 minutos. No más de 1 hr. porque los huevecillos se destruyen. 4.- De la superficie, tomar unas gotas de la solución y colocarlas en el centro de un portaobjetos. 5.- Colocar un cubreobjetos a la muestra. 6.- Observar al microscopio con el objeto de menor aumento. 7.- Identificar. TÉCNICA DIRECTA. (LUGOL) 1.- Se colocan dos gotas de lugol en un portaobjeto. 2.- Se coloca una pequeña muestra de heces sobre las gotas y se homogenizan. 3.- Se coloca un cubreobjetos. 4.- Se observa con el objetivo de 40X y posteriormente con el objetivo de inmersión. 5.- Se identifican los quistes u ooquistes de parásitos. TÉCNICA DE MC. MASTER MODIFICADA. 1.- Colocar 3 gr. de heces en el frasco de boca ancha. 2.- Agregar 42 ml. de agua. Homogenizar. 3.- Colar y transferir a un tubo 15 ml. de la suspensión. 4.- Centrifugar a 2000 rpm durante 2 min. 5.- Eliminar 2/3 partes del sobrenadante. Resuspender el sedimento con solución para flotación. Mezclar. 6.- Centrifugar a 2000 rpm durante 2 min. 7.- Con la ayuda del gotero tomar volumen suficiente de la superficie y llenar los dos compartimentos de la cámara. Evitar la formación de burbujas. 8.- Dejar reposar por tres minutos. 9.- Observar al microscopio con el objetivo de menor aumento. 10.- Mediante la observación directa, realizar el conteo en los dos compartimentos de la cámara. 11.- El resultado final que corresponde a la suma de los dos conteos multiplicarlos por 50.

47

CONCENTRACIÓN POR SEDIMENTACIÓN. 1.- Colocar la muestra fecal en el vaso de precipitado (la cantidad varía de acuerdo a la especie animal). 2.- Agregar de 20 a 50 ml. de la solución preparada (según la especie) lentamente y mezclando hasta que la muestra tenga la apariencia de una pasta uniforme. 3.- Colar y transferir a otro vaso limpio. 4.- Adicionar solución suficiente, agitar suavemente y dejar reposar la muestra por 5 minutos. 5.- Eliminar el sobrenadante y repetir el paso 4 hasta que el sedimento quede limpio. 6.- Depositar pequeñas cantidades del sedimento en una caja de Petri, agregando dos a tres gotas de colorante para hacer resaltar los huevos. 7.- Observar en el microscopio estereoscópico o en el microscopio compuesto con el objetivo seco débil (10x). 8.- Identificar los parásitos.

48

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?


cerrada y limpia?








entregaron?








fueron correctos?

49

SESION 2.

“HEMATOLOGÍA”

El procedimiento más común para la toma de una muestra de sangre en especies

mayores es la punción de la vena yugular; en los porcinos las venas marginal de la oreja y la cava anterior, en los perros y gatos las venas marginales de la oreja y femoral.

La sangre se deposita en un frasco que contenga anticoagulantes como EDTA, oxalato, heparina, etc. Para efectuar la mayor parte de los exámenes hematológicos son suficientes 5 ml. de sangre.

Una gota de una solución al 10% de las sales dipotásicas y disódicas del ácido etilendiaminotetracético (EDTA) evita la coagulación de 5 ml. de sangre si se utiliza en forma de polvo se emplean 5 mg.

50

RECUENTO TOTAL DE LEUCOCITOS Y ERITROCITOS

Equipo necesario para proceder al recuento total de leucocitos y eritrocitos: 1. Cámara cuenta glóbulos o hematímetro. 2. Cubreobjetos especial para la cámara 3. Pipetas de dilución. 4. Líquidos de dilución. Turk: G. Blancos. Hayem: G. Rojos. 5. Microscopio. 6. Contador manual.

La cámara cuenta glóbulos suele ser de una pieza de cristal con dos plataformas elevadas, cada una de las cuales están grabadas las cuadrículas perfeccionadas de Newbawer.

Los cuadros de la esquina se utilizan para el recuento total de leucocitos. El cuadro total se subdivide en 16 más pequeños. Como regla, cinco de los cuadros medianos se utilizan para lograr el recuento total de eritrocitos.

Las pipetas de dilución para el recuento de leucocitos (1:20) y eritrocitos (1:200), tienen grabadas dos señales para lograr las diluciones convenientes. Procedimiento.

Las pipetas se llenan mediante un tubo elástico aplicado a la porción superior con el cual se succionan los líquidos. Con aspiración suave, se hace subir sangre hasta la primera marca exactamente 0.5, secando el exceso con un papel secante. Debe tomar la precaución de detener la subida de líquido exactamente en la señal o ligeramente por encima de la misma. Luego se aspira la solución hasta la marca 101.

Una vez llenadas las pipetas se agitan durante 2 o 3 minutos si es con la mano o 30 segundos con agitador de pipeta eléctrico. Se llena la cámara de recuento, la cual deberá estar completamente limpia y se deja transcurrir 1 a 2 minutos a que sedimente y así tome la posición que les corresponda. Se empezará a contar los leucocitos a lo largo de los cuatro cuadros grandes de las esquinas, que contienen 16 cuadros pequeños. El cálculo es simple solamente se multiplica por 50 el número total de leucocitos hallados en 4 mm2.

Antes de proceder al recuento de eritrocitos se examinará la preparación con poco de aumento para apreciar la buena distribución, Para el recuento total de eritrocitos se emplea el objetivo seco fuerte (40 x); con su aumento se cuentan los glóbulos contenidos en cinco cuadros del centro de la cámara cuya cifra se multiplicará por 10,000 valor que representa el número de elementos rojos por milímetro cúbico de sangre.

51

HEMOGLOBINA La hemoglobinometría es notable por su imprecisión, a pesar de ello podrán ser

indicados los procedimientos en veterinaria práctica, por el hecho de que traducen la capacidad del eritrocito de acarrear oxígeno. Existen varias técnicas para saber la cantidad de pigmento respiratorio en la muestra de sangre.

La lectura se basa en el porcentaje del valor normal en gramos por 100 ml. de sangre. Esta lectura se puede realizar en el hemoglobinómetro de Spencer. Material.

Hemoglobinómetro de Spencer. Palillos con saponina. El instrumento llamado hemoglobinómetro de Spencer mide la oxihemoglobina por

absorción de la luz a través de un filtro verde. Procedimiento.

Se coloca una gota de sangre en una placa de cristal (cámara de hemoglobinómetro), y después los eritrocitos se someten a lavado por medio de un agente que suele ser la saponina desecada, de uno de los extremos de un palillo. Esta cámara de cristal se aplica al hemoglobinómetro y sucesivamente el color verde se compara con un patrón. El color verde tiene la ventaja de que la absorción de la hemoglobina ocurre en coincidencia con la banda verde espectro visible. HEMATOCRITO.

Literalmente el término de hematocrito significa dividir la “sangre”, lo cual en el laboratorio se logra por medio de la centrifugación.

Al centrifugar la sangre se separan en ella tres partes bien distintas: 1) La masa de eritrocitos en el fondo. 2) Capa blanca o gris de leucocitos. 3) Plasma sanguíneo. MICROHEMATOCRITO.

Para esta determinación se recomienda un tubo capilar de hematocrito de unos 7 cm. de longitud y calibre aproximado de 1 mm. Los tubos se llenan por capilaridad; la porción interna se limpia con todo cuidado con un trozo de gasa y el extremo superior del tubo se obstruye por aplicación a la llama de un mechero, se colocan en la centrífuga con la punta sellada al exterior, se hace accionar durante 5 min. de 7000 a 10000 rpm Después de la lectura sobre el cual será más fácil apreciar el porcentaje respectivo de cada capa. Valor corpuscular medio.- Obtenidos los valores del número de eritrocitos, de la hemoglobina y del volumen globular, es posible calcular el volumen promedio de un eritrocito, además su concentración en hemoglobina. Estos valores son de importancia particular para precisar la clasificación morfológica de la anemia y también de ayuda para decidir el tratamiento y su continuación. Volumen corpuscular medio (V. C. M.)Expresa el volumen promedio del eritrocito individual. Este valor se determina por división del volumen globular en 100 ml. de sangre,

52

por el recuento de eritrocitos en millones por milímetro cúbico. El resultado se expresa en femtolitros (fl) V.C.M. = Ht * 10 / E (millones por microlitro) Hemoglobina corpuscular media. (H. C. M.) Cantidad de hemoglobina, por peso, en el eritrocito promedio. Este valor se determina por división de la hemoglobina en gramos, presente en 1000 ml. de sangre, por recuento de eritrocitos en millones por milímetro cúbico. El resultado se expresa en picogramos (pg) H.C.M.= Hb * 10 / E (millones por microlitro) Concentración media de hemoglobina corpuscular (C. M. H. C.) Concentración de hemoglobina en el eritrocito promedio o la proporción del peso de la hemoglobina y el volumen en el cual está contenido. Este cálculo se obtiene por división de la hemoglobina en gramos por 10, 000 ml. de sangre por el volumen de glóbulos rojos por 10 ml. de sangre. C.M.H.C. = Hb*100 / Ht Extensión de la sangre (frotis sanguíneo). El examen de una extensión de sangre periférica en el examen es uno de los procedimientos más informativos.

Una extensión de sangre tiene magníficos resultados cuando se hace con sangre fresca que no contenga anticoagulante y en caso de que se emplearan, el más recomendable es EDTA.

Para la preparación propiamente dicha el portaobjetos perfectamente limpio y desengrasado es colocado en una superficie horizontal o simplemente se obtiene por los bordes entre el pulgar y el índice, acaso con el dedo pequeño como apoyo al otro extremo. Se deposita una pequeña gota de sangre en uno de los extremos, mediante un palillo o un tubo capilar de microhematocrito. Inmediatamente después, debe sujetarse con los dedos, otro portaobjetos con un borde perfectamente regular, se coloca frente a la gota de sangre, formando ángulo aproximadamente de 30º y acercando hasta que lo toque, sin pasar de ahí y se extiende. La extensión debe tener aspecto regular y uniforme, sin lagunas pues la presencia de las mismas delata que el cristal estaba manchado de grasa.

53

Tinción de los frotis de sangre. De la variedad de colorantes más conocidos las más utilizadas son Giemsa, Wright y Hemocolorante rápido. Procedimiento. Método de Giemsa. 1. Se fija el frotis de sangre en alcohol metílico absoluto de 3-5 minutos, después se deja

secar. 2. Se coloca el colorante, que cubra completamente el portaobjetos. 3. Se deja el colorante durante 30 minutos. 4. Se lava la preparación con agua destilada neutra, se seca al aire y se observa. Método de Wright. 1. Se cubre el frotis con el colorante de Wright, se deja actuar de uno a tres minutos. 2. Se añade una cantidad igual de agua destilada neutra o de amortiguador y se mezcla

perfectamente soplando sobre la preparación hasta que aparezca una capa metálica sobre la superficie del líquido.

3. Se deja actuar de 2 a 5 minutos, se quita el sobrenadante y se lava con agua corriente o agua neutra destilada. Se seca al aire y se observa.

Método de Hemocolorante rápido. 1. Fijar el frotis con alcohol metílico y dejar secar. 2. Sumergir el portaobjetos en el Hemocolorante UNO (solución de Eosina Amarillenta en

amortiguador de fosfatos) durante 1 min. 3. Lavar con agua corriente y sacudir para eliminar el excedente. 4. Sumergir por 1 min. En el Hemocolorante DOS (solución de Azur-Azul de metileno en

amortiguador de fosfatos) 5. Lavar con agua corriente, se deja secar y se observa. Forma de ejecutar el conteo.

Tan pronto como la laminilla se ha secado completamente, se coloca una gota de aceite en el extremo más delgado del frotis, ya que la observación se realiza con el objetivo de inmersión que permite las identificaciones celulares más precisas.

Se facilita su identificación tomando en cuenta que los núcleos son púrpura o azules, el citoplasma azul pálido, algunas granulaciones son rojas como eosinófilos, azules en los basófilos, las plaquetas son azul púrpura y los eritrocitos rosas.

El número mínimo de leucocitos contados en el recuento diferencial es 100, los cuales deben ser el total de la suma de los dos lados de la extensión. La mejor manera de desplazar el portaobjetos y poder ejecutar un buen conteo es en forma de grecas, con lo que se evita contar dos veces el mismo campo.

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BOVINO PORCINO EQUINO OVINO CAPRINO GATO CANINO 5,0-10,0

(7,0) 5,0-8,0 (6,5)

6,5-12,5 (9,5) 8-16 (12) 8,0-18,0

5,0-10,0 (7,5)

5,5-8,5 (6,8) Eritrocitos M/uL

24-46 (35) 32-50 (42) 32-52 (42) 24-50 (38) 22-38 24,0-

45,0(37) 37-55 (45) Hematocrito % 8,0-15,0

(12) 10,0-16,0

(13) 11,0-19

(15) 8-16 (12) 8,0-12,0 8,0-15,0 (12) 12,0-18,0

(15) Hemoglobina gr. / dl

40-60 (52) 50-68 (63) 34,0-58,0

(46) 23-48 (33) 15-30 39,0-55,0

(45) 60-77 (70) VCM fl

11,0-17,0 17,0-21 15,2-18,6 9-13 5,2-8,0 13-17 19-23 HCM pg 30-36 (32,7)

30,0-34,0 (32)

31,0-37,0 (35)

31-38 (33,5) 35-42

30,0-36,0 (33,2) 32-36 CMHC g/dl

6,0 - 8,0 6,0 - 7,0 6,0-8,0 6-7,5 6,0-7,5 6,0-7,5 Proteínas Totales (g/dl)

4-12 (8,0) 11-22 (16) 5,5-12,5 (9) 4-12 (8) 4-13 5,5-19,5 (12,5) 6-17 (11,5) Leucocitos K/uL

45-75 39-62 25-70 40-75 50-70 20-55 12-30 Valores relativos Linfocitos

2500-7500 4300-13700 1500-5500 2000-9000 2000-9000 1500-7000 1000-4800 Valores absolutos

(4500) (3500) (5000) (4000) (2800) 2-7 2-10 0,5-7 0-6 0-4 1-4 3-10 Valores relativos Monocitos


(400) (400) (200) (350) (750) 15-45 28-47 30-65 10-50 30-48 35-75 60-77 Valores relativos Neutrófilos

600-4000 3000-10500 2700-6700 700-6000 1200-7200 2500-12500 3000-11500

Valores absolutos Segmentados

(4700) (2400) (7500) (7000) 0-2 0-4 0-2 Raros Raros 0-3 0-3 Valores relativos Neutrófilos

0-120 0-100 Raros Raros 0-300 0-300 Valores absolutos en Banda

(20) (20) (100) (70) 0-20 0,5-11 0-11 0-10 1-8 2-12 2-10 Valores relativos Eosinófilos


(700) (375) (400) (650) (550) 0-2 0-2 0-3 0-3 0-1 Valores relativos Basófilos

0-200 0-400 0-170 0-300 0-120 Raros Raros Valores absolutos

(50) (50) (50)

0,0-1,0 0,0-0,4 0,0-1,5 Reticulocitos %

100-800 (500)

325-715 (520)

100-600 (330)

250-750 (400)

300-700 (450) 200-900

Plaquetas K/uL

56

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?


cerrada y limpia?




¿Realizaste las técnicas

conforme a las instrucciones?

¿Entregaste el microscopio, en

las condiciones en las que te lo

entregaron?








fueron correctos?

57

SESION 3

“URIANALISIS” INTRODUCCION.

El análisis de orina y su interpretación crítica acaso sea uno de los procedimientos diagnósticos más importantes de la investigación veterinaria.

Por ser la orina el producto final de un proceso fisiológico complicado y delicadamente equilibrado, pueden influir en la constitución de la misma muchos mecanismos normales y patológicos. Como se sabe la orina no sólo se altera por enfermedades propia del riñón sino por bastantes circunstancias extrarrenales, con alteraciones que pueden tener importancia diagnóstica.

Obtención de muestra de orina. La orina de muchas especies domésticas puede obtenerse en general, simplemente aprovechando la micción del animal. Sin embargo, debe recordarse que en varios ejemplares es necesario limpiar la vulva o prepucio para evitarse la contaminación en las muestras.

En un recipiente rigurosamente limpio se procurará recoger por lo menos 10 ml. de orina, aunque se pueden utilizar porciones más reducidas con los modernos métodos del laboratorio.

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DESARROLLO. EXAMEN FÍSICO. Examen a simple vista. Se consigue considerable información si se toma la molestia de observar y anotar de la orina su color, transparencia, olor y aspecto de la espuma. Color. El color de la muestra de orina debe ser observado y anotado con respecto a la que se depositó en un tubo de ensaye. Se emplean los colores siguientes para la denominación: Incoloro, amarilla pálida, amarilla intensa, amarilla parda, amarilla verdosa, lechosa, rojo, pardo rojizo, pardo, verde, azul.

El color que presente la orina se debe a la concentración de urocromos, pigmentos biliares, hemoglobina, hematuria e inclusive los medicamentos pueden alterar el color normal de la orina. Olor. En general, el olor de la orina no tiene carácter diagnóstico, aunque la de los machos de ciertas especies (porcino, felinos y caprino) tiene un tufo fuerte característico (sui generis), los olores urinosos derivan de la presencia de ácidos orgánicos volátiles. El olor amoniacal es común si las bacterias convierten la urea en amoníaco. Los cuerpos cetónicos se pueden revelar al olfato en caso de gestación patológica, acetonemia y diabetes, en cuyas circunstancias se percibe un olor dulzón comparado al de algunas frutas. Espuma. Su color es blanca, en presencia de bilis o pigmentos biliares puede ser verdosa, amarillenta o parda. Si hay hemoglobina, la espuma será también parda, pero de tono rojizo. Peso específico/ Densidad. El peso específico de la orina significa la relativa cantidad de sólidos en solución y en consecuencia, es indicación del grado de reabsorción tubular o concentración renal.

El peso específico de la orina deberá ser prueba sistemática en todos los análisis de orina, en particular en caso de perturbación metabólica como la diabetes sacarina o si clínicamente se observan signos de enfermedad renal.

Para tomar el peso específico se aprecia con toda facilidad con el empleo del urinómetro, después de que se ha dejado el líquido a la temperatura ambiente durante unos minutos antes de proceder a la lectura. Procedimiento. 1. Se llena la probeta hasta unos 3 centímetros por debajo del borde. 2. Se deja flotar el urinómetro tomándolo primero suavemente con los dedos. 3. Se registra el peso específico señalado por la parte más convexa del menisco. Se

evitarán burbujas en la superficie de la orina pues su presencia perturbaría la línea del menisco.

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PESO ESPECIFICO NORMAL EN LA ORINA DE LOS ANIMALES DOMÉSTICOS.

ESPECIE PESOS ESPECIFICOS PROMEDIO

RANGO

BOVINA 1.035 1.005-1.040 OVINA 1.030 1.020-1.040

CAPRINA 1.030 1.015-1.045 PORCINA 1.015 1.010-1.030 EQUINA 1.035 1.020-1.050 CANINA 1.025 1.018-1.045 FELINO 1.030 1.020-1.040

EXAMEN QUÍMICO.

En un recipiente sin contaminantes como compuestos cuaternarios de amonio, hipocloritos, detergentes y blanqueadores, tomas la muestra y proceda el uroanálisis.

A pesar de que la orina contiene gran cantidad de sustancias orgánicas, sólo el número son de importancia en los análisis de orina.

En sus análisis químicos se comprenden sistemáticamente las siguientes pruebas: Reacción (pH), Proteínas, Cetonas, Glucosa, Pigmentos Biliares, hemoglobina, bilirrubina. Reacción ácida- alcalina (pH)

La concentración normal de iones de hidrógenos en la orina depende del tipo de régimen alimenticio. Los animales más o menos vegetarianos tienden a emitir orinas alcalinas, en tanto las ácidas son propias de los animales que consumen cereales de alto valor proteico o directamente de carnes de otros animales. VALORES NORMALES DE pH BOVINOS ALCALINA (7-8.5) CAPRINOS ALCALINA OVINOS ALCALINA (6-8.5) CANINOS ACIDA (5.2-6.8) FELINOS ACIDA (6-7) EQUINOS ALCALINA (7-8.5) PORCINOS ALCALINA (6-8.5)

Las tiras de papel hidronio con el uso de otras tiras como las preparadas por Ames Co. Los colores pueden ser interpolados hasta media unidad. pH.- Zona con rojo de metilo y azul de bromotimol. Sensibilidad: Puede diferenciar valores entre 5 y 9. Proteínas.

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En términos generales, la orina, si se elimina en condiciones normales, no contiene ninguna proteína, pues la pequeña cantidad que pueda pasar por el filtro glomerular se reabsorbe en los túbulos.

El reconocimiento de proteínas en la orina se ha simplificado recientemente con el empleo de papel reactivo de Ames.

Cualquier color similar a alguno de los cuadros de colores con signos (+) indica proteínuria significante. El juicio clínico determinará el significado del resultado (trazas) en orina con gravedad puede ser similar a trazas a pesar de concentraciones de albúmina solamente fisiológicas. Proteínas: Zona con azul de tetrabomofenol amortiguada a un pH. Esta área en ausencia de proteínas es amarilla a un mismo pH, toma un tono verde según el tipo y concentración de las proteínas. Sensibilidad: 5 de 100 mg. De albúmina por 100 ml. de orina pueden dar “trazas” esta área es más sensible a la albúmina que las globulinas, hemoglobulina, proteínas de bence-jones y microproteínas. Glucosa.

En la orina normal no hay glucosa aunque esta azúcar pasa fácilmente por los glomérulos, pudiendo darse como trazas cuando presente 1/10%, generalmente claro (+) indica ¼% o menos, obscuro (++++) 1 – 2% o más y medio (++) ½% indica que hay glucosa pero no denota claramente cantidad. Glucosa: Zona con glucosa oxidada la cual con el oxígeno atmosférico oxida la glucosa a ácido glucónico y peróxido de hidrógeno. Este último con una peroxidasa oxida el sistema cromógeno a un tono de café obscuro. Sensibilidad: aproximadamente 0.1% se modifica por sustancias inhibidoras, temperatura y pH una causa de inhibición en una concentración urinaria alta de ácido ascórbico. Cetonas.

Entre los cuerpos cetónicos se comprenden el ácido acetoacético, acetona y ácido betahidroxibutírico. Se reporta un resultado negativo y cuando no aparece ningún tono de morado, positivo en 15 segundos cuando el extremo de la tira reactiva vira hacia el color. La intensidad de color morado es proporcional a la cantidad de cuerpos cetónicos presente. Cetonas: Zona de nitroprusiato de sodio, glicina y amortiguador. Sensibilidad de 5 a 10 mg. De ácido acetoacético por 100 ml. es menos sensible a la acetona y si reacciona con el ácido betahidroxibutírico. Sangre.

La sangre puede estar presente en la orina (hematuria) o, en otros casos, lo que esta presente en el pigmento hemoglobina sin ocurrencia de eritrocitos (hemoglobinuria); la distinción entre hematuria y hemoglobinuria es de considerable importancia diagnóstica. La hemoglobinuria generalmente es signo de enfermedad general, en tanto la hematuria suele casi siempre relacionarse con una enfermedad del aparato genitourinario.

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De acuerdo con el código de colores se dan cuatro clasificaciones que corresponden a negativo, bajo (+), medio (++) y alto (+++). Sangre: Zona de una combinación de un peróxido ortánico y ortolidina. Sensibilidad: es más sensible a la hemoglobina libre y a la mioglobina que a los eritrocitos. Complementa el examen microscópico, la sensibilidad es menor con altas concentraciones urinarias de ácido ascórbico. Bilirrubina.

Esta prueba se puede hacer por medio de tiras reactivas, su lectura se hará de acuerdo a las pruebas anteriores, representando cada uno de los colores la concentración de bilirrubina. Bajo (+), moderado (++) alto (+++). Manejo.

No contamine las áreas reactivas con humos volátiles, detergentes y otras sustancias deteriorantes provenientes de zonas de trabajo o como las que pueden ser encontradas en los recipientes para muestras.

Moje completa pero brevemente las áreas reactivas en orina para no disolver los reactivos. Lea cuidadosamente los resultados a los tiempos específicos bajo buena luz y con el área cerca de la carta de colores apropiado. EXAMEN MICROSCOPICO DE SEDIMENTO URINARIO. Procedimiento.

En muchas muestras de orina es necesario concentrar los elementos de proceder al examen microscópico Las muestras contaminadas con heces y otro material darán resultados falsos y perturbadores.

La orina que va examinarse microscópicamente deberá ser agitada con suavidad para suspender todo sedimento depositado al fondo del tubo. Se centrifugan unos 15 ml. de orina a 1500-2000 rpm durante 5 minutos. Se decanta toda la orina del tubo, pues siempre queda suficiente líquido en las paredes para suspender de nuevo el sedimento, cuyo conjunto es el que sirve para el examen.

Después de la nueva suspensión del sedimento, se deposita una gota en un portaobjetos limpio sobre cuyo material se aplica el cubreobjetos y se observa al microscopio con objetivo seco fuerte en el que es fácil de identificar la mayoría de detalles, como cilindros.

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SESION 4

“SEROLOGÍA”

INTRODUCCION. Bruce, descubrió el primer miembro del género Brucella a partir de casos de fiebre

de Malta en la Isla de este nombre. Bang, descubrió Brucella abortus en vacas abortadas y demostró que era la causa de

la enfermedad conocida con el nombre de Bang. Traum, descubrió Brucella sus en cerdas abortadas.

Toma de muestra.

La muestra se toma directamente de la yugular o de la vena coccígea en tubos limpios (bovinos).

Las muestras serán remitidas al Laboratorio el mismo día de su obtención, o bien si se prefiere separar el suero únicamente, ya que por medio de congelación se puede preservar los anticuerpos presentes en el mismo. Aglutinación.

La aglutinación se produce cuando el antígeno (suspensión de bacterias teñidas) se une a los anticuerpos contenidos en el suero. DESARROLLO.

La reacción de aglutinación puede realizarse por medio de la técnica de aglutinación en placa, aglutinación en tarjeta y aglutinación lenta en tubo. Prueba en Tarjeta.

Es una prueba rápida de aglutinación, que se ejecuta con una sola dilución del suero (no hemolizado) y un antígeno de la cepa 1119-3 de Brucella abortus en una concentración del 8% en bovinos y 3% en ovinos y caprinos, teñida con rosa de bengala en ácido láctico y con un pH de 3.5 ± 0.5. Procedimiento.

Se saca del refrigerador los sueros problema, sueros control y el antígeno, dejándolos a la temperatura ambiente durante 30 minutos antes de ejecutar la prueba. 1.- Depositar 0.03 ml. (30 µl) del suero problema sobre la placa. 2.- Depositar 0.03 ml. (30 µl) del antígeno junto al suero y no sobre de él. 3.- Mezclar perfectamente el antígeno con el suero, utilizando para cada muestra el extremo de un palillo. 4.- Realizar movimientos rotatorios lentamente a la placa o bien se puede emplear un aparato mezclador, durante 4 minutos. 5.- Una vez que finalizan los 4 minutos se procede a efectuar la lectura. La observación de la aglutinación deberá efectuarse con el apoyo de una fuente de luz apropiada o bien utilizando la fuente de luz indirecta con que cuenta el aglutinoscopio.

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Interpretación. NEGATIVA= NO se presenta aglutinación. POSITIVA = Cualquier grado de aglutinación. Prueba de Rivanol.

Conforme a lo establecido en la NOM esta prueba se practicará a todos los sueros de los bovinos que hallan resultado positivos a la Prueba de Tarjeta (prueba tamiz). La prueba de rivanol se considera como una prueba confirmatoria que es altamente confiable debido a su adecuada sensibilidad y especificidad. Fundamento.

El rivanol es un colorante de acridina (lactato de 2 etoxi, 6,9 diamino acridina) que tiene la propiedad de aglutinar los anticuerpos no específicos del suero bovino, entre ellos los anticuerpos tipo IgM que predominan en el caso de una vacunación o infección primaria.

Facilitando la reacción de aglutinación entre los anticuerpos IgG que se encuentran en cantidad mayor en estimulaciones antigénicas posteriores y el antígeno de Brucella abortus cepa 1119-3 teñida con verde brillante y cristal violeta, con pH de 5.8 a 6.2 y concentración celular 4%. Procedimiento. 1.- Dejar que el suero y los reactivos lleguen a la temperatura ambiente durante por lo menos 1 hr. 2.- Usando una pipeta para cada suero, colocar 0.4 ml. (400 µl) del suero problema en el tubo correspondiente. 3.- En los tubos perfectamente identificados, uno por suero, depositar 0.4 ml. (400 µl) de solución de Rivanol. 4.- Mezclar inmediatamente agitando. 5.- Luego de ser expuesto a temperatura ambiente durante por lo menos 15 minutos y máximo una hora, los tubos deben de ser centrifugados a 2000 rpm durante 5 min. En el tubo de ensaye se forman 2 fases; SEDIMENTO compacto de color amarillo, constituido por Rivanol + anticuerpos no específicos. SOBRENADANTE de color amarillo pálido, constituido por los anticuerpos IgG específicos. a) Con una pipeta se colocan sobre la placa cantidades de líquido sobrenadante: CANTIDAD DILUCIÓN

0.08 ml. (80 µl) 1 : 25 0.04 ml. (40 µl) 1 : 50 0.02 ml. (20 µl) 1 : 100 0.01 ml. (10 µl) 1 : 200 0.005 ml. (5 µl) 1 : 400

b) Agregar una gota de 0.03 ml. (30 µl) de antígeno de rivanol a cada cantidad de líquido

sobrenadante, mezclar con el agitador de la mayor a menor dilución. c) Se ejecutan cuatro movimientos giratorios de la placa. d) Colocar la placa en la caja (aglutinoscopio) y poner el reloj a 12 minutos.

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e) A los 6 minutos girar la placa 4 veces. f) Después, transcurridos los 12 minutos, rotar nuevamente 4 veces y leer la reacción

utilizando una fuente de luz indirecta. Interpretación.

Considerar que en los casos de revacunación se pueden presentar resultados falsos positivos. Los resultados serán interpretados tomando en cuenta si hubo vacunación previa; los animales no deben ser muestreados hasta 10 meses después de la última vacunación.

Conforme a la NOM-041-ZOO-1995 Los animales NO vacunados se consideran POSITIVOS cuando presenten

aglutinación completa en cualquier dilución (1:25 a 1:400) Los animales VACUNADOS se consideran POSITIVOS cuando presenten

aglutinación completa en diluciones 1:50 o mayor a ésta.

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SESION 5

“TOXICOLOGÍA” INTRODUCCION.

El veterinario práctico se enfrenta con frecuencia a la circunstancia de tener que explicar el motivo de muertes súbitas a un propietario convencido de que su animal murió como consecuencia de envenenamiento.

En todos los casos que sospeche de envenenamiento; las muestras se tomaran por duplicado (riñón, hígado, orina, sangre, encéfalo, contenido ruminal), donde es más probable la retención del tóxico. Todas las muestras para los exámenes toxicológicos deberán ser enviados sin agentes preservativos, aunque se refrigeran adecuadamente en el tiempo de la remisión.

Algunos tipos de envenenamiento causan modificaciones histológicas que pueden ser de orientación diagnóstica.

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DESARROLLO. Las pruebas para la presencia de las siguientes sustancias pueden ser llevadas

fácilmente a cabo en un laboratorio elemental, con un mínimo de equipo y reactivos; arsénico, mercurio, bismuto, nitratos, estricnina, nitritos. Técnica para la determinación de Acido Cianhídrico. 1. Se preparan tiras de papel filtro mojadas en solución que contenga 5 grs. De carbonato

de sodio y 0.5 gr. De ácido pícrico en 100 ml. de agua. Se deja que esas tiras queden casi por completo secas.

2. Se añaden 2-3 grs. De los materiales vegetales, húmedos y desmenuzados en un tubo de ensaye, al que se le añaden cuatro gotas de cloroformo.

3. El extremo de la tira de picrato se coloca en un tapón de corcho el cual tapa el tubo de ensaye, sin que toque sus paredes.

4. Se incuba por lo menos 24 horas a 37º C. 5. La prueba positiva queda indicada por una coloración rojo brillante a rojo pardo del

papel filtro. Técnica para la determinación de Metales Pesados (Reacción de Reinsch). 1. Se depositan en un vaso de precipitado limpio 25 gramos de tejidos hepáticos, gástricos

o de otra clase finamente molidos. 2. Se añaden 10 ml. de ácido clorhídrico concentrado y 90 ml. de agua destilada. 3. Se introducen en el matraz o vaso, una lamina o alambre de cobre puro, abrillantado

con ácido nítrico. 4. Se coloca un matraz lleno de agua fría sobre la parte abierta del recipiente y el material

se hierve durante 30 a 45 minutos. 5. Se quita el cobre, se lava con abundante agua destilada y se deja secar sobre una

superficie de papel secante. La coloración obscura indica la presencia de arsénico o bismuto. Si aparece un depósito plateado podrá indicar la presencia de mercurio. El antimonio dará también color obscuro con reflejos purpúricos.

El depósito negro de arsénico podrá confirmarse con la colocación del cobre en 1 o

2 ml. de una solución al 10% de cianuro de potasio. Si el depósito negro persiste se debe a la presencia de Bismuto o Antimonio. Técnica para la determinación de Nitratos. 1. Se disuelve 0.5 gr. de Difenilamina en 20 ml. de agua destilada. 2. Se añade ácido sulfúrico hasta el enrase del total a 100 ml. 3. Se enfría la solución y se guarda en un frasco de color ámbar. Esta solución madre

puede ser diluida a partes iguales con ácido sulfúrico al 80 % para una solución de potencia a la mitad.

4. Para ensayar un vegetal con respecto a la presencia de nitratos se deja caer una gota de reactivo en un corte de dicho vegetal.

5. Un color azul indica la presencia de nitratos. 6. Si el color se ha obtenido con la solución diluida indica el valor de dos positivos (2 +),

lo que significa el punto de peligro para el alimento.

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Técnica para la determinación de Nitritos. 1. Se disuelve 0.5 gr. De ácido sulfanílico en 150 ml. de solución de ácido acético glacial

al 20 %. 2. Se disuelven 0.2 gr. De clorhidrato de alfanaftilamina en 150 ml. de ácido acético

glacial al 20 % con calor suave y moderado. 3. Se añaden a un tubo limpio 2 ml. de la solución desconocida. Esta solución puede

obtenerse por impregnación del material problema en agua destilada. 4. Se añaden 2 ml. de solución ácido sulfanílico (reactivo). 5. Se añaden 2 ml. de solución clorhidrato de alfanaftilamina. Se mezcla bien. Un color

rosado o rojo es positivo con respecto a la presencia de nitritos. Técnica para la determinación de Plomo. 1. Raspe una pequeña cantidad de material de la pared del estómago. 2. Se añaden cuatro gotas de ácido nítrico concentrado y se calienta muy lentamente hasta

secar. Se tomaran precauciones para no calentar excesivamente, pues la muestra puede quedar ennegrecida. Lo que podrá dificultar la interpretación de los resultados.

3. Se añaden unas cuantas gotas de agua y dos gotas de una solución al 10% de Yoduro de potasio.

4. La presencia de plomo indica positivamente por la aparición de un color amarillo fuerte. Determinación de Estricnina. 1. En un tubo de ensaye colocar 3 ml. de ácido sulfúrico concentrado. 2. Agregar con cuidado y por las paredes del tubo 2 ml. de la solución que contenga la

muestra procurando no agitar el tubo. 3. Agregar unos cristales de dicromato de potasio y la formación de un anillo o el

desprendimiento de color rojo a violeta de los filamentos será tomada la prueba como positiva.

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CAUSA TRATAMIENTO ARSENICO (Parasiticidas, raticida, insecticida y medicamentos)

Debe administrarse por vía oral 30 gr. de hiposulfito de sodio mezclados en 250 ml. de agua y un tiempo por vía endovenosa 10 ml. de una solución de hiposulfito de sodio al 20 % por vía subcutánea 10 ml. de cafeína.

PLOMO Saturnismo (Insecticida, pinturas, etc.)

Administrar por vía oral sulfatos de magnesio o de sodio a razón de 150 a 300 grs. cada 8 hrs. Aplicar calmantes para controlar el estado de excitación.

MERCURIO Si las lesiones son cutáneas, lavar la piel profundamente. Administra como toma, claras de huevo y 5 lts. de leche (tan frecuente como sea posible). Dar por vía oral de 2 a 5 gr. de azufre sublimado y 30 grs. de hiposulfito de sodio disueltos en 300 ml. de agua. Aplique 10 ml. por vía subcutánea de cafeína. En casos crónicos dar 5 a 10 grs. diarios de yoduro de potasio.

ACIDO CIANHIDRICO O ACIDO PRUSICO (Insecticidas, algunos pastizales y sorgos, maíz, moruno, laurel, cerezo, lino, sudan, almendras amargas, Johnson, sagitaria, holco o pasto miel, etc.)

Es importante eliminar esos forrajes de crecimiento retardado por sequía, jóvenes helados, pisoteados, etc. De la alimentación del ganado. Administrar por vía endovenosa de 40 a 80 ml. de hiposulfito sódico al 20 % y dar como toma 40 grs. De sulfato ferroso disuelto en ¾ de litro de agua. Administrar cafeína y suero glucosado.

MOLIBDENO Molibdenosis (Fertilizantes)

Adición a la ración de 1% de sulfato de cobre. Por vía oral 1 gr. De sulfato de cobre por cada 45 kgs. de peso y 1 mg. de carbonato de cobalto por cada kilogramo de peso corporal. Repetir este último tratamiento cada semana.

ESTRICNINA Administración de 500 mg. A 1.3-4 grs. de amital sódico por vía endovenosa. Aplicar 10 ml. de cafeína por vía subcutánea y 500 ml. de suero glucosado por vía endovenosa.

INTOXICACIONES EN LAS QUE SE DESCONOCE EL AGENTE CAUSAL

Administrar de inmediato 100 gr. de sulfato de hierro al 40 % mezclados con 110 a 120 grs. de percloruro de hierro oficial (hacer mezcla en el preciso momento de emplearla). Dar una toma que contenga una preparación a base de ¾ partes de magnesia hidratada y ¼ parte de carbón animal, disuelta en un litro; caballo, bovino y especies menores (50-100 grs. Aplicar 500 ml. por vía endovenosa de suero glucosado y 10 ml. de cafeína vía subcutánea. Además de administrar antihistamínicos. Este tratamiento universal, es de gran utilidad en presencia de intoxicaciones provocadas por alergias, arsenicales, sales metálicas, yodo, alcaloides y sus sales. No tiene clorito, ácido clorhídrico, cianuro y emético.

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SESION 6 “QUÍMICA SANGUÍNEA”

INTRODUCCION. El concepto de Química Seca no es un concepto nuevo, ya que el empleo de tiras de papel impregnadas de reactivos para medir componentes urinarios como glucosa y proteínas, data de hace un siglo, por no mencionar las tiras de papel para la medición del pH. La base de este sistema de análisis está en el empleo de reactivos consistentes en unidades de reacción con una forma sólida que satisfagan la necesidad de llevar a cabo análisis rápidos, para un componente dado en un momento determinado. La expresión QUIMICA SECA se refiere realmente a la presentación de los reactivos con los que se trabaja, los cuales se encuentran embebidos en una matriz de naturaleza variable, en estado seco y que no requiere de la rehidratación para su uso, siendo esta directa mediante la aplicación de la muestra a estudiar, sea orina, suero, plasma o sangre total. El estudio de los componentes sanguíneos que den reacciones con reactivos específicos, tales son como la glucosa, ácido úrico, creatinina, proteínas totales, colesterol y sus fracciones, enzimas, electrolitos, y muchos otros se denomina QUIMICA SANGUINEA y nos sirve para darnos cuenta de las concentraciones de estos analitos en nuestro paciente y así determinar cuando éstos se encuentran en cantidades normales o cuando en números que nos puedan indicar que nuestro paciente cursa por algún estado patológico.

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MATERIAL . REACTIVOS. Aparato Reflotrón. Tiras de química seca. Centrífuga (si es necesario). Muestra de sangre con Gradilla EDTA. (reciente). Micropipetas. Puntas para micropipeta. Sanitas.

DESARROLLO. 1.- Después de la explicación de los componentes y uso del Reflotrón, conectar el aparato a la corriente eléctrica y encenderlo. 2.- Esperar a que en la pantalla se lea el mensaje READY. Con el botón de selección de temperaturas, seleccionar la temperatura con la que se va a trabajar (según el analito a medir). 3.- Las tiras reactivas, muestras (muy bien mezcladas), deben de estar a temperatura ambiente. 4.- Abrir la compuerta del aparato en donde se introduce la tira reactiva con la muestra. 5.- Al momento que se va a introducir la tira, con la pipeta y con punta nueva, tomar 30uL de la muestra a analizar y colocarla en el cojinete rojo de la tira reactiva (después de desprender la capa protectora de color plateado) con la pipeta y con precaución de que no se derrame fuera del cojinete. 6.- Se introduce al momento que se depositó la muestra (no mas de 20 segundos). 7.- Esperar a que el aparato dé la lectura después del tiempo de incubación lo cual será el resultado. 8.- Cuando en la pantalla esté el resultado, con el botón de selección de unidades convencionales o internacionales, podemos ver el resultado en ambos según se necesite. 9.- Retirar tira reactiva y proceder con los demás analitos.

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SESION 7.

“INMUNOENSAYO DE LA PRUEBA TIROXINA TOTAL” INMUNOENSAYO DE LA PRUEBA

TTIROXINA TOTAL(T4)

Introducción: Objetivos: Al término de esta práctica, el alumno: • Aplicará la técnica de Inmunoensayo para la determinación y cuantificación de la

Tiroxina total en suero. • Entenderá los principios teóricos y técnicos de la técnica de MICROELISA. • Además construirá una gráfica de calibración para llevar a cabo la interpolación de los

valores de absorbancia para encontrar los valores cuantitativos de la T4. Material: Reactivos: Charola con micro-pozos con anti T4. Agua destilada. Lector de micro pozos. Concentrado de enzima conjugada. Pipetas semiautomáticas. Diluyente de la enzima conjugada. Papel absorbente. Reactivo de TMB. Puntas de plástico. Solución de Stop(HCl 2N). Papel cuadriculado para graficar. Cámara húmeda.

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Procedimiento de la Prueba: 1.- Asegure el número deseado de pozos cubiertos en la charola. 2.- Con pipetas de 25 uL, deposite muestras y controles dentro de los pozos. 3.- Agruegue 100 uL del Reactivo Conjugado Operante en cada pozo. 4.- Mezcle completamente durante 30 segundos. Es muy importante hacer la mezcla completamente. 5.- Incubar a temperatura ambiente(18-25 grados centígrados)., por un lapso de 60 min. 6.- Quite la mezcla de la incubación golpeando el contenido del plato a un recipiente de desechos. 7.- Enjuague y golpee la charola de los micropozos 5 veces con agua destilada(no utilizar agua de la llave). 8.- Golpeé los pozos firmemente hacia el papel absorbente para quitar las gotas de agua residuales. 9.- Deposite 100 uL de TMB en cada pozo. Suavemente mezcle durante 5 segundos. 10.- Incube a temperatura ambiente y en la oscuridad durante 20 minutos. 11.- Detenga la reacción agregando 100 uL de solución de Stop a cada pozo. 12.- Mezcle suavemente durante 30 segundos. Es importante que el color azul cambie totalmente a color amarillo. 13.- Leer la absorbancia a 450 nm con un lector de micro pozos. Apéndice: cálculo de resultados. a) Calcule el promedio de los valores de absorbancia para cada muestra problema. b) Usando el valor promedio de absorbancia para cada muestra, determinar la

concentración correspondiente de T4 en ng/mL interpolando desde la curva estándar. c) Reporte sus resultados, sus discusiones y conclusiones. RESULTADOS: • Incluir la gráfica de calibración. • Resultado obtenido después de la interpolación.

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CUESTIONARIO: Parte técnica: 1.- Cual es la función de los siguientes reactivos en el procedimiento? • Reactivo de TMB. • Solución de Stop. 2.- Por que es importante que los lavados sean críticos y que el retiro de agua residual en los pozos sea retirado completamente? 3.- Qué estamos cuantificando, anticuerpos o antígenos? 4.- En base a la pregunta anterior, que tipo de técnica es? indirecta o directa? Explique. 5.- Que significa ELISA y porque MICROELISA? Parte Teórica: 1.- Qué patologías puede usted determinar con la cuantificación de esta hormona T4? 2.- Por qué se relaciona esta hormona con la alopecia en especies de animales como gatos, perros y caballos?. 3.- Investigue los valores normales de esta hormona en las tres especies de animales anteriores. 4.- Mencione los tres tipos de proteínas transportadoras de esta hormona T4. 5.- Qué otras hormonas tiroideas nos ayudarían a descartar un Hipotiroidismo y un Hipertiroidismo?. BIBLIOGRAFIA:

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INMUNOENSAYO DE LA

TIROXINA TOTAL

• Tiroxina T4 hormona sintetizada y almacenada en la Tiroides. • El 99.5% de T4 es transportada por 3 proteínas distintas: 1.- Globulina(TGB) 70%. 2.- Pre-albúmina(TBPA)20%. 3.- Albúmina(10%). La T4, útil para el diagnóstico de desórdenes tiroideos(hipotiroidismo e hipertiroidismo), así como tiroiditis., e incluso anomalías genéticas. PRINCIPIO DE LA PRUEBA:

La mayoría de los sistemas de ELISA desarrollados para detectar agentes ciertos

antígenos, anticuerpos o agentes infecciosos, consisten en un anticuerpo dirigido contra el

agente en cuestión, firmemente unido a una matriz sólida, ya sea en el interior de las

cubetas de una placa de microdilución o la superficie externa de una perla esférica de

plástico o de metal, o algún otro soporte sólido, estos sistemas se denominan

inmunoensayos en fase sólida (SPIA). Si el antígeno está presente en el líquido a probar,

se forman complejos antígeno-anticuerpo estables cuando el líquido se agrega a la fase

sólida. El antígeno no unido se elimina por completo mediante lavado y luego se agrega al

sistema un segundo anticuerpo contra el antígeno que se está buscando. Este anticuerpo ha

sido conjugado a una enzima, como la fosfatasa alcalina o la peroxidasa de rábano picante.

Si el antígeno está presente en el soporte sólido, se une al segundo anticuerpo y forma un

complejo con el antígeno en el medio. Después de eliminar por lavado el anticuerpo

marcado no unido, el agregado e hidrólisis de sustrato de la enzima produce un cambio de

color y completa la reacción.

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El sistema descrito requiere de anticuerpo específico marcado con enzimas para

cada antígeno probado.

El TMB/H2O2, produce el desarrollo de color azul cuya intensidad de color es inversamente proporcional a la cantidad de t4 en los problemas. El HCl, solución de paro es agregado para detener la reacción y producir el revelado. La intensidad del color formada es proporcional a la cantidad presente de la hormona T4 y se relaciona inversamente a la cantidad de T4 en la muestra. APLICACIONES: HIPOTIROIDISMO:

Pérdida de calcio y fósforo. Ablandecimiento de huesos. Alopecia. ESTUDIOS TIROIDEOS AUXILIARES: TSH (Hipófisis) Tiroglobulina Anticuerpos antitiroglobulina FT4 T4 total T3t FT3 Yodo proteico. SE PUEDEN DESCARTAR: Obesidad por trastornos tiroideos.

Seborrea. Alopecia(fisiológica o patológica). Piodermas. Hipercolesterolemia. TRATAMIENTO: • Aplicación de tiroxina sintética. • Aplicación de Yodo.

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HIPOTIROIDISMO HIPERTIROIDISMO

TSH alta TSH baja T4T baja T4T alta T3T baja T3T alta T3F T3F T4F T4F Yodo bajo Yodo alto 1.- PARA EVALUAR FUNCION TIROIDEA: • TSH, T3T, T4T y TU(T3 captación). 2.- PARA EVALUAR FUNCION BIOLOGICA : • FT3 y FT4

83

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?


cerrada y limpia?








entregaron?








fueron correctos?

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PRACTICA No. 5

“INMUNOFLUORESCENCIA”



85

Esta práctica se realizará en el laboratorio multidisciplinario “A” del edificio 5; en las instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootécnica de la Universidad Autónoma de Aguascalientes. Número de alumnos por unidad de práctica Para ésta práctica se contará con un número no mayor a 20 alumnos por sesión, con la finalidad de que tengan una correcta asimilación, de los marcadores para la evaluación de la integridad membranal. Propósito específico de cada práctica. El alumno será competente para aplicar las propiedades del marcador fluoresceína para evaluar integridad membranal en espermatozoides en distintas especies animales; cuando conozca el reglamento del laboratorio, las propiedades de la fluoresceína, la estructura del espermatozoide para identificar las moléculas receptoras de progesterona en el acrosoma de éste, mediante su marcaje con fluoresceína y así evaluar la integridad membranal y evaluar la viabilidad de éste. Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la práctica. Al terminar la práctica será un profesionista capacitado para comprender las propiedades de la fluoresceína, y capaz de evaluar la integridad membranal en los espermatozoides, para ver la viabilidad de ellos, esto lo logrará, con la ayuda de la práctica al término del semestre. Normas de seguridad específicas de la práctica. Para ésta práctica se requieren las siguientes normas de seguridad:

Vestimenta






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Desarrollo de la práctica: La inmunofluorescencia puede utilizarse para identificar anticuerpos de carácter autoinmunitario o antiinfeccioso, así como para identificar microorganismos en muestras microbiológicas o partes de células en cultivo. La prueba es realizada sobre portaobjetos. Moderadamente se han descrito técnicas semejantes que utilizan enzimas en vez de fluorocromos. Tienen la ventaja que pueden visualizarse con microscopios ópticos normales, pero su inconveniente es que requieren el paso del revelado por una enzima sobre el mismo portaobjetos, ésta se ha descrito en la identificación de antígenos leucocitarios. Para utilizar anticuerpos en la localización de antígenos intracelulares, los anticuerpos deben conjugarse con una sustancia que los haga visibles, pero que no interfiera con la especificidad de sus interacciones. Para examinar con microscopio de luz, generalmente se forman complejos entre un anticuerpo y una pequeña molécula fluorescente (por ejemplo fluoresceína, rodamina, etc.) para producir derivados que a continuación pueden incubarse o no. Y los sitios de enlace se pueden observar con el microscopio de fluorescencia. A esto se le llama INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA. MATERIAL. REACTIVOS. Microscopio de Fluorescencia. Muestra biológica (semen, bacterias, etc) Portaobjetos. Nigrosina. Palillos de madera. Fluoresceína. Tubos Ependoff. Buffer. Centrifuga. Platina caliente a 37º centígrados. DESARROLLO. Puede variar de acuerdo al tipo de muestra y al tipo de marcador con el que se cuente en el momento, por este motivo la técnica será descrita por el técnico en el momento que se esté realizando la práctica. Cabe mencionar que las muestras biológicas a utilizar tienen que ser tomadas no más del día anterior y algunas otras como el semen, tienen que tomarse el mismo día o pueden ser conservadas en congelación con nitrógeno líquido.

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Recomendaciones

Método de asignación de calificaciones CRITERIOS DE EVALUACION. Presentación general. 10% (Portada, Técnica, Bibliografía, Anexos, Ortografía, Formato) Introducción y Descripción del Materia Biológico. 25% Resultados. 10% Interpretación. 15% Lista de Cotejo 40% NOTA.



ES NECESARIO APROBAR LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO P ARA ACREDITAR LA MATERIA . Para Saber Mas

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ANEXO 1

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?


cerrada y limpia?








entregaron?








fueron correctos?

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PRACTICA No. 6

“SEGUIMIENTO DE CASOS CLINICOS”



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Esta práctica se realizará en el salón asignado de acuerdo al semestre en curso, en las instalaciones del Centro de Ciencias Agropecuarias, ubicadas en la Posta Zootécnica de la Universidad Autónoma de Aguascalientes. Número de alumnos por unidad de práctica Para ésta práctica se contará con un número no mayor a 20 alumnos por sesión, con la finalidad de que tengan una correcta asimilación, del seguimiento de los casos clínicos. Propósito específico de cada práctica. El alumno será competente para seleccionar algunas de las técnicas aplicadas en el laboratorio de patología diagnóstica para establecer un diagnóstico presuntivo en un caso clínico, cuando conozca el reglamento del laboratorio e integre los conocimientos de manejo de muestras y del paciente, así como de las causas posibles de enfermedad en los animales domésticos, Integrando las técnicas que se realizaron durante el semestre, para su análisis en el laboratorio, elaborando un diagnostico, después de la correcta interpretación de los resultados, y así hacer las recomendaciones necesarias aunadas a un tratamiento eficaz, para llegar a una resolución del caso. Resultados esperados en relación a los Criterios de desempeño específicos de la práctica. Al terminar la entrega de casos clínicos, será un profesionista con la capacidad de dar seguimientos completos a distintos casos clínicos en las diferentes especies, con la ayuda de las técnicas de laboratorio aprendidas durante el semestre, para poder llegar a un diagnóstico final, y poder dar el tratamiento y recomendaciones adecuados. Normas de seguridad específicas de la práctica. Para ésta práctica no se requieren normas de seguridad, ya que no asistirá al laboratorio, solo se entregaran los reportes en el salón de clases.

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Desarrollo de la práctica: Esta práctica, se llevará a lo largo del semestre, el alumno se integrará a un equipo, conformado por no mas de 6 personas. Se tendrán que elegir, 6 casos clínicos diferentes, en las distintas especies animales (bovinos, ovinos o caprinos, equinos, porcinos, caninos o felinos y aves). Se irán presentando los avances de cada uno de los casos, cada semana, del semestre, hasta hacer la presentación final. Sistema de evaluación: Observación directa a través de lista de cotejo (anexo 1) y por reporte escrito. Evaluaciones intermedias con recomendaciones


Recomendaciones

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Método de asignación de calificaciones CRITERIOS DE EVALUACION. Lista de Cotejo 5 Presentación general. 10 (Portada, Técnica, Bibliografía, Anexos, Ortografía, Formato) Hoja Clínica 10 Marco Referencial 10 Marco Teórico 15 Diagnóstico Diferencial 15 Diagnóstico Integral 10 Tratamiento y Resolución del problema 20 Seguimiento Fotográfico 5 NOTA.



ES NECESARIO APROBAR LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO P ARA ACREDITAR LA MATERIA . Para Saber Mas

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ANEXO 1

HOJA DE COTEJO


alumno

Evaluación



práctica?



¿Entregaste completo tu

reporte?


dentro del salón?



universidad autonoma de aguascalientes centro de … · este manual incluye información sobre la...

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